血清miR-203和壳多糖酶3样蛋白1联合检测对肝显著纤维化/肝硬化的诊断价值

目的探讨微小RNA(miR)-203和血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)单独及联合诊断肝显著纤维化/肝硬化的价值。方法将该院2022年1月至2022年12月住院的慢性乙型肝炎(CHB)患者80例纳入研究,同时选取体检健康者40例作为健康对照组。根据组织检查结果将纳入研究的CHB患者分为无/轻度纤维化组(50例)和肝显著纤维化/肝硬化组(30例)。检测各组血清miR-203和CHI3L1水平,肝纤维化4项[Ⅲ型前胶原(P-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)、层粘连蛋白(LN),透明质酸酶(HA)]和生化指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)],计算天门冬氨酸氨基转移酶-血小板比值指数(APRI)、肝纤维化指数(FIB-4)。用非参数秩和检验进行组间各项指标的比较。用Spearman相关进行miR-203和CHI3L1与肝纤维化指标的相关性分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-203和CHI3L1单独和联合对肝显著纤维化/肝硬化的诊断效能。结果miR-203与C-Ⅳ、HA、FIB-4、ALT呈负相关(r=-0.282、-0.318、-0.238、-0.224,P<0.05),与血小板计数(PLT)呈正相关(r=0.298,P<0.05)。CHI3L1与C-Ⅳ、HA、LN、FIB-4、APRI、ALT呈正相关(r=0.296、0.467、0.254、0.284、0.300、0.316,P<0.05),与PLT呈负相关(r=-0.506,P<0.05)。ROC曲线显示miR-203预测肝显著纤维化/肝硬化发生的曲线下面积(AUC)为0.820,CHI3L1预测疾病的AUC为0.873,均优于APRI和FIB-4(P<0.05),两者联合诊断的AUC为0.895;抗病毒治疗后miR-203和CHI3L1水平与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清miR-203和CHI3LI的检测可用于肝显著纤维化/肝硬化诊断和抗病毒疗效的评价,两者联合应用可提高诊断效能。

糖含量对大豆蛋白起泡性的影响

采用美拉德反应协同β-淀粉酶定向断裂共聚糖链,获得具有不同糖含量的大豆蛋白(SPI),分析糖含量对SPI起泡性及其相关特性的调控作用。通过美拉德反应制备糖基化产物,随后利用β-淀粉酶对糖基化大豆蛋白的侧链糖基进行水解,得到糖含量分别为8.10,4.88,2.21 g/100 g大豆蛋白的糖基化修饰产物,并对其起泡性及相关特性分析。SDS-PAGE电泳图谱证实SPI与麦芽糊精发生糖基化反应。内源荧光光谱分析结果表明,糖基化产物的三级结构变得更加疏松;美拉德反应提高了SPI(pH 7.0)的起泡性及泡沫稳定性,即:起泡性从83.48%提高到132.63%,泡沫稳定性从57.95%提高到71.56%。糖含量的变化对SPI的起泡性影响显著,随糖含量的增加,起泡性逐渐增大;而(4.88~8.10 g/100 g大豆蛋白)对SPI的泡沫稳定性影响不显著。随着糖含量的下降,糖基化产物的水合粒径、Zeta电位的绝对值、溶解性逐渐减小,表观黏度逐渐降低。研究结果为定向开发特定功能的大豆蛋白提供理论参考。

饲料能量和维生素B_6对乌鳢生长和蛋白质代谢酶活性的影响

选择体质量(10.92±0.42)g的健康乌鳢Channa argus为试验鱼。试验一设计3个蛋白质水平和三个能量水平的9种试验饲料;试验二设计3个蛋白质水平和3个维生素B6水平的9种试验饲料,探讨饲料能量和维生素B6分别与蛋白质的交互作用对乌鳢生长和蛋白质代谢酶活性的影响。结果表明:试验1:在相同饲料能量水平下,鱼体增重随能量水平升高而升高,各器官蛋白酶比活力亦显著提高(P<0.05)。在相同饲料蛋白质水平下,鱼体增重先随饲料能量水平从14.5 MJ/kg上升到16 MJ/kg而升高,随能量水平再升高而降低。饲料蛋白质水平和能量水平都极显著地影响肝脏中GPT的活力(P<0.01),饲料能量水平显著影响肝脏中LDH的活力以及肌肉中LDH和GPT的活力(P<0.05)。蛋能比极显著影响肝脏中GPT的活力(P<0.01)。试验2:乌鳢的生长随着饲料蛋白质水平的增加呈先升高后稳定的趋势,胃、肠和肝脏蛋白酶比活力和肝脏和肌肉中GPT的活力都受到显著地影响(P<0.05),肝脏和肌肉中LDH的活力受到极显著地影响(P<0.01)。随着维生素B6的添加,生长显著增加(P<0.05),胃和肝脏蛋白酶比活力极显著增加(P<0.01)。在同一维生素B6水平下,各器官蛋白酶比活力随着饲料蛋白质水平的升高而显著提高(P<0.05),肝脏和肌肉中GPT和肌肉中LDH的活力亦受到极显著地影响(P<0.01),肝脏LDH的活力亦受到显著地影响(P<0.05)。在该试验条件下,适宜蛋能比(23.3 g/MJ)能够提高乌鳢对蛋白代谢酶活力,促进蛋白质代谢,进而促进生长;随着饲料蛋白质含量的增加,适量添加维生素B6(18～30 mg/kg)可促进乌鳢对饲料的利用率,增强蛋白代谢酶的活力,促进蛋白质代谢,进而促进生长。

贵州不同海拔高度及播种期对大豆子粒化学成份的影响——Ⅰ.大豆子粒蛋白质和脂肪含量

在贵州省内不同海拔高度的4个地点分4个播期研究了海拔高度和播期对大豆子粒蛋白质和脂肪含量的影响。结果表明,不同地理海拔高度的地点间蛋白质和脂肪含量存在着显著的差异:脂肪含量除最低海拔点(镇远)略低于较低海拔点(贵阳)之外,基本趋势是随海拔高度增高而下降;地点间蛋白质含量虽存在显著的差异,但未发现与海拔高度呈规律率性变化。播期对蛋白质和脂肪含量基本无显著的影响,表明本试验所设的4个播期无显著的提高或降低蛋白质和脂肪含量的作用。

儿茶素单体对心肌细胞缺氧再给氧损伤的保护作用及机制研究

目的:观察没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧再给氧损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法:建立体外培养大鼠心肌细胞缺氧再给氧损伤模型,倒置显微镜下观察加入各儿茶素单体(50,20,8μg·mL-1)后,各组缺氧再给氧前后细胞形态学和搏动频率变化;以MTT法检测各组细胞的存活率;测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;测定心肌细胞膜ATP酶;分别给予蛋白激酶(PKC)阻断剂十字孢碱staurosporine(stau,10nmol·L-1)和Gi/o蛋白失活剂pertussis toxin(PTX,200μg·mL-1),以探讨其作用机制。结果:GCG,EGCG均能够增加心肌细胞存活率,增加SOD和ATP酶活性,降低心肌细胞LDH的释放,降低培养液中MDA的含量,给予PKC阻断剂和Gi/o蛋白失活剂后,与单纯GCG组、EGCG组比较,心肌细胞搏动频率和存活率降低,同时LDH,MDA释放量增加,SOD活性下降。结论:GCG和EGCG具有抗体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧再给氧损伤的作用,其机制可能与其清除自由基、抑制心肌细胞Ca2+超载以及心肌细胞蛋白激酶C和G蛋白的介导有关。

系统性红斑狼疮1000例临床研究

本文对1962年至1992年诊治的1000例系统性红斑狼疮患者的临床资料进行分析。探讨了本病常见的诱发因素、临床表现、早期诊断及治疗与预后的关系。资料表明,32.6%的患者查无明显诱因,病情极易复发,伴严重内脏损害,预后不佳。在临床中,蛋白丢失性肠病的发生率为11.2%,应予以重视。患者3年、5年、10年、20年和30年的生存率分别为95.9%、93.5%、87.6%、66.6%和60.9%。近十年来,采用定期免疫学监测、中西医结合治疗、纤溶联合疗法治疗难治性狼疮肾炎等措施,使本病预后得以明显改善。

血清C-反应蛋白与冠状动脉病变

目的 探讨冠状动脉病变患者血清C-反应蛋白水平及其与冠状动脉病变严重程度的关系。方法 采用免疫浊度法测定冠状动脉造影证实的A型冠状动脉病变患者血清C-反应蛋白(CRP),与年龄和性别相匹配的冠状动脉造影证实的非冠状动脉病变患者进行比较。冠状动脉病变程度采用Gensini积分,将冠状动脉病变患者血清CRP与Gensini积分进行相关分析。结果 冠状动脉病变患者血清CRP明显升高,CRP与冠状动脉病变Gensini积分明显相关(r=0.637,P<0.01)。结论冠状动脉病变患者血清CRP明显升高,CRP水平可反映冠状动脉病变的严重程度。因此血清CRP可作为冠状动脉病变程度的参考指标之一。

反相高效液相色谱法分离蛋白质的研究

采用反相高效液相色谱法考察了几种大孔硅胶烷基键合固定相在等度淋洗条件下进行蛋白质分离的色谱性能。研究了冲洗剂中有机溶剂异丙醇的浓度、离子对酸（ＴＦＡ）浓度对蛋白质保留时间的影响。探讨了蛋白质在ＲＰ－ＨＰＬＣ中的保留机理。结果表明，大孔硅胶（２０～３０ｎｍ）短链（Ｃ４和Ｃ８）烷基键合固定相适合蛋白质的分离。

丙型肝炎病毒E2蛋白结合蛋白的酵母双杂交筛选研究

HCV的包膜蛋白E2 (E2 )的生物学特性与HCV感染的慢性化和抗病毒免疫关系极为密切。为了进一步阐明这个多功能蛋白质与宿主蛋白的关系 ,采用酵母双杂交系统 3,在酵母细胞融合蛋白表达型人肝cDNA文库中进行筛选 ,得到 76个与E2特异性结合的阳性克隆 ,包括人类肝细胞癌相关抗原、硒结合蛋白、核苷传送系统、果糖磷酸激酶等 2 6种已知功能蛋白质基因和 14个未知功能基因。本研究结果为阐明E2在HCV致病中的作用提供了重要研究线索。

结缔组织疾病患儿血沉、C—反应蛋白与铜兰蛋白、触珠蛋白的相关性探讨

目的 :探讨风湿热和幼年性类风湿性关节炎患儿血沉、C—反应蛋白与铜兰蛋白、触珠蛋白的关系及意义。方法 :采用免疫散射比浊法检测C—反应蛋白、铜兰蛋白、触珠蛋白 ,和血沉分析仪检测血沉 ,并与对照组 2 5例健康儿对比。结果 :结缔组织疾病患儿血沉、C—反应蛋白与铜兰蛋白、触珠蛋白均有不同程度的升高 ,2 5例健康儿童的检测结果均在正常范围之内 ,并且所有实验数据以均值±标准差 (x±s)表示 ,T检验作组间差异显著性检验 (P <0 .0 1)。用直线回归及其系数的显著性检验作相关分析 ,铜兰蛋白、触珠蛋白的水平与血沉、C—反应蛋白呈正相关 (P <0 .0 1)。结论 :在结缔组织疾病患儿中铜兰蛋白、触珠蛋白的测定与血沉、C—反应蛋白的作用相仿。

表皮型脂肪酸结合蛋白和脂肪酸合成酶在乳腺浸润性导管癌的表达及临床病理意义

目的探讨脂肪酸结合蛋白和脂肪酸合成酶与乳腺浸润性导管癌发生发展的关系及作用机制,以探询新的分子标志和早期分子治疗的靶基因。方法用半定量逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学和Westernblot等方法检测表皮型脂肪酸结合蛋白(E-FABP)和脂肪酸合成酶(FAS)在76例浸润性乳腺导管癌中的表达变化。结果E-FABP广泛分布于浸润性导管癌的血管内皮细胞、导管和腺泡的上皮细胞,mRNA和蛋白质的表达量在III级浸润性导管癌的较I、II级明显下调(P<0.05)。FAS主要分布于腺泡和导管的上皮细胞,表达量随组织学级数的变化趋势与E-FABP相同,两者的表达具有明显相关性(P<0.05)。此外,E-FABP和FAS的表达与及组织学级数相关(P<0.05),与绝经情况、淋巴结转移、雌激素受体和孕激素受体无关(P>0.05)。结论在I、II级浸润性导管癌,E-FABP可能作为FAS的下游分子,结合和转运FAS合成的长链脂肪酸,以维持肿瘤细胞旺盛的代谢;在III级导管癌,E-FABP、FAS的表达明显下调,癌细胞的活动可能有赖于其他信号分子起作用。本研究为进一步探寻浸润性乳腺导管癌的分子标志及早期治疗途径提供理论依据。

阿魏酸钠对老年大鼠学习记忆能力改善作用及机制

阿尔采末病（AD）是一种慢性原发、进行性脑变性病,病因复杂,发病机制尚不清楚,但有研究表明,AD患者认知功能下降与突触素（SYP）的丢失存在相关性。另有研究表明,神经生长因子（NGF）可促进海马内突触的重建来提高SYP的表达从而改善AD大鼠的学习记忆能力[1]。

金黄色葡萄球菌的蛋白A基因多态性分型

目的建立金黄色葡萄球菌的蛋白A基因(spa)多态性分型方法,并初步测定了结核患者鼻腔定植的金黄色葡萄球菌的spa基因型。方法采用PCR方法扩增10株金黄色葡萄球菌spa基因的X区,测序后通过数据库(http://www.ridom.de/spaserver/)进行分型,并与脉冲场凝胶电泳(PFGE)结果相比较。结果5例患者抗结核治疗前后前鼻腔定植的金黄色葡萄球菌spa分型相同,结果与PFGE一致。5例患者定植的金黄色葡萄球菌spa型分别为:t795、t179、t189、t758和t796,其中t795、t758和t796为新发现的型。结论spa分型是一个较好的金黄色葡萄球菌快速基因分型方法。

奶牛体况与胎次、泌乳阶段和生产性能的关系

奶牛体况评分是指可根据奶牛身体各部位综合得分来衡量牛的膘情,并用于管理奶牛营养和健康的一种重要方法。某代表性奶牛场泌乳期奶牛的体况评分结果表明,奶牛体况与乳蛋白率、305d估计产奶量呈极显著正相关(P<0.01);第3胎次奶牛体况最好,极显著优于其它胎次(P<0.01);泌乳后期奶牛体况极显著优于其它泌乳阶段(P<0.01);奶牛体况与体细胞分之间显著正相关(P<0.05)。根据奶牛体况评分结果可预测牛奶产量和品质。生产中应通过加强营养和改善饲养管理条件等措施使奶牛体况处于合理范围,以获得产量和品质俱佳的牛奶。

微滤技术提高黄酒胶体稳定性的探讨

对黄酒酒液及沉淀物进行分析，确定高分子蛋白质在蛋白质沉淀中所起的作用。进而应用０．４５μｍ 微滤膜处理酒液，发现微滤能大量去除形成大颗粒的前驱物质——高分子蛋白质，明显改善黄酒稳定性。

蝇蛆蛋白对大鼠生长发育影响

通过动物实验探讨蝇蛆蛋白对大鼠生长发育的影响,与酪蛋白比较做出评价。以蝇蛆蛋白和酪蛋白为蛋白原并按AOAC建议的配方合成饲料(蛋白含量10%)喂养断乳4周龄Wistar种雄性大鼠30 d。生长实验显示蝇蛆蛋白在对大鼠体重、摄食量及各脏器生长发育和酪蛋白比较均无显著性差异(P>0.05)。蝇蛆蛋白能够促进大鼠的正常生长发育,是一种优质蛋白资源。

基于鸟枪法蛋白质组学和生物信息学技术对肺鳞癌表达蛋白质谱的分析

目的应用高通量蛋白质组学及生物信息学技术分析肺鳞癌表达蛋白质谱,筛选肺癌标志蛋白质,为肺鳞癌发病机制、早期诊断及治疗提供有价值的线索。方法 6例手术后新鲜肺鳞癌组织,通过激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)分离纯化肿瘤细胞并提取可溶性总蛋白;多维液相色谱-离子阱串联质谱技术(也称鸟枪法蛋白质组学,shot gun proteomics)对蛋白质进行分离、鉴定;进一步通过生物信息学工具预测肺鳞癌细胞表达蛋白质的理化性质、分子功能、生物通路及蛋白质相互作用,并筛选潜在的标志蛋白。结果 LCM共收集了60个帽(cap)的感兴趣细胞,平均每个LCM cap捕获感兴趣细胞数约12000个,其同质性大于95%。可溶性总蛋白经多维液相色谱-离子阱串联质谱共鉴定出860个非冗余蛋白质。蛋白质的理化性质包括分子量、等电点、平均疏水性、跨膜结构域、亚细胞定位、转录后修饰和组织分布等经过在线生物信息学工具分析,并通过统计图直观显示;蛋白质生物学功能基于Gene Ontologyc(GO)软件和Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG)生物学通路分析,根据其注解,筛选出3个有价值的蛋白质,即分裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、粘联素A1(annexin A1,ANXA1)、高移动组蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGPB1)可以作为肺鳞癌候选的标志蛋白。结论鸟枪法蛋白质组学可大规模分离、鉴定肿瘤细胞表达蛋白质,基于生物信息学筛选的标志蛋白质可能成为肺癌诊断和治疗的分子靶点。

超敏妊娠相关血浆蛋白-A对急性冠状动脉综合征患者预后的预测价值

目的评估发病早期外周血超敏妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)水平对急性冠状动脉综合征(ACS)患者预后的预测价值。方法筛选明确诊断的ACS患者480例,测定入院首次(发病<12 h)外周血PAPP-A水平,并随访观察第1、6个月和≥12个月时心血管不良事件。根据PAPP-A最高5分位水平,将患者分为高值组(≥26.08μg/L)和低值组(<26.08μg/L),分析PAPP-A水平和心血管不良事件的关系。结果与PAPP-A低值组相比,PAPP-A高值组患者的复合终点事件发生率随着随访时间明显增加,其第1、6个月和≥12个月的OR值分别为4.76、4.38、3.75,差异均有统计学意义(P=0.000);其中PAPP-A高值组患者的心肌梗死(MI)+心因性死亡(CD)事件在第1、6个月和≥12个月的OR值分别为为9.81、6.08、4.12,差异有统计学意义(P<0.01)。多因素Logistic回归分析显示,PAPP-A是ACS患者近期、中期和远期发生心血管不良事件的独立危险因素(P<0.05)。结论发病早期PAPP-A水平升高是ACS患者再发心血管不良事件的独立危险因素。

蛋白质基体对提取测定水产品中氨基甲酸酯类农药残留的影响及其消除

利用乙腈水溶液为提取液,结合高效液相色谱建立了快速测定水产品中氨基甲酸酯类农药残留的方法。实验考察了蛋白质基质、有机溶剂种类、净化剂等因素对氨基甲酸酯类农药提取率的影响。结果表明,水产品中共存的蛋白质基体会影响氨基甲酸酯类农药的提取率。当采用80%的乙腈水溶液作为提取液时,提取液可以使蛋白质发生缓慢且完全的变性,释放与其结合的氨基甲酸酯类农药,从而提高提取效率。而目前广泛应用的Qu ECh ERS样品前处理方法,由于乙腈与无水硫酸镁的共同作用,引起了样品中蛋白质基质快速变性、聚集包埋药物不利于样品中农药残留的提取。80%的乙腈水溶液具有较强的化学极性,因而提取液中与药物残留共存的脂溶性杂质较少。在提取液中加入少量的PSA和C_(18)粉末即可达到满意的净化效果,简化了样品提取液的后续净化步骤。该方法用于水产品中四种常用氨基甲酸酯类农药(速灭威、异丙威、甲萘威与杀虫丹)的检测,相对标准偏差为0.7~2.5%,回收率为71.7%~103.8%,检出限为1.3~37 ng·g^(-1)。

不同负荷运动对大鼠Th1/Th2平衡及脾淋巴细胞PKC活性的影响

目的:探讨运动中淋巴细胞PKC活性对大鼠Th1/Th2平衡的影响。方法:随机将48只大鼠分成不同运动负荷组及对照组,完成相应负荷运动后采集外周血和脾脏,采用ELISA法测试血清IFN-γI、L-4含量,分离并裂解脾脏淋巴细胞获得上清液,采用BCA法定蛋白浓度,通过ELISA分析P-PKC的含量。结果:一次中等负荷运动对Thl/Th2平衡影响不大,一次负重力竭运动后即刻会使IFN-γ和IL-4均下调,超负荷运动10天则使IFN-γ在8h的恢复期内得不到恢复,使Thl/Th2平衡向Th2方向漂移。脾脏淋巴细胞PKC的活性在一次中等负荷运动过程中、后变化不明显,一次负重力竭运动使其活性下降,8h后即可恢复,但经过10天的超负荷运动后恢复8h的PKC活性仍处于较低水平。结论:中等负荷运动对Thl/Th2平衡和PKC活性影响不大1,0天超负荷运动可以使Thl/Th2平衡向Th2方向漂移,可能是脾淋巴细胞PKC活性下降所致。