桃仁、薏苡仁、肉豆蔻、地龙中黄曲霉毒素的测定方法学研究

选取桃仁、薏苡仁、肉豆蔻、地龙中药材为研究对象,进行黄曲霉毒素的测定方法学研究。采用高效液相色谱-柱后光化学衍生荧光检测法,分别从检测方法的专属性、检测限与定量限、线性与范围、重复性、中间精密度与溶液稳定性等6个方面进行检验分析和方法进行验证。结果表明:黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1分别在0.00060~0.015μg/kg、0.00202~0.0505μg/kg、0.00066~0.0165μg/kg、0.00216~0.054μg/kg范围内线性关系良好,R2=1.000(n=6);重复性试验黄曲霉毒素B1含量RSD为25.7%(n=6),含黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的总量RSD为24.4%(n=6);黄曲霉毒素对照品溶液在12 h内稳定性良好。桃仁、薏苡仁、肉豆蔻、地龙平均回收率分别为84.6%、114.0%、84.3%、113.3%,RSD分别为4.0%、4.8%、6.8%、5.7%(n=6)。该检测方法专属性强、稳定性好、灵敏度高、结果准确可靠,为医药工作者在黄曲霉毒素检测和质量控制方面提供参考。

柱后衍生高效液相色谱法测定虾中14种磺胺类药物残留量

建立了虾中14种磺胺类药物残留量的柱后衍生高效液相色谱检测方法。样品在加入内标物磺胺吡啶后用乙酸乙酯提取，提取液浓缩后用4 mL 乙酸乙酯溶解残余物，用盐酸溶液反萃取，正己烷去脂，盐酸溶液经滤膜过滤后，加入乙腈、甲醇和3.5 mol / L 乙酸钠溶液（体积比为5：5：20）的混合溶液混匀后，经高效液相色谱分离，用荧光胺衍生试剂进行柱后衍生，荧光检测器检测。采用基质标样添加法绘制标准曲线，内标法定量。对柱后衍生系统参数进行了优化，确定了荧光胺溶液的浓度、流速和反应温度分别为0.2 g / L、0.15 mL / min 和50℃。14种磺胺类药物在5～200μg / L 范围内具有良好的线性。磺胺类药物的定量限（LOQ，S / N =10）为1.0～5.0μg / kg。在1.0～100.0μg / kg 添加水平内，磺胺类药物的平均回收率为77.8％～103.6％，相对标准偏差（ RSD）为2.9％～9.1％（ n =6）。实验结果表明该方法灵敏、准确，重复性好，适用于虾中磺胺类药物的残留检测。

测定中药材中氨基甲酸酯类杀虫剂残留的高效液相色谱柱后衍生法

目的:采用高效液相色谱柱后衍生法测定中药材中氨基甲酸酯类杀虫剂残留。方法:通过乙腈提取,固相萃取(SPE)净化,Waters carbmate analysis(3.9mm×150min,4μm)柱,甲醇-水-乙腈(16:68:16)为流动相,柱温30℃,流速1.5mL·min^(-1)进行分离,柱后衍生反应系统,OPA 和氢氧化钠流速均为0.5mL·min^(-1),反应温度80℃,2475荧光检测器进行监测,进样20μL。结果:速灭威、克百威和西维因的添加回收率分别为84.6%～110.5%,86.9%～99.8%,90.1%～110.5%;RSD 分别为4.0%～8.6%,3.8%～8.5%,3.1～7.5%;最低检测限分别为0.01,0.01,0.005μg·mL^(-1)。结论:该方法分离效果好,灵敏度高。

液相色谱柱后衍生法同时测定Pb^(2+)Cu^(2+)Cd^(2+)Co^(2+)Zn^(2+)和Ni^(2+)

采用液相色谱流动相为0.05mol·L^(-1)草酸和0.095mol·L^(-1)氢氧化锂,流速为1.0ml·min^(-1);柱后衍生试剂为0.001mol·L^(-1)PAR+0.3mol·L^(-1)氨水+0.1mol·L^(-1)乙酸,流速为1.0ml·min^(-1),进样体积为20μl,检测波长为500nm,同时对Pb^(2+)、Cu^(2+)、Cd^(2+)、Co^(2+)、Zn^(2+)和Ni^(2+)检测。方法可用于水样检测。

HPLC柱后衍生法测定食盐中的IO_3^-

利用1mol IO_3^-在酸性条件下与I^-生成3mol具有较大摩尔吸光系数I-3的反应建立了测定碘盐中IO_3^-含量的HPLC-UV柱后衍生方法。采用Hamilton PRP-X100阴离子交换柱(Φ4.6×250mm)做分析柱、1mol/L NaCl做流动相、KI与HCl混合溶液做柱后衍生试剂,在流动相和柱后衍生试剂流速均为1mL/L条件下IO_3^-的保留时间为3.5min,50μL进样体积时的标准曲线拟合方程为A=6.36×10-2+0.469×C(μg/g,以I计),r2=0.99977,与不采用柱后衍生而直接测定IO_3^-在220nm吸光度的方法相比,灵敏度提高近30倍。通过测定标准碘盐样品中的碘含量对方法进行了验证,测定结果与标准值偏差小于1.7%。用所建立的方法分析了市场上购买的碘盐商品中IO_3^-的含量,结果与标称值一致。方法的最小检出限为0.18μg/g。

邻苯二甲醛柱前衍生化法快速高效测定液体生物样品L-蛋氨酸含量

目的 拟建立一种快速、简单、灵敏的血浆等生物样品中L-蛋氨酸的含量测定方法.方法 用邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生化法分离并定量C57小鼠血浆中L-蛋氨酸,采用反向色谱柱ODS （4.6 mm×250 mm）;pH 7.2 10 mmol/L NaH2PO4-Na2HPO4（PB）含0.2％ THF和PB-甲醇-乙腈（50：35：15）为流动相梯度洗脱;紫外检测器340 nm检测.结果 邻苯二甲醛柱前衍生化法的最低检出限浓度为0.5 μmol/L,8 min内分离测定了血浆L-蛋氨酸的含量,12 min内血浆所有氨基酸全部洗脱;在0.5-100 μmol/L进样浓度范围内,L-蛋氨酸的峰面积与浓度呈现良好的线性关系,相关系数0.999 8,对于L-蛋氨酸的标准加入回收率在94.63％和97.99％之间.结论 邻苯二甲醛柱前衍生化法是一种快速简便的紫外检测液体生物样品中L-蛋氨酸含量的方法.

HPLC-荧光衍生化法在药物分析中的应用

综述了HPLC-荧光衍生化法中衍生化试剂的研究现状,简述了HPLC-荧光衍生化技术及其在药物分析中的应用情况,展望了HPLC-荧光衍生化技术的发展前景。

离子色谱-柱后衍生可见光检测法测定海水中痕量六价铬

建立了银柱和钠柱串联净化-离子色谱-柱后衍生可见光检测法测定海水中痕量六价铬的分析方法。海水样品经稀释后通过银柱和钠柱串联净化,以Ion PacTM AS7柱(250 mm×2 mm)为分离柱,硫酸铵-氨水溶液为淋洗液,二苯羰酰二肼溶液为显色液,海水中六价铬经分离后与显色液在混合反应圈中进行衍生反应,衍生物经可见光检测器检测。六价铬的质量浓度在0.1~10.0μg/L范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数为0.9999。当进样体积为200μL时,方法检出限为0.03μg/L。海水中六价铬的平均加标回收率为78.0%,测定结果的相对标准偏差为2.4%(n=6)。该方法能够满足海水中痕量六价铬的测定要求。

婴儿奶粉中维生素B_1和B_2的高效液相荧光测定法

目的检测婴儿配方奶粉中低含量的维生素B1和维生素B2。方法婴儿配方奶粉中加入0．5％乙酸溶液沉淀蛋白、过滤进样，采用反相高效液相法，选用含35％甲醇＋65％0．05mol／L醋酸钠溶液（pH=4．5）作为流动相，流量1ml／min，经Zorbax SB-Aq 100％水相反相色谱柱分离，柱温为室温，维生素B1的激发波长（λex）为375nm，发射波长（λem）为435nm，以0．25g／L碱性铁氰化钾溶液为柱后衍生剂，流量为0．3ml／min，反应温度为室温；维生素B2直接进行荧光测定（λex=462nm，λem=522nm）。结果方法的线性范围为10—1000ug/L，相关系数均为0．9999，维生素B1最低定量检出限为5．1ug／L，方法检出限为1．5ug/L，维生素B2最低定量检测限为4．7ug／L，方法检测限为1．4ug／L，平均回收率为86．5％-98．1％，相对标准偏差小于5％。结论该方法简便快捷、灵敏，满足日常快速分析要求。

离子色谱法测定鲜乳与乳制品中的亚氯酸盐和氯酸盐

目的建立鲜乳与乳制品中的亚氯酸盐和氯酸盐的离子色谱测定方法。方法液态奶、奶饮品和奶粉样品经过乙腈沉淀蛋白,RP柱去除脂肪等疏水性化合物后,采用Ion Pac AS19分析柱(250 mm×4 mm)和Ion Pac AG19保护柱(50 mm×4 mm)分离,EGC在线产生KOH梯度淋洗,电导法测定氯酸盐,串联柱后衍生间接紫外法测定亚氯酸盐,检测波长为352 nm,外标法定量。结果亚氯酸盐、氯酸盐的浓度为0.05 mg/L^1.0 mg/L时,线性关系良好,相关系数(r)分别为0.999 5和0.999 8;方法的检出限(S/N=3)分别为0.001 mg/L和0.010 mg/L;相对标准偏差(RSD)分别为3.1%和2.5%(n=6),加标回收率分别为70.0%~92.4%、87.5%~108.6%。结论该方法具有灵敏度高、准确性好、抗干扰强的特点,能满足乳与乳制品中痕量亚氯酸盐和氯酸盐的测定。

免疫亲和柱法测定生湿面制品中T-2毒素含量

建立一种高效液相色谱-荧光法(High performance liquid chromatography-fluorescence detection, HPLCFLD)测定生湿面制品中T-2毒素含量的方法。样品经振荡提取、免疫亲和柱净化、4-二甲基氨基吡啶(4-Dimethylaminopyridine, DMAP)溶液和1-氰酸蒽(1-Anthroyl Cyanide, 1-AC)溶液衍生后,通过HPLC分离,外标法定量。结果表明:T-2毒素在10~200 ng/mL质量浓度范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9);在10.0,30.0和100.0μg/kg 3个加标水平下,平均回收率分别为73.4%, 83.0%和94.6%, RSD分别为5.6%, 4.0%和1.4%;方法检出限(RS/N=3)为10μg/kg,定量限(RS/N=10)为30μg/kg。该方法简单、快速、灵敏,为生湿面制品中T-2毒素的含量测定提供了一种可靠方法。

HPLC-柱后光化学衍生法测定72批舒筋活血丸中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1的含量

目的：建立HPLC-柱后光化学衍生法测定舒筋活血丸中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的含量，并通过对72批样品检测结果的分析初步考察舒筋活血丸制剂在黄曲霉毒素污染方面的安全性，以提示企业选择合格安全的原料药材投料。方法：采用Diamonsil C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，以乙腈-甲醇-水为梯度洗脱流动相，流速1．1mL·min^-1，柱温40℃；采用柱后光化学衍生法，荧光检测器激发波长λex=360nm、发射波长λem：450nm。结果：黄曲霉毒素G1、G2、B2、B1分别在2．806—16．825Pg（r=0．9973）、9．830—58．983Pg（r=0．9998）、2．891～17．345Pg（r=0．9956）、9．9—59．4pg（r=0．9966）范围内线性关系良好；黄曲霉毒素B．及总量回收率（n=6）分别为78．5％（RSD=1．6％）和85．5％（RSD=4．0％）。有27批样品检出黄曲霉毒素，其总量含量为0．007×10^-3～39．87×10^-3μg·g^-1。结论：该方法经方法学验证可用于舒筋活血丸中黄曲霉毒素检测：建议增订舒筋活血丸中黄曲霉毒素检查项；建议企业重视动物类药材的质量和安全性。

多因素对茶氨酸柱后衍生效率的影响及在白茶酒和茶饮料中的检测应用

探讨了流动相p H、OPA含量、衍生液流速及衍生温度等多个因素对茶氨酸柱后在线衍生效率的影响,建立了柱后衍生-液相色谱荧光法检测茶氨酸含量,并对市售多种茶饮料及白茶酒进行了含量分析。采用高纯硅胶极性C18色谱柱,以0.05%磷酸水(v/v)为流动相,柱后OPA浓度0.08%、流速1.0 m L/min、衍生温度40℃,在激发和发射波长分别为340 nm和455 nm进行测定。该方法前处理简单、干扰小、灵敏度高、重现性好,适用于样品中微量茶氨酸的快速、批量检测。