胶原样结构巨噬细胞受体介导染矽尘大鼠肺组织细胞线粒体凋亡信号通路研究

目的通过抑制大鼠肺泡巨噬细胞(AM)表面胶原样结构巨噬细胞受体(MARCO),探讨MARCO介导的线粒体凋亡通路的信号机制及其在矽肺发生发展中的作用。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠48只随机分为多聚鸟苷酸(PolyG)组、矽肺模型组和对照组,每组16只。除对照组外,其余2组进行矽肺造模。PolyG组于造模当天经尾静脉一次性注射给药剂量为1.5 mg/kg体质量PolyG干预,其余2组给予等体积灭菌生理氯化钠溶液。染尘后第28、56天分别处死3组大鼠各8只,收集一侧肺泡灌洗液,分离纯化AM。苏木素-伊红染色观察肺组织病理变化,免疫印迹法测定肺组织内MARCO、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(CytC)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-9和Caspase-3水平,流式细胞术检测AM线粒体去极化率和活性氧(ROS)阳性率,实时定量荧光聚合酶链式反应分析Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达水平。结果染尘后第28、56天对照组和PolyG组MARCO、Bax、CytC、Caspase-9、Caspase-3相对表达水平、线粒体去极化率、ROS阳性率以及Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRNA表达水平均低于同时间点矽肺模型组(P<0.01),而Bcl-2相对表达水平高于同时间点矽肺模型组(P<0.01);第28天PolyG组与对照组组间MARCO、CytC、Caspase-3相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),第56天PolyG组与对照组组间MARCO、CytC、Caspase-3、Bax相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组上述10个指标第28天检测结果与第56天比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与第28天比较,第56天矽肺模型组线粒体去极化率和ROS阳性率差异均无统计学意义(P>0.05),Bcl-2相对表达水平降低(P<0.01),其他7个指标均升高(P<0.01)。与第28天比较,第56天PolyG组CytC、Bax相对表达水平、线粒体去极化、ROS阳性率降低(P<0.01),其他6个指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 MARCO可能在肺组织细胞线粒体凋亡通路中发挥着重要的作用。