广东汉族人群LDL受体基因Pvu Ⅱ多态性位点的研究

建立了ＬＤＬ受体基因内含子１５ｐｖｕⅡ多态性位点的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术．利用该技术从人类外周血基因组ＤＮＡ中分离到一个长为０．８１ｋｂ的片段，核酸序列测定证明分离的片段是ＬＤＬ受体基因内含子１５．对广东汉族人群内含子１５的ＰｖｕⅡ位点多态性状况进行了研究，实验显示：广东汉族人群ＬＤＬ受体基因中存在着ＰｖｕⅡ多态性位点；２１２个ＬＤＬ受体等位基因ＰｖｕⅡ酶切位点出现的频率为０．１６，说明ＰｖｕⅡ多态性位点可以作为广东人群的遗传标记．

中国地方猪种ESR基因PvuⅡ多态性及其与产仔数关系的研究

试验采用PCR-RFLPs方法,研究了中国成华猪、内江猪和太湖猪3个地方品种ESR基因的多态性及其与产仔数间的关系。结果表明,成华猪、内江猪和太湖猪的B等位基因频率分别为0 6389、0 6613和0 6855。在3个猪品种中,除成华猪只检测到AB、BB两种基因型外,在内江猪和太湖猪中都检测到了AA、AB和BB3种基因型。对3个品种不同基因型个体间产仔数的比较研究表明,不同ESR基因型的个体其产仔数存在一定的差异,各品种无论头胎还是经产,总体表现为BB基因型的产仔数高于AB型和AA型个体,而AB型又高于AA型个体。其中,太湖猪BB型个体头胎产活仔数(NBA)(11 13头)显著高于AB型个体(9 42头)(P<0 05)。证明B基因是对提高产仔数有利的基因。同时还分析了ESR基因PvuⅡ-RFLP的应用前景及其存在的问题。

雌激素受体基因PvuⅡ多态性对筛选绝经后骨质疏松危险因素的作用

目的通过雌激素受体基因PvuⅡ基因分型,筛选绝经后骨质疏松的危险因素。方法检测759例绝经后骨质疏松症者腰椎、股骨上段的骨密度和198例雌激素受体基因PvuⅡ基因型,分析不同基因型的年龄、体重指数等因素与骨密度的相关性。结果在PP型,低体重是股骨颈、大转子骨密度的危险因素;在pp型,高龄是大转子、Ward s区骨密度的危险因素;在Pp型,高龄是腰椎、股骨颈、Ward s骨密度的危险因素;低体重是股骨颈、大转子骨密度的危险因素。结论通过雌激素受体基因PvuⅡ多态性筛选危险因素对临床防治绝经后骨质疏松有重要的指导价值。

血脂异常人群不同LPL-PvuⅡ基因型对粗杂粮干预的敏感性

目的:探讨不同基因型血脂异常人群对粗杂粮干预的敏感性。方法:将409名45岁以上的血脂异常人群分为两组:干预组(230人)和对照组(179人),前者每人每天给予湿重100g左右的粗杂粮馒头1个,每1～2个月参加1次健康讲座,后者只参加健康讲座,干预时间6个月;用PCR-RELP(限制性片段长度多态性)方法检测干预组人群中脂蛋白脂酶(LPL)PvuⅡ基因型。结果:干预组除腰臀比(WHR)以外各项指标较试验前均有明显改善,试验后干预组体质指数(BMI)、WHR、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、血甘油三酯(TG)均显著低于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著高于对照组。各基因型组对TG干预的敏感性,P+/P+组显著高于P-/P-组;对TC、HDL-C干预的敏感性,以P-/P-组最低;对于改善血脂有效率,P+/P+组显著高于P-/P-组。结论:粗杂粮干预对血脂异常人群有良好的效果,不同LPL-PvuⅡ基因型对血脂改善的敏感性不同,对于TG而言,P+/P+组敏感性较高,P-/P-组较低。

西藏小型猪ESR基因PvuⅡ多态性与生长繁殖性能相关分析

目的了解ESR基因PvuⅡ位点在西藏小型猪中的多态性分布情况;研究其在西藏小型猪上的遗传效应,为西藏小型猪生长繁殖性状的分子遗传标记辅助选择提供实验依据。方法记录44头西藏小型猪母猪繁殖性能,并对其所产仔猪的生长性能进行测定,采用PCR-RFLP方法对ESR基因PvuⅡ位点进行多态性与生长繁殖性能进行相关性分析。结果西藏小型猪ESR候选基因PvuⅡ位点表现出多态性,为AA、AB、BB型,A、B等位基因频率特征。初产胎的产仔数在不同基因型间差异存在显著性,不同基因型间产仔数呈BB>AB>AA的趋势,初产胎和经产胎的母猪其他指标在不同基因型间差异均没有显著性。结论提高西藏小型猪猪群ESR基因PvuⅡ位点B等位基因频率,有利于提高西藏小型母猪的产仔数。

北京地区汉族妇女雌激素受体基因PvuⅡ多态性与骨密度的关系

目的 探讨北京地区汉族妇女雌激素受体 (ER)基因PvuⅡ多态性与骨密度 (BMD)的关系。方法 采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)法 ,检测 179例北京地区汉族妇女ER基因PvuⅡ多态性。采用双能X线吸收仪 (DEAE)测量腰椎、近端股骨及前臂骨密度 ,并分析其相关性。结果 北京地区汉族妇女ER基因 pp、Pp、PP基因型频率分别为 0 .35 2、0 .4 6 4和 0 .184 ,绝经前与绝经后妇女无显著性差异 ,绝经后妇女腰椎骨密度为 0 .836± 0 .180 g/cm2 ,明显低于未绝经妇女的 1.0 38± 0 .14 0 g/cm2 ,绝经后妇女骨质疏松发病率为 5 4 .3%。结论 ER基因PvuⅡ基因型频率分布有种族差异。ER基因PvuⅡ基因型与骨密度无明显相关性。

脑出血患者脂蛋白脂酶基因PvuⅡ酶切多态性的观察

目的探讨脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性与脑出血的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP),对55例脑出血患者和正常对照组58例脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性分析。结果(1)正常对照组PvuⅡ等位基因频率分别为P+67.24%,P-32.76%;脑出血组PvuⅡ等位基因频率为P+63.63%,P-36.37%;脂蛋白脂酶基因PvuⅡ等位基因频率在脑出血组与正常对照组之间差异无显著性。(2)与正常对照组相比,脑出血患者组血清TG、LDL-c水平较对照组升高(P<0.05);脑出血患者组血清HDL-c、ApoAI水平较对照组降低(P<0.05)。结论脂蛋白脂酶PvuⅡ酶切多态性与脑出血无明显关联。

延边朝鲜族低密度脂蛋白受体基因PvuⅡ多态位点的研究

[目的 ]研究延边朝鲜族人群低密度脂蛋白受体基因内含子 15PvuⅡ多态性位点的存在和等位基因频率 ,以探讨该群体的遗传结构及遗传背景 .[方法 ]按酚 /氯仿抽提法提取基因组DNA ;用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性技术从人类外周血基因组DNA中分离到一个长约 810bp的片段 ,采用Dynabeads固相单链分离直接测序法测定 ,证明分离的片段是否是低密度脂蛋白受体基因内含子 15 ;用限制性内切酶PvuⅡ酶进行酶切 ,进行琼脂糖凝胶电泳 ,在凝胶自动成像系统紫外线检测仪上观察酶切结果 .[结果 ]延边朝鲜族人群低密度脂蛋白受体基因存在PvuⅡ多态性 .12 0名朝鲜族中无酶切位点的纯合个体 92例 ,基因型 (P-P-)频率为 76 6 % ;有酶切位点的杂合个体 2 0例 ,基因型 (P+ P-)频率为16 7% ;有酶切位点的纯合个体 8例 ,基因型 (P+ P+ )频率为 6 7% .2 4 0个低密度脂蛋白受体等位基因中PvuⅡ酶切位点基因 (P+ )的出现频率为 15 % .[结论 ]延边朝鲜族人群低密度脂蛋白受体基因也存在PvuⅡ多态性位点 ,说明PvuⅡ多态性特点可以作为延边朝鲜族的遗传标记 .

302例海南黎族LDLR基因PvuⅡ多态性与血脂水平关系的研究

目的探讨海南地区黎族人群低密度脂蛋白受体(LDLR)基因PvuⅡ位点的多态性及其对血脂及载脂蛋白的影响。方法采用分层随机整群抽样方法选取694例样本(观察组:黎族302例,对照组:汉族392例),抽取空腹静脉血检测血脂水平,运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测LDLR基因PvuⅡ多态性。结果观察组与对照组LDLR基因PvuⅡ3种基因型P1P1、P1P2、P2P2频率(66.89%vs.76.53%、27.81%vs.20.41%、5.30%vs.3.06%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组等位基因P2频率19.20%显著高于对照组13.26%(P<0.01)。观察组脂蛋白(a)[Lp(a)]、载脂蛋白B(apoB)水平显著低于对照组(P<0.01),观察组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白AI(apoAI)水平和apoAI/apoB比值显著高于对照组(P<0.01)。两组对象LDLR基因PvuⅡ各基因型与临床血脂水平指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、apoAI、apoB、Lp(a)]差异无统计学意义(P>0.05)。结论海南黎族人群LDLR基因存在PvuⅡ多态性,LDLR基因PvuⅡ多态性与血脂各项指标水平无相关性,P2等位基因不影响血脂代谢。

脂蛋白脂酶PvuⅡ位点多态性与老年人群血脂的相关分析

目的:探索脂蛋白脂酶的PvuⅡ位点基因多态性与老年人群血脂水平的关系。方法:采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP),检测119名来我院体检的退休干部的脂蛋白脂酶基因内含子6上的PvuⅡ多态性,并分析其与血脂的相关性。结果:P+/P+基因型与三酰甘油正相关,P+/P-基因型与高密度脂蛋白正相关,P-/P-与低密度脂蛋白正相关。结论:LPL-PvuⅡ基因多态性与老年人群血脂有一定的关联。

识别序列外DNA甲基化对限制性核酸内切酶PvuⅡ酶切活性影响的研究

构建了重组质粒ｐＳＶ２ｇｐｔ－ＳＶ４０ｏｒｉ－ａｎｔｉｓｅｎｓｅ－ｒａｓ（简称Ｐ１），利用这一重组体进一步证实了识别序列外ＤＮＡ甲基化对限制性核酸内切酶ＰｖｕⅡ切割活性的抑制作用，并对这一抑制作用进行了定量研究。结果表明：邻近ＰｖｕⅡ识别位，点的ＤＮＡ甲基化可降低ＰｖｕⅡ对该位点酶切活性的７０％左右。

雌激素α受体PvuⅡ和XbaⅠ基因多态性与产后抑郁障碍的相关性

目的探讨雌激素α受体(ERα)基因多态性与产后抑郁障碍发生的关联性,为产后抑郁障碍发生的病因机制提供遗传学证据,进而为疾病基因诊断与治疗提供理论基础。方法选取产后抑郁障碍产妇(产后抑郁组)与健康产妇(正常对照组)各45例,运用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应分析法、基因记数法统计两组ERα基因的基因型和等位基因频率,分析ERαPvuⅡ和XbaⅠ多态性与产后抑郁的关联性。结果产后抑郁组与正常对照组ERαPvuⅡ基因型及等位基因(P与p)频率分布差异有统计学意义(P<0.05),产后抑郁组与正常对照组ERαXbaⅠ基因型及等位基因(X与x)频率分布差异无统计学意义(P>0.05),ERαPvuⅡ与XbaⅠ联合基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ERαPvuⅡ基因多态性与产后抑郁障碍发病有相关性,XbaⅠ基因型突变对于产后抑郁障碍发病无相关性,联合基因分析,产后抑郁产妇与健康产妇整体基因型分布相似。

2型糖尿病与脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性的相关性的初步探讨

目的探讨脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性在2型糖尿病发病中的意义。方法PCR扩增52例2型糖尿病患者及100例对照者的脂蛋白脂酶基因PvuⅡ基因突变点,经限制性内切酶消化后行凝胶电泳确定其基因型。结果脂蛋白脂酶基因PvuⅡ各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无显著性。结论脂蛋白脂酶基因PvuⅡ突变可能不足以构成2型糖尿病的独立遗传性危险因子。

Ⅱ型糖尿病与脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性的关联

目的:探讨Ⅱ型糖尿病与脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性是否有关联。方法:采用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态性方法,对Ⅱ型糖尿病患者和正常人脂蛋白脂酶基因内含子6PvuⅡ多态性及其对血脂及载脂蛋白(apo)水平的影响进行研究。结果:表明Ⅱ型糖尿病与脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性有一定关联。

维吾尔族人群LPL基因PvuⅡ多态性与身体测量和血生化指标的相关性研究

目的探讨脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）基因PvuⅡ酶切位点多态性在塔克拉玛干沙漠腹地健康维吾尔族人群中的分布特征及其与身体测量和血生化指标的相关性,并与不同种族人群进行比较。方法采用PCR-RFLP方法检测99例健康维吾尔族人群（男性38例,女性61例）LPL基因PvuⅡ酶切位点的多态性。结果新疆99例健康维吾尔族人群中以P＋等位基因多见,频率（52.02%）高于P-等位基因频率（47.98%）,三种基因型中以P＋P-基因型最为多见（61.62%）,其次为P＋P＋基因型（21.21%）,最低是P-P-基因型（17.17%）,且各基因型和等位基因频率在男女中分布无显著性差异（P〉0.05）;男性中P-P-基因型组空腹血糖水平显著高于P＋P＋和P＋P-基因型组,各基因型与空腹血糖有显著性差异（χ~2=3.411,P〈0.05）,在女性中P-P-基因型组总胆固醇水平显著高于P＋P-和P＋P＋基因型组,各基因型与总胆固醇有显著性差异（χ~2=4.669,P〈0.05）,其他各项身体测量和生化指标均未见显著性差异（P〉0.05）;而LPL基因PvuⅡ酶切位点多态性在维吾尔族人群中的分布与海南汉族人群、大连汉族人群、郑州汉族人群、海南黎族人群等不同民族人群比较均存在显著差异（P〈0.01,P〈0.05）;与日本、中国汉族、韩国、阿拉伯、土耳其等不同种族人群比较也均存在显著差异（P〈0.01,P〈0.05）,而与芬兰和印度人群比较的差异无显著性（P〉0.05）。结论 LPL基因PvuⅡ酶切位点P-P-基因型和P＋等位基因在健康维吾尔族人群中的分布可能与空腹血糖、总胆固醇等血脂水平相关联。

猪雌激素受体基因PvuII多态性与产仔数性状的关系

雌激素受体 (estrogenreceptor ,ESR)能调控雌激素的合成 ,影响繁殖功能。将ESR基因作为控制猪产仔数的候选基因 ,分析其PvuII多态性与高产猪种莱芜猪和国外引进猪种长白猪产仔数的关系。序列分析发现 ,PCR扩增区 5 6bp的PvuII酶切片段位于RFLP分析获得的 3 7kb正向序列的起始部分。因ESR基因在高产仔数的莱芜猪中的PvuII多态性分布不能证实B基因为优势基因 ,故推测 3 7kb条带对该猪种产仔数可能不起决定作用。

雌激素受体α基因XbaⅠ、PvuⅡ和BstUⅠ多态性与男性骨量的关系

目的了解雌激素受体α(estrogenreceptorα,ERα)基因多态性与男性骨密度(bonemineraldensity,BMD)的关系。方法PCR限制性片段长度多态性检测上海市388名46～80岁无血缘关系的健康汉族男性ERα基因XbaⅠ、PvuⅡ和BstUⅠ多态性,双能X线吸收仪检查腰椎1～4(L1～4)和股骨近端股骨颈(femoralneck)、大转子区(trochanter)和Ward’s三角部位BMD。结果被研究人群XbaⅠ和PvuⅡ等位基因频率分布符合HardyWeinberg定律。未发现ERα基因第1外显子区存在BstUⅠ多态性,所有对象均是BB基因型。XbaⅠ多态性与各部位BMD值均无相关;PvuⅡ多态性与L1～4和Ward’s三角部位BMD值均有关联(P<0.05),Pp基因型在上述部位平均BMD值明显高于PP和pp基因型(P<0.05)。结论本研究结果提示中国汉族人群缺乏或罕有ERα基因BstUⅠ多态性;ERα基因PvuⅡ多态性可能影响老年男性松质骨骨量的丢失。

绝经后骨质疏松症相关因素与雌激素受体-α基因PvuⅡ、XbaⅠ多态性的关系

目的 研究上海市绝经后妇女骨质疏松症与雌激素受体 α(ER α)基因PvuⅡ、XbaⅠ多态性及相关因素的关系。 方法 按骨密度 (BMD)值将上海市 5 17例绝经后汉族妇女分为骨质疏松组 (2 4 4例 )和对照组 (2 73例 ) ,用PCR 限制性片段长度多态技术检测ER α基因PvuⅡ、XbaⅠ多态性。 结果 ER α基因PvuⅡ、XbaⅠ等位基因和基因型频率分布在两组间差异无显著性。在全部受试者中 ,2～ 4腰椎 (L2～ 4)、股骨颈 (Neck)、大转子 (Troch)及Ward’s三角 (Ward’s)的BMD值与体重呈正相关 (r为 0 4 5 3、0 5 34、0 5 0 4、0 35 1,均为P <0 0 0 1) ,与年龄、绝经年限负相关 (P <0 0 0 1) ;职业与股骨近端各部位BMD值呈正相关 (P <0 0 1) ;月经初潮年龄、身高分别与L2～ 4及股骨颈BMD值负相关 (P <0 0 5 ) ;ER α基因PvuⅡ多态性与股骨近端各部位BMD值相关 (P <0 0 5 ) ,但骨质疏松组和对照组均未发现PvuⅡ、XbaⅠ多态性与BMD值的关联 ,PvuⅡ、XbaⅠ多态性频率分布在两组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。 结论 ER α基因PvuⅡ多态性、年龄、身高、体重、月经初潮年龄、绝经年限和职业与绝经后妇女BMD值相关 ,但ER α基因PvuⅡ、XbaⅠ多态性不是上海绝经后妇女骨质疏松症的遗传易感因子。