饲料蛋白水平对匙吻鲟幼鱼肌肉营养成分的影响

该试验旨在研究饲料中蛋白含量对匙吻鲟(Polyodon spathula)幼鱼肌肉营养成分的影响,确定匙吻鲟生长所需的最适饲料蛋白水平。试验选择300尾体重相近、健康、无病的匙吻鲟将其均分5组,每组3个重复,每个重复20尾匙吻鲟。各组匙吻鲟分别投喂不同蛋白水平的饲料,其中试验1组的粗蛋白含量为36.05%,试验2组的粗蛋白含量为38.06%,试验3组的粗蛋白含量为40.1%,试验4组的粗蛋白含量为41.98%,试验5组的粗蛋白水含量44.05%。试验期为8周,试验结束采集各组匙吻鲟的肌肉样品检测其营养成分。结果显示,匙吻鲟投喂粗蛋白含量为40.1%和41.98%的饲料,可以使其肌肉中的粗蛋白水平显著高于饲喂粗蛋白含量为36.05%的饲料组(P<0.05);匙吻鲟投喂粗蛋白含量为40.1%和41.98%的饲料,可以使其肌肉中的粗脂肪水平显著高于投喂粗蛋白含量为36.05%、38.06%和44.05%的饲料组(P<0.05)。研究表明,匙吻鲟饲喂饲料粗蛋白质含量为40.1%~41.98%时,其肌肉营养价值较高。

广西净水渔业养殖模式探索

为充分挖掘水库初级生产力,通过净水渔业模式解决水产养殖与水质安全的矛盾,文章提出在广西发展“匙吻鲟+鲢+细鳞斜颌鲴”的放养模式,介绍主要放养品种的生物学特性、放养优势、养殖容量测算方法、鱼种的选择和投放、生产管理与经济效益评价。

匙吻鲟仔稚鱼消化酶发育的研究

对出膜后0—53d匙吻鲟的酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、α-淀粉酶、脂肪酶以及磷酸酶的活性变化进行了测定。匙吻鲟出膜后饲养于室内水泥培育池中,从第3天开始投喂枝角类,之后于第40天将试验鱼转移至池塘。试验材料为受精卵及出膜后第3、第6、第12、第20、第30、第40、第44、第47、第53天仔稚鱼样品。研究发现主要消化酶在出膜时或卵黄期即可检测出活力。碱性蛋白酶和酸性蛋白酶分别在出膜后3d(3DAH)和刚出膜时(0DAH)检测出活力。碱性蛋白酶活力在44DAH达到最大值[(1.96±0.09)U/fish],47DAH出现下降,但在53DAH开始上升,比活力在53DAH达到最大值[(8.84±0.59)U/mg protein]。酸性蛋白酶在44DAH达到最大值[(0.52±0.05)U/fish],比活力在6DAH出现第一个峰值[(2.08±0.09)U/mg protein],并在30DAH出现最小值[(0.83±0.06)U/mg protein]。试验期间碱性蛋白酶活力高于酸性蛋白酶。在12DAH—40DAH期间α-淀粉酶活力相对稳定,并在47DAH达到最大值[(0.42±0.03)U/fish],比活力在12DAH出现一个峰值[(1.18±0.12)U/mg protein],并于47DAH出现最大值[(1.94±0.16)U/mg protein]。发育早期脂肪酶活力较高,活力和比活力分别在30DAH[(0.20±0.02)U/fish]和6DAH[(2.28±0.22)U/mg protein]出现最大值。碱性磷酸酶活力变化趋势与比活力变化趋势相似,但是最大值分别出现在44DAH[(0.08±0.00)U/fish]和30DAH[(1.96±0.15)U/mg protein]。酸性磷酸酶活力在3DAH出现一个峰值[(0.01±0.00)U/fish],之后显著升高,并在44DAH达到最大值[(0.05±0.00)U/fish],其比活分别在30DAH[(1.19±0.10)U/mg protein]和44DAH[(1.10±0.08)U/mg protein]出现两个峰值。结果表明,蛋白酶、α-淀粉酶和磷酸酶随个体发育活力增加,碱性蛋白酶在个体发育早期对蛋白质的消化具有重要作用。养殖环境发生改变时,酸性蛋白酶、α-淀粉酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活力在生长减慢时增加,生长加快时降低,而脂肪酶活力则维持稳定。

匙吻鲟、杂交鲟和鳙肌肉品质的比较研究

分析养殖匙吻鲟(Polyodon spathula)、杂交鲟(hybrid sturgeon)和鳙(Aristichthys nobilis)肌肉理化及营养特性,对3种鱼的肉质进行评价。结果表明:鳙的含肉率显著高于两种鲟鱼(P<0.05),两鲟鱼间差异不显著(P>0.05);匙吻鲟肌肉粗蛋白含量与杂交鲟、鳙之间均无显著差异(P>0.05),杂交鲟肌肉粗蛋白含量显著低于鳙(P<0.05);对于粗脂肪含量杂交鲟与匙吻鲟和鳙之间无显著差异(P>0.05),匙吻鲟显著高于鳙(P<0.05);粗灰分含量鳙显著高于两种鲟鱼(P<0.05)。3种鱼的脂肪酸由3种饱和脂肪酸和6种不饱和脂肪酸组成,杂交鲟不饱和脂肪酸含量显著高于匙吻鲟、鳙(P<0.05);匙吻鲟单不饱和脂肪酸含量显著高于杂交鲟和鳙(P<0.05);多不饱和脂肪酸含量杂交鲟>匙吻鲟>鳙,3种鱼之间差异显著(P<0.05);高不饱和脂肪酸含量3种鱼之间差异显著(P<0.05),鳙>杂交鲟>匙吻鲟。动脉粥样化指数匙吻鲟显著低于鳙(P<0.05);血栓指数匙吻鲟与杂交鲟之间无显著差异(P>0.05),但均显著低于鳙(P<0.05)。杂交鲟熟肉率显著低于鳙(P<0.05),胶原蛋白的含量显著高于鳙(P<0.05);液体流失率、水分流失率匙吻鲟显著低于杂交鲟、鳙(P<0.05);脂质流失率、肌纤维直径匙吻鲟与杂交鲟之间无显著性差异(P>0.05),但脂质流失率两种鲟鱼显著低于鳙(P<0.05),肌纤维直径两种鲟鱼显著高于鳙(P<0.05);生肉硬度匙吻鲟与鳙之间无显著差异(P>0.05),但均显著低于杂交鲟(P<0.05);黏附性、内聚性、回弹力、剪切力杂交鲟均显著高于鳙(P<0.05);弹性匙吻鲟显著高于鳙(P<0.05);黏性、咀嚼性三者之间差异显著(P<0.05),杂交鲟>匙吻鲟>鳙。熟肉硬度匙吻鲟与杂交鲟、鳙之间无显著差异(P>0.05),杂交鲟显著高于鳙(P<0.05);内聚性、回弹力匙吻鲟显著高于杂交鲟、鳙(P<0.05);弹性匙吻鲟显著高于鳙(P<0.05);黏性、咀嚼性匙吻鲟显著高于鳙(P<0.05);剪切力匙吻鲟显著低于鳙(P<0.05)。多汁性、油腻、风味浓度3种鱼之间无显著性差异(P>0.05);嫩度匙吻鲟<杂交鲟<鳙,匙吻鲟显著低于鳙(P<0.05)。研究认为,匙吻鲟风味较好,健康指数较为理想,杂交鲟与之相似。鳙可提供较高水平的蛋白和HUFA等不饱和脂肪酸,其嫩度也相对较好。

池塘与网箱养殖匙吻鲟肌肉营养成分及品质评价

对池塘和网箱养殖匙吻鲟肌肉营养成分及营养品质进行了比较研究。结果表明,池塘组肌肉粗蛋白和粗灰分含量高于网箱组(P<0.05),粗脂肪含量低于网箱组(P<0.05);池塘组和网箱组肌肉必需氨基酸构成比例均符合FAO/WHO的标准,必需氨基酸中都是赖氨酸(Lys)含量最高;池塘组鲜味氨基酸总量(∑DAA)低于网箱组(P<0.05);根据氨基酸评分(AAS)和化学评分(CS),池塘组和网箱组的第一限制性氨基酸均为缬氨酸(Val)和蛋氨酸+半胱氨酸(Met+Cys);池塘组∑MUFA含量高于网箱组(P<0.05),而∑SFA和∑PUFA含量低于网箱组(P>0.05);池塘组∑n-3PUFAs/∑n-6PUFA值低于网箱组(P<0.05),后者是前者的4.6倍;池塘组EPA+DHA值低于网箱组(P<0.05)。研究表明,网箱组匙吻鲟更符合人类健康饮食的要求,具有较高的营养价值。

施氏鲟精子诱导匙吻鲟雌核发育

采用照射强度为10188μW(/cm2·s),照射距离为15cm的紫外线对施氏鲟(Acipenser schrenckii)精子进行4-7min的照射,用照射后的精子对匙吻鲟(Polyodon spathula)卵进行人工授精,以探索精子的最佳紫外线照射时间。设计热休克起始时间、持续时间和休克温度3因子、3水平的正交试验,以探索人工诱导匙吻鲟雌核发育的理想热休克条件。结果表明:用紫外线照射5min处理的施氏鲟精子,与匙吻鲟卵受精所得胚胎经染色体观察均为单倍体(n=60),表明照射精子遗传失活的有效性和可靠性;若热休克处理前受精卵保持在(18±0.3)℃,在一定的休克温度(35-39℃)条件下,于不同时间(受精后16-20min)起始热休克,持续处理2min均能诱导受精卵染色体加倍。对热休克处理条件的优化结果表明,将受精卵于受精后18min,在37℃的水中热休克处理2min,二倍体诱导率最高,达18.8%。染色体鉴定显示,该条件下处理的胚胎均为二倍体(2n=120),未发现单倍体和非整倍体。本研究为进一步分析异源精子诱导匙吻鲟雌核发育机制以及匙吻鲟性别决定的分子机制奠定了基础。

匙吻鲟仔稚鱼摄食特性研究

通过测定不同规格（全长15.2-95.5 mm）、不同水温（21.2℃、16.8℃）和一天当中匙吻鲟（Poly-odon spathula）仔稚鱼饱满指数的变化,研究了匙吻鲟仔稚鱼摄食特性。结果表明,在平均全长达到20.1 mm之前（约开口摄食3 d）,随着个体的生长,饱满指数逐渐增大并在20.1 mm达到最大值,且在规格相近的个体之间,饱满指数相差较大,最高达78.4倍。平均全长达到20.1 mm以后,随着个体的生长,饱满指数呈现下降的趋势,且在规格相近的个体之间,饱满指数相差较小。水温从21.2℃降到16.8℃,20.0-23.2 mm的仔鱼饱满指数降低53.3%。仔鱼具有明显的昼夜摄食节律,属晨昏摄食,全天出现1个摄食高峰和1个摄食低谷,从低谷到高峰,饱满指数呈强弱交替波动性上升。以＂时平均饱满指数法＂计算匙吻鲟仔鱼（16.3-21.0 mm）的日摄食率为6.5%。

杂交鲟和匙吻鲟HSP70 cDNA克隆与序列分析

采用RT-PCR法从杂交鲟(♀Huso huso×♂Acipenserschrencki)和匙吻鲟(Polyodonspathula)肝脏RNA克隆获得HSP70基因的全长cDNA(HSP70 cDNA)。所测定的HSP70 cDNA序列与NCBI/GenBank上登载的鲫(GenBank No.DQ872648)同源性最高,杂交鲟和匙吻鲟分别达96%和98%,杂交鲟HSP70序列为382 bp,匙吻鲟为334 bp。将杂交鲟和匙吻鲟与其它脊椎动物HSP70氨基酸序列用DNAstar软件进行相似度比较,鱼类与哺乳动物、两栖类非洲爪蟾之间HSP70氨基酸序列相似度平均值分别为86.2%和86.8%。鱼类之间的氨基酸序列相似度较大,平均为93.8%,表现出较高的保守性。以HSP70核苷酸序列为分子标记,用MEGA4软件中最大简约法(MP)构建了12个物种HSP70系统发育树,识别出3个大的单系类群:杂交鲟、匙吻鲟、团头鲂、鲫、鲤、斑马鱼聚为类群一(bootstrap 96);虹鳟和大西洋鲑聚为类群二(bootstrap 100);人类和褐家鼠类聚为类群三(bootstrap 89)。

美国的匙吻鲟及其渔业

匙吻鲟科(Polyodontidae)鱼类全世界仅有两个种,一个是分布在北美洲的匙吻鲟(Polyodon spathula),另一个为我国所特有的白鲟(Psephurus gladius)。匙吻鲟摄食浮游生物,生长十分迅速,既可以游钓,也可以进行商业捕捞,其卵和肉都具有较高的食用价值。在美国,匙吻鲟的分布曾相当广泛,但随着水利工程的建设。

温度对匙吻鲟胚胎与仔鱼发育的影响

研究不同温度下匙吻鲟(Polyodon spathula)的胚胎与仔鱼发育。结果表明,26℃时,匙吻鲟胚胎发育到大卵黄栓期全部死亡;在15～24℃范围内,胚胎均可孵化出膜,孵化时间与温度呈极显著的负相关关系(P<0.01)。胚胎发育的最适温度范围为18～22℃,最佳温度为20℃,生物学零度为12.30℃。卵黄囊期仔鱼历时随温度的升高而缩短。在16～22℃范围内,温度对卵黄囊期仔鱼生长的影响极显著(P<0.01),22～24℃影响不显著(P<0.05)。在22～26℃范围内,仔鱼生长的差异不显著(P<0.05),成活率低,且畸形率极显著地高于16～20℃(P<0.01)。匙吻鲟仔鱼早期发育的最适温度范围为18～20℃,温度过高是造成仔鱼畸形率增加的主要原因之一。

不同生长阶段匙吻鲟肌肉成分的研究

对体重分别为50、150、300和600g匙吻鲟的肌肉成分分析表明,随着体重的增加,水分含量依次降低,蛋白质和脂肪的含量依次升高。体重300和600g的匙吻鲟蛋白质含量差异不显著(P>0.05);脂肪含量在4个生长阶段差异都显著(P<0.05)。氨基酸总量与鱼体内蛋白质含量趋势相同,都是随着体重的增加而增加。匙吻鲟肌肉中谷氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天冬氨酸、甘氨酸和丙氨酸的含量都较高。体重300g和600g的匙吻鲟氨基酸含量无显著性差异(P>0.05)。

延迟投饵对匙吻鲟仔鱼存活与生长的影响

在（22±0.5）℃水温条件下,通过饥饿试验,研究了延迟投饵对匙吻鲟（Polyodon spathula）仔鱼存活与生长的影响。结果表明：延迟1~2 d投饵对仔鱼存活的影响不显著;延迟3 d以上投饵,仔鱼成活率显著下降;完全饥饿条件下,仔鱼半致死时间为11日龄,全部死亡时间为17日龄;延迟1 d投饵对仔鱼生长的影响不显著,延迟2 d以上投饵对仔鱼生长的影响显著。匙吻鲟仔鱼开口摄食期没有混合营养期,从初次开口摄食到饥饿半致死之间的间隔仅4 d。因此,匙吻鲟仔鱼初次投喂的最适时间建议在开口摄食后的2 d之内。

饲料蛋白水平对匙吻鲟幼鱼肌肉营养成分及消化酶活力的影响

配制蛋白水平34.16%、36.53%、39.10%和41.08%的4种等能半精制饲料,在水温28～32℃条件下,饲喂体质量(19.91±3.73)g的匙吻鲟45d,研究饲料蛋白水平对匙吻鲟肌肉营养成分和消化酶(酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、α-淀粉酶和脂肪酶)活性的影响。结果显示,41.08%组体质量显著高于36.53%组,其余各组体质量差异不显著;肌肉粗蛋白含量随着饲料蛋白水平的增加而增加,各组肌肉水分、粗脂肪和粗灰分含量差异不显著;酸性蛋白酶和肝胰脏碱性蛋白酶活力随饲料蛋白水平的增加而增加,而肠道碱性蛋白酶活力随饲料蛋白水平的增加而降低;消化道α-淀粉酶活力随饲料蛋白水平的增加而降低,而肝胰脏α-淀粉酶活力表现出相反的趋势;饲料蛋白水平对消化道和肝胰脏脂肪酶活力影响不显著,各组脂肪酶活力差异不显著。试验结果表明,饲料蛋白水平对匙吻鲟肌肉粗蛋白含量、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和α-淀粉酶都会产生显著影响;饲料蛋白水平为39.10%比较适宜。

匙吻鲟胚胎与胚后发育的观察

在福建地区，利用池养匙吻鲟亲鱼进行人工催产和干法人工授精后，对其胚胎和胚后发育进行了观察。结果表明：成熟卵为椭圆形、多黄卵，平均卵径（2．41士0．04）mm×（2．30±0．03）mm。卵裂为特殊的辐射卵裂。水温17．0～19．8℃时，胚胎发育历时115．75～147．00h，孵化时间为134．75h。胚后发育分为卵黄囊期仔鱼、晚期仔鱼和稚鱼期。水温（20±0．5）℃条件下，8日龄卵黄囊完全耗尽，仔鱼才开始摄食进入晚期仔鱼；水温（22±0．5）℃时，10日龄进入稚鱼期；水温21～23℃时，35日龄的平均全长（74．91±6．12）mm，平均体重（2．32±0．55）g，吻长接近全长的30％，外部形态与成鱼相似。

匙吻鲟摄食器官数量性状胚后发育研究

匙吻鲟摄食器官发育期较长，全R65．5mm以前为仔稚鱼期，摄食方式为吞食，适口饵料粒径大于0．3mm，该阶段口径、口宽及齿的数量发育较快。全长65．5mm以后开始出现鳃耙，其长度及过滤面积呈幂函数增长，显示具有较强的过滤能力。滤食阶段，鳃耙间距小于0．1mm，饵料规格与鳙相似。本文对匙吻鲟口及鳃耙数量发育进行了回归分析，并探讨了其摄食器官数量性状与食性变化的关系。

匙吻鲟仔鱼期饵料的研究

鱼类早期生长的细微差别对其存活以及整个生活史阶段的生长，有着不可估量的影响，而摄食是影响仔鱼期生长的最重要的外界影响因子之一。在水温19．5～20．5℃下，对匙吻鲟（Polyodon spathula）仔鱼的开口时间、适宜开口饵料和投饵率进行了研究。结果表明，匙吻鲟仔鱼在6日龄初次摄食，摄食率在7—8日龄迅速升高，9—10日龄达到100％，11-13日龄略有降低，14-15日龄迅速降低，不可逆点（PNR期）出现在15日龄；以轮虫作为开口饵料，仔鱼的存活率和生长优于丰年虫和颗粒饲料组；养殖水体中轮虫密度在120—150个／mL可满足仔鱼的生长需求。

匙吻鲟苗种规模化培育技术

2010年4月14日至6月1日在湖北宜昌进行了匙吻鲟苗种的规模化培育试验示范。鱼苗培育在室内水槽内进行,放养密度800～1000尾/m2,改善水温、溶氧、流速等养殖条件,适时投喂适口饵料生物,经过15d养殖,获4cm左右的鱼种47.12万尾,成活率95%;鱼种培育在水库坝下池塘进行,放养密度30万～40万尾/hm2,以水温相对稳定、水质优良的水库为养殖水源,及时驯食,转食后日投喂鱼种体重3%～5%的浮性鲟鱼饲料,加强饲养管理,经过30d养殖,获10～12cm鱼种40.47万尾,成活率85.9%。

匙吻鲟的细胞遗传学分析

采用体内注射PHA和秋水仙素,肾细胞短期培养,常规空气干燥法制备匙吻鲟(Polyodon spathula)的染色体标本。对其肾细胞染色体数目统计分析表明,匙吻鲟染色体组由120条染色体所组成。以测得的核型参数和按Levan,et al.提出的染色体划分标准得出:具有22对中部着丝粒染色体(m),16对亚中部着丝粒染色体(sm),22对亚端部着丝粒染色体(st)和端部着丝粒染色体(t);染色体臂数(NF)为196,核型公式为44 m+32sm+44st,t。再采用流式细胞仪分析系统测定匙吻鲟体细胞的DNA含量,与鸡血细胞标准对照相比为2.69±0.19,以鸡红细胞DNA含量2.3 pg/N测算,则匙吻鲟体细胞DNA含量为6.18 pg/N。根据所得到的结果并结合已发表的鲟鱼类DNA含量和染色体资料,判定匙吻鲟为四倍体物种。鲟形目鱼类全部为多倍体起源的鱼类,在细胞水平的进化比较特殊,以染色体加倍的方式进行。染色体加倍及分化,可能是造成鲟形目鱼类种类较多及多倍体类型(4n、8n、12n等)丰富的主要原因。