A-PRF促进兔膝关节骨软骨损伤愈合的观察

目的·探讨改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin,A-PRF)在骨软骨再生中的作用。方法·获取新西兰兔骨髓间充质干细胞(bone-marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)和膝关节软骨细胞;通过低速离心兔心脏血液获得A-PRF。采用光学显微镜观察A-PRF的组织学结构;ELISA法检测A-PRF中生长因子,包括血小板衍生生长因子、转化生长因子-β、胰岛素样生长因子、血管内皮生长因子、表皮生长因子和成纤维细胞生长因子的释放;采用活/死细胞双染法及MTT法检测A-PRF对兔BMSCs细胞毒性及增殖情况的影响;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测A-PRF对兔BMSCsⅡ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)基因表达的影响;使用transwell小室测定A-PRF对于兔BMSCs以及软骨细胞迁移能力的影响。建立兔膝关节骨软骨缺损模型,将18只兔随机分为3组:A-PRF组(n=6)在缺损处植入A-PRF;A-PRF+BMSCs组(n=6)植入接种兔BMSCs的A-PRF;对照组(n=6)不进行植入操作。术后12周处死兔,采用苏木精-伊红(H-E)、甲苯胺蓝和番红O-固绿染色进行膝关节标本的组织学观察,并根据膝关节的表面形态学与组织学情况,采用国际软骨修复协会(International Cartilage Repair Society,ICRS)评分系统进行宏观与组织学评分。结果·A-PRF具有松散的网络结构,可以缓慢释放生长因子。加入A-PRF后,未观察到其对兔BMSCs具有细胞毒性;在加入A-PRF后24、48和72 h,BMSCs的增殖能力均明显升高(均P<0.05),成软骨相关基因Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖,以及成骨相关基因ALP和OCN均显著上调(均P<0.05)。加入A-PRF后,兔BMSCs与软骨细胞的迁移能力均显著增强(均P<0.05),且兔BMSCs的迁移能力显著高于软骨细胞(P=0.025)。在兔膝关节缺损模型中,观察关节表面形态,可见A-PRF组和A-PRF+BMSCs组缺损均基本恢复,而对照组仅有软组织覆盖。在ICRS宏观评分方面,A-PRF组与A-PRF+BMSCs组的差异无统计学意义,但2组评分均显著高于对照组(均P<0.05)。组织学观察显示,A-PRF组和A-PRF+BMSCs组均产生骨软骨修复,但A-PRF组软骨更加成熟,对照组则形成纤维修复。在ICRS组织学评分方面,A-PRF组与A-PRF+BMSCs组的差异无统计学意义,但2组评分均显著高于对照组(均P<0.05)。结论·自体A-PRF具有良好的生物相容性和促进BMSCs增殖的能力,在体外和体内均可促进软骨和软骨下骨的修复。

PRF在前牙即刻种植修复中的应用

前牙即刻种植常伴有不同程度的骨缺损,常规引导骨再生技术,术中创口闭合困难,术后炎症反应明显,感染概率增加。该文报道单独应用富血小板纤维蛋白修复前牙即刻种植骨缺损,评价其在即刻种植手术中引导骨再生、减轻炎症反应的效果。

BMSCs/PRF复合载蛇床子素支架材料修复兔下颌骨缺损的实验研究

目的:探讨BMSCs/PRF复合载蛇床子素支架材料修复兔下颌骨缺损的实验研究的可行性。方法:36只新西兰大白兔随机分为3组,每组12只,双侧下颌骨制备缺损模型。A组植入BMSCs/PRF复合载蛇床子素支架材料;B组植入BMSCs复合载蛇床子素支架材料,C组单植入纳米羟基磷灰石支架材料。分别于术后2、4、8、12周处死实验动物,制备组织标本,行大体观察、影像学分析、HE染色、扫描电镜检测,并对影像学分析值及成骨情况加以评价,对分析数据结果使用SPSS17.0统计软件进行分析,P<0.05有统计意义。结果:影像学检查及组织学染色显示A组骨缺损处愈合程度,成骨速度及其质量明显优于B组C组;扫描电镜显示A组该复合材料与组织相容性好,无炎症刺激反应;统计牙CT分析数据及新生骨面积,A组的成骨情况明显优于B组与C组(P<0.05)。结论:BMSCs/PRF复合载蛇床子素支架材料有明显骨诱导作用,是一种新型复合材料,可望成为临床应用中修复颌骨缺损的新型材料。

压力对骨髓间充质干细胞(BMSCs)膜片复合富血小板纤维蛋白(PRF)双膜结构中BMSCs成软骨能力的影响

目的:观察压力对骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复合富血小板纤维蛋白(Platelet-rich Fibrin,PRF)(BMSCs/PRF)双膜结构中BMSCs的成软骨能力。方法:密度梯度离心法分离培养兔骨髓间充质干细胞,经表面标记分子检测及成骨、成脂能力鉴定后,制备细胞膜片。将取自同一个体的兔耳廓动脉全血通过离心获得PRF,将PRF压制成膜后与BMSCs细胞膜片复合并进行混合培养。培养2 d后按不同力值将复合膜随机分为0 kPa(对照)、90、120、150 kPa 4大组;每一大组再分为刺激1 h/d、6 h/d两组,然后置于加载装置中按分组分别施以不同静态压力。分别于加载第2、4、6天终止培养、取材;Real-time PCR法检测PCNA、SOX-9、Aggrecan、COL-ⅡmRNA表达水平。结果:实验所设定的各组压力刺激条件均可对双膜结构中的BMSCs产生显著的促增殖效应,其中以120 kPa/1 h持续4 d的压力条件下PCNA基因表达水平最高。2 d压力刺激明显上调Aggrecan水平,而对SOX-9与COL-Ⅱ的表达无显著作用;4 d压力刺激可同时促进Aggrecan、SOX-9及COL-Ⅱ mRNA的表达,其中以120 kPa/1 h/4 d的压力条件下的成软骨基因表达水平最高;6 d压力刺激下仅在90、120 kPa加压1 h时表现出对COL-Ⅱ mRNA的促进作用。结论:适当的压力刺激可明显促进BMSCs/PRF双膜结构中BMSCs的增殖与软骨向分化能力。

犬PRF复合BMSCs修复拔牙窝颊侧骨壁缺损的实验研究

目的:评价富血小板纤维蛋白(PRF)构建的组织工程骨,在颊侧骨壁缺损修复中的成骨作用。方法:体外将PRF作用于比格犬的骨髓间充质干细胞(BMSCs),第21天测定钙结节量;4、7、11 d时采用实时定量PCR法检测成骨相关基因。9只成年比格犬拔除上颌左右两侧的侧切牙,构建颊侧骨壁缺损的拔牙位点,并随机分为血凝块组、PRF组和组织工程骨组,在手术后即刻、6周及12周时评价各组的颊侧骨高度和拔牙窝的骨密度。结果:PRF在体外实验中能明显促进BMSCs的增殖,提高成骨分化以及钙化能力(P<0.05)。动物实验中,PRF表现出了促进早期伤口愈合的能力。在颊侧骨壁缺损的修复中,组织工程组在6周时骨高度和骨密度分别为(2.63±0.57)mm、(765.19±59.70)HU,较血凝块组[(5.65±2.91)mm、(599.08±53.88)HU]和PRF组[(4.14±1.16)mm、(644.76±65.39)HU]显著增高(P<0.05)。结论:PRF复合BMSCs构建的组织工程骨可以在早期有效地修复拔牙窝骨壁缺损。

即刻种植联合PRF对前牙缺失患者牙槽骨吸收及龈沟液骨代谢指标的影响

目的:探讨即刻种植联合富血小板纤维蛋白(Platelet-rich fibrin,PRF)对前牙缺失患者牙槽骨吸收及龈沟液骨代谢指标的影响。方法:选择2018年3月-2020年3月笔者医院就诊的106例前牙缺失患者为研究对象,予以随机数字表法分为对照组(即刻种植)53例和观察组(即刻种植联合PRF)53例,记录两组患者的临床疗效及术后不良反应情况;比较治疗后龈沟液骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)及骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)水平变化;随访12个月,记录两组患者术后种植体骨密度、唇腭向骨高度、唇腭向骨厚度、牙槽骨吸收及美学效果。结果:对照组显效28例,有效13例,无效12例;观察组显效37例,有效10例,无效3例,对照组和观察组总有效率依次为77.35%、94.34%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组唇腭向骨高度、厚度及种植体周围骨密度均高于对照组,牙槽骨吸收情况低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后观察组OPG水平、美学评分均较对照组高,OPN、ALP低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组并发症发生率5.66%低于对照组的16.98%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:即刻种植联合PRF对前牙缺失患者临床疗效显著,可减少牙槽骨吸收,改善骨代谢,降低不良反应发生率。

富血小板纤维蛋白(PRF)在拔牙位点保存应用中的临床效果分析

目的探究富血小板纤维蛋白(PRF)在拔牙位点保存应用中的临床效果。方法研究时间为2014年2月至2017年8月,研究对象为200例拔除后牙区牙齿修复患者,随机数字表法分为观察组与对照组,各100例。观察组拔牙后将PRF植入患者牙槽窝内,对照组拔牙后将海奥胶原膜置于牙槽窝内,在患者治疗前与治疗后3个月实施口腔CBCT,分析患者牙槽骨高度、宽度、创面愈合时间等指标。结果观察组创面愈合时间较对照组创面愈合时间明显缩短,差异有统计学意义(t=13.670,P<0.05)。患者治疗前牙槽骨高度、宽度参数比较差异无统计学意义;观察组治疗后牙槽骨高度、宽度较治疗前变化不明显,差异无统计学意义;对照组治疗后较治疗前牙槽骨高度、宽度明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后牙槽骨高度、宽度指标方面,观察组大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论拔牙位点保存中应用富血小板纤维蛋白,可加速创面愈合,抑制患者牙槽嵴吸收,为患者后期种植牙的实施奠定基础。

自体髂骨复合PRF修复牙槽嵴裂的实验研究

目的:将富血小板纤维蛋白(Pl at el et-ri ch fi bri n,PRF)应用于牙槽嵴裂植骨手术,验证其是否能够减少植骨术后的骨吸收。方法:8～12月龄犬8只,以外科手术的方法制备双侧牙槽嵴裂模型,随机于两侧同期植入自体髂骨(对照组)及自体髂骨混合PRF(实验组)。于术后当日、2个月、4个月时拍摄上颌骨CT,利用三维重建软件测量植骨区体积,计算骨吸收率。结果:术后2个月、4个月时实验组的骨吸收率明显小于对照组,行配对样本的t检验,P<0.01。结论:将PRF加入自体髂骨进行骨移植修复犬的牙槽嵴裂,在术后4个月的时间范围内,可以减少术后的骨吸收。

PRF辅助的自体脂肪面部移植术后满意率调查

目的探讨富血小板纤维蛋白(PRF)辅助的自体脂肪面部填充的有效性和安全性。方法回顾性分析自体脂肪面部填充的病例共300例,其中PRF组为68例,常规组为232例,所有入组患者得到术后6个月以上随访,并通过对患者的满意率调查来评价有效性,比较并发症发生率。结果 PRF组术后6个月满意率为69.12%,常规组6个月满意率为51.72%;手术次数统计:PRF组术后需2次或多次脂肪填充比例为29.41%,常规组为44.40%;并发症统计:2组患者均未出现脂肪栓塞、出血、感染、坏死等并发症,3例常规组患者脂肪填充区可触及结节,PRF组未触及结节。结结论自体脂肪移植应用于面部是非常安全有效的方法,PRF联合应用可以提高手术效果和满意率。

PRF植入兔拔牙创内的实验研究

目的探讨PRF对拔牙窝的促进骨再生作用及牙槽嵴保存的影响。方法①实验动物模型:将24只新西兰大白兔随机分为4组(A、B、C、D组),每组6只,拔除一侧下颌切牙。抽取大白兔自体外周血液,离心后制成PRF。A组拔牙窝内植入PRF/nano-HA混合物;B组拔牙窝内植入PRF;C组拔牙窝内植入nano-HA;D组拔牙窝作为空白对照。分别于术后4周、12周处死动物,取材。②观察:将标本脱钙脱水石蜡包埋行组织学切片,显微镜下观察骨愈合情况。结果术后4周,拔牙窝内新生骨组织数量质量A组>B组>C组>D组(空白组)。术后12周,A组成骨质量最好,B、C组骨改建情况类似,均优于D组。结论①PRF能够促进骨组织的修复。②PRF联合nano-HA具有保存拔牙窝牙槽嵴高度的功能,可作为牙槽骨保存的移植材料。

富血小板纤维蛋白(PRF)诱导骨髓间质干细胞分化成骨细胞的实验研究

目的研究富血小板纤维蛋白在诱导骨髓间质干细胞向成骨细胞转化的作用。方法取7天新西兰大白兔股骨,分离骨髓间质干细胞进行体外培养,在各自的培养条件下分为三组:实验组(不同剂量的PRF组)、空白对照组(MSCS组)和阳性对照组(BMP-2组)。三组细胞的比较采用MTT测定细胞增值率、PNPP法测定碱性磷酸酶的表达、免疫组化标记Ⅰ型胶原蛋白的表达、检测细胞为成骨细胞。结果细胞形态学观察,MSCS分化后,细胞形态从长梭形变成三角形,多角形,立方形;MTT测定细胞增殖显示,随着PRF膜剂量的增加,细胞增殖数量增加,PRF剂量为4,5mL时,与BMP-2组差别不大;ALP活性结果显示,MSCS分化后,ALP活性远高于MSCS细胞。两者差异具有显著统计学意义(t=24.608,p=0.000);免疫组化标记Ⅰ型胶原结果显示,PRF组分化后的MSCSⅠ型胶原表达显著。结论富血小板纤维蛋白可以诱导骨髓间质干细胞分化为成骨细胞,分化的类成骨细胞具有成骨细胞的特性,可以作为自体材料应用于口腔种植学领域里骨缺的修复。

富血小板纤维蛋白膜(PRF)引导成骨能力的比较研究

目的:探讨及比较富血小板纤维蛋白膜(PRF)、海奥生物膜联合骨粉用于新西兰大白兔下颌骨缺损处早期引导骨生成的能力。方法:选取雌性新西兰大白兔9只,在其双侧下颌骨下缘上2mm做圆形骨缺损,A组植入骨粉后覆盖PRF,B组植入骨粉后覆盖海奥生物膜,C组植入骨粉。术后2,4,8周分期分组处死动物,取下颌骨缺损植骨区标本。标本行大体观察、CT及组织学观察成骨情况。结果:大体观察,骨缺损区早期骨愈合坚硬度A组>B组>C组。CT观察,骨缺损区骨密度早期A组>B组>C组,统计学分析,2周、4周时A组B组C组之间骨密度值分别具有统计学差异,8周组A组B组无统计学差异,与C组分别存在统计学差异。组织学观察,同期比较A组新生骨组织及再生血管化均优于B组、C组,新生骨排列较B组、C组规则。结论:PRF在骨缺损的修复中能够促进新骨的形成,提高新骨形成的时间和质量,对引导成骨起到有效促进作用。

PRF在年轻恒牙牙髓切断术中的应用

目的探讨PRF盖髓剂在年轻恒牙牙髓切断术中的治疗效果,并观察牙髓活性与根尖发育的临床表现.方法抽取患者自体静脉血,离心制备富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin PRF);选取年轻恒牙70颗,记录所有患牙应用PRF盖髓剂在牙髓治疗术前、术后6个月、术后12个月的牙髓活力和牙根发育变化情况.结果在规定的复查时间内,70颗患牙临床表现为牙髓活力正常,牙根继续发育,根管壁上牙骨质厚度有所增加,同时牙根长度变长,根尖孔已闭合或逐渐闭合.结论PRF作为盖髓剂用于治疗年轻恒牙活髓切断术,取得了较好的临床疗效.

富血小板纤维蛋白(PRF)联合自体骨在拔牙同期自体牙即刻移植术中的临床疗效观察

目的:探讨富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)联合自体骨在拔牙同期自体牙即刻移植中充填牙周骨缺损的临床可行性。方法:将2014年1月—2015年12月就诊行拔牙同期自体牙即刻移植的130例患者,按患者意愿及就诊顺序随机分为A、B和C 3组,在移植牙根周骨质缺损区分别填塞不同的移植材料。A组60例采用PRF联合自体骨植入;B组35例单纯植入PRF;C组35例单纯植入自体骨,随访12个月,对术后移植牙松动度和影像学表现进行评价。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:随访12个月,A组成功率为80%,有效率为96.4%;B组成功率为51.4%,有效率为80%;C组成功率为57.1%,有效率为77.1%;经χ2检验,A组与B组、C组间的成功率、有效率差异均有统计学意义(P<0.05),B组与C组的成功率、有效率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在自体牙移植中植入PRF联合自体骨可促进牙周成骨,有利于移植牙的稳固。

i-PRF联合结缔组织移植瓣治疗MillerⅠ类及Ⅱ类重度牙龈退缩的疗效评价

目的:探究可注射的富含血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin,i-PRF)联合结缔组织移植瓣(Connective tissue graft,CTG)治疗MillerⅠ类及Ⅱ类重度牙龈退缩的疗效及美学效果。方法:选取2018年1月-2019年9月笔者医院收治的50例MillerⅠ类或Ⅱ类重度牙龈退缩患者为研究对象,采用随机数字表法将患者分为试验组和对照组,每组25例(25颗患牙),并分别进行改良冠向复位瓣(Coronally advanced flap,CAF)+CTG+i-PRF和CAF+CTG修复治疗。比较两组患者术前及术后6个月角化龈宽度(KTW)、探诊深度(PD)、牙龈退缩深度(RD)、临床附着水平(CAL)及牙龈厚度(GT),两组患者术后6个月根面覆盖(RC)百分比及完全根面覆盖(CRC)率以及美学效果。结果:术后6个月,两组患者KTW、GT均较术前明显增加,PD、RD及CAL均较术前明显减小,比较差异具有统计学意义(均P<0.05),其中试验组患者KTW明显大于对照组、RD明显小于对照组,比较差异具有统计学意义(均P<0.05);试验组患者术后6个月RC及CRC高于对照组,组间比较无显著性差异(P>0.05);试验组患者术后VAS、粉红美学指数(PES)明显高于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:i-PRF联合CTG在重度牙龈退缩CAF修复中疗效显著,可进一步改善患者KTW、RD,提高美学修复效果。

体外评估hDPCs-PRF复合体内hDPCs的迁移行为

目的:在前期成功构建人牙髓细胞(hDPCs)—富血小板纤维蛋白(PRF)复合体基础上,观察hDPCs在复合体中的迁移能力。方法:采用组织块法分离培养hDPCs,制备hDPCs-PRF复合体,培养7 d、14 d、21 d后行苏木精—伊红(HE)染色,观察hDPCs的形态及迁移行为。结果:初期hDPCs-PRF复合体中,白细胞、牙髓细胞主要存在于白膜层中;随着培养时间的延长,白膜层逐渐溶解消失,白细胞及牙髓细胞沿着复合体边缘游走,hDPCs由原来的椭圆形变成长梭形。培养21 d后,显微镜下可见hDPCs-PRF复合体培养基中大量hDPCs的存在,大部分细胞生长状况良好。结论:hDPC-PRF复合体可缓慢降解并同步释放复合体内的牙髓细胞;hDPCs-PRF复合体中释放的牙髓细胞仍具有继续增殖分化的潜力。

A-PRF在上颌窦内提升术中的临床应用

目的:探讨改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin,A-PRF)在上颌窦内提升术中的临床应用。方法:选择我院上颌后牙剩余牙槽嵴高度不足的种植患者,26例42颗牙,采用Osstem TSⅢ型种植体系统,骨挤压与液压法联合经牙槽嵴入路内提升术,应用A-PRF作为植入物,并同期植入种植体。术后6-8月进行义齿修复。结果:术后曲面断层片显示上颌窦内提升幅度在3.3-7.8mm (平均6.1mm),26例患者42颗牙齿均取得良好的骨结合。结论:改良型富血小板纤维蛋白(A-PRF)是完全自体血液来源的组织,不存在排异反应,且具有诱导软硬组织形成作用,可作为一种有效的低成本的上颌窦提升生物材料应用于临床。

富血小板纤维蛋白修复兔颅骨骨缺损的实验研究

目的:观察新一代血小板浓缩物富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)能否促进成骨,以指导临床应用。方法:3月龄大耳白兔9只,采用PRF修复标准化颅骨缺损。常规取材,进行软X线摄片及HE、改良Go-mori染色光镜观察。结果:IPP 6.0图像分析软件测量兔颅骨软X线片显示之新生骨小梁面积,统计学分析结果显示,不同时间点的PRF修复组骨小梁面积均显著大于对照组(P<0.05),4周差异显著性最大(P<0.01)。组织学观察表明,不同时间点实验组骨成熟程度均高于对照组。结论:PRF能够显著促进兔颅骨缺损的愈合,且早期疗效最为显著。

富血小板纤维蛋白在治疗糖尿病兔皮肤溃疡中的实验研究

目的观察富血小板纤维蛋白(PRF)对糖尿病动物模型皮肤创面的治疗作用及疗效。方法将20只大白兔随机分为空白对照组(4只)、糖尿病模型组(4只)、重组人表皮生长因子凝胶(rhEGF)组(4只),PRF组(8只),将糖尿病模型组、rhEGF组、PRF组建立糖尿病动物创面模型,4组动物创面分别予以1%碘伏清创、1%碘伏清创、rhEGF外敷、PRF外敷。观察各组创面面积及容积变化情况,标本予以HE染色观察创面组织生长情况,免疫组化标记血管内皮生长因子(VEGF)蛋白,计算VEGF平均光密度。结果干预后3、7 d显示,rhEGF组、PRF组创面面积和容积缩小的速度高于空白对照组及糖尿病模型组(P<0.05)。第2、3周末大体病理观察rhEGF组、PRF组创面组织表皮覆盖完全,真皮结构致密,皮肤结构基本恢复正常,有大量毛细血管存在。第2、3周末标本VEGF平均光密度蛋白含量,rhEGF组、PRF组显著高于空白对照组、糖尿病模型组(P<0.05)。结论 PRF可显著促进糖尿病兔皮肤创面的愈合。

拔牙创不同处理方式对牙槽窝愈合影响的实验研究

拔除36只兔的双侧下颌第一磨牙,拔牙创处理分为4组(n=9),A组:PRF联合ADM组;B组:PRF组;C组:ADM组;D组:对照组。不同时间点牙槽骨高度与宽度比较各组间差异无显著性(P>0.05);骨计量学各参数比较:术后2、4周各组之间比较有统计学意义(P<0.01),A组最优;术后8周B组与C组差异无显著性(P>0.05),A组分别与另2组比较有统计学意义(P<0.01),A组最优。PRF联合ADM促进拔牙窝愈合效果最佳。