富血小板血浆提取方法的探讨

目的:比较不同离心和激活方法处理富血小板血浆(PRP)的效果。方法:1名健康志愿者、30名眼科住院患者静脉采血,分别用PCCSkit法,Curasan法及Trindade法制备PRP。ELISA检测各组血小板衍化生长因子(PDGF)、转化生长因子(TGF-β)、血管内皮细胞生长因子(VEGF),倒置相差显微镜观察PRP添加方式对人成骨样细胞MG63观察效果的影响。结果:Trindade离心法提取的PRP加CaCl2后,PDGF含量高于其他2种方法,PCCSkit法提取的PRP加CaCl2和凝血酶后,TGF-β含量高于其他2种方法,Curasan法提取的PRP加CaCl2后,VEGF浓度高于其他2种方法。3种离心方法中未激活和激活的PRP中生长因子浓度差异有显著性(P<0.05),激活组中CaCl2组和CaCl2加凝血酶组PRP中生长因子含量差异无显著性(P>0.05)。显微镜观察显示,PRP离心后的萃取液可去除RBC对MG63细胞观察效果的影响。结论:3种离心方法间无显著差异;低温、即刻提取PRP,用CaCl2或CaCl2加凝血酶激活均促进生长因子释放;PRP离心萃取液更有利于用于细胞培养中的镜下观察。

富血小板血浆对痤疮丙酸杆菌的体外抑菌实验研究

目的通过体外实验探索富血小板血浆(PRP)对痤疮丙酸杆菌的抑菌作用。方法采用纸片扩散法(简称"改良K-B法")来进行PRP体外抑菌的实验,设置红霉素溶液阳性对照药,贫血小板血浆(PPP)为阴性对照药,最后测定抑菌圈直径。结果 PRP对痤疮丙酸杆菌有较强的敏感性,在纸片扩散法实验中的抑菌圈直径为(15.37±0.747 0)mm,与PPP相比差异有统计学意义(P<0.05)。参考抗生素药敏实验等级划分的判断标准,PRP对痤疮丙酸杆菌的抑菌效果属于高敏。结论 PRP对痊疮的主要致病菌座疮丙酸杆菌有良好的抑菌效果。

兔富血小板血浆液制备及CaCl_2诱导的比较

目的通过比较不同方法制备兔富血小板血浆,用CaCl2做诱导剂测量血小板计数、白细胞计数、血小板衍化生长因子(PDGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1),探讨手工富血小板血浆制备方法及在CaCl2激活后的影响。方法采用一次离心法,二次离心法(Landesberg法和Aghaloo法)制备大耳白兔富血小板血浆进行比较。检测3组富血小板血浆中血小板计数、白细胞计数。用CaCl2做诱导剂,比较激活前后PDGF及TGF-β1的变化。结果 3种方法制备的富血小板血浆中血小板计数差异有统计学意义(P<0.01),Landesberg法和Aghaloo法均可制备有效浓度的富血小板血浆。一次离心法由于干扰较小,比较稳定,但血小板数不高;二次离心法富血小板血浆中血小板数相对高,手工制备容易受很多因素影响,且不稳定。3组富血小板血浆用CaCl2诱导前后,一次离心法、Aghaloo法PDGF与正常血浆组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Landesberg法制备的血小板血浆中PDGF、TGF-β1水平明显高于激活前(P<0.01)。一次离心法、Landesberg法和Aghaloo法富血小板血浆中血小板计数与白细胞计数呈正相关。结论手工制备兔富血小板血浆、Landesberg法和Aghaloo法都可以获得有效浓度,而Aghaloo法获得浓度最高。运用CaCl2做诱导剂,使富血小板血浆激活,可释放生长因子,起到治疗作用。

氢流量对富硅-氮化硅薄膜键结构及光学性质的影响

采用等离子体增强化学气相沉积法,以SiH_4、NH_3和H_2为反应气体,通过改变氢流量来制备富硅-氮化硅薄膜。利用傅里叶变换红外吸收光谱、紫外-可见光透射光谱、X射线衍射谱和光致发光谱对薄膜的结构与性质进行表征。实验发现,适当地增加H2流量,可以提高反应过程中H离子与Si、N悬挂键的键合几率,从而起到钝化薄膜悬键的作用。当H_2流量从10 sccm变化到20 sccm时,H主要起到钝化薄膜悬挂键作用,因而缺陷态减少,缺陷态发光减弱,薄膜的光学带隙缓慢展宽。继续增加H_2流量,薄膜中的氮原子持续增加,伴随着缺陷态再次增多,辐射加强,并导致光学带隙迅速展宽。当H_2流量达到30 sccm时,薄膜中的氮化硅晶粒增大,数目增多,缺陷态发光消失,出现了氮化硅中由非晶硅量子点团簇引起的发光现象,说明薄膜中出现了非晶硅量子点团簇。因此,适量的增加氢流量能够对薄膜起到钝化的作用,并实现从富硅-氮化硅向Si_3N_4相转变的过程中形成氮化硅基质包埋的非晶硅量子点团簇结构。

半月板非血供区损伤的修复方案

背景:半月板在膝关节的生物力学和软骨保护方面起着关键作用,它具有减震、维持膝关节力线稳定以及减少关节软骨磨损等多种功能,但迄今为止对于半月板红-白区及白-白区损伤的手术修复一直效果不佳,若只行单纯的半月板切除术,膝关节整体力学结构的改变易导致膝关节骨关节炎进展加快,因此,近年来国内外学者均在尝试采用不同的方式辅助半月板损伤修复,以期改善半月板非血供区损伤的修复效果,减缓患者膝关节骨关节炎的进展。目的:总结近年来基础与临床上半月板的非血供区损伤的辅助修复方法,并对该领域未来发展前景及所面临的挑战进行了展望。方法:采用中国知网、万方数据、PubMed和FMRS数据库进行文献检索,检索2005-2021年发表的相关文献,纳入与半月板损伤修复有关的包含临床研究及组织工程研究在内的所有文献,最终对60篇文献进行综述。结果与结论:①由于半月板特殊的解剖结构,其内侧2/3的区域存在血供较差、出现损伤后难以愈合的问题,目前辅助半月板损伤修复的方法包括:微骨折术、髌下脂肪垫粉碎术、间充质干细胞、富血小板血浆以及纤维蛋白凝块。②不同的修复方式存在其各自的优劣势,微骨折术和髌下脂肪垫粉碎术作为临床应用方法,操作简便,但其操作过程中存在造成医源性损伤、引发术后疼痛及骨关节炎的可能,进一步精细化操作避免损伤的发生是临床不可避免的话题。而间充质干细胞、富血小板血浆虽然在基础研究中表现出了良好的效果,但由于其制备方法多样,运用方法不固定,且富血小板血浆在临床运用时甚至出现了完全相反的临床效果,因此,进一步研究间充质干细胞与富血小板血浆提高半月板修复潜力的机制,规范化其制备流程与运用方法仍是下一步的研究方向。③纤维蛋白凝块则在临床运用上表现出了良好的结果,但目前仍缺乏更多的相关研究。④总之,目前纤维蛋白凝块技术与髌下脂肪垫粉碎术研究内容仍较少,而富血小板血浆在临床上表现出现了两极分化现象,微骨折术与滑膜间充质干细胞的临床运用稳定,是目前较好的辅助修复方法。

不同处理方式对富血小板血浆相关生长因子的影响

目的:探究超声、冻融、钙离子及其组合等处理方法对富血小板血浆(PRP)释放生长因子含量的影响。方法:20份PRP来自健康献血者,根据不同处理方式将每份分为9组,即超声组、冻融组、葡萄糖酸钙组、氯化钙组、超声+葡萄糖酸钙组、超声+氯化钙组、冻融+葡萄糖酸钙组、冻融+氯化钙组、超声+冻融组,采用ELISA检测每组处理后的PRP中转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)的含量。结果:样本的血小板浓度为(966.7±202.6)×10^(9)/L。TGF-β1含量最低的是冻融组,最高的是超声+冻融组;VEGF含量最低的是葡萄糖酸钙组,最高的是冻融+氯化钙组;PDGF-BB含量最低的是葡萄糖酸钙组,最高的是超声+冻融组。3种生长因子的含量在葡萄糖酸钙组与氯化钙组间比较均没有统计学差异(P>0.05)。结论:9种PRP处理方式中,两种钙离子激活剂无差异;反复冻融及超声处理可能是促进PRP释放生长因子的最佳方式,葡萄糖酸钙则是作用最弱的方式。

马属动物富血小板血浆制备方法

富血小板血浆(PRP)作为一种再生医学疗法,可用于治疗马属动物肌腱韧带损伤、关节疾病、外伤等,在欧美等发达国家已有20多年的应用历史。马属动物PRP可通过商品化装置或实验室方法制备,不同制备方法会影响PRP血小板浓度、细胞组成、血小板功能,进而影响其治疗效果。尽管国际上有大量有关PRP的报道,但仍未对马属动物PRP的制备方法形成统一方案。国内关于马属动物PRP的文献较少,尚无对PRP制备方法及研究概况的总结,大大限制了其在马属动物临床疾病治疗中的应用。论文就马属动物PRP作用机制、制备原理、制备方法及其影响因素进行综述,分析各种制备方法优缺点及发展趋势,以期为PRP研究及其临床应用提供参考。

关节腔注射富血小板与玻璃酸钠治疗膝关节骨性关节炎的长期疗效比较

目的比较关节腔注射富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)与玻璃酸钠(Sodium hyaluronate,SH)治疗早中期膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的长期临床疗效。方法收集我院2014年1月-2017年1月间收治的符合标准的KOA患者87例,采用双盲随机对照法进行研究,分为PRP组42例,SH组45例,并于3周内连续注射3次PRP或SH。分别在注射前及最后一次注射后的第2,6,12,24及36个月时记录IKDC主观评分,Tegner评分以及欧洲生命质量视觉模拟(EQ-VAS)评分。结果PRP组治疗后第2,6,12,24个月的IKDC主观评分、Tegner评分、EQ-VAS评分以及第36个月的IKDC主观评分均高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。SH组治疗后第2,6,12,24个月的IKDC主观评分及Tegner评分均高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后第36个月的EQ-VAS评分低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。组间比较,在任何评分指标的任何随访时间点,两组结果均未见明显差异(P>0.05),但PRP组再干预率低于SH组,分别为17.2%,32.8%。结论关节腔注射PRP[]或SH治疗KOA均能改善膝关节功能,提高患者生活质量,在2年内有良好的疗效,但长期疗效并不明显,且关节腔注射PRP疗效并不优于SH。

关节腔注射富血小板血浆与臭氧治疗膝关节骨性关节炎的疗效观察

目的观察关节腔注射富血小板血浆(PRP)与臭氧(O3)治疗膝关节骨性关节炎(KOA)的临床疗效。方法选取膝关节骨性关节炎患者40例作为研究对象,采用随机双盲法将其分为PRP组20例,O3组20例,均采取每周1次,连续3次进行关节腔注射PRP或O3的治疗,记录治疗前、治疗后1周、1个月、3个月、6个月的VAS评分及WOMAC评分,采用末次随访时Macnab疗效评价指标评价疗效。结果PRP组治疗后1周、1个月、3个月、6个月VAS评分及WOMAC评分均优于O3组(P<0.05)。PRP组临床治愈19例,显效1例,治疗改善率为85%;O3组临床治愈13例,显效3例,有效4例,治疗改善率为75%。结论富血小板血浆(PRP)治疗膝关节骨性关节炎短期疗效优于关节腔注射O3治疗膝关节骨性关节炎。

富血小板血浆联合改良Broström-Gould法修复距腓前韧带的早期临床疗效

目的 观察自体富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)联合改良Broström-Gould法修复距腓前韧带(anterior talofibular ligament,ATFL)的早期临床疗效。方法 回顾性分析我院2020年3月至2022年2月收治的37例ATFL损伤病人的临床资料,采用改良Broström-Gould法治疗,根据是否接受PRP治疗分为对照组(14例)和PRP组(23例),比较两组术前和术后6周时距骨倾斜角(talar tilt angle,TTA)、美国足踝外科医师协会(American Orthopaedic Foot and Ankle Society,AOFAS)踝与后足功能评分系统评分和疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分。结果 两组病人术后6周AOFAS评分、TTA和VAS评分均优于术前,差异有统计学意义(P<0.05);组间AOFAS评分[(82.3±7.1)分vs.(85.5±9.2)分]、TTA(3.7°±0.5°vs.3.5°±0.6°)的差异无统计学意义(t=1.261,P=0.564;t=1.016,P=0.641);VAS评分[(2.8±0.5)分vs.(0.9±0.2)分]的差异有统计学意义(t=3.857,P=0.028)。结论 自体PRP联合改良BroströmGould法修复ATFL损伤,能够有效减轻术后疼痛度,有利于加速康复锻炼,值得临床进一步推广。

自体富血小板血浆联合负压吸引疗法治疗慢性创面的Meta分析

目的:通过全面的数据检索及严格的筛选,纳入并汇总可用数据,评估自体富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)联合负压吸引疗法对慢性创面愈合的有效性及安全性。方法:在电子数据库中进行文献检索,并根据预定的标准选择研究,包括所有关于PRP联合负压创面疗法和单用负压创面疗法治疗慢性创面的随机和非随机对照研究,评估研究的质量并总结结果后,使用RevMan5.3软件对纳入研究进行Meta分析。结果:本次纳入了27项研究,共1687例慢性创面患者,实验组840例,均采用PRP联合负压引流法干预;对照组847例,均采用单纯负压引流法干预。通过对纳入的研究数据进行分析,结果显示实验组在创面愈合及住院时间、创面愈合率、细菌培养阳性率、患者疼痛症状等方面均优于对照组。结论:PRP联合负压吸引疗法治疗慢性创面较单独使用负压吸引疗法更具优势,但其作用机理需更多的研究来明确,此外该文章由于纳入研究的质量限制,尚有待更多高质量的临床随机对照研究予以验证。

富血小板血浆制备技术及其组分的研究进展

目的总结富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)的制备技术及其组分的研究进展。方法广泛查阅近年国内外有关PRP的作用机制、制备方法以及组成等相关文献,并进行总结分析。结果 PRP促进生物学修复作用的发挥依赖于一系列序贯发生的级联细胞分子事件。PRP中含有高浓度血小板,其激活后释放大量活性因子,还含有少量的白细胞和红细胞。PRP的制备基于血小板的浓缩技术,不同的制备技术获得的血小板浓度、复苏率和组分也不相同。结论 PRP的制备技术目前尚无统一标准,不同的制备方法获得的不同成分和不同浓度的PRP,为临床患者选择最适合的个体化PRP产品奠定基础。

富血小板血浆治疗糖尿病足溃疡的研究进展

糖尿病足溃疡(DFU)是糖尿病慢性并发症中较为严重的一种,治疗难度大,住院时间长,创面愈合缓慢,致残、致死率高。随着对DFU机制研究的逐渐深入,以富血小板血浆(PRP)为代表的血小板浓缩物被广泛应用于临床,其具有制备方法简单、费用较低、抗感染能力强、缩短创面愈合时间等优势,已成为治疗DFU重要的辅助方法之一。目前国内PRP制备方法较多,各单位所使用的制备参数各不相同,缺乏统一标准,导致所制备的PRP制品中血小板含量差异较大、临床疗效参差不齐。因此,该文就PRP的制备、DFU创面愈合困难的原因、PRP促进DFU愈合的机制及相关研究进展进行综述。

改良法制备自体富血小板血浆及其生长因子含量分析

目的建立一个安全、有效、简便、经济的自体富血小板血浆(PRP)的提取方法,并对其中的生长因子含量进行分析。方法2014年1-6月,北京大学人民医院皮肤科就诊的萎缩性痤疮瘢痕患者24例,男10例,女14例,年龄21〜46(28.6±6.0)岁。采集患者肘静脉血用改良的Chouk-roim法制备PRP,采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量分析正常血浆及PRP中6种生长因子包括血小板源生长因子(PDGF)-β、转化生长因子(TGF)-β1、表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子(IGF)-1的浓度。结果PRP中PDGF-β浓度(755.61±418.31)ng/L,高于正常血浆(479.93±279.18)ng/L(t=3.479,P<0.01);TGF-β1浓度(2267.00±1223.68)ng/L,高于正常血浆(1535.50±910.91)ng/L.(t=7.082,P<0.01);EGF浓度(30.70±12.39)ng/L,高于正常血浆(20.27±10.31)ng/L,(t=6.899,P<0.01);VEGF浓度(25.42±17.69)ng/L,高于正常血浆(12.01±7.77)ng/L(t=230,P<0.01);VEGF浓度(17.85±7.17)ng/L,高于正常血浆(10.90士4.73)ng/L,(t=6.050,P<0.01);IGF-1浓度(201.22±36.80)ng/ml,高于正常血浆(174.90±33.80)ng/ml(t=3.760,PC0.01)。结论改良法PRP比正常血浆含有更高浓度的生长因子,且制备方法相对简便、经济,所获取的自体液体成分PRP尤其适用于有创的皮肤美容激光术后外涂以促进创面修复。

富血小板血浆在肩袖损伤治疗中的研究进展

肩袖损伤是引起肩痛及肩关节功能障碍的常见原因之一,其发病率高,可严重影响患者的生活质量,肩袖修复失败是目前临床工作中面临的巨大挑战。富血小板血浆作为组织修复再生的一种新兴疗法,为临床治疗肩袖损伤提供了新的思路。本文通过近几年的文献研究,阐述了富血小板血浆的制备、其生物学特性及近几年的体外、动物及临床试验等方面的研究现状,旨在规范富血小板血浆在肩袖损伤中的临床应用,找到富血小板血浆治疗肩袖损伤的最佳治疗条件。

电感耦合等离子体质谱测定富钴结壳中的稀土元素

采用封闭压力酸溶(HF+HNO3)消解样品,以Rh为内标,用电感耦合等离子体质谱测定富钴结壳中的稀土元素。用此方法对3个国家一级标准物质富钴结壳标样(GSMC-1,GSMC-2,GSMC-3)进行了多次测定,结果稀土元素的测定值与标准值相符,多次测定结果的相对标准偏差(RSD,n=5)在0.36%～4.0%之间,加标回收率为90%～106%。基于此方法,对6个富钴结壳样品进行了测定,显示富钴结壳样品中稀土元素的配分曲线与标准物质中稀土元素的配分模式一致。方法适用于富钴结壳样品的批量分析。

单采法与手工法制备富血小板血浆在膝骨关节炎疗效中的差异对比

目的探讨单采法与手工法制备富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)质量参数与膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)治疗效果的对比。方法回顾性分析作者医院2019-01/2022-03月符合KOA诊断并使用PRP治疗的60例患者,按照PRP制备方法分为手工法组(n=26)和单采法组(n=34),比较两种方法制备的PRP各项参数,及经治疗后,KOA治疗效果各项评价指标及不良反应发生情况。结果两组制备的PRP血小板计数、血小板富集系数和血红蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05),手工法制备PRP中红细胞计数、白细胞计数、红细胞比容和平均血小板体积(mean platelet volume,MPV)较单采法组高,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)和Lysholm膝关节评分差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者VAS均明显降低,Lysholm总分明显升高,与治疗前比较差异具有统计学意义(P<0.05);组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗和随访期间均无严重不良反应发生。结论两种方法均可制备出符合质量要求的PRP,有效减轻KOA患者症状、恢复功能,未见严重不良反应发生,疗效无明显差异。

中国富血小板血浆临床制备方法的研究进展

自体富血小板血浆(PRP)是一种通过离心的方法从自体血中提取出来的血小板浓缩物。近20年来,已经被广泛应用于多种学科,如骨科、口腔颌面外科、整形美容科等。然而,至今,PRP的临床制作方法还没有统一标准,不同的制作方法导致PRP的成分以及临床疗效不同,给临床医务工作者应用PRP造成了诸多困扰。通过检索和分析中国已发表有关PRP制备的文献(中文和英文)发现,国内PRP临床制备方法差异性较大,包括采血量、离心设备、离心次数、离心力、离心时间和PRP制备量等。PRP中血小板富集度和回收率,白细胞浓度等指标也不稳定,亟需更高质量的研究或指南来规范和指导临床PRP的制备。

改良白膜法对制备浓缩血小板质量的影响

目的探讨改良白膜法对制备浓缩血小板质量的影响。方法按照随机数字表法将已采集的60袋400 ml全血分为两组:改良白膜法制备浓缩血小板组(研究组)和富含血小板血浆法制备浓缩血小板组(对照组),每组30袋。分别记录两组制备出的浓缩血小板的p H值、红细胞混入量及血小板计数,并进行统计学分析。结果研究组改良白膜法制备出的浓缩血小板中血小板计数明显高于对照组富含血小板血浆法制备出的浓缩血小板(P<0.05);两组间浓缩血小板的p H值和红细胞混入量差异比均无统计学意义(P>0.05)。结论改良白膜法制备出的浓缩血小板在血小板计数方面明显高于富含血小板血浆法制备出的浓缩血小板,该方法制备出的浓缩血小板质量较富含血小板血浆法明显较好。