人IA-2基因的部分区段克隆表达及其在1型糖尿病诊断中的应用价值评估

目的:构建人IA-2基因不同区段原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,并初步验证其在1型糖尿病蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体检测中的价值。方法:用RT-PCR方法调取目的基因,构建相应的原核表达质粒,转化大肠杆菌HB101,诱导表达获得纯化重组蛋白;以重组蛋白为包被抗原,初步建立检测蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体的ELISA方法,评价各片段在1型糖尿病诊断中的价值。结果:获得了2种可被1型糖尿病患者血清识别的重组人蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区段IA-2(601～979)和IA-2(683～979),检测敏感性和特异性相当,但IA-2(683～979)检测的阳性D450nm值明显高于IA-2(601～979),成为首选的抗原区段。结论:所选重组人IA-2(683～979)抗原区段具有良好的抗原性,可作为1型糖尿病患者辅助诊断试剂的候选抗原。

继发性磺脲类药物失效患者IA-2抗体与胰岛β细胞功能关系分析

目的:探讨IA-2抗体对继发性磺脲类药物失效的患者早期诊断和干预的作用。方法:测定173例继发性磺脲类药物失效的2型糖尿病患者的酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2抗体),测定空腹及餐后胰岛素和C肽水平,评估胰岛β细胞功能。结果:体质指数、谷氨酸脱羧酶抗体(GAD抗体)浓度,胰岛素抵抗指数及糖负荷后30min胰岛素曲线下面积等指标在IA-2抗体阳性组与阴性组之间差异有统计学意义。结论:在糖尿病患者中早期测定IA-2、GAD等相关抗体对诊断分型,早期采用保护残存胰岛β细胞功能的治疗方法和对其预后的判定有重要意义。

胰岛自身抗体联合检测在不同病程I型糖尿病中的阳性率

目的 观察不同病程I型糖尿病患者中血清胰岛细胞抗体（ICA）、谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）和酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）的阳性率，探讨胰岛自身抗体在本病发病机制和诊断中的作用。方法取41例病程≤5年和30例病程≥10年的I型糖尿病患者血清，用酶联免疫吸附法（ELISA）定性测定ICA，放射免疫一步法（RIA）定量测定GADA，免疫沉淀法（IP）定量测定IA-2A。结果ICA 、GADA 和IA-2A的阳性率分别为21.1％、39.4％和38.0％。三种抗体联合，阳性检出率为67.6％，其中GADA和/或IA-2A阳性者占62.0％。病程≤5年组GADA阳性率为51.2％，显著高于病程≥10年组（23.3％）（P< 0.01），而ICA 和IA-2A的阳性率及三种抗体的阳性种类数在两组差异均无显著性。71例患者中ICA阳性组有病毒感染史者显著高于ICA阴性组，但三种抗体均阴性者和至少一种抗体阳性者在发病年龄、体重指数、性别比例及有无糖尿病家族史、病毒感染史和其它自身免疫病等方面差异均无显著性。结论I型糖尿病患者血清胰岛自身抗体联合检测可获得较高的阳性率，对临床特点不典型患者的诊断有较大意义。GADA在短病程患者中的阳性率显著高于长病程患者，而ICA和IA-2A的阳性率与病程无关。全身性自身免疫倾向可能与胰岛自身抗体持续阳性有关，但不是其唯一原因?