干扰FoxO1慢病毒包装及稳转大鼠骨髓间充质干细胞株的建立

目的建立干扰叉头状转录因子O1(FoxO1)的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)稳转株,为研究BMSCs定向分化提供条件。方法提取大鼠原代BMSCs。构建FoxO1干扰载体,扩增后进行测序鉴定。FoxO1质粒瞬转293T细胞后,通过Western blot验证其干扰效果,并选择干扰效果最好的质粒载体。然后通过三因子慢病毒包装系统将FoxO1质粒和两个辅助质粒共转染293T细胞,包装慢病毒,组名为sh1,sh2,sh3,Vector。包装的干扰慢病毒和阴性对照病毒感染大鼠BMSCs,通过Western blot和RT-qPCR检测其表达效果。结果成功提取大鼠原代BMSCs;测序结果显示,重组FoxO1质粒构建成功;重组FoxO1质粒瞬时转染293T细胞48 h,细胞荧光明显,表明EGFP表达良好;Western blot结果显示,载体中标签蛋白表达成功,并筛选到干扰效果最佳的目的质粒sh1-FoxO1;干扰FoxO1慢病毒滴度为1×10^(8) TU·μL^(-1);包装完成的慢病毒感染BMSCs,经嘌呤霉素筛选后,Western blot结果显示,与Vector组相比,sh1组FoxO1的蛋白相对表达量降低(P<0.05);RT-qPCR结果显示,与Vector组相比,sh1组FoxO1的mRNA相对表达量降低(P<0.01),得到干扰FoxO1的大鼠BMSCs稳转株。结论成功构建了FoxO1干扰BMSCs稳转株,为进一步研究FoxO1在诱导BMSCs定向分化为IPCs过程中的作用及其潜在机制奠定了基础。

大面积烧伤病人胃肠内外营养支持治疗的临床研究

目的 :探讨大面积烧伤病人胃肠内外营养支持的方法及疗效。方法 :6 1例大面积烧伤病人 ,第一期采用烧伤 1号方 ,以胃肠外营养为主 ,辅以中药材配制的烧伤饮料 ;第二期采用烧伤 2号方 ,以静脉营养与胃肠内营养相结合 ;第三期采用烧伤 3号方 ,以胃肠道营养为主 ,并监测病人体重、蛋白质代谢、创面愈合天数及免疫能力。结果 :6 1例病人除 1例死亡外 ,80 %病人在治疗 4～ 6周后 ,体重恢复正常 ,其余体重丢失控制在 10 %以内 ,血浆白蛋白、转铁蛋白、前白蛋白及CD+4 细胞水平也恢复正常 ,创面愈合时间也明显缩短。结论 :该实验采用的营养支持疗法可满足重度烧伤病人对热能及各类营养素的需求 ,增强免疫能力 ,减少感染和并发症 ,降低死亡率 ,是一种较有效的营养支持疗法。

急性脑梗死与糖化血红蛋白、糖化血清蛋白相关性探讨

目的探讨急性脑梗死与血糖的关系,分析糖化血红蛋白、糖化血清蛋白对预后的影响。方法将192例急性脑梗死患者根据空腹血糖和既往有无糖尿病史分为糖尿病组、高血糖组、正常血糖组。分析急性脑梗死时糖化血红蛋白、糖化血清蛋白对患者预后的影响。结果正常血糖组治疗好转率较糖尿病组及非糖尿病高血糖组高,统计学处理差异有显著性(P<0.05)。病死率以糖尿病组最高,其中糖化血红蛋白、糖化血清蛋白高对预后有明显影响。结论高糖化血红蛋白、高糖化血清蛋白影响急性脑梗死的预后,及时地控制高血糖,对脑梗死的治疗及预后有重要的意义。

结直肠癌术后放化疗联合DC-CIK的疗效分析

目的探讨放化疗联合树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)对结直肠癌的疗效。方法回顾性分析51例结直肠癌根治术后行放化疗联合HPS70(Heat Shock Protain70)负载的DC-CIK细胞疗法患者的临床资料,采用1∶1配对的方法 ,以性别、年龄、部位、病理分期、AJCC(1997)中临床分期、术后辅助化疗方案、是否接受术后辅助放疗为指标,在同期行结直肠癌根治术但未行DC-CIK细胞疗法的患者中选择51例作为对照,比较两组患者3年生存率(OS)和3年无病生存率(DFS)。结果 DC-CIK治疗组及对照组3年生存率分别为88.2%和68.6%,两者比较差异具有显著性(P<0.05)。DC-CIK治疗组及对照组3年无病生存率分别为43.1%和27.5%,两者比较差异具有显著性(P<0.05)。结论结直肠癌根治术后放化疗联合DC-CIK细胞疗法,能明显提高患者的远期生存率和无病生存率。

颈椎不稳黄韧带TGFβ1、BMP2表达的实验研究

目的探讨颈椎不稳对于黄韧带中转化生长因子β1(TGFβ1)、骨形态发生蛋白2(BMP2)基因表达的影响及其意义。方法采用逆转录聚合酶联反应技术(RT-PCR)对正常与颈椎不稳定动物模型的黄韧带中不同时间点TGFβ1、BMP2的表达水平进行测量比较。结果在不同时间点,颈椎不稳组黄韧带中TGFβ1、BMP2的基因表达较正常黄韧带组均增高(P<0.01)。结论TGFβ1、BMP2在颈椎不稳大鼠黄韧带的表达在不同时间点有明显变化,这种变化可能在加速黄韧带的退变中起重要作用。

肝脏缺血预处理所致PKC活性改变及细胞内信号转导机制的实验研究

目的研究大鼠肝脏缺血预处理保护效应中蛋白激酶C(PKC)的活性改变及细胞内信号可能的转导机制。方法通过建立大鼠肝脏缺血预处理模型,应用PKC抑制剂、激动剂,检测PKC和P44/42MAPKs磷酸化水平的变化,同时观察光镜下细胞形态学损害。结果与缺血再灌注(IR)组比较,预处理(IP)组和PKC激动剂组的PKC磷酸化水平显著提高(P<001),P44/42MAPKs磷酸化水平、HSP70表达量明显增加,肝细胞结构改变较小。与IP组相比,PKC抑制剂组相应指标呈相反变化,PKC磷酸化水平显著降低(P<001),肝组织细胞结构出现较明显的改变。结论体内缺血预处理保护作用中,PKC的激活对P44/42MAPKs通路激活起重要作用,PKC对P44/42MAPKs起正性调控作用,HSP70表达受P44/42MAPKs的调控。

不同生态因子对谷子蛋白质脂肪含量影响的研究

研究结果表明，在亩施肥０—８０公斤范围内，蛋白质、脂肪合量与氮、磷、钾肥施用量呈正相关，即随着氮磷钾肥施用量的增加而增加，在整个生育期蛋白质，脂肪含量与积温、降雨量、日照时数呈负相关；一定剂量的化学因子；ＥＤＴＡ、锗、β－环糊精拌谷种能提高谷子蛋白质脂肪含量．通过分析还提出了改善谷子品质的途径．

吡格列酮对淀粉样β蛋白片段1-42引起的大鼠海马c-Jun氨基端激酶信号传导通路改变的作用

目的探讨吡格列酮(Pio)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)所致大鼠海马神经细胞损伤保护作用的信号传导机制。方法 SD大鼠左侧脑单次icv给予5μlAβ1-422.0mmol.L-1制备大鼠痴呆模型。65只大鼠随机分为正常对照组、Aβ1-42模型组及Pio20,40和80mg.kg-1组;Pio组大鼠在icv单次给予Aβ1-42前24h先ig给予Pio20,40及80mg.kg-1,每天一次,连续给药7d。Western印迹法检测海马CA1区磷酸化丝裂原激活蛋白激酶激酶4(MKK4)、磷酸化c-Jun氨基端激酶1(JNK1)和磷酸化c-Jun的蛋白表达水平;应用激光共聚焦显微镜观察磷酸化JNK在小胶质细胞表达部位。结果与正常对照组比较,Aβ1-42模型组大鼠icv给予Aβ1-42后,可引起海马CA1区磷酸化的MKK4,JNK1和c-Jun的表达明显增加(P<0.01);与Aβ1-42模型组比较,Pio20,40和80mg.kg-1可剂量依赖性地对抗Aβ1-42引起的磷酸化MKK4,JNK1和c-Jun表达的增加(P<0.01),Pio40mg.kg-1使磷酸化MKK4蛋白与总量MKK4蛋白之比从Aβ1-42模型组的1.02±0.35降低到0.44±0.06,磷酸化JNK1从0.94±0.17降低到0.55±0.05,磷酸化c-Jun从4.64±0.41降低到2.48±0.12(P<0.01)。荧光免疫组织化学双染,激光共聚焦显微镜观察结果显示,磷酸化的JNK主要在小胶质细胞表达。结论 Pio通过抑制小胶质细胞内JNK激酶信号传导通路的活化,对抗Aβ1-42引起的海马神经细胞损伤。

组蛋白H1序列固有无序特性分析

组蛋白H1对于高阶染色质结构的形成和基因表达调控具有重要作用.为了揭示组蛋白H1在染色质结构形成中的生物学机制,本文对组蛋白H1三个结构域C-terminal domain(CTD)、N-terminal domain(NTD)和Globular domain(GD)及各区域连接位点对应序列氨基酸偏好、复杂度等序列特征进行了系统对比研究,并对各区域进行了固有无序蛋白有序区/无序区预测分析.结果表明,组蛋白H1三个结构中,中间的球状结构域(GD)中的氨基酸序列是非常保守的,NTD富含疏水氨基酸,CTD末端富含碱性氨基酸.进一步的研究表明,CTD和NTD两个结构域普遍具有固有无序特性,因此这些区域具有较大的柔性结构,对其在染色质形成中行使的重要生物学功能具有重要意义.

膜技术在乳清粉综合利用中的应用

提出了用超滤膜、电渗析膜、反渗透膜技术分离乳清蛋白,提纯乳糖的新工艺。采用超滤膜分离大分子乳清蛋白,用电渗析膜分离法除去乳糖中的杂质离子,用反渗透膜除去大量水分。分离后的产物,经浓缩、干燥得到乳清浓缩蛋白(WPC)及高纯度的乳糖,试验取得了比较满意的结果。与现行工艺相比,污染少、能耗底、收率提高,使生产成本显著下降,该工艺具有良好的开发前景。

血管紧张素Ⅱ1型受体基因rs3772622位点多态性与非酒精性脂肪性肝病发病风险的相关性分析

目的探究血管紧张素Ⅱ1型受体（AGTR1）rs3772622位点多态性与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的关系及该位点与patatin样磷酯酶域（PNPLA3）rs738409位点多态性的交互作用。方法选取2013年9月-2014年9月青岛市市立医院经临床B超诊断为NAFLD的患者241例及正常对照人群205例,采用PCR及基因型检测方法对AGTR1 rs3772622位点和PNPLA3 rs738409位点进行检测。运用统计学方法检测两位点等位基因频率、基因型频率及各项临床数据资料生化结果。计量资料行独立样本t检验,计数资料行χ2检验。通过二元Logistic回归分析AGTR1 rs3772622及PNPLA3 rs738409突变基因型罹患NAFLD的风险,使用广义多因子降维法（GMDR）研究两位点之间的交互作用。结果 AGTR1 rs3772622位点基因型及等位基因在NAFLD组与对照组中的分布频率差异无统计学意义（P〉0.05）。相对于野生型,AGTR1 rs3772622位点突变型并未增加NAFLD的发病风险（P〉0.05）,PNPLA3 rs738409突变型人群患NAFLD的风险是野生型的2.09倍[OR=2.09,95%可信区间（95%CI）：1.35~3.23,P=0.001]。AGTR1 rs3772622位点与PNPLA3 rs738409位点联合作用使NAFLD的发病风险明显增加（OR=3.60,95%CI：1.50~6.23,P〈0.001）。两突变基因双携带者与PNPLA3 rs738409单突变基因携带者生化指标的比较发现ALT、AST在两组间差异有统计学意义（P值均〈0.05）。结论中国人群中AGTR1 rs3772622位点多态性对NAFLD的发生发展无关。但其位点突变可增加PNPLA3rs738409位点突变患者罹患NAFLD的风险。

玉米蛋白生物活性肽的研发与利用

玉米蛋白含有丰富的蛋白质和独特的氨基酸,通过微生物发酵可得到大量的生物活性肽;介绍了微生物发酵制取玉米肽的方法、特点及其活性肽的生理功能和其利用;利用低价值的玉米蛋白发酵生产高附加值的生物活性肽,具有原料来源丰富、成本低、安全性好等特点,可以充分利用玉米资源,大大提高玉米加工企业的经济效益和社会效益,应用前景十分广阔。

猪抵抗素(resistin)ELISA检测方法的建立

用纯化的可溶性重组resistin蛋白免疫健康家兔,制备抗血清,优化ELISA各反应条件(如工作浓度、温育时间、特异性试验),初步建立了检测猪resistin蛋白的间接ELISA方法。结果表明抗原、抗体最佳工作浓度为1∶200和1∶400,resistin最低检出限量为193.75 ng/ml;抗原和一抗、一抗和二抗的最适温育时间均为60 min。本试验建立的ELISA方法,具有灵敏度较高,特异性较好的特点,可作为猪组织和血清中resistin蛋白的检测方法。

重组人骨形成蛋白-2和珊瑚复合移植的动物实验研究

目的 :评价重组人骨形成蛋白 - 2 ( rh BMP- 2 ) /珊瑚复合人工骨的骨诱导活性和骨修复能力。 方法 :rh BMP- 2和珊瑚以一定的方式复合后 ,植入小鼠股部肌袋和兔颅骨标准大小缺损 ,以单纯珊瑚植入作对照。术后不同时间取材 ,通过组织学方法检测其骨诱导活性和骨修复能力。 结果 :复合人工骨植入小鼠肌袋 1周诱导软骨形成 ;3周形成编织骨 ;6周形成含骨髓的板层骨 ,同时珊瑚被部分降解吸收 ;复合人工骨植入兔颅骨缺损后 ,以引导成骨和诱导成骨双重机理完成骨修复过程。术后 12周 ,植入物完全被成熟的骨组织取代 ,其骨修复效果明显优于单纯的珊瑚。 结论 :此复合人工骨具有骨传导和骨诱导活性 ,骨修复能力较强 。

大豆蛋白纤维氨纶包芯纱高弹针织物的开发

测试了原料和产品的性能 ,制定了产品方案 ,对纺织各工序主要工艺参数进行了探讨。

心力衰竭、β-肾上腺素受体与运动

心力衰竭已成为全世界范围内发病率和死亡率升高的主要原因之一。心力衰竭患者的心肌中发生了一系列分子水平的改变,其中最显著的是在β-肾上腺素受体(β-AR)信号级联中的改变。β-肾上腺素受体是属于G蛋白偶联受体(GPCRs)大家族中的一种,它通过控制肌肉收缩力以及对儿茶酚胺变时性的应答来调整心脏功能。在预防和治疗心力衰竭的方法中,适量的有氧运动可以对患者起到积极的作用。

绿豆籽粒干物质 蛋白质及淀粉积累规律研究

绿豆籽粒干物质、蛋白质和淀粉含量是绿豆产量和品质的重要指标。选用不同熟期的5个绿豆品种(早熟品种3个,中熟品种2个),研究了其籽粒干物质、粗蛋白质和粗淀粉的积累规律。结果表明:花后5～11 d为绿豆豆荚荚长、荚宽和荚厚的快速增长期,之后荚长无明显变化,荚宽和荚厚缓慢减小,花后20～23 d时荚果成熟。花后5～11 d是绿豆鲜荚重和荚皮鲜重的快速增长期,而籽粒鲜重和籽粒干重的快速增长期为花后11～17 d,花后17 d以后籽粒鲜重快速下降而干重无显著变化。花后10～14 d是籽粒粗蛋白质和粗淀粉急剧变化期,粗蛋白质含量快速下降,而粗淀粉含量快速上升;花后14～18 d为缓慢变化期;花后18 d以后粗蛋白质和粗淀粉含量基本稳定。综上所述,花后10～18 d是绿豆籽粒产量及品质形成的关键时期,合理有效的田间管理将有助于提高绿豆产量、改善营养品质和籽粒大小。

血清C反应蛋白浓度与急性冠脉综合征临床类型关系的探讨

目的探讨C反应蛋白 (CRP)与急性冠脉综合征 (ACS)临床类型的关系。方法测定 46例ACS患者和 2 5例正常对照者CRP浓度。ACS组患者分为无ST段抬高组和Q波心肌梗塞组 ,各 2 3例。比较无ST段抬高组及Q波心肌梗塞组之间CRP浓度的差异。结果无ST段抬高组 ,Q波心肌梗塞组CRP水平明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ;Q波心肌梗塞组CRP明显高于无ST段抬高组 (P <0 0 5 )。结论CRP水平与ACS临床过程的严重性显著相关 。

窒息新生儿血清蛋白的变化及意义

目的 探讨窒息新生儿血清总蛋白 (STP)、白蛋白 (ALB)、球蛋白 (GLO)及前白蛋白 (PA)的变化 ,并借此了解窒息对肝细胞有无损伤及其程度。方法 4 1例窒息新生儿 ,其中轻度窒息组 2 1例和重度窒息组 2 0例 ,同期足月正常新生儿10例为对照组 ,收集其静脉血 ,检测血清STP、ALB、GLO及PA的含量。结果 与对照组相比 ,轻度窒息组血清STP和GLO含量不降低 (P >0 .0 5 ) ,而ALB及PA含量显著降低 ,差异有显著意义 (P <0 .0 1) ;与轻度窒息组和正常组相比较 ,重度窒息组血清STP、ALB、GLO及PA含量显著降低 ,差异有显著意义 (P <0 .0 1或P <0 .0 2 )。结论 新生儿窒息后肝功能可受到不同程度的损伤 ,与窒息程度密切相关 ;测定血清蛋白的含量可以作为反映肝细胞损伤的指标 ,尤以ALB及PA灵敏。

大豆蛋白纤维纱与棉/涤纱交织色织物的生产

介绍了经纱为棉/涤(60 /40)纱,纬纱为14. 5tex大豆蛋白纤维纱的色织物生产技术。着重讨论了大豆蛋白纤维的纺纱工艺、染色工艺及织造工艺关键措施。