UPLC-Q-TOF-MS^(E)结合UNIFI数据库技术快速分析五倍子化学成分及对大鼠血管药理作用机制

目的 鉴定五倍子化学成分并探究其舒张血管的作用机制。方法 建立五倍子UNIFI数据库。采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间-质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS^(E))与UNIFI数据处理平台,鉴定五倍子中的化学成分。用大鼠胸主动脉环实验探究五倍子提取物舒张血管的作用和其有效的物质成分发挥作用的机制。结果 超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术结合UNIFI数据库快速分析鉴定五倍子化学成分60种。五倍子提取物可能通过促进血管内皮一氧化氮合酶的活性;在药理通路中,它可能影响平滑肌细胞内Ca2+的释放和外钙内流,从而发挥作用。结论 本研究首次采用UPLC-Q-TOF-MS^(E)结合UNIFI数据库对五倍子提取物进行鉴定。从五倍子提取物中鉴定出60种化合物。酚酸类占比较大,其药理作用可能是酚酸类化合物通过内皮依赖和内皮非依赖途径激活一氧化氮合酶发挥舒张血管的作用。药理通路其可能为通过促进平滑肌细胞内钙释放和外钙内流发挥作用。

基于UPLC-Q-TOF-MSE的百合化学成分分析

目的利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MSE)技术对百合的化学成分进行定性分析。方法液相采用Acquity超高效液相色谱,Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温35℃,进样量10μL;质谱采用Xevo G2-XS型四级杆飞行时间质谱仪,电喷雾离子源正、负离子模式下采集数据。通过分析一级质谱精确相对分子质量和二级质谱裂解信息,结合对照品与文献报道进行鉴定和推测。结果从百合中初步鉴定了33个化合物,23个酚酸类化合物,8个甾体皂苷类化合物,2个生物碱类化合物。其中(25R)-呋甾烷-5-烯-1β,3α,22α,26-四醇-3,26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(25R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖-5α-呋甾烷-3β,20α,26-三醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、(25R)-螺甾烷-5-烯-3β,17α-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷均首次在该植物中发现。结论UPLC-Q-TOF/MSE技术能全面、快速地对百合化学成分进行分析,为其药效物质基础和质量控制的进一步阐明奠定了良好的基础。

UPLC-Q-TOF MS^E技术结合UNIFI数据库筛查方法快速分析巴戟天化学成分

采用UPLC-Q-TOF MS^E技术结合UNIFI数据库筛查方法对巴戟天中的化学成分进行了快速鉴定。对于已知化合物,利用其名称、分子式、结构式等信息补充完善UNIFI数据库,进行数据筛查,依据其精确分子质量、特征离子、中性丢失、MS/MS裂解规律、色谱保留行为等信息,结合对照品信息和文献报道等对其进行验证;对于未知成分,根据其精确分子质量、质谱裂解碎片、色谱保留行为以及已知同类化合物的特征碎片,对其进行结构表征。本实验共鉴定出110个化合物,包括8个寡糖类、12个环烯醚萜类、58个蒽醌类化合物和32个其他类化合物;推断出8个未知化合物,包括1个有机酸、2个苷类化合物、5个环烯醚萜类成分,其中4个是潜在的新化合物,另外4个为巴戟天中首次发现的化合物。该方法可对巴戟天药材中的化学成分进行快速、全面的分析,为巴戟天药材的质量控制和药效物质基础研究奠定基础。

UPLC-Q TOF MS^E与镜像对比分析四种麻黄炮制过程的成分变化

利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q TOF MS^E)技术采集麻黄和其不同炮制品的复杂化学成分数据,通过对比分析,探究蜜炙、醋制、酒制、炒炭4种炮制过程中麻黄非挥发性化学成分的变化。根据时间依赖型质谱扫描模式(MS^E)采集的超高精度样品数据快速识别麻黄及其炮制品中的主要化学成分,并结合镜像对比分析,总结不同炮制工艺对化学成分与变化趋势的影响。结果显示,与生品麻黄相比,炮制品中共有4类主要成分:生物碱、黄酮、烯烃和有机酸,21种非挥发性化学成分发生变化。其中,生物碱类成分均有所下降,以酒制和炒炭炮制品下降最多;黄酮、烯烃和有机酸类成分经蜜炙后含量上升,而在其他炮制品中含量下降。麻黄及其炮制品物质基础复杂,药效是多类成分共同作用的结果,不同炮制过程会使麻黄的化学成分发生明显变化,炮制品功效可能会随之改变,该方法可为麻黄炮制的现代化研究提供物质基础,也可为临床区别用药提供借鉴。

UPLC-Q-TOFMS^E技术结合UNIFI数据库快速分析桑黄化学成分

首次采用UPLC-Q-TOFMS^E技术结合UNIFI数据库筛查方法对桑黄中的化学成分进行快速鉴定。本实验共鉴定出58个化合物,包括11个有机酸及有机酸酯、7个苯丙素类、7个甾体、6个三萜、5个黄酮、5个酚类、4个二萜及其他化合物。该方法可对桑黄中的化学成分进行全面、快速地分析,为桑黄的质量控制和药效物质基础的阐明提供参考。

UPLC-ESI-Q-TOF-MS^E快速鉴定黄连中生物碱类成分

目的采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术(UPLC-ESI-Q-TOF-MSE)快速分析和鉴定黄连中生物碱成分。方法采用色谱柱:HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm,Waters),流动相采用A:0.1%甲酸水溶液,B:乙腈,梯度洗脱。流速为0.4m L·min-1,进样量为3μL,正离子MSE扫描模式检测。结果通过元素组成分析和碎片结构分析,并结合对照品数据对照和相关文献,鉴定了6种生物碱分别为a.木兰花碱、b.小檗红碱、c.黄连碱、d.非洲防己碱、e.药根碱、f.小檗碱,并分析其裂解规律。结论 UPLC-ESI-Q-TOF-MS^E可用于快速鉴定黄连中生物碱成分,为黄连饮片的质量控制提供有效的技术支持。

基于UPLC/Q-TOF-MS^E分析小续命汤有效成分组的化学成分

目的:快速阐明中药复方小续命汤的化学组成。方法:利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF-MSE)对小续命汤有效成分组进行了快速分析和成分鉴定。液相条件:Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,流速0.35 m L·min-1;质谱条件:采用ESI源,正、负离子模式下分别进行数据采集。结果:通过与对照品信息的提取辨识、与数据库数据的匹配指认以及对文献资料的比照分析,从小续命汤有效成分组中鉴定了42个化合物,主要包括黄酮、生物碱、三萜皂苷等类成分,并归属了各化合物的单味中药来源。结论:本研究比较全面地阐明了小续命汤有效成分组的化学组成,为此中药复方的质量控制提供参考,也为其深入的药效物质基础及药理作用研究奠定了基础。

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法筛查尿液中150种药物与毒物

提出了超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UHPLC-Q-TOF/MS^(E))筛查尿液中150种药物与毒物的方法。尿液样品经液液萃取后,采用ACQUITY UPLC HSS C_(18)色谱柱分离,以不同体积比的含0.1%(体积分数)甲酸的乙腈溶液和5mmol·L^(-1)甲酸铵溶液(pH 3.0)的混合液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源正离子全扫描模式筛查。根据化合物的保留时间、母离子和碎片离子信息鉴定150种化合物。结果表明,150种化合物中有13组同分异构体,基于不同的保留时间或独特的碎片离子,13组同分异构体中的10组可以成功地彼此区分;尿液中150种化合物的检出限(3S/N)为0.2~25.0μg·L^(-1)。68个代表性化合物的绝对基质效应为23.1%~119%,提取回收率为30.8%~115%。方法用于120个实际尿液案例的筛查分析,有10个样品呈阳性。

基于UPLC-Q-TOF/MSE的UNIFI质谱数据库建立及其在血脂康胶囊化学成分的快速分析中的应用

本研究采用UPLC-Q-TOF/MSE技术结合UNIFI数据库开发了快速、全面、准确、高效的血脂康胶囊化学成分定性分析方法。利用化合物名称、分子量、分子式、结构式等信息建立UNIFI数据库,并依据高分辨质量数、同位素分布、质量偏差、碎片离子匹配度、色谱保留行为等信息进行数据库自动检索,实现药材和制剂中天然产物的定性鉴定。结合手动确证,在血脂康胶囊及红曲药材中鉴定到82种化学成分,对于其中的有机酸类、黄酮类、莫纳克林类、红曲色素类主要成分进行了质谱裂解规律分析,确保鉴定准确度,多种莫纳可林类化合物为首次采用LC-MS工作流程实现定性分析。综上,本研究通过LC-MS技术阐明了血脂康胶囊的化学物质基础,为血脂康胶囊中药制造过程中的关键质量属性控制和一致性评价提供了扎实的实验数据支持,为基于血脂康胶囊的药效物质基础研究提供支撑。

超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱法快速筛查尿液中58种毒品及滥用药物

目的建立超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MSE)快速筛查人体尿液中58种毒品及滥用药物的方法。方法样品经甲醇蛋白沉淀法进行前处理。目标物经ACQUITY UPLC HSS C18色谱柱分离,以0.1%甲酸-乙腈溶液及5mmol/L甲酸铵-水溶液(pH=3)为流动相进行梯度洗脱,质谱采用电喷雾电离正离子全扫描模式(MS^E)检测。利用UNIfi软件建立数据库,并对样品进行筛查分析。结果人体尿液中58种毒品及滥用药物的检出限(LOD,3S/N)在0.2~25.0ng/mL之间,用UNIFI软件对尿液样品中添加的58种毒品及滥用药物进行快速筛查,通过数据库比对,目标化合物均被检出。结论方法的准确性高,操作简单、快速,适用于尿液中毒品及滥用药物的快速筛查。

基于UPLC-Q-TOF-MS^(E)结合多元统计方法的不同产地白芍药材质量评价

目的分析不同产地白芍药材质量差异及特异性化学成分,为白芍的产地判别和质量评价提供依据。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MSE)对不同产地白芍样品全成分分析,应用主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)及聚类分析(cluster analysis,CA)对安徽亳州、四川中江、浙江磐安3个产地共15批次白芍药材进行多元统计分析,根据VIP值>1和t检验(P<0.05)筛选不同产地白芍药材中具有显著差异的化学成分。结果从不同产地白芍药材中共鉴定出44个化学成分,以单萜类、鞣质类、三萜类、黄酮类、挥发油类等成分为主,其中以单萜类成分含量最高。不同产地白芍的化学成分差异明显,共鉴定出16个差异化学成分,其中牡丹皮苷G为安徽亳州产地特有成分,1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖为浙江磐安产地的特有成分,1-O-β-D-glucopyranosylpaeonisuffrone为四川中江产地特有成分;柠檬酸、1-没食子酸酰葡萄糖、去苯甲酰基芍药苷或异构体、没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸甲酯、没食子酰芍药苷或异构体、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、白芍苷R1、牡丹皮苷B为3个产地共有成分,但含量呈现不同的变化规律。结论不同产地白芍质量差异明显,在共有成分基础上,安徽亳州白芍含有特异成分牡丹皮苷G,浙江磐安白芍含有特异成分1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖,四川中江白芍的特有成分为1-O-β-D-glucopyranosylpaeonisuffrone,可作为产地鉴别的依据,共有成分及差异成分的含量可作为质量评价的依据。

结肠炎奇效颗粒中化学成分的UPLC-Q-TOF/MSE分析

目的:为了系统分析复方中药结肠炎奇效颗粒的化学组成,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF/MSE)对该制剂中主要化学成分进行了快速鉴定和归属。方法:色谱条件采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱(0~2 min,5%B;2~16 min,5%~21%B;16~30 min,21%~95%B;30~33 min,95%B;33~34 min,95%~5%B;34~37 min,5%B),流速0.3 mL·min-1,柱温30℃,进样量2μL。质谱分析使用电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式扫描,扫描范围m/z 60~1 200,MSE模式采集数据。通过与对照品、参考文献和自建数据库信息比对后对各离子峰进行鉴定。结果:从结肠炎奇效颗粒中共分离和鉴定出102个化学成分,包括有机酸类、黄酮及其苷类、三萜类、苯乙醇苷类、鞣质类、环烯醚萜苷类等,其中黄酮及其苷类主要来源于骨碎补和山楂,苯乙醇苷类和环烯醚萜苷类来源于车前子,三萜类和鞣质类主要来源于山楂和诃子,且已鉴定化学成分包含骨碎补中成分28个,车前子中成分31个,诃子肉中成分53个以及山楂中成分58个。结论:建立的UPLC-Q-TOF/MSE能全面快速地分析结肠炎奇效颗粒中的化学成分,初步阐明了该颗粒剂的化学成分轮廓,可为其药效物质基础及质量控制研究奠定基础。

采用UPLC-Q-TOF/MS^E鉴别芪苈强心胶囊有效部位中的化学成分

为了全面快速地阐明复方中药芪苈强心胶囊的化学组成,本文利用UPLC-Q-TOF/MSE对芪苈强心胶囊进行了快速分析和成分鉴定,从芪苈强心胶囊中鉴定了40个化合物,并归属了各化合物的单味药来源。结果显示,芪苈强心胶囊的主要成分包括三萜皂苷类、黄酮苷类、C21甾类和酚酸类等。该研究比较全面地阐明了芪苈强心胶囊的化学组成,为此中药复方制剂的质量控制和物质基础研究奠定了基础。

利用UPLC-Q-TOF-MS^E快速分析四物汤中的化学成分

该研究利用UPLC-Q-TOF-MSE技术分析了四物汤的化学成分。通过正、负离子模式的检测,根据质谱数据以及相关文献,快速表征了43个色谱峰,鉴定了其中的25个化合物,主要包括来自白芍的8个单萜糖苷类化合物和来自川芎、当归的13个苯酞类化合物。同时,通过MarkerLynx软件进行主成分分析和偏最小二乘法分析,比较了四物汤水提液和60%乙醇提取液中的化学成分差异,为探讨四物汤补血作用的物质基础提供了依据。

UPLC-Q-TOF-MS^E技术结合UNIFI数据库快速定性分析黄牡丹化学成分

目的应用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MSE)结合UNIFI天然产物信息平台对黄牡丹Paeonia delavayi var.lutea的化学成分进行快速定性分析。方法应用时间依赖型MSE方式采集样品质谱数据,结合自动检出及人工核对方法分析黄牡丹化学成分。结果通过UNIFI数据库自动检出、在线及离线数据库的检索和相关文献的人工核对,鉴定了57个化合物,包括单萜苷、酚酸、鞣酸、丹皮酚和三萜等类化合物。结论本方法可以快速全面地定性分析黄牡丹根的化学成分,为黄牡丹的质量控制和药效物质基础的阐明提供参考。

UPLC-Q-TOF-MS^E结合相对保留时间在线快速鉴定麦冬中甾体皂苷类成分

目的:采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MSE)表征并快速在线鉴定麦冬中甾体皂苷类成分;结合呋甾皂苷在反向色谱上的保留规律,鉴别同分异构体。方法:运用2种反相色谱柱(ACQUITY UPLC HSS T3和Agela Venusil XBP C18-2),在2种溶剂系统(0.1%甲酸/水-0.1%甲酸/乙腈,丙酮-水)和3个洗脱条件下对系列呋甾皂苷的色谱保留规律进行总结。利用UPLC-Q-TOF-MSE对麦冬成分进行分析,获得质谱数据。结果:3种色谱条件下呋甾皂苷的相对保留时间一致,呈现如下保留规律:甾体皂苷中糖链结构相同,苷元上羟基的数目越多保留时间越短;仅羟基位置不同时,保留时间为1位羟基<17位羟基<14位羟基;仅C-26位糖链糖基连接位置不同时,葡萄糖-(1→6)-葡萄糖<葡萄糖-(1→2)-葡萄糖;从麦冬表征的图谱中共鉴定了21个色谱峰,其中14个呋甾皂苷,7个为螺甾皂苷。结论:色谱保留时间能为呋甾皂苷同分异构体的液质联用在线鉴定提供有益的数据支持。

治咳川贝枇杷滴丸UPLC-Q-TOF-MS^E指纹图谱研究

目的:全面、快速阐明复方中药治咳川贝枇杷滴丸的化学组成。方法:采用UPLC-Q-TOF-MSE对治咳川贝枇杷滴丸的化学成分进行快速表征、鉴定,并尝试使用其特征指纹图谱进行质量控制。结果:对治咳川贝枇杷滴丸进行超声波辅助结合低温冻提,采用UPLC-Q-TOF-MSE对其醇提物中多种化合物进行分析,从中鉴定了35个化合物。在此基础上,以紫外谱图的24个共有峰建立了治咳川贝枇杷滴丸的指纹图谱,并对不同批次滴丸进行了相似度分析,表明不同批次治咳川贝枇杷滴丸的质量差异较小。结论:本方法对治咳川贝枇杷滴丸化学成分的快速鉴定及质量控制奠定了基础。

UPLC-Q-TOF/MS^E方法分析养血清脑颗粒的化学成分

为系统阐明复方中药养血清脑颗粒的化学组成,本研究采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间/全信息串联质谱(UPLC-ESI-Q-TOF/MS^E)技术,对养血清脑颗粒的化学成分进行分析。通过Q-TOF-MS^E提供化合物的准确相对分子质量、质谱碎片离子信息,与对照品的保留时间和质谱数据比对,结合参考文献,共鉴定出142种成分,主要包括酚酸类、单萜苷类、醌类、生物碱类和苯酞内酯类5类成分,并对各成分的药材来源进行归属。本研究全面、快速、准确地分析了养血清脑颗粒的化学成分,为养血清脑颗粒的药效物质基础和质量控制等研究奠定了基础。

基于UPLC-ESI-Q-TOF-MS^E技术分析颠茄草化学成分

目的:采用超高效液相色谱-电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱技术(UPLC-ESI-Q-TOF/MSE)快速分离、分析颠茄草化学成分。方法:采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱(3 mm×150 mm,2.7μm),以乙腈为流动相A,醋酸铵缓冲溶液为流动相B,梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1,柱温30℃,进样量2μL;采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式下采集数据,通过建立的Agilent PCDL颠茄属化合物数据库初步检索鉴定化合物,并人工复核相对分子质量、特征离子、中性丢失、色谱保留时间等信息,同时利用Agilent MSC结构解析软件,结合对照品信息和数据库信息确证结构,总结裂解规律。结果:初步鉴定出颠茄草中化学成分19个,并归纳了莨菪碱类化合物的裂解规律。结论:采用UPLC-ESI-Q-TOF/MS法快速分析颠茄草化学成分,为进一步阐明颠茄草药效物质基础和质控指标的选择提供依据。

基于UPLC-Q-TOF/MS;分析不同炮制时间炒车前子的化学成分变化规律

目的:为探究不同炮制时间炒车前子化学成分变化情况,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLCQ-TOF/MSE)对不同炒制时间炒车前子中差异成分进行快速鉴定和半定量分析。方法:色谱条件采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~1 min,5%~10%B;1~2 min,10%~15%B;2~10 min,15%~20%B;10~12 min,20%~40%B;12~13 min,40%~100%B;13~14 min,100%~5%B;14~15 min,5%B),流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃,进样量3μL。质谱分析使用电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式检测,扫描范围为m/z50~1500。采用MarkerLynx 4.1软件挖掘差异化合物,比较不同炒制时间样品各离子峰的离子响应强度,研究化学成分含量变化情况。结果:共找到具有潜在的显著性差异成分20个,其中17个成分已鉴定,3个成分未知,主要包括苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类、生物碱类等。炮制后蔗糖、京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、车前素A等7个成分峰强度降低;orobanchoside,dianthoside和车前草苷D峰强度在炒制过程中先升高后降低;去咖啡酰基毛蕊花糖苷,木通苯乙醇苷A,异毛蕊花糖苷等10个成分峰强度升高,其中9个为新生成成分。结论:炒制后,炒车前子化学成分的含量和组成均发生了显著变化,这可能与车前子炒制后通便作用减弱、止泻利尿活性增强有关。