饲养温度对小菜蛾(Plutella xylostella)AchE和CarE活力的影响

在湿度定义为干、湿球温度差为3℃、光照强度10000-12000 lx、光照周期14L:10 D条件下,探索饲养温度(X:24-36℃)之变化对小菜蛾(Plutella xylostella)4龄幼虫乙酰胆碱酯酶(AchE)和羧酸酯酶(CarE)活力(Y)的影响效应。实验结果表明,活力指数随着饲养温度的升高而降低,两者之间存在显著的线性相关关系:温度与乙酰胆碱酯酶(AchE)活力两者间的相关关系函数式为Y=0．3327-0．0068X;与羧酸酯酶(CarE)活力的为Y=3．1278-0．0780X。

苍耳等药用植物提取物对小菜蛾的拒食作用和产卵忌避效果

室内采用叶碟法,研究苍耳(Xanthium sibiricumPetril)等8种药用植物乙醇提取物对小菜蛾(Plutel-la xylostella)的拒食和产卵忌避活性。结果表明,苍耳(果实)、雷公藤(根)和商陆(根)乙醇提取物对小菜蛾4龄幼虫的取食均有较强的抑制作用,选择性拒食率分别为86.16%、49.06%和43.82%;非选择性拒食效果仍以苍耳(果实)提取物最好,达45.23%。选择性产卵忌避率以雷公藤(根)提取物为最高(69.52%),其次是苍耳(果实)和山苍树(枝叶)提取物,分别为62.50%和57.72%,雷公藤(根)、商陆(根)、窃衣(茎叶)和苍耳(果实)的非选择性产卵忌避作用均在77%以上。苍耳和雷公藤提取物在对小菜蛾的拒食和产卵忌避的各测试中,均表现较强活性。

银杏外种皮对小菜蛾生长及体内保护酶活性的影响

用12.5、25、50、100、200 mg.mL-1银杏外种皮提取物浸泡过的无农药残留的小青菜饲喂小菜蛾3龄幼虫,研究了银杏外种皮提取物对小菜蛾生长及其体内3种保护酶SOD、CAT、POD活性的影响.结果表明:银杏外种皮提取物对小菜蛾幼虫具有一定的拒食活性和毒杀作用,能够降低幼虫化蛹率,影响蛹的质量.此外,银杏外种皮提取物能够扰乱小菜蛾幼虫体内保护酶的动态平衡,主要表现为SOD活性被激活,4、36、48 h时处理组SOD活力均显著高于对照组;CAT活性被抑制,4、24 h时处理组CAT活力均显著低于对照组;4-36 h POD活性被抑制,处理组POD活力均显著低于对照组,而48 h时POD活性又被激活,处理组活力显著高于对照组.

小菜蛾鞣化激素基因克隆及其功能分析

鞣化激素是调节昆虫表皮骨化和翅膀发育的一种神经激素，尽管已经在许多不同种昆虫上克隆了鞣化激素基因，但是关于小菜蛾Plutella xylostella鞣化激素及其基因的研究至今未见报道。本研究克隆了两个小菜蛾鞣化激素基因Pxbursα和Pxbursβ（GenBank登录号分别为KF498645和KF498646）全长cDNA，其序列长度分别为537bp和360bp，与已报道的其他昆虫的鞣化激素氨基酸序列一致性分别为51％～68％和37％～57％。实时定量PCR分析发现Pxbursα和Pxbursβ均在蛹期表达量高，而在幼虫期和成虫期的表达量低。以Pxbursα部分序列的双链RNA（dsRNA）饲喂小菜蛾4龄末期幼虫，发现蛹期Pxbursα的表达受到了显著抑制，小菜蛾的发育停滞在蛹期而无法正常羽化，并最终死亡。由此推测，小菜蛾鞣化激素基因在蛹期的大量表达对其生长发育和羽化具有重要的作用。

半闭弯尾姬蜂的寄主选择性及寄生对寄主发育和取食的影响

在24℃下研究了半闭弯尾姬蜂寄生对寄主幼虫龄期的选择性及对寄主生长发育、取食量的影响.结果表明,该蜂能寄生小菜蛾2～4龄的幼虫,但当2～4龄幼虫同时存在时,偏爱寄生2、3龄幼虫,对2、3、4龄幼虫的选择系数分别为0.37、0.44、0.19.该蜂对4龄幼虫的寄生能力随寄主日龄增大而下降.2～4龄小菜蛾幼虫被寄生后,总发育历期与预蛹期都比未被寄生的显著延长.当小菜蛾幼虫在2龄初被寄生后,总取食量比未被寄生的显著减少;但当幼虫在3、4龄初被寄生后,各龄的取食量与未被寄生的差异不显著.

嗜线虫致病杆菌HB310培养基筛选和培养条件优化

嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila是与小卷蛾斯氏线虫Steinernema carpocapsae互惠共生的一种革兰氏阴性菌,对多种农业害虫都具有很高的杀虫活性。本研究对多种影响嗜线虫致病杆菌HB310菌株发酵培养的因素进行了筛选优化。通过单因素试验确定最佳碳源、氮源和无机盐分别为葡萄糖、牛肉蛋白胨和KH2PO4;通过正交实验确定培养基的最优组合为:葡萄糖2%、牛肉蛋白胨1%、牛肉浸膏0.3%和K2HPO41%;最佳摇瓶培养条件为:接种量6%、培养基p H 7.5、摇床转速200 rpm、培养温度28℃和培养时间48 h,在此条件下,嗜线虫致病杆菌HB310菌株生长速率最快,菌液的杀虫活性最高。

不同剂型杀虫剂对小菜蛾的防效比较

氯虫苯甲酰胺、氰氟虫腙、溴虫腈、甲维盐和丁醚脲是小菜蛾常用防控药剂。5种杀虫剂乳油(EC)和悬浮剂(SC)的表面张力、室内毒力及盆栽菜和田间持效期测定结果表明,EC制剂的表面张力值均小于SC制剂,室内杀虫活性也普遍高于SC制剂;但盆栽菜和田间持效期测定显示,SC制剂室外药效稳定性优于EC制剂。说明同种药剂EC制剂和SC制剂各有优势,建议应用时,结合不同环境条件选择合适的剂型。

小桐子种子提取物对小菜蛾、家蝇杀虫活性初探

以乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿和石油醚为溶剂对小桐子种子进行粗取,并采用常规方法对小菜蛾和家蝇进行杀虫活性测定。结果显示,种子的5种溶剂提取物对2种试虫的杀虫活性均较强,其中对小菜蛾的触杀活性以乙酸乙酯提取物最高,48 h校正死亡率达93.6%,最低的石油醚为78.9%;乙醇提取物对家蝇的胃毒效果最强,48 h校正死亡率达100%,石油醚最低,为58.3%。

冬虫夏草寄主蝠蛾天然饲料珠芽蓼对小菜蛾、斜纹夜蛾生长发育的影响

珠芽蓼Polygonum viviparum L.是冬虫夏草寄主蝠蛾的天然饲料,具有较高的药用、营养与饲用价值。本文分别于小菜蛾Plutella xylostella(L.)与斜纹夜蛾Spodoptera litura Fabricius的人工饲料中添加5%、15%、25%的新鲜珠芽蓼根粉饲喂小菜蛾与斜纹夜蛾,测定了新鲜珠芽蓼根对小菜蛾与斜纹夜蛾生长发育与存活的影响。结果显示,珠芽蓼根对小菜蛾与斜纹夜蛾的1-4龄幼虫具有很强的生长抑制活性及毒杀活性,对斜纹夜蛾5龄幼虫具有明显的毒杀活性。

小菜蛾p38 MAPK基因的克隆与生物信息学分析

小菜蛾（PhttellaxylostellaL．）是一种危害十字花科植物的世界性害虫，研究其基因功能为寻找新的小菜蛾防治方法具有重要意义。本研究克隆了小菜蛾p38MAPK基因的开放阅读框（ORF），并根据其DNA序列推导出了蛋白一级结构，发现该基因编码一个含有349个氨基酸残基的蛋白。通过SMART网站分析发现该蛋白在第20～304位氨基酸残基区域存在着一个典型的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶结构域，说明它是一个潜在的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶。Blast比对发现Pxp38基因与家蚕Bmp38基因、酿酒酵母ScHOGl基因、人类Homosapiensp38基因在蛋白～级结构上的相似性分别是91．7％、51．6％和78．6％，说明p3sMAPK基因在进化上具有较高的保守性。·

菜蛾盘绒茧蜂寄生对寄主小菜蛾脂肪体细胞变态的影响

结果表明,小菜蛾(Plutella xylostella L．)幼虫被菜蛾盘绒茧蜂(Cotesia plutellae(Kurdjumov))寄生后,不能正常化蛹,寄主的脂肪体细胞变态受到明显的抑制．在多分DNA病毒(Polydnavirus,PDV)、畸形细胞等寄生因子存在状态下,经蛋白质双向电泳分析表明,不同寄生状态的小菜蛾脂肪体蛋白组分存在明显差异,与正常发育的寄主脂肪体完全不同．说明菜蛾盘绒茧蜂PDV、畸形细胞以不同的调控方式影响寄主脂肪体的蛋白合成和积累,以满足寄主体内幼蜂发育时营养的需求．

控制小菜蛾的赤眼蜂田间种群保护与增殖研究

通过建立十字花科蔬菜间作甜玉米、黑光灯诱虫育蜂笼这2种田间保护增殖措施，探讨了玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostriniae、拟澳洲赤眼蜂T.confusum以及卷蛾分索赤眼蜂Trichogranunatoidea baarae对小菜蛾Plutella xylonella种群数量控制的作用．结果表明：十字花科蔬菜地间作甜玉米使得玉米螟赤眼蜂对小菜蛾卵寄生率有明显的提高，为4．62％～11．47％；黑光灯诱虫育蜂笼的设立对田间小菜蛾卵寄生蜂的种群数量起到了良好的增殖作用，自2002年4月初到6月底，诱集小菜蛾产卵127300粒，培育卷蛾分索赤眼蜂10万多头．在育蜂笼设立初期，笼内小菜蛾卵的寄生率为87．34％，距笼5m之外其寄生率急剧下降，其有效扩散范围不超过20m．2个月后的调查表明，赤眼蜂可逐步扩散到离育蜂笼30m处，各调查点之间寄生率的差距逐渐缩小，在距笼25m范围内，小菜蛾卵的寄生率维持在50％以上，有效地抑制了小菜蛾种群数量的增长．

生态控制措施对小菜蛾种群的控制研究

应用害虫种群控制系统的理论和方法,以拟澳洲赤眼终(,Techogrammer confusum)、性诱剂为基木措施,辅以爱比菌素(Aba,ecton)、印楝素等非化学杀虫剂，组配成生态控制配套措施，评价对小菜峨的拉制作用。结果表明,本套生态控制措施可将1茬菜心品种上的小莱峨种群趋势指数待续控制在1.0以下,同时减少施用农药5一6次,降低农药成本44.4D%一51.04%

土荆芥精油预处理后小菜蛾幼虫对氟虫腈敏感度的变化

采用微量点滴法测定了土荆芥Chenopodium ambrosioides精油预处理前后氟虫腈对小菜蛾Plutella xylostella 2龄幼虫的触杀作用,采用生化分析方法研究了土荆芥精油预处理前后小菜蛾幼虫体内乙酰胆碱酯酶(AChE)、羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)的比活力。研究结果表明,1μL·mL-1和10μL·mL-1的土荆芥精油预处理可增加小菜蛾幼虫对氟虫腈的敏感度,LC50分别为氟虫腈单用时的0.66倍和0.44倍;当用1μL·mL-1和10μL·mL-1土荆芥精油预处理小菜蛾2龄幼虫2h后,再用氟虫腈致死中量点滴处理,小菜蛾存活幼虫体内AChE、CarE和GSTs比活力均低于氟虫腈单独处理组。研究结果说明土荆芥精油预处理对氟虫腈的增效作用可能与主要抗性相关酶系活性变化有关。

杀虫剂对小菜蛾幼虫的毒力研究

采用浸叶法测定10种杀虫剂对海南省海口、三亚、儋州小菜蛾田间种群的毒力。结果表明:10种药剂对海口地区小菜蛾3龄幼虫的毒力LC50大小顺序为:Bt>氟啶脲>多杀菌素>茚虫威>虫螨腈>阿维菌素>丁醚脲>虫酰肼>杀螟丹>高效氯氰菊酯;三亚地区小菜蛾3龄幼虫的毒力LC50大小顺序为:Bt>多杀菌素>氟啶脲>茚虫威>虫螨腈>阿维菌素>虫酰肼>丁醚脲>杀螟丹>高效氯氰菊酯;儋州地区小菜蛾3龄幼虫的毒力LC50大小顺序为:Bt>多杀菌素>茚虫威>氟啶脲>虫螨腈>阿维菌素>丁醚脲>虫酰肼>杀螟丹>高效氯氰菊酯。3个地区对Bt和多杀菌素均表现敏感,海口地区小菜蛾种群除对高效氯氰菊酯、杀螟丹和Bt外,对其他药剂的敏感性均比三亚种群和儋州种群敏感。

2%阿维菌素微乳剂防治甘蓝小菜蛾试验

进行田间试验以明确2%阿维菌素微乳剂防治甘蓝小菜蛾的效果。结果表明,2%阿维菌素微乳剂能够很好的控制甘蓝小菜蛾,且防治效果明显高于对照,对作物安全。

几种杀虫剂对小菜蛾的田间防治效果

小菜蛾是十字花科蔬菜主要害虫。目前对小菜蛾的防治以化学防治为主。选用多种低毒药剂进行田间药效试验。结果表明:5%氯虫苯甲酰胺悬浮剂、150 g/L茚虫威悬浮剂、100 g/L虫螨腈悬浮剂和3%甲维盐乳油等4种药剂对小菜蛾的防效较好,防治效果均在80%以上。其中5%氯虫苯甲酰胺悬浮剂和150 g/L茚虫威悬浮剂的田间持效期较长,药后10 d防治效果仍可保持在60%左右。

小菜蛾U6 snRNA基因的克隆及作为miRNA定量表达分析内参基因的评价

【目的】克隆小菜蛾Plutella xylostella(L.)小分子非编码RNA U6的cDNA序列,并评价其是否适合作为定量检测小菜蛾microRNA(miRNA)表达量的内参基因。【方法】本研究采用RT-PCR克隆获得了小菜蛾4龄幼虫核小RNA(small nuclear RNA,snRNA)U6的cDNA序列,并用定量PCR法检测了U6及8种miRNAs在小菜蛾不同发育阶段及不同杀虫药剂处理后的表达稳定性。【结果】小菜蛾U6的cDNA序列全长94 bp,与其他昆虫U6的核苷酸序列一致性达98.9%。用geNorm和RefFinder软件分析荧光定量PCR结果表明,U6在小菜蛾卵、1-4龄幼虫、蛹和成虫7个不同发育阶段表达稳定;用马拉硫磷、毒死蜱、辛硫磷、灭多威、呋喃虫酰肼、高效氯氰菊酯、氯虫苯甲酰胺、溴虫腈和Bt 9种不同作用机理的杀虫药剂处理3龄末幼虫48 h,对U6的表达水平无显著影响。【结论】小菜蛾U6表达水平不受不同发育阶段和不同杀虫药剂处理的影响,符合作为内参基因的基本特点,可作为定量PCR法评价小菜蛾miRNA或其他非编码小分子RNA表达水平的内参基因。研究结果为小菜蛾miRNA表达水平的准确定量奠定了基础。

1.8%苦参碱·阿维菌素乳油防治甘蓝小菜蛾药效试验

1.8%苦参碱·阿维菌素乳油防治甘蓝小菜蛾的田间药效试验结果表明:其对甘蓝上小菜蛾具有良好的防治效果。田间每667 m2喷施该药剂30 g后7 d,小菜蛾的校正死亡率达到80%以上,显著优于对照药剂1.8%阿维菌素乳油20g和0.36%苦参碱水剂60 g的防治效果,说明1.8%苦参碱·阿维菌素乳油在蔬菜生产上具有良好的应用前景。

小菜蛾颗粒体病毒PP31蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

杆状病毒PP31是一种磷酸化的DNA结合蛋白。pp31基因存在于所有已完成测序的鳞翅目昆虫杆状病毒。用PCR方法从小菜蛾颗粒体病毒基因组扩增pp31基因,将其克隆至原核表达载体pET28a,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株。经IPTG诱导,在被转化菌株中表达产生出携带6×His标签的PP31蛋白。用ProBondTM树脂纯化的His-PP31融合蛋白大小约29 kD左右。用该融合蛋白免疫新西兰大白兔,获得PlxyGV PP31蛋白抗血清。Western blot分析显示,所获得的抗血清具有较强的特异性和高效价,可应用于PlxyGV PP31蛋白分析。