Prx1敲除对4NQO诱导的小鼠舌癌前病变细胞增殖及转录因子Ets1表达的影响

目的检测核增殖抗原Ki67和转录因子Ets1在4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导的Prx1+/+和Prx1+/-小鼠舌癌前病变模型中的表达,探讨Prx1敲除对小鼠舌癌前病变细胞增殖及转录因子Ets1表达的影响。方法实验分为Prx1+/+阴性对照组、Prx1+/+4NQO组、Prx1+/-阴性对照组、Prx1+/-4NQO组。在实验过程中对照组小鼠给与蒸馏水,实验组小鼠给与4NQO饮用水,第16周末处死小鼠,取舌组织,用于HE染色及Ki67和Ets1免疫组织化学染色。结果在4NQO的诱导下,成功构建鼠舌癌前病变模型。组织学检查发现在第16周末,实验组小鼠舌黏膜上皮表现为单纯增生或不同程度的异常增生。免疫组化结果显示,与对照组正常舌黏膜相比,Ki67、Ets1在Prx1+/+4NQO组舌癌前病变中表达明显增高(P<0.01)。Prx1敲除导致Prx1+/-4NQO组舌黏膜上皮中Ki67、Ets1表达明显降低(P<0.01)。结论 Prx1对细胞增殖有促进作用,可能通过调控转录因子Ets1在口腔癌前病变发生发展中发挥重要作用。

抗氧化蛋白Prx1在口腔黏膜白斑中的表达

目的检测抗氧化蛋白Prx1和DNA氧化损伤标记物8-OHdG在口腔黏膜白斑中的表达,探讨Prx1在口腔黏膜白斑中的作用。方法选择40例口腔黏膜白斑,包括单纯增生10例,白斑伴上皮轻度异常增生15例,白斑伴上皮中度异常增生15例,正常口腔黏膜10例。采用免疫组织化学染色方法,分别检测Prx1、8-OHdG在黏膜中的表达。结果口腔黏膜白斑伴上皮中度异常增生组Prx1和8-OHdG染色的MOD值均高于正常组、白斑单纯增生组、白斑伴上皮轻度异常增生组,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Prx1与口腔黏膜白斑的发病有关,口腔黏膜白斑的发生可能与氧化损伤有关。

尼古丁对口腔癌前病变细胞中Prx1表达及MAPK信号通路活化的影响

目的通过检测尼古丁对口腔癌前变细胞株DOK细胞中抗氧化蛋白Prx1表达及MAPK三种激酶JNK、ERK、p38的磷酸化水平的影响,探讨尼古丁对口腔癌前病变细胞凋亡的作用机制,以期为口腔癌前病变的防治提供科学依据及新的生物靶点。方法 1μmol/L尼古丁长期处理口腔癌前病变细胞DOK 7天,采用荧光定量PCR和Western Blot的方法,检测尼古丁组与对照组中Prx1 mRNA与蛋白的表达及磷酸化JNK、ERK、p38蛋白(pJNK、p-ERK、p-p38)的表达情况。结果倒置显微镜下观察,1μmol/L尼古丁长期处理口腔癌前变细胞株DOK细胞7天后,细胞形态未见明显变化。与对照组相比,尼古丁组DOK细胞中Prx1 mRNA及蛋白表达水平均显著增高(P=0.011,P=0.044)。p-p38(P=0.030)和p-JNK(P=0.017)蛋白表达与对照组相比降低,p-ERK的蛋白表达增高(P=0.035),差异有统计学意义。结论 Prx1、JNK、ERK及p38可能在烟草相关口腔癌前病变细胞凋亡中发挥重要作用。

Prx1基因敲除小鼠模型的构建

目的建立Prx1(Peroxiredoxin 1)基因敲除小鼠模型。方法体外培养Prx1基因捕获小鼠ES(胚胎干)细胞,利用显微注射方法将ES细胞注射入C57BL/6小鼠囊胚腔,通过胚胎移植将注射后的囊胚引入受体小鼠子宫,将高嵌合率小鼠与C57BL/6小鼠杂交,利用毛色遗传和PCR技术对子代鼠进行鉴定。结果通过对F1代小鼠的毛色遗传和PCR基因型鉴定,Prx1基因捕获ES细胞能够整合到小鼠生殖系,并稳定遗传。结论成功获得Prx1基因敲除小鼠。

烟草通过调控Prx1/Ets1结合抑制口腔白斑组织细胞凋亡

目的检测烟草对口腔白斑组织中细胞凋亡水平、α7nAChR、Ets1、抗氧化蛋白Prx1及MAPK信号通路相关蛋白表达的影响,验证Prx1与Ets1结合情况,探讨烟草对口腔白斑组织细胞的影响。方法选择32例临床口腔白斑组织标本,包括吸烟者口腔白斑组织12例,非吸烟者口腔白斑组织20例,正常口腔黏膜组织10例。采用TUNEL法检测口腔白斑组织细胞凋亡水平。采用免疫组化染色方法,检测Prx1、Ets1、α7nAChR及MAPK信号通路相关蛋白p-JNK、p-p38、p-ERK在口腔白斑组织中的表达。采用Duolink技术,在口腔白斑组织中检测Prx1与Ets1蛋白结合情况。结果口腔白斑组织中细胞凋亡指数显著高于正常对照组,口腔白斑吸烟组细胞凋亡指数显著低于非吸烟组。口腔白斑组织中Prx1、Ets1、α7nAChR及p-JNK、p-p38、p-ERK蛋白表达水平显著高于正常对照组,其中口腔白斑吸烟组Prx1、Ets1及α7nAChR表达显著高于非吸烟组,口腔白斑吸烟组p-JNK、p-p38蛋白表达水平显著低于非吸烟组。Prx1与Ets1在口腔白斑组织中存在结合。结论烟草可能通过诱导Prx1/Ets1结合调控MAPK信号通路相关蛋白的表达,抑制口腔白斑细胞凋亡。

抗氧化蛋白Prx1在尼古丁诱导的口腔癌淋巴转移中的作用

目的研究抗氧化蛋白Prx1在尼古丁诱导的口腔癌淋巴转移中的作用。方法利用Transwell小室在体外模拟口腔癌细胞淋巴转移过程,通过计数穿过Matrigel胶和单层淋巴内皮细胞的OSCC细胞数量,评价口腔癌细胞淋巴转移能力。通过比较未经处理和经1μmol/L尼古丁连续处理7天的OSCC SCC15和CAL27细胞穿过小室的细胞数,探讨尼古丁对口腔癌淋巴转移的作用;构建Prx1过表达和敲低的SCC15和CAL27细胞株,并用1μmol/L尼古丁连续处理7天,计数穿过小室的细胞数,研究Prx1在尼古丁诱导口腔癌淋巴转移中的作用。结果经1μmol/L尼古丁连续处理7天的SCC15和CAL27细胞穿过小室的细胞数相比于对照组增加(P<0.05)。经1μmol/L尼古丁连续处理7天,与对照组相比,Prx1敲低的SCC15和CAL27细胞穿过小室的细胞数明显减少细胞穿过小室的细胞数明显低于对照组(P<0.01),Prx1过表达的SCC15和CAL27细胞穿过小室的细胞数增加(P<0.05),差异有统计学意义。结论 Prx1可促进尼古丁诱导的口腔癌淋巴转移。

Prx1调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在实验性口腔黏膜癌变中的作用

目的检测口腔黏膜癌变过程中线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin表达变化及抗氧化蛋白Prx1对其调控作用,探讨Prx1在口腔黏膜癌变中的作用机制。方法利用4NQO化学诱导Prx1^(+/+)和Prx1+/-小鼠舌黏膜癌变模型,采用免疫组织化学染色及Q-PCR方法,检测PINK1、Parkin在小鼠舌正常黏膜、白斑、白斑伴上皮异常增生、鳞癌组织中的表达。结果在Prx1^(+/+)小鼠舌癌变模型中,PINK1、Parkin蛋白及mRNA表达在舌白斑及白斑伴上皮异常增生组织中显著高于正常黏膜及舌癌组织;与Prx1^(+/+)小鼠各组相比,Prx1敲除导致小鼠舌白斑、白斑伴上皮异常增生及舌癌中PINK1蛋白及mRNA表达明显降低;小鼠舌白斑及舌癌组织中Parkin mRNA表达显著升高。结论线粒体自噬参与了口腔黏膜癌变过程;Prx1可能通过调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在其中发挥重要作用。

Prx1^(+)骨骼干细胞的研究进展

配对相关同源基因1(paired related homeobox 1,Prx1/Prrx1/MHox)在胚胎肢芽和颅面发育中高表达,成体中的Prx1^(+)细胞分布在长骨的骨膜、骨髓和颅骨的骨缝中,表现出间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)或骨骼干细胞(skeletal stem cells,SSCs)的特征。近期的研究显示,表达Prx1基因的骨骼干细胞(Prx1^(+)skeletal stem cells,Prx1^(+)SSCs)参与了骨骼的创伤愈合和对机械应力的应答反应。同时,牙周膜中Prx1^(+)细胞在牙周组织正常发育和缺损修复中发挥的作用也受到关注。该文回顾Prx1基因和Prx1^(+)细胞的特征和功能,总结Prx1^(+)SSCs对骨骼改建或修复的作用,有助于SSCs在调控颅面骨生长、促进牙槽骨再生中的深入研究。

中药漏芦对口腔鳞癌细胞中转录因子Ets-1及过氧化物还原酶Prx1表达的影响

目的通过检测中药漏芦乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract,EA)对口腔鳞癌细胞株SCC15中转录因子Ets-1及过氧化物还原酶家族成员Prx1的表达水平的影响,初步探讨漏芦对口腔鳞癌细胞氧化应激作用的分子机制,为指导口腔癌临床用药提供新的思路。方法 50μg/ml漏芦EA处理口腔鳞癌细胞株SCC15 48h后,采用荧光定量PCR和Western Blot,检测药物处理组和对照组中Ets-1和Prx1的mRNA与蛋白表达情况。结果倒置显微镜下观察,50μg/ml漏芦EA处理SCC15细胞48h后,细胞生长速度较对照组减慢,细胞形态变圆,部分出现皱缩变圆甚至脱落。与对照组相比,药物处理组中Ets-1和Prx1的mRNA相对表达量显著降低(P=0.002,P=0.025),蛋白表达水平显著降低(P=0.030,P=0.042),差异有统计学意义。结论漏芦可能通过抑制氧化应激相关蛋白Ets-1和Prx1表达来抑制口腔癌细胞的生长。

尼古丁上调口腔鳞状细胞癌抗氧化蛋白Prx1的表达

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中抗氧化蛋白Prx1与烟草诱导的氧化应激的相关性。方法:采用RT-PCR、Western Blot方法,观察尼古丁作用相同时间(48h)不同浓度(0.1、1、10、100μmol/L)及同一浓度(1μmol/L)不同时间(24、48、72h)对Tca8113细胞Prx1mRNA及蛋白表达的影响。结果:尼古丁可诱导Tca8113细胞Prx1mRNA和蛋白表达增加。结论:Prx1表达增高可能与烟草诱导的氧化应激有相关性,在烟草诱导的OSCC发生发展中可能发挥重要作用。

在成骨细胞分化过程中调节Osterix转录因子表达和肿瘤坏死因子活性的同源异形盒蛋白Prx1的表达

肿瘤坏死因子（TNF-α）具有促使骨质疏松发生和抑制骨形成的作用,是骨节炎症中导致骨骼损伤的重要因子。成骨细胞（osteoblast,OB）来源于多能间充质细胞系,是骨形成的主要功能细胞,其按一定的路径分化为成熟骨细胞。Osterix（Osx,SP7）是一种OB分化所必需的转录因子。有实验证明如果机体缺乏该转录因子会导致骨骼软骨化。美国科学家的研究曾经报道过一种位于0sx启动子内的TNF抑制元件，这种抑制元件可以用于分离核蛋白，从而介导TNF-α发挥抑制OB分化的作用。

星形胶质细胞瘤中Prx1、Prx6和GFAP的表达情况及其与肿瘤恶性程度的关系研究

目的探讨星形胶质细胞瘤中Prx1、Prx6和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况及其与肿瘤恶性程度的关系。方法采用回顾性研究选取2011年9月至2015年9月收治64例星形胶质细胞瘤患者作为研究对象,另外选取同期接受治疗的需行手术切除的正常脑组织患者23例作为正常对照组。采用SP法与RT-PCR试验对星形胶质细胞瘤与正常脑组织中Prx1、Prx6、GFAP的表达情况及其与恶性程度的相关性;Prx1、Prx6和GFAP的mRNA表达水平及其与恶性程度的相关性进行检测分析。结果 Prx1、Prx6的阳性表达情况为:Ⅳ级胶质瘤>Ⅲ级胶质瘤>Ⅱ级胶质瘤>正常脑组织;GFAP阳性表达情况:正常脑组织>Ⅱ级胶质瘤>Ⅲ级胶质瘤>Ⅳ级胶质瘤,两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05);不同恶性程度胶质瘤与GFAP阳性率、Prx1及Prx6阳性率之间的相关性系数分别为r_1=0.726、r_2=0.689、r_3=-0.541,P均<0.05。由此可以看出,GFAP阳性率与胶质瘤恶性程度呈负相关,Prx1及Prx6阳性率与胶质瘤恶性程度呈正相关。Prx1 mRNA、Prx6 mRNA的表达水平为:Ⅳ级胶质瘤>Ⅲ级胶质瘤>Ⅱ级胶质瘤>正常脑组织;GFAP表达水平为:正常脑组织>Ⅱ级胶质瘤>Ⅲ级胶质瘤>Ⅳ级胶质瘤,两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05);不同恶性程度胶质瘤与GFAP mRNA、Prx1 mRNA及Prx6 mRNA表达水平之间的相关性系数分别为r_1=0.665、r_2=0.639、r_3=-0.501,P均<0.05。由此可以看出,GFAP mRNA表达水平与胶质瘤恶性程度呈负相关,Prx1 mRNA及Prx6 mRNA表达水平与胶质瘤恶性程度呈正相关。结论星形胶质细胞瘤中Prx1、Prx6表达水平较高,GFAP表达水平较低,GFAP阳性率与胶质瘤恶性程度呈负相关,Prx1及Prx6与胶质瘤恶性程度呈正相关。Prx1、Prx6及GFAP可作为临床判定星形胶质细胞瘤的恶性程度的重要标志物。

基于TCGA数据库分析Prx1在头颈部鳞状细胞癌患者组织中的表达及临床意义

目的 通过TCGA数据库在线分析工具,分析过氧化物还原酶1(peroxiredoxin1, Prx1)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)患者组织中的表达及临床意义。方法 基于TCGA数据库,利用UALCAN分析HNSCC中Prx1的表达水平及其与患者的性别、年龄、临床分期、肿瘤病理分级及淋巴结转移之间的关系。利用UCSC Xena分析Prx1表达与HNSCC患者吸烟相关性。利用PROGgeneV2对HNSCC患者组织中Prx1表达与总生存率的相关性进行分析。结果 Prx1在HNSCC患者组织中的表达高于正常组织,Prx1高表达与HNSCC患者临床分期、肿瘤病理分级及较差预后相关,与性别、年龄、淋巴结转移无显著相关性,Prx1高表达与患者吸烟密切相关。结论 Prx1在烟草相关HNSCC的发生发展中发挥重要作用,Prx1可能是防治HNSCC的潜在生物学靶点。

Prx1对细胞信号转导过程的调控

Prx1是一种高等生物体内广泛表达的抗氧化酶,在细胞处于不同的氧化状态时,能够以二聚体和十聚体两种不同的形式存在。该蛋白不仅能起到抗氧化和调节H2O2介导的信号转导作用,同时还能发挥分子伴侣的功能,通过细胞信号网络,直接或间接地参与体内多种与氧化相关的生理病理过程,发挥体内氧化还原调节器的重要作用。

天然产物五味子乙素对口腔癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的 研究天然产物五味子乙素(Schisandrin B,Sch B)对口腔癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 用不同浓度的五味子乙素分别处理口腔癌细胞株SCC15和CAL27细胞24 h和48 h,采用CCK-8法和AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术,检测五味子乙素对口腔癌细胞增殖及凋亡的影响;采用Transwell实验分别检测五味子乙素对细胞侵袭的影响,采用qRT-PCR和Western Blot检测五味子乙素对Prx1 mRNA与蛋白表达的影响。结果 CCK-8和流式细胞术检测发现五味子乙素明显抑制SCC15和CAL27细胞增殖并促进细胞凋亡,呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。Transwell实验结果显示,五味子乙素对侵袭的抑制作用呈时间和剂量依赖性。五味子乙素对Prx1 mRNA的表达无显著影响,但对其蛋白表达有显著的抑制作用(P<0.05)。结论 五味子乙素可能通过调控Prx1蛋白的表达抑制口腔癌细胞的增殖、侵袭,促进细胞凋亡。

探讨Peroxiredoxin1在胃癌腹膜转移中的作用机制

目的探讨胃癌组织中Peroxiredoxin1(Prx1)的表达与胃癌腹膜转移的关系。方法采用免疫组织化学SP染色法检测上海交通大学附属新华医院收治的65例同期伴腹膜转移胃癌患者的胃癌原发灶、腹膜转移灶、淋巴结转移灶及癌旁正常胃黏膜组织中prx1蛋白的表达。结果免疫组化显示胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶中prx1蛋白强表达,阳性表达率分别为胃癌原发灶60%(39/65)、腹膜转移灶68%(44/65)、淋巴结转移灶88.6%(39/44),癌旁正常胃黏膜组织中Prx1蛋白阳性表达率为3%(2/65),且表达很弱。癌旁正常胃黏膜中prx1蛋白的表达与胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶之间比较,差异具统计学意义(P<0.05);胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌病灶中的Prx1检查可能成为判断胃癌术前是否腹膜转移以及预后的生物学标志。