绵羊体况与PMSG对同期发情效果的影响

为了研究不同体况和不同剂量孕马血清促性腺激素(PMSG)对绵羊同期发情效果的影响,试验将体况良好的60只母羊随机分为A、B两组,体况差的120只母羊随机分为C、D两组,A、C组注射400 IU PMSG,B、D组注射330 IU PMSG。结果表明:肌肉注射400 IU PMSG的母羊发情率优于肌肉注射330 IU PMSG(P<0.05),且体况良好的母羊发情率优于体况差的母羊(P<0.05)。说明母羊体况严重影响同期发情的效果,合理应用生殖激素可以提高绵羊的同期发情率。

PMSG免疫学检测方法的建立

为了建立一种马属动物孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)浓度的检测方法,试验使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测商用PMSG抗原纯度,斑点印迹杂交(Dot-blot)判断PMSG和抗体是否结合,蛋白免疫印迹杂交(Western-blot)确定抗体和PMSG抗原的结合方式,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)建立PMSG浓度-吸光度值标准曲线,并拟合方程。结果表明:PMSG抗原纯度符合要求,抗体与PMSG抗原采用空间表位方式结合;PMSG浓度与OD450值的标准曲线拟合方程为y=0.004 5x+0.020 2,R2=0.998,在0~4×102IU/m L范围内,PMSG浓度与OD450值之间高度相关,R2>0.99。说明PMSG抗原可与抗体通过空间表位方式特异性结合,所建立的PMSG免疫学检测方法具有较高的准确性。

母猪超数排卵对胚胎发育和胚胎质量的影响

对湖北白猪青年母猪和经产母猪用孕马血清促性腺激素 (PMSG)和人绒毛膜促性腺激素 (HCG)进行超数排卵处理 ,发情后配种 ,手术采集胚胎并观察 ,实验发现 ,1 0IU/kg体重的PMSG能促进母猪的发情并显著提高青年母猪的排卵数 ,1 0IU/kg体重的PMSG对经产母猪的超排效果不明显。超数排卵影响胚胎的质量 ,自然发情母猪较超数排卵母猪排卵较快 。

抑制素A及促性腺激素对小鼠未成熟卵母细胞体外成熟的影响

目的:探讨抑制素A(InhibinA,INHA)对小鼠未成熟卵母细胞体外成熟(In vitro maturation,IVM)的影响。方法:从孕马血清促性腺激素(Pregnant mare serum gonadotrophin,PMSG)组(使用PMSG组,16例)及无PMSG组(未使用PMSG组,20例)获得的生殖泡期(Germinal vescle,GV)卵母细胞在不同浓度INH A的培养液中进行体外培养,观察第一极体(The first polar body,PB1)排出和皮质颗粒(Cortical granules,CG)染色情况。结果:PMSG组获卵数为(17.2±2.6)个/只,无PMSG组获卵数为(15.9±1.8)个/只(P>0.05);PMSG组与无PMSG组的PB1率分别为57.7%、50.7%(P>0.05)。PMSG组中INH A200、350ng/ml组的PB1率较对照组高(P<0.05);无PMSG组中各INH A组PB1率与对照组比较无显著差异(P>0.05);结论:INH A和PMSG对体外培养GV期卵母细胞核成熟有促进作用。

猪卵母细胞体外成熟及乙醇孤雌激活研究

探讨了不同基础培养液(mTCM-199、NCSU23)和PMSG、HCG浓度、作用时间对猪卵母细胞体外成熟的影响和乙醇及乙醇与各种化学试剂联合处理对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活、孤雌生殖胚胎发育的影响,最终找到了优异的猪卵母细胞体外成熟培养体系,并确定了乙醇孤雌激活的适宜浓度、作用时间和与不同化学试剂联合处理的适宜组合。结果表明:优化的猪卵母细胞体外成熟培养体系为NCSU23+20 IU/mLPMSG+20IU/mL HCG+10%PFF,激素作用时间为45 h,成熟率可达70.3%±3.9%;乙醇的适宜激活浓度为8%,激活率为29.6%+2.5%;乙醇激活的适宜处理时间为10 min,激活率为32.6%±4.1%;乙醇与CB+CHX联合处理的激活率最高,激活率为60.8%±3.2%,卵裂率、3-4细胞率、6-8细胞率分别为45.1%±3.0%、28.6%±3.7%、8.7%±1.2%;乙醇与CB+6-DAMP联合处理的激活率为51.7%±1.9%,卵裂率、3-4细胞率、6-8细胞率分别为41.7%±3.6%、30.3%±4.3%、9.9%±1.8%,虽然激活率、卵裂率低于乙醇与CB+CHX处理组,但3-4细胞率、6-8细胞率均高于乙醇与CB+CHX处理组(30.3%±4.3%对28.6%±3.7%,9.9%±1.8%对8.7%±1.2%)。因此,乙醇激活的适宜方法为:8%乙醇处理10 min,CB+6-DAMP处理7 h。

周龄和激素水平对长爪沙鼠超数排卵效果的影响

目的探讨不同周龄和激素水平对长爪沙鼠超数排卵效果的影响,以期确定长爪沙鼠最佳超排周龄和激素使用剂量。方法腹腔注射10 IU PMSG/HCG对4～18周龄8个年龄段的雌性长爪沙鼠进行超数排卵,末次注射16～17 h内对各组动物卵母细胞计数,确定最佳超排周龄后,对该年龄动物以5、10、15 IU3个剂量水平腹腔注射PMSG/HCG,观察各组动物的卵母细胞计数差异。结果与其它周龄组相比,6周龄组长爪沙鼠超数排卵后的卵母细胞数最多,各组间有统计学意义(P<0.05),而5、10、15IU等3个剂量组的超排效果也有一定的差异,10 IU组数量最高。结论对长爪沙鼠而言,采用10 IU激素注射和6周龄的动物进行超数排卵,获得的卵母细胞数量最多而且超排效果稳定性。

不同剂量激素处理对小鼠超数排卵及产仔性能的影响

研究不同激素组合处理对小鼠超数排卵及产仔性能的影响,以便获得适宜的超数排卵的激素使用剂量。分别用不同剂量孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)注入小鼠体内进行超数排卵处理,比较激素处理后小鼠卵母细胞成熟率、产仔数、胎儿出生重及性别比。结果显示,5 IU PMSG+5 IU HCG剂量组和10 IU PMSG+10 IU HCG剂量组合相比较,卵母细胞成熟率差异不显著(P>0.05),5 IU PMSG+5 IU HCG剂量组平均产仔数最高;10 IU PMSG+10 IU HCG剂量组的胎儿平均初生重最高,但产仔数少。综合以上,在实验中,5 IU PMSG+5 IU HCG剂量组合进行超排处理效果最好。

应用GnRH+PGc+GnRH法诱导水牛同期发情效果的观察

为了提高水牛的繁殖力,研究利用氯前列烯醇(PGc)结合促性腺激素释放激素(GnRH)对水牛群体进行同期发情处理,比较不同PGc浓度、不同药物组合、不同年龄和不同品种对同期发情效果的影响。结果表明:不同剂量的PGc对水牛的同期发情率存在显著差异(P<0.05),以0.6 mg的PGc注射量为宜。注射800 IU孕马血清促性腺激素(PMSG)+PGc 0.6 mg试验组的水牛同期发情率优于500 IU PMSG+PGc 0.6 mg试验组,但低于GnRH+PGc+GnRH试验组的水牛同期发情率,且差异显著(P<0.05)。GnRH+PGc+GnRH法可促进不同年龄和品种的水牛同期发情效果,且差异显著(P<0.05),因此采用GnRH+PGc+GnRH法可促进水牛的同期发情,进而提高水牛的繁殖力。

孕马血清促性腺激素对小鼠受孕的影响

目的观察孕马血清促性腺激素(PMSG)对于小鼠受孕率的影响。方法通过注射PMSG进行超数排卵处理,建立实验组和自然周期组昆明小鼠妊娠模型,比较两组小鼠的受孕率和获得的平均胚胎数。结果在PMSG妊娠小鼠模型中,小鼠妊娠率为75%,平均受孕17个胚胎;自然周期小鼠妊娠率为40%,平均受孕10个胚胎。结论PMSG能促进小鼠排卵,增强小鼠受孕率。

不同激素对母犬的诱导发情和产仔效果的研究

为了研究不同激素对诱导母犬发情和产仔效果的影响,选用110只长期不发情的母犬作为试验动物,试验共分5个组,试验Ⅰ组肌肉注射PMSG,试验Ⅱ组使用PMSG和HCG组合分别肌肉注射,试验Ⅲ组使用PMSG和LRH-3组合分别肌肉注射,试验Ⅳ组使用PMSG、PGF2α、E2和LRH-34种药物组合分别肌肉注射,另设对照组,分别观察诱导发情和产仔效果。结果表明,在发情表现方面,试验Ⅳ组效果最好,在阴门肿胀程度、流血性分泌物及阴道上皮角化程度等方面均表现为高度反应;在发情率方面,试验Ⅳ组分别比试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组提高了32%、28%和20%,差异极显著(P<0.01);在受胎率方面,试验Ⅳ组的受胎率最高,为76%,分别比试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组提高了35%、20.4%和10%,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅳ组之间差异极显著(P<0.01),试验Ⅲ组和试验Ⅳ组之间差异极显著(P<0.01);在产仔数方面,试验Ⅳ组共产仔130只,分别比试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组多产92、74和45只,差异极显著(P<0.01)。对照组没有使用任何药物,发情率最低,只有10%,受胎率为0。试验结果显示,PMSG、PGF2α、E2、LRH-34种激素药物联合使用促进发情效果最好,在受胎率、产仔数方面均明显优于单独或其他组合使用的效果。

不同剂量生殖激素对小鼠超排效果的影响

为了探讨孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)对小鼠超数排卵的最佳组合剂量、最佳注射时间间隔,本试验以成熟实验小鼠为试验动物,分别采用不同剂量PMSG(5IU、7.5IU、10IU、12.5IU)与不同剂量HCG(5IU、7.5IU、10IU、12.5IU)组合注射小鼠进行排卵效果研究,并以44h、46h、48h、50h的间隔时间对小鼠进行超数排卵处理试验。结果表明,(10+10)IU剂量组合处理的见栓小鼠平均获卵数最高(10.3枚);在注射间隔为48h试验组中见栓小鼠平均获卵数最高(8.4枚)。提示本试验条件下,小鼠超排中PMSG与HCG组合剂量为10IU、注射时间间隔为48h时超排效果较好。

反亲和层析法纯化PMSG的试验研究

按PMSG粗品提取方法,从非孕马血清中获得“杂蛋白”提取物。以此“杂蛋白”为抗原制备兔抗“杂蛋白”抗血清,并从中提取IgG,制备多元性抗体免疫吸附柱,然后将PMSG粗品通过此柱,免疫吸附除去其中的杂蛋白,以提高PMSG的纯度和比活性。试验结果,杂蛋白除去率为61.4～70％,PMSG活性回收率为74～89％;PMSG比活性由原来的267IU/mg提高到630IU/mg,纯度提高约2.3倍;通过反亲和层析法部分纯化的PMSG,经电泳分析,主要为α—G部分,兼有少量其他血清杂蛋白。

小鼠超数排卵影响因素研究

从小鼠发情周期、小鼠日龄及注射超排激素剂量3个方面对昆明白小鼠超数排卵的效果进行了研究。结果表明:小鼠发情初期与发情间期对超排的效果差异不显著(P】0.05),35日龄的小鼠超排效果显著低于(P【0.05)60、90日龄的小鼠,孕马血清促性腺激素(PMSG)(10 IU)+人绒毛膜促性腺激素(hCG)(10 IU)剂量组合超排效果极显著高于(P【0.01)其他3组剂量[PMSG(5 IU)+hCG(5 IU)、PMSG(7.5 IU)+hCG(7.5 IU)、PMSG(12.5 IU)+ hCG(12.5 IU)]组合。输卵管全段剖开法是本实验条件下收集早期胚胎的一种可行方法。

不同剂量孕马血清促性腺激素对兰坪乌骨绵羊超数排卵效果的影响

为了研究影响兰坪乌骨绵羊超数排卵效果的因素,试验选择兰坪乌骨绵羊30只,随机分为A组、B组,每组15只,分别注射孕马血清促性腺激素(PMSG)100,200 IU,并使用促卵泡激素(FSH)减量注射法进行超数排卵处理,测定其黄体数、回收胚胎数和可用胚胎数。结果表明:黄体数、回收胚胎数、可用胚胎数A组与B组之间差异不显著(Ρ>0.05)。说明不同剂量PMSG对兰坪乌骨绵羊超数排卵效果无显著影响(Ρ>0.05)。