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Screening and Identification of Tobacco Mutants Resistant to Potato Virus Y( PVY)
1
作者 Xiuqing WAN Guoshun WU +2 位作者 Chan QIAO Ruo LI Lei HUANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2015年第5期1-4,8,共5页
[ Objective] This study aimed to screen and identify tobacco mutants resistant to potato virus Y (PVY), thus laying the foundation for obtaining PVY resistance genes. [ Method ] At seedling stage, tobacco mutant mat... [ Objective] This study aimed to screen and identify tobacco mutants resistant to potato virus Y (PVY), thus laying the foundation for obtaining PVY resistance genes. [ Method ] At seedling stage, tobacco mutant materials were inoculated with PVY virus and preliminarily screened by naked-eye observation. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), real-time fluorescence quantitative PCR and test strip assay were performed to further identify the pre-screened PVY- resistant seedlings. [ Result ] In 2011, two highly PVY-resistant tobacco mutants (MZE2-15 and MZE2-16) and three PVY-tolerant mutants (MZE2-70, MZE2- 207 and MZE2-228) were obtained, which were further screened and identified in 2012. According to the results, tobacco mutant materials MZE2-407 and MZE2- 428 were susceptible to PVY; mutant materials MZE2-16 and MZE2-15 were resistant to PVY. [ Conclusion] This study provide theoretical basis for the control of tobacco PVY disease. 展开更多
关键词 tobacco potato virus y MUTANT
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Simulation modelling of potato virus Y spread in relation to initial inoculum and vector activity 被引量:1
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作者 Andrew GALIMBERTI Andrei ALYOKHIN +1 位作者 Hongchun QU Jason ROSE 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第2期376-388,共13页
Potato virus Y(PVY)is a non-persistent virus that is transmitted by many aphid species and causes significant damage to potato production.We constructed a spatially-explicit model simulating PVY spread in a potato fie... Potato virus Y(PVY)is a non-persistent virus that is transmitted by many aphid species and causes significant damage to potato production.We constructed a spatially-explicit model simulating PVY spread in a potato field and used it to investigate possible effects of transmission efficiency,initial inoculum levels,vector behavior,vector abundance,and timing of peak vector activity on PVY incidence at the end of a simulated growing season.Lower PVY incidence in planted seed resulted in lower virus infection at the end of the season.However,when populations of efficient PVY vectors were high,significant PVY spread occurred even when initial virus inoculum was low.Non-colonizing aphids were more important for PVY spread compared to colonizing aphids,particularly at high densities.An early-season peak in the numbers of noncolonizing aphids resulted in the highest number of infected plants in the end of the season,while mid-and late-season peaks caused relatively little virus spread.Our results highlight the importance of integrating different techniques to prevent the number of PVY-infected plants from exceeding economically acceptable levels instead of trying to control aphids within potato fields.Such management plans should be implemented very early in a growing season. 展开更多
关键词 potato virus y spatially-explicit modelling aphidS virus spread integrated pest management
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河北保定地区黄瓜花叶病毒与马铃薯Y病毒复合侵染叶用莴苣分子鉴定
3
作者 陈利达 李畅 +4 位作者 李敬蕊 吕桂云 吴晓蕾 宫彬彬 高洪波 《中国蔬菜》 北大核心 2024年第5期69-74,共6页
利用RT-PCR方法对采集自河北保定地区的疑似叶用莴苣病毒病样品进行分子生物学鉴定,并构建系统发育进化树。结果表明,特异性引物CMV和PVY分别扩增得到大小为260、420 bp的单一条带;通过核苷酸序列Blast比对及系统进化树分析,河北保定地... 利用RT-PCR方法对采集自河北保定地区的疑似叶用莴苣病毒病样品进行分子生物学鉴定,并构建系统发育进化树。结果表明,特异性引物CMV和PVY分别扩增得到大小为260、420 bp的单一条带;通过核苷酸序列Blast比对及系统进化树分析,河北保定地区叶用莴苣病毒分离物分别与印度番茄CMV分离物(MN514839.1)、印度马铃薯PVY分离物(JX945850.1)聚在同一分支上,同源性分别为95%、92%。本研究首次检测到河北保定地区叶用莴苣病毒病是由CMV与PVY复合侵染所致。 展开更多
关键词 叶用莴苣 黄瓜花叶病毒 马铃薯y病毒 复合侵染
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四川烟区CMV和PVY株系分化研究 被引量:7
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作者 赵雪君 刘世超 +7 位作者 李斌 赵城钢 刘旭旭 杜丽娟 魏周玲 青玲 陈德鑫 孙现超 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期8-16,共9页
为了明确当前四川烟区蚜传病毒的株系分化情况,该研究利用RT-PCR技术对四川烟区的CMV和PVY两种蚜传病毒病进行了检测和鉴定.依据病毒的CP基因序列合成引物,以烟草病叶的总RNA为模版,RT-PCR扩增得到了657bp的CMVCP片段和759bp的PVYCP片段... 为了明确当前四川烟区蚜传病毒的株系分化情况,该研究利用RT-PCR技术对四川烟区的CMV和PVY两种蚜传病毒病进行了检测和鉴定.依据病毒的CP基因序列合成引物,以烟草病叶的总RNA为模版,RT-PCR扩增得到了657bp的CMVCP片段和759bp的PVYCP片段,获得的基因片段连接到pGEM-T Easy载体上,测序.样品检测结果显示,在252份样品中CMV和PVY的检出率分别为33.33%和34.52%,两者复合侵染率为15.87%.构建的系统发育树分析结果表明,四川烟区的CMV株系分化不明显,主要属于IB亚组.PVY有着明显的株系分化现象,PVY^(N:O)株系、PVY^O株系、PVY^N株系在四川烟区均有发生.研究结果可能对培育抗病品种,控制这两种蚜传病毒具有一定的参考价值. 展开更多
关键词 烟草植株 黄瓜花叶病毒 马铃薯y病毒 株系 分化
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多抗PVY、TMV和CMV转基因烟草的培育 被引量:25
5
作者 朱常香 宋云枝 温孚江 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期1040-1047,共8页
【目的】利用RNA介导抗性培育抗多种植物病毒的转基因烟草。【方法】分别以马铃薯Y病毒(PVY)、烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)全长衣壳蛋白(CP)基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得PVYCP3′端长度100bp、TMVCP3′端长度100bp... 【目的】利用RNA介导抗性培育抗多种植物病毒的转基因烟草。【方法】分别以马铃薯Y病毒(PVY)、烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)全长衣壳蛋白(CP)基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得PVYCP3′端长度100bp、TMVCP3′端长度100bp和CMVCP3′端长度200bp的cDNA片段并拼接成嵌合基因,并以此为模板构建反向重复结构嵌合基因的植物表达载体pRHPTC。将pRHPTC通过冻融法导入农杆菌LBA4404,采用叶盘法转化烟草NC89,然后测定转基因烟草对3种病毒的抗性。【结果】经卡那霉素筛选和PCR检测,共获得276株转基因烟草。Southern和Northernblot分析表明,外源基因以不同拷贝数整合于烟草基因组中;不同转基因植株中病毒RNA的积累量存在显著差异。抗病性检测显示:23%左右的转基因植株表现出对3种病毒侵染的抗性。对转基因植株扩繁后代和T1代的抗性分析表明:多病毒抗性表现稳定。【结论】利用RNA介导的抗病毒基因工程可获得同时抗多种病毒的转基因烟草,其抗病性在T0代扩繁植株和T1代植株中得到稳定遗传。 展开更多
关键词 马铃薯y病毒 黄瓜花叶病毒 烟草花叶病毒 转基因烟草 多病毒抗性
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烟草PVY隐性抗病基因的分子标记及其适用性 被引量:11
6
作者 刘勇 宋中邦 +1 位作者 童治军 李永平 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期76-81,共6页
马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是危害烟草的重要病害,种植抗病品种是经济有效的防治措施。分子标记辅助选择可提高抗病育种效率。来源于X-射线诱变的Virgin A Mutante(VAM)的隐性抗PVY基因位点(va)被广泛应用于烟草抗病育种。为了提... 马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是危害烟草的重要病害,种植抗病品种是经济有效的防治措施。分子标记辅助选择可提高抗病育种效率。来源于X-射线诱变的Virgin A Mutante(VAM)的隐性抗PVY基因位点(va)被广泛应用于烟草抗病育种。为了提高va位点的育种利用效率,根据烟草隐性抗PVY基因(感病基因)e IF4E-1基因序列,设计特异扩增的引物CF2GR11,开发e IF4E-1基因的分子标记,并检测了该标记与抗性的遗传距离和在常见烟草资源中的适用性。CF2GR11在云烟87、红花大金元和K326等感PVY品种可扩增出500 bp产物,在NC102、NC55和K326PVY等抗病品种无扩增条带。以抗、感PVY亲本构建的101个F2单株为定位群体,遗传连锁分析表明,CF2GR11标记与烟草PVY感病基因的遗传距离为0.99 c M。对46份PVY抗性明确的栽培烟草资源的检测表明,供试资源的标记检测结果与抗性的吻合度为100%,表明CF2GR11标记适用性高。该目的基因标记可用于抗PVY育种的辅助选择和抗PVY资源的鉴定。 展开更多
关键词 烟草 马铃薯y病毒 抗性 分子标记
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铜元素诱导烟草抗PVY^N相关生理生化及信号物质的研究 被引量:6
7
作者 李鑫 吴元华 +1 位作者 顾晶晶 赵秀香 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期536-540,共5页
通过气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及生理生化指标的测定,研究了铜(Cu)元素诱导感染PVYN的烟株信号物质的积累及对系统抗性的影响。结果表明:喷施Cu元素能延迟烟株显症和叶脉出现褐色坏死时间,降低发病程度,病毒增殖受到抑制,烟株... 通过气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及生理生化指标的测定,研究了铜(Cu)元素诱导感染PVYN的烟株信号物质的积累及对系统抗性的影响。结果表明:喷施Cu元素能延迟烟株显症和叶脉出现褐色坏死时间,降低发病程度,病毒增殖受到抑制,烟株体内的与抗性相关物质如脯氨酸及可溶性糖含量升高,电解质的外渗减少。此外,Cu元素处理能诱导信号物质水杨酸和乙烯的积累,水杨酸含量在接种后15d达到最大量3.93μg·g-1,为接种对照的1.3倍;而乙烯释放量在3~9d内均高于接种对照,在12d时乙烯释放量显著低于接种对照,分析认为前期Cu元素处理后诱导了乙烯释放的增强,进行抗性信号的传递。因此,喷施Cu元素后可以诱导烟草植株产生抗病性,增强烟草对PVYN侵染的抵抗力,并且诱导了相关抗性信号的传递。 展开更多
关键词 烟草 马铃薯y病毒脉坏死株系(pvyN) 诱导抗性 信号物质
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烟草PVY抗性的遗传分析与分子标记筛选 被引量:11
8
作者 王贵 刘勇 +1 位作者 卢秀萍 李昆志 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期97-103,共7页
本文以抗马铃薯Y病毒(简称PVY)的烟草品种RY5,感病品种Coker176为亲本,构建F1、正反交F2和正反交BC1群体,苗期摩擦接种PVY的抗性遗传分析结果表明,接种后第21d群体PVY抗性数据符合孟德尔单基因隐性质量性状的遗传模型。接种后第28d群体... 本文以抗马铃薯Y病毒(简称PVY)的烟草品种RY5,感病品种Coker176为亲本,构建F1、正反交F2和正反交BC1群体,苗期摩擦接种PVY的抗性遗传分析结果表明,接种后第21d群体PVY抗性数据符合孟德尔单基因隐性质量性状的遗传模型。接种后第28d群体PVY抗性数据偏离孟德尔单基因隐性质量性状的遗传模型。提取F2代群体中抗病和感病单株DNA,从多条RAPD引物和一对SCAR引物中,筛选出两个紧密连锁的分子标记。RAPD标记O12V3695与RY5的抗病基因对应的显性等位基因位点(Va)间的遗传距离为2.10cM,而SCAR标记与Va间的遗传距离为2.52cM,这两个分子标记可用于抗PVY抗性育种。 展开更多
关键词 烟草 马铃薯y病毒 抗性遗传分析 RAPD SCAR
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PVY^N与PVY^O病毒RT-PCR快速检测体系研究 被引量:10
9
作者 孙琦 张春庆 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期213-216,共4页
马铃薯Y病毒(PVY)是侵染马铃薯的重要病毒之一,严重影响马铃薯的生产。本文通过对PVY病毒N株系(PVYN)与O株系(PVYO)的基因序列进行比较,在其外壳蛋白同源区设计一对通用引物,建立了PVY病毒的RT-PCR检测体系。另外在N株系与O株系同源区... 马铃薯Y病毒(PVY)是侵染马铃薯的重要病毒之一,严重影响马铃薯的生产。本文通过对PVY病毒N株系(PVYN)与O株系(PVYO)的基因序列进行比较,在其外壳蛋白同源区设计一对通用引物,建立了PVY病毒的RT-PCR检测体系。另外在N株系与O株系同源区设计一条3′引物,选择N株系与O株系差异区设计两条5′端引物,建立了可鉴定PVYN与PVYO的复合RT-PCR体系。这个体系的建立,对于马铃薯脱毒苗的检测与PVY病毒的调查及病理研究都具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 pvy 株系 马铃薯 引物 病毒 脱毒苗 外壳蛋白 同源区 RT-PCR 快速检测
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TMV、PVY福建分离物分子鉴定及末端区域变异分析 被引量:3
10
作者 杨军 张俊祺 +5 位作者 罗朝鹏 赖荣泉 曾文龙 李锋 宋纪真 尹启生 《烟草科技》 EI CAS 北大核心 2011年第5期74-79,共6页
为及时准确地鉴定出病毒病原和追踪了解病毒病流行变异趋势,使用特异性引物对福建烟区病毒烟叶样品进行RT-PCR分析,分别鉴定出病毒病原为TMV和PVY。序列测定结果表明PCR扩增产物为预期的TMV 5’末端和PVY 3’末端序列,大小分别为959和64... 为及时准确地鉴定出病毒病原和追踪了解病毒病流行变异趋势,使用特异性引物对福建烟区病毒烟叶样品进行RT-PCR分析,分别鉴定出病毒病原为TMV和PVY。序列测定结果表明PCR扩增产物为预期的TMV 5’末端和PVY 3’末端序列,大小分别为959和646个核苷酸,均包含末端非编码区和部分病毒功能基因蛋白编码区。将所获得的病毒末端序列与国内外报道的主要病毒分离物的同一区域进行比较,分析结果显示TMV 5’端非编码区保守性极强,不同分离物之间部分126 kDa或183 kDa编码蛋白N端编码区表现出一定程度的变异(突变),PVY外壳蛋白编码区与3’末端非编码区变异数量差异不大,变异(突变)均主要为碱基转换,环境自然选择压力对病毒基因组变异(突变)具有一定的影响。 展开更多
关键词 烟草普通花叶病毒(TMV) 马铃薯y病毒(pvy) RT-PCR 分子鉴定 变异
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贵州烟草上一株PVY坏死株系全序列测定与分析 被引量:7
11
作者 张帅 杨金广 +3 位作者 王凤龙 钱玉梅 申莉莉 王永 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2011年第1期47-51,共5页
2007年从贵州省贵定烟区采集一株呈典型马铃薯Y病毒坏死株系(Potato virus Y vein necrosis strain,PVYN)的烟草病毒病样,经PVY鉴别寄主枸杞(Lycium barbarum L.)单斑分离纯化后,于枯斑三生烟(Samsun NN)株上保存,得到PVY分离物Guiding-... 2007年从贵州省贵定烟区采集一株呈典型马铃薯Y病毒坏死株系(Potato virus Y vein necrosis strain,PVYN)的烟草病毒病样,经PVY鉴别寄主枸杞(Lycium barbarum L.)单斑分离纯化后,于枯斑三生烟(Samsun NN)株上保存,得到PVY分离物Guiding-3。以GenBank中已有的PVY全序列为基础,设计了3对PVY特异引物。通过总RNA提取、RT-PCR及序列测定,发现所测得的PVY分离物Guiding-3全长基因组序列(NCBI登录号为HM590405)包括9 699个碱基,整条序列仅包含一个由9 186个碱基组成的开放读码框(ORF),编码一条包含3 061个氨基酸的多聚蛋白。利用MEGA软件对所测得的PVY全序列与GenBank中已有的PVY全序列进行系统进化分析,发现Guiding-3分离物的序列与PVYN、PVYNTN、PVYN:O、PVYO、PVYNNP株系的一致性分别为98%、97%、94%、92%、85%,在已有的PVY株系中,Guiding-3分离物与PVYN株系具有较高的进化亲缘关系。另外,还对PVY的分子变异进行了初步讨论。 展开更多
关键词 烟草 马铃薯y病毒 全序列分析
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烟草抗PVY的EMS突变体pvyr1筛选与抗性遗传初步分析 被引量:4
12
作者 刘勇 黄昌军 +3 位作者 宋中邦 李文正 于海芹 刘贯山 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2017年第1期59-63,67,共6页
为了从烟草EMS突变体库中筛选抗马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)突变体,采用苗期人工接种初筛M2抗病单株,对M3、M4和M5株系连续接种鉴定PVY抗性。采用e IF4E1基因特异分子标记检测和c DNA全长测序,分析突变体PVY抗性是否与e IF4E1突变... 为了从烟草EMS突变体库中筛选抗马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)突变体,采用苗期人工接种初筛M2抗病单株,对M3、M4和M5株系连续接种鉴定PVY抗性。采用e IF4E1基因特异分子标记检测和c DNA全长测序,分析突变体PVY抗性是否与e IF4E1突变有关。配制F1群体初步分析抗性遗传特性。苗期人工接种从1800份M2种子中筛选到1份抗PVY的烤烟突变体。冬季无加温措施塑料大棚内苗期人工接种PVY坏死株系MN分离物,接种后35 d未诱变对照品种发病率为100%,E9119-1Z/M3株系的发病率为56.3%,无症状单株ELISA检测PVY均为阴性,表明E9119-1Z/M3株系对PVY中抗。E9119-1Z的M4株系和M5株系在光照培养室内苗期人工接种对PVY坏死株系MN分离物和ZT-5分离物表现为中抗。E9119-1Z-R14-2/M5株系为抗性稳定的突变体,命名为pvyr1。pvyr1采用e IF4E1基因特异分子标记检测为阳性,c DNA测序表明e IF4E1基因无突变。pvyr1与未诱变对照品种(感PVY)、va位点抗PVY品种NC55的杂交F1代抗性鉴定结果初步表明,pvyr1突变体对PVY的抗性符合孟德尔隐性遗传,且与NC55的va位点不等位。表明pvyr1为一个与e IF4E1基因突变不同的抗PVY新资源。 展开更多
关键词 烟草 马铃薯y病毒 EMS突变体
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烟草感染PVY^N后叶脉坏死与总酚、类黄酮及PPO关系研究 被引量:15
13
作者 吴元华 钟丽娟 赵秀香 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期398-402,共5页
本文采用常规摩擦接种和比色法研究了烟草感染PVYN后叶脉坏死与总酚、类黄酮及PPO的关系。试验结果表明:感病品种K326接种PVYN后总酚和类黄酮含量升高,且接种处理与未接种对照间总酚和类黄酮含量的差别随症状表现的加重有递增趋势;就部... 本文采用常规摩擦接种和比色法研究了烟草感染PVYN后叶脉坏死与总酚、类黄酮及PPO的关系。试验结果表明:感病品种K326接种PVYN后总酚和类黄酮含量升高,且接种处理与未接种对照间总酚和类黄酮含量的差别随症状表现的加重有递增趋势;就部位而言,与根部及叶部相比,坏死严重的叶脉中总酚和类黄酮含量增加幅度最大,其含量分别增加了149.23%和152.97%;其PPO活性在接种PVYN后3d时出现第一个高峰,比对照高213.61%,随后降至最低,但仍比对照高130.77%,在接种PVYN后15d,坏死症状表现严重时,又迅速升高。抗病品种VAM接种PVYN后无异常症状,其总酚和类黄酮含量也升高,但升高幅度不大,不同部位总酚及类黄酮含量增加的幅度也均小于25%,其PPO活性在接种PVYN后稍有升高,但基本保持一个水平。 展开更多
关键词 烟草 马铃薯y病毒脉坏死株系 总酚 类黄酮 多酚氧化酶
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利用qRT-PCR技术对PVY重组株系的鉴定 被引量:4
14
作者 尚慧 韩树鑫 +6 位作者 高艳玲 张威 范国权 申宇 聂先舟 吕文河 白艳菊 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期238-244,共7页
【目的】马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)作为制约马铃薯生产的重要病毒之一,株系分化繁杂。近年被科学家研究分离的PVY^(N-Wi)和PVY^(NTN-NW)株系而言,其基因组结构极为相似但致病性差异较大。【方法】本研究利用qRT-PCR方法,方便快... 【目的】马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)作为制约马铃薯生产的重要病毒之一,株系分化繁杂。近年被科学家研究分离的PVY^(N-Wi)和PVY^(NTN-NW)株系而言,其基因组结构极为相似但致病性差异较大。【方法】本研究利用qRT-PCR方法,方便快捷的检测出马铃薯Y病毒的这2种不同株系,同时并使之可成功且稳定的应用于马铃薯生产中。通过查找Gen Bank已公布的PVY^(N-Wi)和PVY^(NTN-NW)株系的全基因组序列,设计用于qRT-PCR检测,扩增目的片段大小为150 bp左右的特异性引物,应用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)进行检测。【结果】通过设计的引物对保存的试管苗毒源进行检测,可以成功的精准鉴别出PVY^(N-Wi)和PVY^(NTN-NW)株系;同时对100份田间采集的叶片样品进行检测,成功的检测出100份样品中32份样品,受到PVY^(N-Wi)株系侵染;27份样品,受到PVY^(NTN-NW)株系侵染;同时存在9份样品,可能同时受到PVY^(N-Wi)、PVY^(NTN-NW)株系的侵染。【结论】实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)可适用于马铃薯叶片样品的检测,为株系的快速鉴定提供了可靠的方法,可用于生产中大规模样品的检测,有利于及时采取防控措施,降低损失。 展开更多
关键词 马铃薯y病毒(pvy) 株系分化 实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)
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烟草PVYN辽宁分离物全序列测定与分析 被引量:2
15
作者 王芳 高正良 +3 位作者 周本国 许大凤 安梦楠 吴元华 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期109-113,共5页
利用引起烟草脉坏死病的马铃薯Y病毒脉坏死株系辽宁分离物(Potato virus Y—vein necrosis strain Liaoning isolate,PVYN-LN),以GenBank中已有的PVY全序列为基础,设计特异引物。通过总RNA提取、RT-PCR、3’RACE和5’RACE扩增及序列测定... 利用引起烟草脉坏死病的马铃薯Y病毒脉坏死株系辽宁分离物(Potato virus Y—vein necrosis strain Liaoning isolate,PVYN-LN),以GenBank中已有的PVY全序列为基础,设计特异引物。通过总RNA提取、RT-PCR、3’RACE和5’RACE扩增及序列测定,测得PVYN-LN全长基因组序列(NCBI登录号为JQ971975)包括9714个碱基(含PolyA尾),整条序列仅包含一个由9186个碱基组成的开放读码框(ORF),编码一条包含3061个氨基酸的多聚蛋白。对所得序列进行BLAST,利用MEGA软件对所测得的PVYN-LN全序列与GenBank中已有的PVY全序列及氨基酸进行系统进化分析,发现PVYN-LN分离物与已报道的PVYN株系具有较高的进化亲缘关系,该分离物属于PVYN株系。序列重组分析软件RDP4分析,该序列无重组。 展开更多
关键词 烟草 pvyN 基因组全序列 重组分析
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利用dsRNA介导的抗病性获得抗马铃薯Y病毒(PVY)的转基因烟草 被引量:6
16
作者 江彤 邓竹根 +3 位作者 宋培培 陈伟 丁菲 贾琳 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期648-653,共6页
为了获得抗马铃薯Y病毒(PVY)转基因烟草,分别扩增PVY HC-Pro基因3′端正、反向片段,构建反向重复植物表达载体。利用农杆菌介导法转化普通烟草(Nicotiana tabacum)云烟85,经抗性筛选及抗病性鉴定,获得T0代转基因抗病烟草株系。繁殖T0代... 为了获得抗马铃薯Y病毒(PVY)转基因烟草,分别扩增PVY HC-Pro基因3′端正、反向片段,构建反向重复植物表达载体。利用农杆菌介导法转化普通烟草(Nicotiana tabacum)云烟85,经抗性筛选及抗病性鉴定,获得T0代转基因抗病烟草株系。繁殖T0代抗病株系,抗病性鉴定发现,部分抗病株系的T1代烟株发生了一定比例的抗感分离。Real-time PCR检测发生抗感分离的T1代烟株,发现抗病烟株中PVY HC-Pro基因RNA积累水平显著低于感病烟株,说明抗病烟株中HC-Pro基因发生了RNA沉默。利用dsRNA技术沉默HC-Pro基因,获得了烟草品种云烟85的T1代转基因抗PVY株系。 展开更多
关键词 马铃薯y病毒 HC-PRO基因 沉默 转基因抗病烟草
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烟草在PVY^N病毒与烟蚜作用下对高CO_2浓度的响应 被引量:1
17
作者 付雪 叶乐夫 戈峰 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第13期3575-3583,共9页
以CO2浓度为主处理因子,研究了加倍CO2浓度和对照大气CO2浓度条件下,烟蚜、马铃薯Y病毒N株(PVYN)以及二者共同作用下烟草各指标的响应。结果表明,在当前CO2浓度条件下,PVYN、烟蚜及两者联合作用对烟草生物量影响不显著;而在未来高CO2浓... 以CO2浓度为主处理因子,研究了加倍CO2浓度和对照大气CO2浓度条件下,烟蚜、马铃薯Y病毒N株(PVYN)以及二者共同作用下烟草各指标的响应。结果表明,在当前CO2浓度条件下,PVYN、烟蚜及两者联合作用对烟草生物量影响不显著;而在未来高CO2浓度条件下,PVYN、烟蚜及两者联合作用对烟草生物量影响很大。CO2浓度升高后,PVYN和蚜虫二者联合作用显著降低烟草产量,危害加重,高CO2的"肥料"作用被极大地削弱。在有烟蚜、PVYN以及两者共同作用时烟草的化学物质及主要的次生代谢物烟碱的含量对CO2浓度升高的响应也发生一定的变化,表现在:高CO2浓度条件下,蚜虫、蚜虫与PVYN共同作用显著增加了烟草的含氮量;显著减少了烟叶含糖量;PVYN及其与蚜虫共同作用显著升高叶片可溶性蛋白含量;当高CO2浓度下,各处理的烟草烟碱含量均显著下降,而且PVYN感染的烟叶烟碱含量无论在哪一种CO2浓度条件下,都比无毒无虫的对照烟叶烟碱含量升高。结果显示,烟蚜和马铃薯Y病毒N株(PVYN)对烟草的产量、营养物质及防御物质都有影响;CO2浓度升高对烟草的生长有促进作用,增加了烟草的产量,但蚜虫的危害和PVYN感染使烟草产量下降,在高CO2浓度条件下,烟蚜和PVYN共同作用相对于目前CO2浓度对烟草产量的危害加重。 展开更多
关键词 CO2 烟草 烟蚜 马铃薯y病毒N株(pvyN)
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利用人工ta-siRNA策略培育抗PVY烟草 被引量:1
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作者 吴斌 姜珊珊 +3 位作者 张眉 徐德坤 辛志梅 王升吉 《山东农业科学》 2018年第12期86-90,共5页
人工ta-siRNA基因沉默技术具有同时表达多个ta-siRNA和产生ta-siRNA位置固定等特点,在精确性和高效性等方面有明显优势。本研究以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)外壳蛋白(coat protein,CP)为靶基因,选取不同位置的3个siRNA为靶序列,烟... 人工ta-siRNA基因沉默技术具有同时表达多个ta-siRNA和产生ta-siRNA位置固定等特点,在精确性和高效性等方面有明显优势。本研究以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)外壳蛋白(coat protein,CP)为靶基因,选取不同位置的3个siRNA为靶序列,烟草TAS3a作为ta-siRNA表达的骨架,分别构建植物表达载体PVY-CP5'、PVY-CPM和PVY-CP3',并利用叶盘法转化烟草NC89。瞬时表达检测结果显示,3个syn-tasiRNA植物表达载体均能在植物体内成功表达siRNA;抗病性鉴定发现,转PVY-CP5'、PVY-CPM和PVY-CP3'的转基因株系中抗病株系的比率分别为45. 08%、27. 21%、61. 90%;Northern杂交分析显示,目的片段转录产物(总RNA)的积累量与植株的抗病性呈负相关,转基因植株中均有siRNA存在,表明植株的病毒抗性是由RNA介导的。 展开更多
关键词 人工ta-siRNA 马铃薯y病毒(pvy) RNA介导的病毒抗性 转基因烟草
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硫酸镁对烟草感染PVY^N后病情及防御酶系活性的影响 被引量:1
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作者 顾晶晶 李鑫 +1 位作者 赵秀香 吴元华 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期286-290,共5页
对叶面喷施240mg·L-1硫酸镁溶液后,烟草幼苗感染烟草马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato Virus Y-vein necrosis,PVYN)的发病情况、病毒含量及防御酶系活性进行研究。结果表明:烟草幼苗经240 mg·L-1 MgSO4处理,再接种PVYN后其发病... 对叶面喷施240mg·L-1硫酸镁溶液后,烟草幼苗感染烟草马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato Virus Y-vein necrosis,PVYN)的发病情况、病毒含量及防御酶系活性进行研究。结果表明:烟草幼苗经240 mg·L-1 MgSO4处理,再接种PVYN后其发病程度减轻,病情指数及幼苗叶片中病毒含量均低于未喷施MgSO4的对照。叶面单独喷施MgSO4处理和喷施后接种PVYN处理,对苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性均有较强的促进作用,烟草幼苗接种PVYN后,PAL在处理第6天时达到酶活高峰(2.63U·g-1FW),POD、PPO的活性在接种PVYN后第15天时产生高于对照处理的酶活高峰,峰值分别为55.76U·g-1FW和10.62U·g-1FW;但喷施MgSO4对过氧化氢酶(CAT)活性影响较小。本研究证实,MgSO4具有较强的诱导植物产生抗病毒的能力,可明显提高植株的抗病性。 展开更多
关键词 烟草 马铃薯y病毒脉坏死株系(pvyN) 苯丙氨酸解氨酶 过氧化物酶 多酚氧化酶 过氧化氢酶 MgSO4
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马铃薯Y病毒脉坏株系(PVY^N)的侵染对烟草光合作用和呼吸作用的影响 被引量:2
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作者 文才艺 吴元华 张艳红 《襄樊学院学报》 1999年第2期34-36,共3页
感染马铃薯Y病毒脉坏死株系后,烟草叶片的叶绿素含量和Hill反应活性均明显降低,光合速率在接种后2天出现增高现象,随后逐渐降低,呼吸速在接种的后2~6天明显降低,显症初期呼吸速率增高,随后大幅度降低.
关键词 烟草 马铃薯y病毒脉坏死株系 光合作用 呼吸作用 生理特性 叶绿素 Hill反应活性 光合速率
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