Psammaplin A对牛老化卵母细胞体外发育的影响

为探讨组蛋白去乙酰化抑制剂Psammaplin A(PsA)对牛老化卵母细胞体外发育的影响,本试验将卵母细胞随机分为对照组、老化组和50mmol/L PsA处理的老化组(PsA组)。应用免疫荧光染色和JC-1检测牛卵母细胞孤雌激活后的囊胚率、囊胚中的细胞数、细胞凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和胚胎线粒体膜电位强度。结果显示,老化组囊胚率显著低于PsA组及对照组(P<0.05),PsA组囊胚率与对照组间无显著差异(P>0.05)。对照组及PsA组囊胚内细胞数显著高于老化组(P<0.05),PsA组囊胚内细胞数与对照组间无显著差异(P>0.05);老化组细胞凋亡率显著高于对照组及PsA组(P<0.05),PsA组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。老化组MⅡ期卵母细胞的GSH水平显著低于对照组与PsA组(P<0.05),对照组与PsA组的GSH水平无显著差异(P>0.05)。老化组1细胞期胚胎ROS水平显著高于对照组和PsA组(P<0.05),PsA组ROS水平显著高于对照组(P<0.05)。老化组4-8细胞早期胚胎的线粒体膜电位强度显著低于对照组和PsA组(P<0.05),对照组线粒体膜电位强度显著高于PsA组(P<0.05)。综上所述,PsA可有效延缓牛卵母细胞的老化并提高卵母细胞和胚胎质量。

Psammaplin A对离体结肠癌SW480细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨组蛋白去乙酰化3(HDAC3)抑制剂Psammaplin A对离体结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法取处于对数生长期结肠癌SW480细胞,随机分为Psammaplin组与对照组,Psammaplin组给予不同浓度(0.5、5、50、500、5 000μg/m L)Psammaplin A干扰48 h,对照组不给予任何干预。采用Western blotting法检测HDAC3及DNMT3a蛋白表达:MTT法检测不同细胞培养时间(24、48、72、96 h)、不同浓度梯度Psammaplin A对SW480细胞增殖的影响。流式细胞术检测Psammaplin A对SW480细胞周期及凋亡的影响。结果 Psammaplin组0.5、5、50、500、5 000μg/m L的Psammaplin A干扰SW480细胞48 h后,HDAC3蛋白相对表达量分别为23.28±8.91、21.72±9.18、18.63±7.26、14.17±5.64、10.58±7.22,对照组HDAC3蛋白相对表达量为24.84±7.65,与对照组比较,Psammaplin组在500及5 000μg/m L时差异有统计学意义(P均<0.05)。Psammaplin组0.5、5、50、500、5 000μg/m L的Psammaplin A干扰SW480细胞48 h后,DNMT3a蛋白相对表达量分别为18.36±8.43、17.51±6.29、16.12±6.54、11.27±5.31、10.54±4.26,对照组为20.15±6.31,与对照组比较,Psammaplin组在500及5 000μg/m L时差异有统计学意义(P均<0.05)。50μg/m L的Psammaplin A干预SW480细胞培养24、48、72及96 h后,Psammaplin组细胞存活率为时间依赖性下降,与对照组比较,在48、72及96 h时差异均有统计学意义(P均<0.05);Psammaplin组0.5、5、50、500、5 000μg/m L的Psammaplin A作用48 h后,与对照组比较,SW480细胞存活率呈剂量依赖性下降,在50、500、5 000μg/m L时差异有统计学意义(P均<0.05)。Psammaplin组与对照组G1期细胞所占比例分别为(69.27±0.93)%、(81.25±0.89)%,G2期细胞所占比例分别为(4.72±1.83)%、(9.62±1.34)%,S期细胞所占比例分别为(27.61±1.65)%、(10.43±0.97)%,两组各期细胞所占比例比较,P均<0.05。Psammaplin组与对照组细胞凋亡率分别为56.98%、31.67%,两组比较,P<0.01。结论 Psammaplin A可通过抑制HDAC3及DNMT3a表达降低结肠癌细胞存活率及增殖活性,诱导凋亡。