甘露糖敏感性绿脓杆菌制剂对加热后肝癌细胞生物学特性的影响

目的 探讨甘露糖敏感性绿脓杆菌制剂（PA-MSHA）对水浴加热后有转移潜能的人肝癌MHCC97L细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法 42℃水浴加热前2 h加入1×10^11/L PA-MSHA,加热组不加药,对照组不加热、不加药,其他处理相同并在同一时间点观察。在不同的时间观察细胞增殖、生长曲线、克隆形成率、流式细胞术分析细胞周期（FCM）、侵袭、运动、酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶（MMP）-2蛋白表达。结果PA-MSHA能够逆转加热对人肝癌MHCC97L细胞的增殖促进作用,和对照组比较,加热联合PA-MSHA能明显抑制人肝癌MHCC97L细胞的增殖（P〈0.01）,其最大抑制效应为加热后48 h（42.3%）,细胞倍增时间延长了1.68倍,加热联合PA-MSHA组其加热后48、96 h的细胞集落形成率均明显降低（P〈0.01）,FCM显示,加热联合PA-MSHA能逆转加热对细胞周期的影响,和对照组比较,其48 h的G1期细胞比例明显升高,S＋G2期细胞比例明显降低（P〈0.01）,其96 h的G1期和S＋G2期细胞比例差异无统计学意义（P〈0.05）。加热联合PA-MSHA组其加热后48 h和96 h相同数量的细胞穿过人工基底膜到达Transwell小室膜背面的细胞平均数（侵袭实验）和穿过Transwell小室膜到达背面的MHCC97L细胞平均数（运动实验）均明显低于加热组（P〈0.01）,ELISA法检测相同数量细胞的上清液发现,加热联合PA-MSHA组其加热后48、96 h细胞VEGF和MMP-2蛋白的分泌量和加热组比较差异无统计学意义（P〈0.05）。结论 PA-MSHA能抑制体外加热后肝癌细胞的增殖,其作用和抑制细胞进入DNA合成期和分裂期有关,进一步抑制其侵袭运动能力,其作用和MMP-2、VEGF表达无关。