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早熟大豆外源DNA导入的RAPD分子验证 被引量:21
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作者 李希臣 雷勃钧 +5 位作者 卢翠华 钱华 周思君 吕云波 谢纬武 王斌 《大豆科学》 CSCD 北大核心 1994年第2期152-156,共5页
利用花粉管通道技术直接导入外源总DNA,从而进行农作物品种改良,在国内外许多作物上已得到了广泛的应用。但外源总DNA是否能够通过花粉管通道进入受体,后代的变异是不是由于外源总DNA片段与受体基因组整合、表达所引起的,... 利用花粉管通道技术直接导入外源总DNA,从而进行农作物品种改良,在国内外许多作物上已得到了广泛的应用。但外源总DNA是否能够通过花粉管通道进入受体,后代的变异是不是由于外源总DNA片段与受体基因组整合、表达所引起的,一直没有得到直接的分子生物学证据,本文报道了利用RAPD(RandomlyAmplifiedPolymorphicDNA)这一分子生物学技术,对通过花粉管通道导入外源总DNA所获得的大豆早熟后代进行了分子验证。结果表明:在后代基因组中找到了供体具有而受体没有的特异性DNA片段,直接从DNA分子水平上证明了外源总DNA片段可以通过花粉管通道导入受体,并与其基因组DNA整合,在后代中得到表达和遗传。 展开更多
关键词 大豆 花粉管通道 早熟 RAPD 育种
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外源DNA导入的大豆品种“黑生101”的RAPD初探 被引量:9
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作者 李希臣 雷勃钧 +4 位作者 卢翠华 钱华 周思君 韩玉琴 刘昭军 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期230-235,共6页
黑生101 是利用花粉管通道技术育成的第一个大豆品种,利用132 个随机引物对黑生 101 及其供体、受体的 D N A 进行 R A P D扩增,其中3 个单引物和2个双引物组合起来,均能在后代黑生 101 中扩增出与供体相同而... 黑生101 是利用花粉管通道技术育成的第一个大豆品种,利用132 个随机引物对黑生 101 及其供体、受体的 D N A 进行 R A P D扩增,其中3 个单引物和2个双引物组合起来,均能在后代黑生 101 中扩增出与供体相同而与受体不同的 D N A 片段,证明黑生101 中确有供体 D N A 片段的导入。 展开更多
关键词 大豆 黑生101 RAPD 分子验证 花粉管通道
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国槐DNA导入花生栽培品种选育抗叶斑病新种质的鉴定 被引量:12
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作者 刘风珍 万勇善 薛其勤 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第6期113-117,共5页
为了培育抗花生叶斑病的新种质,利用花粉管通道技术将国槐DNA导入花生栽培品种79266,在变异后代筛选抗叶斑病材料,对选出的5个种质系进行叶斑病抗性和农艺性状的田间鉴定,并进行抗病种质系与受体DNA差异的SSR多态性分析。获得的主要结... 为了培育抗花生叶斑病的新种质,利用花粉管通道技术将国槐DNA导入花生栽培品种79266,在变异后代筛选抗叶斑病材料,对选出的5个种质系进行叶斑病抗性和农艺性状的田间鉴定,并进行抗病种质系与受体DNA差异的SSR多态性分析。获得的主要结果如下:受体品种79266感染叶斑病(包含花生褐斑病、黑斑病和网斑病)病程曲线的线下面积(AUDPC值)为205.3,5个抗病种质系的AUDPC值极显著低于受体品种,其中05D1128的AUDPC值最小,为112.0,感病最轻;收获前7 d调查花生褐斑病和网斑病的发病程度,05D1148对花生褐斑病的抗性最强,其病级和病情指数均极显著低于受体品种,抗性比受体品种提高17.56%。05D1128对网斑病的抗性最强,其病级和病情指数均极显著低于受体品种,抗性比受体品种提高31.83%;叶斑病抗性最强的05D1128与受体品种相比,百果重和百仁重明显提高,但荚果产量和籽仁产量极显著降低。褐斑病抗性最强的05D1148与受体品种相比,二者所考察农艺性状间无显著差异;采用40对SSR引物进行PCR扩增,在05D106、05D1128、05D1144、05D1148、05D1172 5个新种质系与受体间检测到的多态性位点数分别是9,8,5,6和7。因此,利用国槐DNA导入花生栽培品种提高其对叶斑病的抗性的育种方法是有效的,所选育种质系中05D1148对叶斑病的抗性和农艺性状的综合表现最好,可以作为新的花生抗叶斑病种质材料加以利用。 展开更多
关键词 花生(Arachis hypogea L) 叶斑病 抗性鉴定 DNA导入技术
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诸葛菜DNA对油菜的高效遗传转化 被引量:2
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作者 梁明山 吴书惠 +1 位作者 李薇 梁珊玲 《西南农业学报》 CSCD 1996年第4期35-41,共7页
 以甘蓝型油莱奥罗(Oro)为受体,诸葛菜(Orychophragmusviolaceus)为供体,用花粉管通道法,在自花授粉24小时后导入诸葛菜总DNA,其后代发生了显著变异。变异率达9.8%。分析比较变异株DI-...  以甘蓝型油莱奥罗(Oro)为受体,诸葛菜(Orychophragmusviolaceus)为供体,用花粉管通道法,在自花授粉24小时后导入诸葛菜总DNA,其后代发生了显著变异。变异率达9.8%。分析比较变异株DI-10和Oro的经济性状表明,主花序有效长度增加29.8%,第一次有效分枝数增加33.3%,有效荚果数增加176.9%,每荚粒数增加18.5%,千粒重增加44.2%,单株产量增加3.67倍;含油量增加2.42%,油酸含量增加14.33%,芥酸减至0.68%。Southren杂交表明,转化油菜(DI-10)产生优良遗传特性是诸葛菜DNA导入所致。 展开更多
关键词 诸葛菜DNA 奥罗油茶 花粉管通道法 杂交
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Nifedipine对烟草花粉萌发、花粉管生长及生殖核分裂的影响 被引量:3
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作者 范六民 杨弘远 周嫦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第9期686-691,共6页
用细胞学和统计学方法研究了Ca2+ 通道专一性阻滞剂nifedipine(Nif)对烟草(Nicotiana tabacumL.)离体花粉萌发、花粉管生长及生殖核分裂的影响。10- 4 m ol/LNif可抑制花粉萌发。... 用细胞学和统计学方法研究了Ca2+ 通道专一性阻滞剂nifedipine(Nif)对烟草(Nicotiana tabacumL.)离体花粉萌发、花粉管生长及生殖核分裂的影响。10- 4 m ol/LNif可抑制花粉萌发。Nif对花粉管生长的影响与其浓度和处理持续时间有关,10- 4 m ol/L Nif始终抑制花粉管生长;而10- 7~10- 5 m ol/LNif在较短时间内起不同程度的促进作用,之后逐渐过渡为抑制花粉管生长。较高浓度处理可使花粉管形态趋向异常,细胞质流动趋于停滞。Nif抑制生殖核的有丝分裂,相对推迟分裂高峰。Nif使花粉管中的金霉素(CTC)荧光趋于减弱,表明Nif通过抑制Ca2+ 通道活性产生生理效应。 展开更多
关键词 烟草 NIFEDIPINE 花粉管 生殖核 花粉 萌发
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细胞松弛素B和鬼笔环肽对梨花粉管钙离子浓度和尖端钙离子通道的影响
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作者 刘珠琴 吴巨友 +2 位作者 姜雪婷 徐国华 张绍铃 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1763-1767,共5页
应用激光共聚焦显微镜和全细胞膜片钳技术研究了微丝骨架解聚剂细胞松弛素B(CB)和稳定剂鬼笔环肽(PD)对梨花粉管细胞内钙离子浓度动态变化和尖端质膜上钙离子通道的影响。结果显示:CB处理能促进花粉管内胞质钙离子[Ca2+]i浓度增加,同时... 应用激光共聚焦显微镜和全细胞膜片钳技术研究了微丝骨架解聚剂细胞松弛素B(CB)和稳定剂鬼笔环肽(PD)对梨花粉管细胞内钙离子浓度动态变化和尖端质膜上钙离子通道的影响。结果显示:CB处理能促进花粉管内胞质钙离子[Ca2+]i浓度增加,同时还能激活质膜上的钙离子通道;而PD处理对花粉管内[Ca2+]i浓度及钙离子通道几乎没有影响。研究表明,微丝骨架的解聚激活了花粉管质膜上的钙离子通道,使得胞外钙离子大量流入,胞内钙离子浓度升高,从而抑制花粉管生长。 展开更多
关键词 花粉管 微丝骨架 钙离子通道 细胞松弛素B 鬼笔环肽
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我国分子育种的新进展
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作者 李忠娴 《江西农业学报》 CAS 1993年第1期68-74,共7页
本文综述了控制植物遗传性状的理想可获实现。控制性状遗传主要是发展分子育种,而分子育种的首要技术是基因转移。我国设计的授粉后外源DNA导入技术,即花粉管通道技术,近五年来在我国已有16个省市25个实验室,集中了稻、麦、棉、大豆等... 本文综述了控制植物遗传性状的理想可获实现。控制性状遗传主要是发展分子育种,而分子育种的首要技术是基因转移。我国设计的授粉后外源DNA导入技术,即花粉管通道技术,近五年来在我国已有16个省市25个实验室,集中了稻、麦、棉、大豆等主要农作物的研究,并取得了突破性进展和可喜成绩,引起国际科学界瞩目,达国际领先水平,使我国的分子育种研究进入了应用阶段。本文还指出我国分子育种将进入常规育种轨道,具有广阔的发展前景。 展开更多
关键词 外源DNA 花粉管通道 基因转移技术 分子育种
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植物抗盐性及其遗传工程 被引量:3
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作者 郭善利 王秀芝 《聊城师院学报(自然科学版)》 1998年第2期53-58,共6页
从盐胁迫对植物遗传物质的影响、植物抗盐遗传和育种、与抗盐有关的基因的分离鉴定以及外源DNA花粉管通道技术转化植物和抗盐性研究四个方面探讨了植物遗传工程与抗盐性研究的关系。
关键词 盐胁迫 遗传工程 基因 分离 鉴定 植物 抗盐性
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苦瓜功能稻的全基因组重测序及精米营养品质分析 被引量:1
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作者 袁洁 何登骥 +7 位作者 何加太 詹庆才 周昆 何艳 阳永建 魏颖娟 陶湘林 唐汉军 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期378-384,共7页
针对花粉管通道法导入苦瓜DNA的籼稻子代D9和受体RT,采用IlluminaHiSeq^(TM)平台进行全基因组重测序,分析了精米的基本营养成分、总皂苷成分以及膨胀势和米饭的食味品质。结果表明:苦瓜的部分DNA片段被整合进了受体水稻的DNA中,使生理... 针对花粉管通道法导入苦瓜DNA的籼稻子代D9和受体RT,采用IlluminaHiSeq^(TM)平台进行全基因组重测序,分析了精米的基本营养成分、总皂苷成分以及膨胀势和米饭的食味品质。结果表明:苦瓜的部分DNA片段被整合进了受体水稻的DNA中,使生理活性成分总皂苷含量显著提高;苦瓜基因对水稻的营养成分有改善作用,使脂肪含量增加,膳食纤维与灰分的含量有所减少。 展开更多
关键词 籼稻 苦瓜 花粉管通道法 碱基序列 营养品质
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钙对花粉萌发的启动产效应和对花粉管生长的调节作用 被引量:41
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作者 龚明 杨中汉 曹宗巽 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期238-249,共12页
本文以云南松和烟草为材料,研究了钙对花粉萌发和花粉管生长的效应。结果表明花粉萌发介质中高浓度的钙(10 ̄(-1)~10 ̄(-1)2mol/L)显著抑制了云南松和烟草的花粉萌发和花粉管生长,而较低浓度的钙或缺钙(10 ̄... 本文以云南松和烟草为材料,研究了钙对花粉萌发和花粉管生长的效应。结果表明花粉萌发介质中高浓度的钙(10 ̄(-1)~10 ̄(-1)2mol/L)显著抑制了云南松和烟草的花粉萌发和花粉管生长,而较低浓度的钙或缺钙(10 ̄(-3)~0mol/L)对花粉萌发和花粉管生长无明显影响。测定萌发过程中花粉钙含量变化的结果表明,花粉水合阶段和萌发早期有一急剧的钙释放高峰。在培养介质中加入钙螫合剂EGTA抑制了花粉的萌发,但这种抑制可被随后加入的钙所逆转。钙通道阻塞剂Vera-pamil和Co ̄(2+)也能抑制或阻止花粉萌发,但这种抑制主要发生在花粉萌发的早期。此外,在同样浓度的钙载离子体A_(23187)的处理下,花粉管生长比花粉萌发过程更为敏感。上述结果暗示着钙可能作为花粉萌发的启动者(Initiator)和花粉管生长的调节者(Regulator)来启动花粉萌发和调节花粉管生长。 展开更多
关键词 花粉 萌发 花粉管 生长 启动效应
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GABA对烟草花粉管Ca^(2+)和K^+的动态调节表明离子通道参与了花粉管生长的调控 被引量:7
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作者 赵丽 赵志龙 +2 位作者 龚汉雨 覃永华 余光辉 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期668-675,共8页
γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)对烟草花粉管生长具有重要的调节作用,但其分子机制还远未得到阐明。该研究运用非损伤微测技术对花粉管顶端的Ca2+、K+流动模式进行探讨。结果表明,GABA可以特异性地触发Ca2+内流和K+外流。离子... γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)对烟草花粉管生长具有重要的调节作用,但其分子机制还远未得到阐明。该研究运用非损伤微测技术对花粉管顶端的Ca2+、K+流动模式进行探讨。结果表明,GABA可以特异性地触发Ca2+内流和K+外流。离子通道特异性阻断剂实验表明,GABA是通过激活渗透性的Ca2+通道而引起Ca2+内流,且这种调节模式不同于谷氨酸(Glu)引起的Ca2+流动模式。GABA可能是通过GABA-B受体来调节烟草花粉管的Ca2+、K+通道,导致顶端Ca2+内流、K+外流,从而调节花粉管的极性生长。 展开更多
关键词 烟草 花粉管 γ-氨基丁酸 离子通道 非损伤微测技术
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Introduction of exogenous wild soybean DNA into cultivated soybean and RAPD molecular verification 被引量:1
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作者 谢纬武 王斌 +4 位作者 雷勃钧 李希臣 卢翠华 钱华 周思君 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1995年第10期1195-1201,共7页
The exogenous total DNA of the wild high-protein soybean was transferred to cultivated soybean through the pollen tube channel and the genomic variation of the transformed progeny was detected by the method of RAPD(Ra... The exogenous total DNA of the wild high-protein soybean was transferred to cultivated soybean through the pollen tube channel and the genomic variation of the transformed progeny was detected by the method of RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA). Distinguished variations were found in one of the 7 transformed plants of the first generation(D_1),of which the traits of fruition,outward appearance,leaf shape and flower colour were almost identical with those of the recipient parent;of which grain weight,seed coat colour and stem strength were situated between the two parents;and there were greatly more pods per plant and 12.5% higher content of protein in seeds than that of the recipient parent.All the properties have been invariably inherited for 3 generations. Through RAPD analysis of the genomes of the donor,the recipient and the transformed progeny(D_3)as a group,DNA polyrnorphisms were found in amplified products by 24 of 150 primers.The results prove that the exogenous DNA caused the distinct variance of the genome.The authors infer that the homogeneous recombination of large exogenous DNA is the main cause for the variance. 展开更多
关键词 SOYBEAN pollen tube channel INTRODUCTION of EXOGENOUS DNA RAPD
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