改良检测血浆中3种双酯型乌头碱含量的UPLC/Q Exactive MS方法学研究

目的:改良UPLC/Q Exactive MS用于同时测定大鼠血浆中乌头碱、次乌头碱和新乌头碱含量的方法学。方法:采用Dionex UltiMate 3000快速超高效液相色谱仪和Q Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统检测。采用HypersilGOLD色谱柱分离,流动相A(0.1%甲酸-水):流动相B(乙腈)=35∶65,通过全扫描/选择离子监测(FullMS/SIM)模式进行定性筛查和定量检测。结果:此检测方法专属性高,绝对基质效应在99.22%~100.79%;线性相关系数r≥0.9995,次乌头碱、乌头碱和新乌头碱在1~64ng/mL范围内线性关系良好,定量下限(S/N=10),次乌头碱为0.2ng/mL,乌头碱和新乌头碱为0.5ng/mL;准确度RE%在-2.3800%~2.131%,精密度RSD%在0.0971%~8.8111%,符合生物样本定量分析要求;稳定性考察结果表明室温放置8h、-20℃冻存2周的条件下稳定,-20℃冻融3次后将不再适合生物样本测定。结论:改良后的方法更适合同时测定大鼠血浆中3种双酯型乌头碱的含量。

通过超高效液相色谱—四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用仪对人尿中42种小肽类禁用物质进行兴奋剂检测

目的:通过采用超高效液相色谱—四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用仪(Q Exactive Plus UHPLC/HRMS),建立对人尿中42种小肽类禁用物质的检测方法。被检测的小肽类禁用物质涵盖了世界反兴奋剂机构(WADA)禁用清单中的生长激素促分泌剂类(GHS)、生长激素释放肽类(GHRP)、促性腺激素释放因子(GnRHs)、人类生长激素(h GH)、生长因子以及生长因子调节剂等分类的定性物质、片段及代谢物,还包括了两种利尿剂去氨加压素(Desmopressin)和苯赖加压素(Felypressin)及其代谢物。方法:使用直接进样方法对尿液样本进行预处理,取待测样品加入内标溶液涡旋混匀,以10000 r/min离心10分钟后。取上清液与稀释溶液混匀,在超高效液相色谱-Q Exactive Plus组合型四极杆Orbitrap质谱仪上进行分析。结果:采用全扫描(Full Scan)和平行反应监测(PRM)模式对含有42种小肽类禁用物质及内标的阳性质量控制样品(QCP)进行定性分析。在最低要求检测浓度(MRPL)下,该方法均可以正确检出尿样中的小肽类目标化合物(其信噪比S/N>3),可满足WADA的相关技术文件的要求。结论:该方法通过直接进样的前处理方法,使得样品前处理程序变得简单、高效,同时因为采用了Q Exactive Plus UHPLC/HRMS,尽可能多地保留了样品检测的灵敏度和特异性,从而使得该方法的灵敏度、特异性以及检出限等均可满足WADA对此类药品检测能力的要求。

基于UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术快速识别补肾活血方的化学成分

目的:利用UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪联用技术,快速识别与鉴定补肾活血方中的化学成分。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,质谱采用负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描功能,对补肾活血方化学成分进行快速识别及鉴定。结果:通过质谱数据、对照品比对共鉴定出58个化合物;结果显示,补肾活血方中的主要化学成分包括异黄酮类、酚酸类、人参皂苷类及少量的环烯醚萜类化合物。结论:该研究能够快速分析和确定补肾活血方的化学成分,为确定补肾活血方防治糖尿病性视网膜病变药效物质提供了依据。

超高效液相色谱-高分辨质谱测定白酒中氨基甲酸乙酯含量

利用氨基甲酸乙酯(ehthy carbamate,EC)源内裂解的特殊性质,在超高效液相色谱-高分辨质谱一级全扫描模式下,以EC母离子(m/z 90.05)及其子离子(m/z 62.02)作为定性离子,m/z 62.02作为定量离子,开发酱香型白酒中EC的一级子离子定量法,有效解决了一级母离子定量噪音较大、二级子离子定量响应较低的问题。结果表明,在12.2~244μg/L内线性相关系数大于0.999,检出限为0.95μg/L,加标回收率在83.46%~106.79%之间,相对标准偏差为0.67%~3.54%。该方法具有分析速度快、检出限低、准确度高等优点,适用于酱香型白酒中EC的监控。

高分辨质谱技术视野下的细胞代谢组学研究策略

高分辨质谱技术的卓然发展,分析化学、化学计量学与生物学的深度融合,使得秉承系统性思维、依托大数据信息表征能力的诸多组学技术在当今大行其道,让生命科学研究具备了愈加宏大开阔的视野。以Q Exactive为代表的高分辨率/准确质谱同时定性与定量能力的坚实提升为细胞代谢组学研究提供了系统完备的解决策略,从科学发现到假说验证,从非靶向全组分代谢信息表征到基于高分辨定量的靶标代谢分析,高分辨质谱技术视野下的代谢组学思维将深切地改变着细胞研究的科研形态,为生命科学打开一扇崭新的开启宝藏之门。