PCDH10基因在多发性骨髓瘤细胞中的作用

目的探讨PCDH10(protocadherin 10)基因对多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法采用脂质体将pcDNA3.1(+)PCDH10及pcDNA3.1(+)质粒稳定转染入骨髓瘤RPMI-8226细胞,分别为PCDH10转染组、空质粒转染组,未转染组作为对照。采用RT-PCR及Western blot检测转染前后PCDH10基因和蛋白的表达,应用MTT法检测转染前后细胞的增殖能力;应用Transwell小室实验检测转染前后细胞的迁移及侵袭能力;应用Western blot检测增殖、迁移和侵袭相关蛋白表达水平。结果 PCDH10基因转染RPMI-8226细胞后,PCDH10在基因和蛋白水平均呈现高表达。MTT结果显示,PCDH10转染组增殖能力较对照组减弱;Transwell实验结果显示PCDH10能抑制瘤细胞的迁移、侵袭能力,PCDH10转染组迁移、侵袭的细胞数分别为(51.00±2.65)、(51.00±8.00)个,与对照组比较显著减少(P<0.05);Western blot检测结果显示PCDH10基因可下调AKT、p-AKT、cyclinD1和MMP-9的表达(P<0.05)。结论 PCDH10基因可能通过下调PI3K/AKT通路活性而抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226的增殖、迁移和侵袭。

甲基化修饰致PCDH10基因在多发性骨髓瘤中沉默

目的研究PCDH10基因在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者及细胞系KM3、RPMI-8226中的甲基化状态,分析甲基化对其沉默的影响。方法常规骨髓穿刺术获取MM患者骨髓样本,培养骨髓瘤细胞系KM3、RPMI-8226,以增生性骨髓象骨髓样本作为对照。RT-PCR检测其中PCDH10基因表达水平,甲基化特异性PCR(methylation-sensitive PCR,MSP)法检测PCDH10基因甲基化状态,通过5-氮杂-2'-脱氧胞苷和组蛋白去乙酰化酶抑制剂[5-aza-2'-deoxycytidine(Aza)and trichostatin A(TSA),A+T]处理MM细胞系,检测药物处理前后PCDH10甲基化状态及表达水平。结果 PCDH10基因在正常人群中表达,但在MM患者骨髓及细胞系中广泛低表达,且77.27%(34/44)的MM患者PCDH10呈甲基化状态。PCDH10基因可经A+T试验逆转甲基化状态并恢复表达。结论 DNA甲基化可能在多发性骨髓瘤的PCDH10基因沉默中发挥作用,从而参与骨髓瘤的发生。

吡柔比星调控原钙黏蛋白10的表达对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡诱导的作用机制研究

目的探讨吡柔比星(THP)对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法 2014年4月-2019年3月在郴州市第一人民医院实验室进行实验。应用终浓度为0.1mg/L、1mg/L、2.5mg/L、5 mg/L吡柔比星处理多发性骨髓瘤细胞KM3,记为THP 0.1mg/L组、THP 1 mg/L组、THP 2.5mg/L组、THP 5mg/L组;未经任何处理的KM3细胞作空白对照(Con)组;转染pcDNA3.1为pcDNA3.1组,转染pcDNA3.1-PCDH10为pcDNA3.1-PCDH10组,转染si-NC后用1 mg/L的THP处理为THP 1 mg/L+si-NC组,转染si-PCDH10后用1 mg/L的THP处理为THP1 mg/L+si-PCDH10组。MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western-blot法检测蛋白表达。结果不同浓度THP处理后,KM3细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达水平显著降低,p21、Bax、PCDH10蛋白的表达水平显著升高(P <0.05);过表达PCDH10后,KM3细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达水平显著降低,p21、Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05);抑制PCDH10表达后,THP处理的KM3细胞活性显著升高,细胞凋亡率显著降低,Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平显著升高,p21、Bax蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。结论吡柔比星可抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与调控PCDH10表达相关。

PCDH10在舌鳞状细胞癌组织中表达及临床意义

目的探讨PCDH10在舌鳞状细胞癌(TSCC)组织中的表达及临床意义。方法选取2010-03～2013-03在我院行手术治疗且临床资料完整的TSCC患者65例,利用实时荧光定量PCR技术检测TSCC和癌旁组织中PCDH10 m RNA表达,所有患者术后均行随访,随访截止日期2018年3月31日,生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-Rank检验,多因素分析采用Cox比例风险回归模型。结果 TSCC组织中PCDH10 m RNA相对表达量为0. 42±0. 10,癌旁组织则为1. 02±0. 07,差异有统计学意义(t=37. 977,P <0. 001)。TSCC组织中PCDH10 m RNA表达与分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P <0. 05)。随访过程中失访4例,失访率6. 15%,以TSCC组织中PCDH10 m RNA相对表达量的P25值作为界值,将患者分为低表达(n=15)和高表达(n=46),低表达组患者中位生存时间19个月,总生存率20. 00%,高表达组患者中位生存时间45个月,总生存率45. 65%,Log-Rank检验差异有统计学意义(χ~2=11. 096,P=0. 001)。Cox比例风险回归分析结果显示,发生淋巴结转移(HR=0. 303,95%CI 0. 128-0. 716)和PCDH10 m RNA低表达(HR=0. 406,95%CI 0. 178-0. 923)是影响患者生存时间的风险因素。结论 PCDH10在TSCC组织中呈低表达,且与患者预后有关,PCDH10低表达是影响患者预后的风险因素。

胃癌病灶内PCDH10对癌细胞浸润性生长及上皮间质转化的影响

目的:研究胃癌病灶内编码原钙黏蛋白10(PCDH10)对癌细胞浸润性生长及上皮间质转化的影响。方法:选择在攀枝花市中心医院接受手术切除的胃癌患者作为研究对象,手术切除后留取胃癌病灶及癌旁病灶,测定PCDH10基因及上皮间质转化基因的mRNA表达量、蛋白酶及其抑制分子的蛋白含量。结果:胃癌病灶内PCDH10、TIMP1、TIMP2、RASAL2、E-cadherin的mRNA表达量显著低于癌旁病灶,Vav2、Vav3、CatB、MMP9、ZEB1、Twist1、Vimentin的含量显著高于癌旁病灶;PCDH10低表达的胃癌病灶内Vav2、Vav3、CatB、MMP9、ZEB1、Twist1、Vimentin的含量显著高于PCDH10高表达的胃癌病灶,TIMP1、TIMP2、RASAL2、E-cadherin的含量显著低于PCDH10高表达的胃癌病灶。结论:胃癌病灶内PCDH10低表达对癌细胞浸润性生长及上皮间质转化具有促进作用。

胃癌组织原钙黏蛋白10 mRNA表达水平与预后的相关性

背景与目的:编码原钙黏蛋白10(protocadherin-10,PCDH10)的PCDH10基因启动子甲基化与胃癌患者不良预后相关。但PCDH10表达水平与胃癌预后的关系不明确。该研究旨在分析PCDH10表达水平与胃癌预后及临床病理因素间的关系,寻找预测胃癌患者复发及死亡风险的指标。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)方法检测115对胃癌组织与相应癌旁组织PCDH10 m RNA的表达水平,分析PCDH10 m RNA的表达水平与预后及临床病理因素的关系。采用Logistic回归分析建立预测患者5年内复发或死亡风险的模型。结果:PCDH10 m RNA低表达组与非低表达组相比,无进展生存时间(progression-free survival,PFS)与总生存时间(overall survival,OS)显著延长(P值分别为0.046与0.033),淋巴结转移较少(P=0.001),TNM分期较早(P=0.001)。Cox单因素分析发现,Lauren分型、T分期、N分期、M分期及PCDH10 m RNA表达水平与PFS及OS显著相关。包含PCDH10作为参数的Logistic回归模型对胃癌患者术后5年内复发或死亡风险的预测效率与仅包含传统临床病理学参数的Logistic回归模型的预测效率相当。结论:PCDH10低表达胃癌患者淋巴结转移较少,TNM分期较早,预后较好,可以作为预测胃癌患者预后的辅助指标。基于PCDH10表达水平的Logistic回归模型可以在淋巴结转移情况不明时起到辅助判断患者预后的作用。

肝癌患者PCDH10表达与其预后的关系

目的探讨肝癌患者原钙黏蛋白10(PCDH10)表达及与其预后的关系。方法收集62例原发肝癌患者癌组织与癌旁组织标本。采用甲基化特异性聚合酶链反应法对癌组织及癌旁组织PCDH10启动子甲基化进行定性和定量检测,并采用蛋白印迹法检测肝癌、癌旁组织中的PCDH10蛋白表达水平。所有患者均随访3年,记录患者预后,采用COX回归分析影响肝癌预后的因素。结果①癌组织甲基化阳性率高于癌旁组织(P<0.05);②癌组织PCDH10阳性率低于癌旁组织(P<0.05);③不同PCDH10蛋白表达水平肝癌患者肿瘤大小、血清AFP水平、肿瘤TNM分期差异有统计学意义(P<0.05),性别、年龄、分化程度、肿瘤包膜间差异无统计学意义(P>0.05);④PCDH10蛋白阳性者总生存率、无病生存率均高于阴性者(P<0.05);COX回归分析显示:PCDH10蛋白、肿瘤直径<5 cm是影响肝癌预后的保护因素(P<0.05)。结论肝癌患者癌组织出现PCDH10启动子高甲基化、蛋白低表达,与患者预后密切相关。

弥漫大B细胞淋巴瘤组织中PCDH10的表达

目的:探讨原钙黏蛋白10(PCDH10)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测55例DLBCL组织(DLBCL组)和23例炎性增生淋巴结组织(炎性组)中PCDH10的表达,并结合患者临床资料进行分析。结果:DLBCL组PCDH10的阳性表达率为29.1%,低于炎性组(65.2%)(P=0.003)。DLBCL组织中PCDH10的表达与LDH水平、Ki-67、Ann Arbor分期和国际预后评分指数(IPI)均有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、有无骨髓侵犯无关(P>0.05)。DLBCL组织中PCDH10阳性表达率随Ann Arbor分期进展和IPI增加均呈下降趋势(P<0.05)。结论:PCDH10在DLBCL组织中低表达,其低表达与DLBCL的恶性程度及不良预后有关,可为病情和预后评估提供一定的参考。

PCDH10减少多发性骨髓瘤细胞逃避表阿霉素杀伤

目的:探讨原钙黏蛋白10(protocadherin-10,PCDH10)对表阿霉素杀伤多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞的影响及机制。方法:采用脂质体法将PCDH10基因转染入人MM细胞株RPMI8226细胞,RT-PCR和Western blot法检测PCDH10基因和蛋白的表达;CCK-8法检测表阿霉素对RPMI8226细胞的增殖抑制作用,求得半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration,IC50);Transwell法检测表阿霉素和PCDH10对RPMI8226细胞迁移的影响;流式细胞术检测CXC族趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)蛋白表达;Western blot方法检测Ras同源家族成员A(ras homolog gene family member A,Rho A)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白表达情况。结果:PCDH10基因成功转染入RPMI8226细胞,并成功表达;PCDH10转染组表阿霉素IC50为(0.87±0.07)μg/ml,明显低于空质粒转染组(1.27±0.02)μg/ml(F=77.93,P=0.000);PCDH10减少表阿霉素所致的细胞迁移(F=34.943,P=0.000)并抑制CXCR4(F=117.269,P=0.000)、Rho A(F=1 818.250,P=0.000)和MMP-9(F=523.764,P=0.000)蛋白表达。结论:PCDH10一方面可增强MM细胞对表阿霉素的敏感性,另一方面可通过抑制CXCR4、Rho A、MMP-9蛋白的表达来减少MM细胞逃避表阿霉素的杀伤,从而增强了表阿霉素的抗骨髓瘤效应。

人肝癌细胞株HepG2中原钙粘附蛋白10基因异常甲基化及其与HBx蛋白的关系

目的研究原钙粘附蛋白10(PCDH10)启动子在人肝癌细胞株HepG2中的甲基化状态及与HBx调控的相关性。方法用逆转录PCR(RT-PCR)和甲基化特异性聚合酶链反应(MSP),检测去甲基化药物5-氮-2'-脱氧胞苷(Aza)联合组蛋白乙酰化酶抑制剂TSA(trichostatin A)处理前后,HepG2细胞中PCDH10基因的表达及启动子甲基化水平;用亚硫酸氢盐测序PCR(BSP)定位检测发生甲基化的CG位点。用MSP检测表达HBx基因的重组腺病毒感染HepG2细胞后PCDH10基因的表达及甲基化水平。结果 PCDH10基因在HepG2细胞株中表达沉默,其启动子发生明显甲基化,Aza可以部分去除PCDH10甲基化从而上调其mRNA表达水平。但HBx蛋白表达不影响HepG2细胞中PCDH10的甲基化程度。结论 PCDH10启动子异常甲基化使HepG2细胞内转录沉默,但其甲基化状态与HBx蛋白表达无关。

原钙黏蛋白10通过NF-κB/cyclin D1信号通路抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖

目的:探讨原钙黏蛋白10(PCDH10)对人乳腺癌细胞的增殖抑制作用及机制。方法:采用RTPCR法检测4种人乳腺癌细胞和正常乳腺上皮MCF-10A细胞中PCDH10的mRNA表达;将PCDH10慢病毒表达载体(pLV-PCDH10)感染MDA-MB-231细胞,建立稳定表达PCDH10的细胞系,同时设置空白对照(blank)和阴性对照(pLV-NC)细胞;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和集落形成实验检测细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、核因子κB p65亚基(NF-κB p65)和NF-κB抑制蛋白α(IκBα)蛋白表达。结果:人乳腺癌细胞中PCDH10的mRNA水平表达均低于正常乳腺上皮MCF-10A细胞(P<0.05)。经RT-PCR与Western blot验证,稳定过表达PCDH10的人乳腺癌MDA-MB-231细胞构建成功;与pLV-NC组相比,过表达PCDH10可显著抑制细胞增殖(P<0.05),诱导细胞发生G1期阻滞;Western blot结果表明,同pLV-NC组比较,过表达PCDH10可显著下调cyclin D1和CDK4蛋白表达,降低NF-κB p65和IκBα蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。结论:PCDH10可抑制乳腺癌细胞增殖,阻滞细胞周期进程,其机制可能与NF-κB/cyclin D1信号通路有关。

5-氮杂-2’-脱氧胞苷通过反转原钙黏蛋白10表达抑制人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的侵袭和迁移

目的探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)诱导抑癌基因原钙黏蛋白10(PCDH10)重新表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外侵袭迁移能力的影响并初步探讨其机制。方法体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231,设置对照组和5-Aza-CdR药物处理组,分别采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PCDH10 mRNA的表达水平;Transwell法和划痕实验检测细胞的侵袭迁移能力;Western blotting检测PCDH10、DNA甲基转移酶(DNMT) 3A、DNMT3B、核因子(NF)-κB p65和基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达的变化。结果 5-Aza-CdR能够反转PCDH10的mRNA和蛋白表达;PCDH10表达恢复后MDA-MB-231细胞的侵袭迁移能力受到抑制;Western blotting检测发现,MDA-MB-231细胞经5-Aza-CdR处理后DNMT3A、DNMT3B、NF-κB p65、MMP-2和MMP-9的表达下调。结论 5-Aza-CdR可抑制MDA-MB-231细胞DNMT3A和DNMT3B的表达,使抑癌基因PCDH10表达恢复,从而通过阻滞NF-κB p65的活化,下调MMP-2和MMP-9表达而抑制乳腺癌细胞的侵袭转移。

原钙黏蛋白10对胃癌顺铂化疗敏感性的影响及作用机制初探

目的探究原钙黏蛋白10(PCDH10)对顺铂化疗敏感的影响及机制。方法将pcDNA3.1+PCDH10质粒、pcDNA3.1+空质粒分别转染至对数期人胃癌BGC823细胞株,分别作为转染组和空载组,未做处理的细胞作为空白组,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PCDH10 mRNA的相对表达量,蛋白质印记法(Western blot)检测PCDH10蛋白的相对表达量,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,划痕试验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力。取转染组、空载组及空白组细胞加入不同浓度的顺铂溶液,比较各组细胞存活率及顺铂对细胞的半数抑制浓度(IC50);取转染组、空白组细胞加入IC50浓度的顺铂溶液,分别作为转染+顺铂组、顺铂组,比较转染组、空白组、转染+顺铂组、顺铂组细胞磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(MTOR)、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6)基因及蛋白的相对表达量。结果转染组细胞PCDH10 mRNA及PCDH10蛋白的相对表达量,均高于空载组和空白组细胞(P﹤0.05)。将稳定转染的各组细胞重新接种,转染组细胞培养24、48、72 h时OD值及培养24 h细胞迁移率和穿膜细胞数均低于空载组和空白组细胞(P﹤0.05)。顺铂浓度分别为0.500、1.000、2.000、4.000、8.000μg/ml时,转染组细胞存活率、顺铂对细胞的IC50值均低于空载组和空白组细胞(P﹤0.05)。转染组、顺铂组、转染+顺铂组细胞PI3K、MTOR、p70S6 mRNA和PI3K、MTOR、p70S6蛋白的相对表达量均低于空白组细胞(P﹤0.05),磷酸化蛋白激酶B(pAKT)/AKT低于空白组细胞(P﹤0.05),转染+顺铂组细胞PI3K、MTOR、p70S6 mRNA和PI3K、MTOR、p70S6蛋白的相对表达量均低于空白组细胞(P﹤0.05),pAKT/AKT低于转染组和顺铂组细胞(P﹤0.05)。结论PCDH10过表达可抑制人胃癌BGC823细胞的增殖、迁移、侵袭能力,并可增强细胞顺铂化疗敏感性,其作用机制可能与下调PI3K、MTOR、p70S6 mRNA及PI3K、MTOR、p70S6蛋白表达、抑制AKT磷酸化相关。

PCDH10在非小细胞肺癌中的表达及PCDH10过表达对A549细胞功能的影响

目的:探讨原钙黏蛋白10(protocadherin 10,PCDH10)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达情况,并探讨其在NSCLC细胞中的生物学功能及可能的分子作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测PCDH10及Ki67 mRNA在NSCLC及相应癌旁组织中的表达水平,并分析其表达与临床病理特征及预后之间的关系。采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.1(+)-PCDH10及空载体pcDNA3.1(+)转入肺腺癌A549细胞;然后,采用IncuCyte S3活细胞动态与分析系统检测细胞的增殖能力,FCM法检测细胞周期与凋亡水平,Transwell小室法检测细胞的迁移及侵袭能力。最后,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Bcl-2、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、cyclinE、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及Slug mRNA和蛋白的表达水平。结果:PCDH10 mRNA在NSCLC组织中的表达水平明显低于其在癌旁组织中的表达水平(P <0.001);PCDH10 mRNA的表达与NSCLC的T分期、淋巴结转移、TNM分期及Ki67 mRNA表达负相关(P值均<0.001),与患者预后正相关(P <0.001)。PCDH10过表达可通过诱导A549细胞发生G1期阻滞及促进细胞凋亡,抑制细胞的增殖(P值均<0.05),并能抑制A549细胞的迁移及侵袭能力(P值均<0.01);PCDH10过表达A549细胞中PCNA、Bcl-2、cyclin D1、cyclin E、CDK4和Slug mRNA及蛋白的表达水平均较空载体对照组明显下调(P值均<0.05),仅有E-cadherin mRNA及蛋白的表达水平明显上调(P值均<0.01)。结论:PCDH10在NSCLC组织中低表达,PCDH10过表达可抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。

皮肤癌中原钙黏蛋白10基因启动子甲基化水平及意义

目的探讨皮肤癌组织中原钙黏蛋白10(protocadherin 10,PCDH10)基因的甲基化水平及临床意义。方法取67例皮肤鳞状细胞癌、85例皮肤基底细胞癌患者手术切除癌组织和癌旁正常组织标本,43例光化性角化病患者活检病变组织及正常组织标本,提取DNA进行甲基化修饰。高分辨率熔解曲线法检测各浓度标准品荧光信号强度,运用软件分析得到甲基化分型图谱,判断样本曲线在标准曲线上的位置,获得样本甲基化程度的数据。结果鳞状细胞癌、基底细胞癌组织中PCDH10基因启动子高甲基化比率(89.6%、87.1%)均高于癌旁组织(11.9%、8.2%)(P<0.05);光化性角化病病变组织PCDH10基因启动子高甲基化比率(51.2%)高于癌旁正常组织(9.3%)(P<0.05);鳞状细胞癌、基底细胞癌组织中PCDH10基因启动子高甲基化比率高于光化性角化病病变组织(P<0.05);鳞状细胞癌组织中PCDH10基因启动子超甲基化比率为23.9%。结论高水平的PCDH10基因甲基化可能被用作皮肤癌的标志物,其中超甲基化可作为鳞状细胞癌的标志,而低水平的PCDH10甲基化可作为皮肤病早期发现的指标。

实时荧光定量甲基化特异性聚合酶链反应技术定量检测胃癌患者外周血原钙黏蛋白10基因甲基化水平及意义

目的探讨外周血中原钙黏蛋白10基因（PCDH10）基因启动子区域5’-胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤基序（CpG）岛甲基化在原发性胃癌无创性诊断及预后评估中的意义。方法采用实时荧光定量甲基化特异性聚合酶链反应（Real-time MSP）检测202例胃癌、52例胃黏膜上皮异型增生、68例慢性胃炎组织和血清及120例健康人血清中PCDH10启动子甲基化水平，分析其与临床病理等参数及预后之间的关系。结果胃癌组织PCDH10甲基化率（80.2%、162/202）显著高于配对癌旁组织（26.7%、54/202）、胃黏膜上皮异型增生组织（23.1%、12/52）及慢性胃炎标本（14.7%、10/68）（均P＝0.000）。肿瘤组织与配对血清PCDH10甲基化水平具有良好的一致性，其Aζ值是0.862（P＝0.000）。血清PCDH10甲基化水平与患者诊断时年龄（P＝0.018）、幽门螺杆菌（Hp）感染（P＝0.000）、肿瘤大小（P＝0.000）、肿瘤分化（P＝0.002）、淋巴管侵犯（P＝0.000）、静脉侵犯（P＝0.007）、浸润深度（P＝0.000）、淋巴结转移（P＝0.000）、远处转移（P＝0.015）、临床分期（P＝0.000）及不良预后（P＝0.000）有相关，而与患者性别（P＝0.435）、肿瘤部位（P＝0.458）及生长模式（P＝0.435）无明显相关。结论PCDH10甲基化在胃癌的发生发展中起重要作用。

原钙黏蛋白10基因在胃癌组织的表达及其临床意义

目的观察原钙黏蛋白10（PCDH10）在胃癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测202例胃癌患者癌组织及其相应的癌旁组织中PCDH10的表达，分析其与患者临床病理特征和预后的关系。结果胃癌组织中PCDH10蛋白的低表达率为63.4%（128/202），显著高于癌旁组织（P＝0.000）。胃癌组织中PCDH10低表达与患者幽门螺杆菌感染状态（P＝0.000）、肿瘤大小（P＝0.000）、淋巴管侵犯（P＝0.001）、浸润深度（P＝0.000）、淋巴结转移（P＝0.000）、远处转移（P＝0.001）及TNM分期（P＝0.000）显著相关，而与患者性别（P＝0.757）、肿瘤诊断时年龄（P＝ 0.312）、肿瘤部位（P＝ 0.512）、肿瘤生长模式（P＝ 0.366）、肿瘤分化程度（P＝ 0.091）和静脉侵犯（P＝ 0.056）无明显相关。Kaplan-Meier生存分析结果显示，PCDH10低表达的胃癌患者与PCDH10正常/高表达患者比较，其总生存期显著缩短，两者比较差异有统计学意义（P＝0.000）。但Cox多因素回归分析结果表明PCDH10低表达不是影响胃癌患者独立预后因素。结论PCDH10在胃癌组织中表达下调，与肿瘤发生进展及患者预后显著相关。

乳腺癌细胞PCDH10基因启动子甲基化与信使RNA表达相关性研究

目的探讨原钙黏蛋白10(PCDH10)在人乳腺癌细胞中的信使RNA(mRNA)表达和甲基化状态及其相互关系。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中,收集乳腺癌患者的正常乳腺组织和癌组织PCDH10的mRNA和甲基化数据,用UALCAN在线工具进行分析。亚硫酸盐测序法(BSP)检测乳腺癌细胞中PCDH10基因启动子甲基化状态,反转录-PCR法检测PCDH10基因表达水平。用5-氮杂胞苷(5-Aza-CR)和/或曲古抑菌素A(TSA)处理后,检测MDA-MB-231细胞中PCDH10基因表达。结果正常乳腺组织和癌组织的mRNA均值分别为0.14和5.8×10-2;这2种组织的启动子甲基化水平分别为5.9×10-2和0.20。MDA-MB-231、MCF-7、ZR-751和Bcap37细胞甲基化率分别为85.88%,67.65%,67.06%和78.82%,这4种细胞mRNA表达水平分别为(0.7±0.1)×10-2,(46.8±3.4)×10-2,(38.1±2.9)×10-2,(0.5±0.1)×10-2。未处理组、5-Aza-CR处理组、TSA处理组和5-Aza-CR+TSA处理组mRNA表达水平分别为(1.1±0.2)×10-2,(52.4±4.8)×10-2,(48.4±3.9)×10-2,(102.4±9.4)×10-2。上述指标:正常组织与乳腺癌组织相比,差异均有统计学意义(均P<0.01);MDA-MB-231、Bcap37和MCF-7、ZR-75-1相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);与未处理组比较,5-Aza-CR处理组、TSA处理组和5-Aza-CR+TSA处理组均有统计学意义(均P<0.05)。结论乳腺癌细胞中PCDH10基因启动子区频繁甲基化与其mRNA低表达或缺失有关,其基因表达可被去甲基化药物逆转。