miR-100-5p对甲状腺癌细胞增殖与凋亡调控作用的实验研究

目的通过实验探讨微小核糖核酸(microRNA,miR)-100-5p在甲状腺癌细胞中的表达情况及其对细胞增殖与凋亡的调控作用。方法使用荧光定量PCR检测miR-100-5p在甲状腺癌细胞系(TPC-1,KTC-1)与甲状腺正常细胞系(Nthy-ori3-1)中的相对表达情况。TPC-1细胞分别转染miR-100-5p模拟物(miR-100-5p mimic)、抑制物(miR-100-5p inhibitor)及相应阴性对照(miR-mimic NC,miR-inhibitor NC)后,用CCK-8检测TPC-1细胞增殖情况,流式细胞仪检测TPC-1细胞凋亡情况。通过miRTarBase和TargetScan7.2数据库对miR-100-5p的靶基因进行预测和功能富集分析,用蛋白印迹实验与双荧光素酶报告基因实验验证miR-100-5p对成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)的靶向调控作用。结果与Nthy-ori3-1细胞相比,miR-100-5p在TPC-1细胞中表达水平(1.87±0.03 vs 1.00±0.03)与KTC-1细胞中表达水平(6.33±0.47 vs 1.00±0.03)均上调,差异具有统计学意义(t=-34.220,-19.588,均P<0.05)。转染miR-100-5p mimic组在24,48,72h细胞450nm吸光度(A_(450nm))均高于miR-mimic NC组,差异具有统计学意义(t=-7.516,-17.828,-8.445,均P<0.05);转染miR-100-5p inhibitor组在24,48,72h A_(450nm)均低于miR-inhibitor NC组,差异具有统计学意义(t=6.720,6.782,6.073,均P<0.05)。与miR-mimic NC组相比,转染miR-100-5p mimic后凋亡率(7.43%±0.49%vs 10.55%±0.80%)下降(t=5.767,P=0.004),与miR-inhibitor NC组相比,转染miR-100-5p inhibitor后凋亡率(3.19%±0.22%vs 2.64%±0.15%)上升(t=-3.606,P=0.023),差异均有统计学意义。蛋白印迹实验显示,与miR-mimic NC组相比,FGFR3在miR-100-5p mimic组蛋白表达水平(0.78±0.12 vs 1.00±0.00)下调(t=3.071,P=0.037),与miR-inhibitor NC组相比,FGFR3在miR-100-5p inhibitor组蛋白表达水平(1.17±0.07 vs 1.00±0.00)上升(t=-4.509,P=0.046),差异均有统计学意义。与miR-mimic NC相比,miR-100-5p mimic没有降低FGFR33’UTR野生型组荧光素酶活性(1.01±0.17 vs 1.00±0.00)与突变型组荧光素酶活性(0.99±0.11 vs 1.00±0.00),差异无统计学意义(t=-0.057,0.181,P=0.96,0.873)。结论miR-100-5p在甲状腺癌细胞中表达上调,可促进甲状腺癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,其可能成为甲状腺癌诊疗中新的生物标志物与调控靶点。

食管鳞状细胞癌病人血清miR-21-5p和miR-100-5p水平与临床特征和预后的相关分析

目的 分析食管鳞状细胞癌(ESCC)病人血清miR-21-5p和miR-100-5p的表达对ESCC鉴别诊断、临床特征和预后的影响。方法 2018年1月~2022年1月于我院放疗科接受放射治疗的158例晚期ESCC病人为实验组,150例健康体检志愿者为对照组。实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-21-5p和miR-100-5p表达水平。利用t检验比较miR-21-5p和miR-100-5p在实验组和健康对照组间的表达差异,采用ROC曲线分析其诊断价值。利用Kaplan-Meier法Log-Rank检验进行预后生存分析。多因素Cox回归分析ESCC病人预后的影响因素。结果 与对照组比较,ESCC病人血清miR-21-5p和miR-100-5p表达水平显著升高(P<0.001)。ROC曲线分析提示,二者联合诊断ESCC的AUC为0.918,灵敏度为93.2%,特异度为87.1%。ESCC病人血清miR-21-5p和miR-100-5p表达升高与更晚的TNM分期和更差的无进展生存期和总体生存期显著相关(P<0.05)。多因素Cox分析显示,TNM分期为Ⅲ期、血清中miR-21-5p高表达和miR-100-5p低表达是ESCC病人无进展生存期和总体生存期的独立危险因素(P均<0.05)。结论 血清miR-21-5p和miR-100-5p表达水平在ESCC病人中显著升高,且提示更差的预后。血清miR-21-5p和miR-100-5p,有望成为ESCC诊断和预后预测的生物标志物。

调神解郁针法结合康复训练治疗卒中后抑郁的疗效及对S100β、5-HT的影响

探究调神解郁针法结合康复训练治疗脑卒中后抑郁(PSD)的疗效及对S100钙结合蛋白β(S100β)、5-羟色胺(5-HT)的影响。方法 随机将海南省中医院2021年11月-2023年3月接收的PSD患者60例分为两组,各30例。将实施基础治疗的患者纳入对照组,将实施基础治疗+调神解郁针法+康复训练的患者纳入观察组。比较两组治疗效果。结果 治疗4周,观察组总有效率较对照组高(P<0.05)。两组治疗4周汉密尔顿抑郁量表24项(HAMD-24)评分、血清S100β降低,观察组较低,改良Barthel指数(ADL)评分、5-HT升高,观察组较高(P<0.05)。结论 调神解郁针法结合康复训练治疗PSD效果显著,可改善其血清S100β及5-HT水平,减轻其抑郁症状,提高日常生活能力。

金银花多酚粗提物调控miR-100-5p参与非小细胞肺癌细胞NCI-H1299侵袭迁移

目的:探讨金银花多酚粗对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞恶性生物学行为的影响及分子机制。方法:将非小细胞肺癌NCI-H1299细胞分为NC组、紫杉醇组、金银花多酚粗提物低、中、高剂量组、miR-100-5p组、miR-NC组、anti-miR-100-5p+高剂量组、anti-miR-NC+高剂量组;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法检测E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-100-5p表达水平。结果:不同浓度金银花多酚粗提物处理后,NCI-H1299细胞活性降低,细胞迁移和侵袭数量减少,E-Cadherin、miR-100-5p表达水平升高,N-Cadherin、Vimentin表达水平降低(P<0.05)。过表达miR-100-5p后,NCI-H1299细胞活性升高,细胞迁移[(226±20.03)个]和侵袭数量[(171±15.03)个]增加,E-Cadherin表达水平(0.34±0.03)降低,N-Cadherin(0.88±0.08)、Vimentin表达水平(0.95±0.09)升高(P<0.05)。下调miR-100-5p可逆转金银花多酚粗提物对NCI-H1299细胞增殖、迁移侵袭及Wnt/β-catenin通路的影响。结论:金银花多酚粗提物可能通过上调miR-100-5p表达,抑制Wnt/β-catenin通路活化,进而抑制非小细胞肺癌NCI-H1299细胞增殖、迁移和侵袭。

血清5-羟色胺与S100-β蛋白水平在评估创伤性脑损伤后认知功能障碍中的应用价值

目的探讨血清5-羟色胺(5-HT)和S100-β蛋白水平在评估创伤性脑损伤(TBI)后认知功能障碍中的应用价值。方法回顾性分析80例TBI患者的临床资料,以伴有认知障碍为观察组(53例),不伴有认知障碍为对照组(27例)。比较两组患者血清5-HT和S100-β水平,以及不同严重程度认知障碍患者血清5-HT与S100-β水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清5-HT、S100-β及二者联合预测TBI后认知功能障碍的效能。结果观察组患者血清5-HT和S100-β蛋白水平均高于对照组;认知障碍程度越重,患者血清5-HT和S100-β蛋白水平越高(均P<0.05)。相关性分析结果显示,血清5-HT和S100-β蛋白水平与蒙特利尔认知评估量表评分均呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清5-HT与S100-β蛋白水平预测TBI患者发生认知功能障碍的曲线下面积(AUC)分别为0.741、0.715,二者联合预测的AUC为0.832。结论TBI后认知功能障碍患者的血清5-HT与S100-β蛋白水平较高,且与认知功能障碍的发生、严重程度密切相关;血清5-HT与S100-β蛋白在预测TBI患者发生认知功能障碍方面具有一定价值。

5-Br-PADAP-TritonX-100-β-环糊精体系分光光度法测定电镀废水中镉

在β-环糊精（β-CD）和TritonX-100存在下，基于镉与2-（5-溴吡啶-2-偶氮）-5-二乙氨基苯酚（5-Br-PADAP）的显色反应，建立了分光光度法测定电镀废水中镉的新方法。络合物的最大吸收波长为570nm，表观摩尔吸光系数为2．40×10^5L·mol^-1·cm^-1，镉量在10～800μg／L范围内服从比尔定律，线性回归方程为A=0．0856 ρ＋0．0012，r=0．9991。方法用于电镀废水中微量镉的测定，相对标准偏差为2．5％～3．2％，加标回收率为98．0％～102．0％，测定结果同原子吸收光谱法的测定结果相吻合。

俄罗斯提升大学国际化水平“5-100计划”的措施与成效分析

新时期,俄罗斯根据国内外形势在高等教育领域推行"5-100计划"。该计划以提升大学国际化水平为目标,以大学及学科世界排名、留学生数量、科研成果的国际影响力为衡量指标,以专项资金、建设国际化课程、引进国际师资为举措。计划取得一定成效,但项目大学世界排名和国际教师数量方面尚未达到预期。分析计划成效及问题原因,对我国"双一流"建设有一定的启示及借鉴意义。

miR-100-5p下调mTOR抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭

目的观察miR-100-5p对前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并探讨其相关调控机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测前列腺癌细胞系LNCaP和人前列腺上皮细胞系RWPE-1中miR-100-5p的表达。分别用脂质体转染法将NC-mimics和miR-100-5p mimics转染LNCaP细胞,用CCK-8增殖实验、细胞划痕实验和Transwell小室法检测miR-100-5p对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。用生物信息学方法预测miR-100-5p的可能作用靶基因;用qRT-PCR和Western blot检测miR-100-5p对mTOR mRNA和蛋白水平的影响。结果miR-100-5p在LNCaP细胞中的表达较RWPE-1细胞明显降低(P<0.01)。转染miR-100-5p mimics后,LNCaP细胞中miR-100-5p表达水平显著增高(P<0.01),细胞增殖能力、迁移能力及侵袭能力明显降低(P<0.01)。生物信息学结果显示,mTOR可能是miR-100-5p的作用靶基因。miR-100-5p mimics组LNCaP细胞中mTOR mRNA的表达明显低于NC-mimics组(P<0.01)。结论miR-100-5p在PCa细胞系LNCaP中呈现低表达,体外实验发现miR-100-5p能够抑制LNCaP细胞的增殖、迁移及侵袭能力,其机制与下调mTOR基因的表达有关。

TritonX-100-5-Br-PADAP光度法测定发样中铁

在表面活性剂TritonX - 10 0存在下 ,以 5-Br -PADAP作显色剂 ,光度法测定发样中铁 ,结果在所选浓度范围内线性关系良好 ,稳定时间长 ,回收率平均为 98 14%。

NT-proBNP、S100β和5-HT在预测脓毒症相关性脑病中的价值

目的评估N端B型利钠肽原(NT-proBNP)、S100蛋白(S100β)和5-羟色胺(5-HT)在预测脓毒症相关性脑病(SAE)中的价值。方法选取2019年9月至2020年9月该院收治的脓毒症患者64例,根据是否合并SAE分为SAE组(26例)和非SAE组(38例)。检测并比较两组患者S100β、5-HT、NT-proBNP等实验室指标,分析各指标间的相关性,运用受试者工作特征(ROC)曲线分析S100β、5-HT、NT-proBNP对SAE的预测价值。结果SAE组的PCT、5-HT、NT-proBNP和S100β水平均高于非SAE组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,S100β(OR=4.673,95%CI:2.262~7.084,P<0.001)、NT-proBNP(OR=5.254,95%CI:3.016~7.492,P<0.001)、5-HT水平升高(OR=4.375,95%CI:1.727~7.023,P<0.001)均是脓毒症患者发生SAE的危险因素。相关性分析显示,5-HT的水平与S100β、NT-proBNP呈正相关(r=0.771、0.821,P<0.001)。ROC曲线分析显示,5-HT,S100β,NT-proBNP对SAE均具有较高的预测价值,并且5-HT预测SAE的曲线下面积与S100β、NT-proBNP比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论5HT的水平与NT-proBNP和S100β呈正相关,3者均可以作为预测脓毒症患者发生SAE的潜在生物标志物。

miR-100-5p调控甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移、侵袭及EMT进程

目的:探讨miR-100-5p对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)进程的影响。方法:通过GEO数据库下的miRNA微阵列数据集(GSE104006、GSE73182、GSE151180),选取变化倍数[|log2Fold Change(FC)|>1]和adj.P.Val<0.05的miRNA进行交集。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-100-5p在PTC细胞系(TPC-1和B-CPAP)和人正常甲状腺细胞系(Nthy-ori 3-1)中的表达趋势。合成miR-100-5p相关的模拟物(mimics-100-5p)、抑制剂(inhibitor-100-5p)以及对应的对照组(mimics-NC和inhibitor-NC)。分别转染PTC细胞系,通过Edu实验、平板克隆实验、划痕愈合实验、Transwell实验深入研究miR-100-5p对PTC细胞的影响。通过蛋白印迹实验检测转染mimics-100-5p、inhibitor-100-5p及对应NC组MMP-9和EMT相关标志蛋白的表达趋势。结果:三个miRNA微阵列数据库共同交集于miR-100-5p。与人正常甲状腺细胞系Nthy-ori 3-1相比,miR-100-5p在PTC细胞系中低表达。qRT-PCR验证转染成功。Edu实验、平板克隆实验显示过表达miR-100-5p细胞的增殖速率明显降低,而敲低miR-100-5p后结果与之相反。划痕愈合实验和Transwell实验显示过表达miR-100-5p的TPC-1细胞的迁移和侵袭能力受限,而敲低miR-100-5p的结果与之相反。蛋白印记实验显示过表达miR-100-5p后MMP-9、VIM蛋白表达趋势明显降低,而E-cad蛋白表达上升,敲低miR-100-5p可以逆转过表达miR-100-5p的结果。结论:miR-100-5p负调控PTC细胞的增殖、迁移和侵袭。此外,miR-100-5p还参与介导PTC的上皮间质转化进程。

不同炭化温度制备的C/0.5Al_2O_3-0.5P_2O_5-100SiO_2凝胶玻璃的光学性质

通过醇盐不完全水解制备了含有有机基团(O-C_2H_5)的0.5Al_2O_3-0.5P_2O_5-100SiO_2凝胶,在氮气中加热到300～700℃使其中的有机基团炭化,得到镶嵌在凝胶玻璃中不同尺寸的碳纳米颗粒.利用高分辨电镜、X射线衍射和喇曼光谱研究了碳纳米颗粒的结构,发现凝胶玻璃中的碳颗粒为非晶碳纳米颗粒.测试了它们的吸收光谱,发现了由于量子限域效应引起的吸收边的移动.在532um Nd:YAG激光的激发下镶嵌有碳纳米颗粒的凝胶玻璃有一强的室温发光,发光峰在586um左右.发光峰几乎不随碳纳米颗粒尺寸的变化而变化.这种发光产生于碳纳米颗粒的表面或碳颗粒和凝胶网络的界面.

微小RNA-100-5p对颞下颌关节炎中雷帕霉素靶蛋白的作用机制研究

目的:探讨微小RNA-100-5p(miR-100-5p)对颞下颌关节炎中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为A组、B组、C组、D组和E组,每组12只,向双侧颞下颌关节腔内注射碘乙酸钠溶液,制备颞下颌关节炎大鼠模型。造模成功后,C组注射pcDNA3.1-miR-100-5p重组质粒,D组注射mTOR抑制剂雷帕霉素(rapamycin),E组注射pcDNA3.1-miR-100-5p重组质粒和rapamycin,A组注射等剂量生理盐水,比较各组大鼠颞下颌关节组织形态学变化,颞下颌关节组织中基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-1、MMP-13、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平及miR-100-5p、mTOR表达量。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:B组颞下颌关节结构模糊,出现滑膜增生、血管扩张、簇集样细胞团及大量炎症浸润现象,各干预组颞下颌关节组织病理学变化较B组均有不同程度改善,其中,E组改善最明显。B组MMP-3、MMP-1、MMP-13、IL-6、IL-1β、TNF-α水平较A组高(P<0.05);C组、D组、E组MMP-3、MMP-1、MMP-13、IL-6、IL-1β、TNF-α水平较B组低(P<0.05);D组MMP-3、MMP-1、MMP-13、IL-6、IL-1β、TNF-α水平与C组相比差异无统计学意义(P>0.05);E组MMP-3、MMP-1、MMP-13、IL-6、IL-1β、TNF-α水平较D组低(P<0.05);E组miR-100-5p表达量较B组高(P<0.05);E组mTOR蛋白表达量较B组低(P<0.05)。结论:微小RNA-100-5p可能通过下调雷帕霉素靶蛋白表达而缓解颞下颌关节炎症。

基于QS的俄罗斯高等教育"5-100计划"探析

俄罗斯是传统的教育和科技强国,苏联解体后俄罗斯高等教育的国际影响力和竞争力持续下降."5-100计划"是俄罗斯政府为重振本国高等教育在国际上的影响力和竞争力、加快与国际接轨的重要举措.QS评价体系指标以俄罗斯高等教育的"5-100计划"并对比QS世界大学排名,认识俄罗斯乃至中国高校与世界一流名校的差距.

miR-100-5p通过抑制大鼠骨髓间充质干细胞的迁移和成骨分化参与非创伤性股骨头坏死

目的探讨miR-100-5p在非创伤性股骨头坏死(NONFH)发病机制中的作用。方法实时定量PCR检测NONFH患者的miRNA表达,确定NONFH患者股骨头组织miR-100-5p高表达。而后培养大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSC)分为空白对照组,地塞米松处理组(地塞米松处理3 d),微小RNA阴性对照组(转染miR-NC),agomiR-100-5p组(miR-100-5p过表达),antagomiR-100-5p组(转染miR-100-5p拮抗剂)。使用实时定量PCR检测股骨头骨组织miR-100-5p、碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和Ⅰ型胶原蛋白(Col1)的mRNA表达。采用Western blot法检测股骨头骨组织ALP、RUNX2、Col1和骨形态发生蛋白受体2(BMPR2)蛋白的表达。采用划痕愈合实验评估miR-100-5p对rBMSC迁移能力的影响。通过茜素红染色观察miR-100-5p对rBMSC成骨分化能力的影响。结果与正常的股骨头骨组织相比,NONFH患者股骨头骨组织中miR-100-5p显著上调;与正常rBMSC相比,20μmol/L地塞米松处理后的rBMSC中miR-100-5p表达上调;rBMSC中miR-100-5p的上调降低ALP、RUNX2、Col1和BMPR2的表达,抑制rBMSC的成骨分化能力和迁移能力。结论miR-100-5p在NONFH患者的骨组织和20μmol/L地塞米松处理后的rBMSC中表达升高。上调的miR-100-5p可能通过抑制rBMSC的迁移和成骨分化参与NONFH的发病机制。

has-miR-100-5p靶向含7A的锌指和BTB结构域是绝经后骨质疏松的潜在靶标

背景:miRNAs在骨质疏松症的发病机制中起重要作用,因此可以成为重要的治疗靶点。其中,靶向miR-100-5p调控轴促进成骨细胞分化是骨质疏松的潜在治疗靶标。目的:探讨has-miR-100-5p和has-miR-101-3p在绝经后骨质疏松中的靶向调控作用。方法:比较GSE56814和GSE56815数据中高骨矿物质密度和低骨矿物质密度之间的差异表达基因,并进行富集分析。预测差异表达基因中has-miR-100-5p和has-miR-101-3p的靶向调控的基因。随后,收集40例绝经后骨质疏松患者和40例健康对照者的外周血样本,采用qRT-PCR法检测has-miR-100-5p和has-miR-101-3p以及靶标基因的差异表达。最后,通过双荧光素酶报告基因检测has-miR-100-5p对靶标基因3’UTR的结合作用。结果与结论:①富集分析显示,高骨矿物质密度和低骨矿物质密度之间鉴定到81个共同差异表达基因,显著富集于免疫、核因子κB复合物、肿瘤坏死因子信号通路等;②miRTargetbase数据库和miRTarget数据库预测显示,has-miR-100-5p和has-miR-101-3p均靶向调控含7A的锌指和BTB结构域(zinc finger and BTB domain containing,ZBTB7A);③qRT-PCR检测显示,与健康对照组比较,骨质疏松组has-miR-100-5p mRNA表达上调(P<0.001),has-miR-101-3p和ZBTB7A mRNA表达下调(P<0.001);双荧光素酶报告系统显示,野生型ZBTB7A-3’UTR共转染has-miR-100-5p后,293T细胞的荧光活性下调;④结果显示,has-miR-100-5p靶向ZBTB7A可能是绝经后骨质疏松症的潜在靶标。

miR-100-5p靶向mTOR信号通路调控人非小细胞肺癌A549细胞自噬

目的探讨miR-100-5p靶向调控mTOR信号通路对人非小细胞肺癌A549细胞自噬的影响。方法采用A549细胞,实验设置对照组、转染miR-100-5p mimics组、转染miR-100-5p inhibitor组及其对应的无义核酸序列组(mimics NC和inhibitor NC),通过Real time-PCR检测各组细胞中miR-100-5p及自噬相关基因mTOR、Beclin1、LC3及Bcl-2 mRNA相对表达水平;流式细胞术检测瞬时转染后各组细胞的凋亡情况;Western印迹检测miR-100-5p mimics转染48 h后A549细胞中自噬蛋白mTOR的表达情况;最后,通过预测软件结合双荧光素酶报告实验验证miR-100-5p和mTOR之间的靶向关系。结果 A549细胞经过瞬时转染后,对照组、mimics NC组、inhibitor NC组的miR-100-5p、自噬相关基因mTOR、Beclin1、LC3和Bcl-2表达量差异无统计学意义(P>0.05),与mimics NC组比,mimics组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著上调(P<0.05),与inhibitor NC组比,inhibitor组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著下调(P<0.05),与mimics组比,inhibitor组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著下调(P<0.05)。对照组、mimics NC组、mimics组、inhibitor NC组、inhibitor组A549细胞转染48 h细胞凋亡比例,各组差异有统计学意义(F=35.169,P<0.001)。mimics组A549细胞转染48 h细胞凋亡比例显著高于其余4组,差异有统计学意义(均P<0.05)。3组mTOR蛋白水平比较:mimics组>对照组>mimics NC组(均P<0.05)。结论 miR-100-5p靶向mTOR调控A549细胞自噬促进细胞凋亡,提示miR-100-5p可作为肺癌的临床治疗生物治疗的靶点。

miR-132-5p靶向S100A9介导高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡及炎症反应

目的:探讨微小RNA-132-5p(microRNA-132-5p,miR-132-5p)靶向S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)对高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡及炎症反应的影响。方法:人肾小球系膜细胞用DMEM正常糖培养基培养作为对照组,用DMEM高糖培养基培养作为高糖组;miR-NC、miR-132-5p、anti-miR-NC、anti-miR-132-5p转染至正常培养的肾小球系膜细胞中,记为miR-NC组、miR-132-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-132-5p组;将miR-NC、miR-132-5p、si-NC、si-S100A9转染至肾小球系膜细胞中再用高糖培养基培养,记为高糖+miR-NC组、高糖+miR-132-5p组、高糖+si-NC组、高糖+si-S100A9组;将miR-132-5p分别与pcDNA、pcDNA-S100A9转染至肾小球系膜细胞中再用高糖培养基培养,记为高糖+miR-132-5p+pcDNA组、高糖+miR-132-5p+pcDNA-S100A9组。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测miR-132-5p和S100A9 mRNA表达水平;Western blot检测S100A9、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)表达;双荧光素酶报告实验验证miR-132-5p和S100A9的靶向关系;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素(interleukin,IL)-8、IL-6水平。结果:高糖诱导的肾小球系膜细胞中miR-132-5p表达水平降低,S100A9表达水平升高(P<0.05)。miR-132-5p靶向调控S100A9,过表达miR-132-5p或抑制S100A9表达,高糖诱导的肾小球系膜细胞中细胞凋亡率降低,Bax表达水平降低,Bcl-2表达水平升高,TNF-α、IL-8、IL-6水平降低(P<0.05)。S100A9过表达逆转miR-132-5p过表达对高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡和炎症反应的抑制作用。结论:过表达miR-132-5p通过靶向下调S100A9抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡和炎症反应。

4,7-二(2-溴代噻吩-5-基)-2,1,3-苯并噻二唑-N-(1-辛基壬烷基)咔唑在ZnS(100)表面吸附的理论研究

采用密度泛函理论中的广义梯度近似(DFT/GGA)方法,在PW91/DNP水平上研究了4,7-二(2-溴代噻吩-5-基)-2,1,3-苯并噻二唑-N-(1-辛基壬烷基)咔唑(简称PC-DTBT)的低聚合物(PC-DTBT)n(n=1-5)的稳定性和化学活性.结果表明:随着聚合度增加,(PC-DTBT)n的稳定性降低,化学活性增强.采用密度泛函理论与周期性平板模型相结合的方法,研究了PC-DTBT单体在ZnS(100)表面的吸附,通过吸附前后化合物PC-DTBT的Mulliken charge和前线轨道分析表明:当PC-DTBT吸附在ZnS(100)表面时,ZnS(100)表面向PC-DTBT转移0.200 e电荷,前线轨道能隙变窄.理论预测的结果与实验值吻合.

miR-100-5p用于肝癌患者预后判断的临床意义分析

目的探讨miR-100-5p在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及对HCC患者预后判断的临床意义。方法选取2004年1月至2013年12月于浙江医院就诊的HCC患者118例。以miR-100-5p表达水平中位数为界,将肿瘤分为miR-100-5p低表达组和高表达组。通过逆转录、RT-qPCR检测石蜡标本组织中miR-100-5p表达水平,采用χ2检验分析miR-100-5p表达和患者性别、年龄、肿瘤分期和预后的相关性;通过绘制生存曲线和log-rank检验分析miR-100-5p表达水平和患者总体预后的相关性。结果miR-100-5p低表达、高表达与临床分期有关(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤长径无关(均P>0.05)。肿瘤高分期和miR-100-5p低表达是HCC预后的独立危险因素(均P<0.05),其HR值及95%CI分别为0.269(0.138~0.523)、2.569(1.277~5.169)。miR-100-5p低表达组预后生存率明显低于高表达组患者(P<0.01),且高分期HCC患者预后生存率低于低分期组(P<0.01)。并且在不同亚组中miR-100-5p与HCC预后关系各不相同,其中在高分期(Ⅲ+Ⅳ期)、低龄(≤60岁)、男性、小组织(肿瘤长径≤5 cm)组中,低表达miR-100-5p患者的生存时间更短差异均有统计学意义(均P<0.05);而在低分期(Ⅰ+Ⅱ期)、高龄(>60岁)、女性、大组织组(肿瘤长径>5 cm)中均未发现相关性(均P>0.05)。结论低表达miR-100-5p是HCC预后较差的独立危险因素。