高速逆流色谱分离纯化防风中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷

建立了高速逆流色谱分离制备防风中有效成分升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的方法。防风根的粉末经甲醇浸泡提取和减压蒸馏,得粗提浸膏。以V(乙酸乙酯)∶V(正丁醇)∶V(水)=2∶7∶9为溶剂,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0mL/min。从316mg防风粗提物中一步分离得到13.9mg升麻素苷和25mg5-O-甲基维斯阿米醇苷,纯度分别为98.1%和99.2%。采用ESI-MS,1H NMR和13C NMR对目标化合物的结构进行了鉴定。

玉屏风方饮片及汤剂中毛蕊异黄酮苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量相关性研究

目的:建立玉屏风汤剂中毛蕊异黄酮苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定方法,研究黄芪、防风饮片及玉屏风汤剂中此3种成分的含量相关性。方法:采用HPLC法,色谱柱为Hypersil ODS;流动相为乙腈-水(梯度洗脱);检测波长为254nm;流速为1mL·min-1;柱温为30℃。结果:黄芪中的毛蕊异黄酮苷、防风中的升麻素苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷的提取率分别为45.58%~63.35%,45.01%~65.09%,53.62%~87.75%。结论:饮片与汤剂中的含量呈现一定相关性,但不同批次饮片的提取率差异性较大;为玉屏风汤剂物质基础的研究提供了一定的参考。

HPLC法测定防风中升麻苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定防风中升麻苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷的含量。方法采用Agilent Zorbax SB-C18(5μm,150 mm×4.6 mm id)柱,甲醇-水流动相体系梯度洗脱,检测波长254 nm,流速0.7 ml/min,柱温25℃,进样量5μl。结果成功建立了防风中4种主要成分的HPLC含量测定方法,且方法学考察结果良好。结论该方法简便可行,定量准确,可用于防风中4种主要成分的质量控制。

RP-HPLC法同时测定不同产地及不同部位防风中4种有效成分的含量

目的建立防风药材中4种有效成分含量同时测定的方法，以比较不同产地防风药材及不同部位中有效成分的含量，为防风药材质量标准的制定及防风的资源开发提供科学依据。方法采用RP-HPLC法。色谱柱：Diamonsil C18柱（200mm×4．6mm，5μm）；流动相：甲醇-水，梯度洗脱；流速：1．0mL·min^-1；检测波长：254mm；柱温：30℃。结果升麻素、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷能够达到基线分离；升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷质量浓度在1．92～400mg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999、0．9998，n=5），平均加样回收率分别为97．5％、97．7％，RSD分别为1．3％、2．8％（n=9）；升麻素、亥茅酚苷质量浓度在0．96～200mg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999、0．9999，n=5），平均加样回收率分别为99．3％、97．7％，RSD分别为2．0％、1．7％。结论本方法为防风药材的资源开发提供了参考，可用于防风药材的质量控制。

防风色原酮类成分的近红外光谱定量分析

目的:本文建立了能快速测定防风中升麻素、4种色原酮含量之和的近红外光谱定量模型。方法:用高效液相色谱法测定55批防风饮片的4种色原酮的含量作为参考值,结合偏最小二乘回归法(PLS)建立回归模型。筛选了不同的光谱预处理方法、波段及最佳因子数,最终模型通过相关系数(R2)、预测均方根误差(RMSEP)和校正均方差(RMSEC)来评估其稳健性。结果:升麻素的最佳RMSEP值、RMSEC值、R2分别为0. 025 0、0. 024 0、0. 949 9,4种色原酮含量总和的最佳RMSEP值、RMSEC值、R2分别为0. 2460、0. 1720、0. 9110。结论:本研究建立的近红外光谱定量模型较准确,可用于对防风质量的快速检测。

正交试验法优选复方苦黄方的水提取工艺

目的:优选复方苦黄方的水提取工艺。方法:采用正交试验法,以苦参碱与氧化苦参碱含量之和、升麻素苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷含量之和、盐酸小檗碱含量以及浸膏得率的综合评价值为指标,以提取时间、加水量(回流提取3次)、浸泡时间为因素,对复方苦黄方水提取工艺进行优选并进行验证试验。结果:提取时间对综合评价值有显著性影响(P<0.05);优选的水提取条件为提取时间120 min,加水量8、6、6倍,浸泡时间20 min;验证试验中苦参碱和氧化苦参碱的总含量平均值为3.152 6 mg/g(RSD=1.03%,n=3),升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的总含量平均值为4.977 2 mg/g(RSD=2.27%,n=3),盐酸小檗碱的平均含量为3.345 0 mg/g(RSD=1.19%,n=3),浸膏得率平均值为49.23%(RSD=2.43%,n=3)。结论:优选的复方苦黄方的水提工艺稳定可行。

玉屏风煎剂不同配伍对毛蕊异黄酮苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的影响

目的:建立玉屏风煎剂中毛蕊异黄酮苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定方法,研究在不同配伍情况下3种成分含量的变化。方法:采用高效液相色谱法测定样品含量,色谱柱为Hypersil ODS(250mm×4.0mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为254nm。结果:与黄芪单煎、防风单煎相比,不同配伍的合煎对3种成分的含量影响不明显或使含量呈现不同程度的下降趋势,尤以黄芪+防风+白术三药合煎降低趋势较大。结论:玉屏风煎剂不同配伍中主要成分的含量在煎煮过程中存在动态变化。本试验结果可为玉屏风煎剂的配伍规律及物质基础的研究提供一定的参考。

关防风HPLC特征指纹图谱研究及4个色原酮类成分一测多评法分析研究

目的:建立指纹图谱及一测多评法测定关防风中4个化学成分含量。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0～10min,20%A→40%A;10～30 min,40%A→65%A;30～40 min,65%A;40～60 min,65%A→80%A;60～70min,80%A),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温30℃;采用高效液相色谱法测定12批关防风的指纹图谱,建立指纹图谱共有模式。以5-O-甲基维斯阿米醇苷为内参物,建立升麻素、升麻素苷、亥茅酚苷的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评。同时采用外标法测定12批关防风中4个色原酮类成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证一测多评法的准确性。结果:12批关防风指纹图谱标定了共20个共有峰,指认了其中7个化学成分。12批样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均大于0.90。建立的相对校正因子重现性良好,采用校正因子计算的含量值与实测值之间无显著差异(P>0.05);通过聚类分析,栽培品和野生药材能有效区分。结论:所建立的方法准确、可行,可用于关防风中4个化学成分的定性定量分析。