淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB编码基因的克隆及序列分析

目的 获取淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB编码基因 (porB)并构建其重组表达质粒。 方法 根据porB已知序列 ,设计合成一对引物 ,用PCR方法从淋病奈瑟菌基因组DNA中扩增出 porB基因片段 ,克隆到原核表达质粒 pQE3 0中 ,转化大肠埃希菌M15感受态细胞 ,经酶切和PCR鉴定 ,然后进行测序。 结果 porB基因体外扩增产物大小约为 911bp。重组质粒经双酶切和PCR鉴定表明为正确重组子 ,测序结果与已知序列基本吻合。 结论 成功克隆了淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB编码基因 ,为下一步PorB蛋白的功能研究和淋病奈瑟菌蛋白质疫苗的研制提供了基本的物质基础。