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c-Met siRNA对肝细胞生长因子诱导的人胆管癌QBC939细胞增殖的影响 被引量:10
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作者 张秀华 缪林 +2 位作者 季国忠 范志宁 刘政 《医学研究生学报》 CAS 2009年第11期1154-1158,共5页
目的:近年来胆管癌的发病率和病死率呈上升的趋势,5年生存期低于5%,因此亟需利用现代生物技术探索新的治疗方法。探讨针对肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met的RNA干扰对人胆管癌(CCA)QBC939细胞增殖的影响。方法:构建针对人c-Met基因的小干... 目的:近年来胆管癌的发病率和病死率呈上升的趋势,5年生存期低于5%,因此亟需利用现代生物技术探索新的治疗方法。探讨针对肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met的RNA干扰对人胆管癌(CCA)QBC939细胞增殖的影响。方法:构建针对人c-Met基因的小干扰RNA(siRNA),转染体外培养的人CCA QBC939细胞,应用MTT法检测细胞增殖,Western blot检测c-Met、细胞周期素(Cyclin)D1和A表达以及磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号通路活化。结果:c-Met siRNA显著抑制c-Met蛋白表达,且随着其浓度的增加,c-Met蛋白表达逐渐下降,500 nmol/L c-Met siRNA对c-Met蛋白表达的抑制率达65%。HGF刺激24 h,细胞增殖是对照组的4.54倍,100 nmol/L c-Met siRNA预处理即显著抑制HGF诱导的细胞增殖,其抑制率达26%,且随浓度增加,其抑制作用逐渐增强,500 nmol/L c-Met siRNA对HGF诱导的细胞增殖的抑制率达85%。HGF刺激4h,PI3K和Akt的活性即显著增强,分别是对照组的4.09和4.54倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的PI3K/Akt活化,500 nmol/L c-Met siRNA几乎完全抑制HGF诱导的PI3K/Akt活化。HGF显著诱导人CCAQBC939细胞ERK1/2活化,50 ng/ml HGF刺激4 h,磷酸化ERK1/2表达是对照组的3.63倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的ERK1/2活化。HGF显著诱导人CCA QBC939细胞细胞周期素D1和A表达,分别是对照组的2.83和3.16倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的细胞周期素D1和A表达。结论:针对人c-Met基因的RNA干扰可有效阻断人CCA QBC939细胞c-Met表达,并通过阻断PI3K/Akt和ERK1/2信号通路活化而抑制HGF诱导的细胞增殖。 展开更多
关键词 人胆管癌qbc939细胞 肝细胞生长因子 c—Met 小干扰RNA
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羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤PS2、COX-2的影响 被引量:3
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作者 黄国栋 黄媛华 +2 位作者 黄道富 肖美珍 唐丽君 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期308-310,共3页
目的探讨羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤的乳癌相关肽(PS2)、环氧合酶-2(COX-2)的影响,分析PS2、COX-2与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌QBC939细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,将30只裸鼠随机分成对照组、羟基喜树碱低剂量组... 目的探讨羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤的乳癌相关肽(PS2)、环氧合酶-2(COX-2)的影响,分析PS2、COX-2与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌QBC939细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,将30只裸鼠随机分成对照组、羟基喜树碱低剂量组和羟基喜树碱高剂量组,观察移植瘤体生长情况,RT-PCR法检测瘤体内PS2、COX-2 mRNA表达。结果与对照组比,羟基喜树碱低、高剂量组都可使移植瘤体的PS2 mRNA表达增高;COX-2 mRNA表达降低,且瘤体生长减慢,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论羟基喜树碱可降低移植瘤COX-2 mRNA表达,增高移植瘤体的PS2 mRNA表达,并使人胆管癌裸鼠移植瘤生长减慢。 展开更多
关键词 胆管癌 裸鼠 移植 qbc939细胞 PS2 COX-2
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蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939增殖及cyclin E和P27蛋白表达影响的研究 被引量:5
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作者 梁军才 张秀华 +2 位作者 游思洪 何伟 缪林 《医学研究生学报》 CAS 2010年第11期1136-1139,共4页
目的已有诸多研究显示中药蟾蜍灵具有明显抑制肿瘤增殖的作用,观察蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939的cyclin E和P27表达的影响,探讨其调控胆管癌细胞增殖的途径和机制。方法 MTT比色法观察不同浓度蟾蜍灵(0.1、1、10μmol/L)对人胆管癌细胞Q... 目的已有诸多研究显示中药蟾蜍灵具有明显抑制肿瘤增殖的作用,观察蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939的cyclin E和P27表达的影响,探讨其调控胆管癌细胞增殖的途径和机制。方法 MTT比色法观察不同浓度蟾蜍灵(0.1、1、10μmol/L)对人胆管癌细胞QBC939增殖的影响;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)实验检测蟾蜍灵毒性;流式细胞术检测人胆管癌细胞QBC939细胞周期的变化;Western blot法测定cyclin E、P27蛋白水平变化。结果 MTT比色法结果表明蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939生长具有较强的抑制作用,并在一定范围内具有时间和浓度依赖性,流式细胞仪检测细胞周期阻滞在G0/G1期,具有良好的量效关系。Western blot测定cyclin E蛋白表达量下降,P27蛋白表达量升高。结论蟾蜍灵可能是通过阻滞细胞周期,减少cyclinE蛋白表达,增加P27蛋白表达,来达到抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 胆管癌细胞 蟾蜍灵 细胞周期 Cyclin E蛋白 P27蛋白
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原花青素对人胆管癌细胞QBC939抑制的体内外研究 被引量:1
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作者 张玉洁 吴倩 +1 位作者 洪学军 曹军华 《实用药物与临床》 CAS 2013年第6期459-461,共3页
目的研究原花青素(PC)体内外对人胆囊癌细胞的抑制作用。方法常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、空白对照组和PC组。MTT法检测PC对人胆囊癌细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;建立QBC939细胞裸鼠异种移植瘤... 目的研究原花青素(PC)体内外对人胆囊癌细胞的抑制作用。方法常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、空白对照组和PC组。MTT法检测PC对人胆囊癌细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;建立QBC939细胞裸鼠异种移植瘤模型。将荷瘤裸鼠随机分为5组:阴性对照组、5-Fu阳性对照组及PC 3个剂量组,每日腹腔注射给药,每隔3 d测肿瘤大小;12 d后,处死裸鼠,剥瘤称重并计算抑瘤率。结果 PC 3个剂量组显著抑制QBC939细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性;将细胞周期阻滞在S期,并诱导QBC939细胞凋亡;PC可抑制QBC939细胞裸鼠异种移植瘤的生长。结论 PC体内外均可抑制SHG-44细胞生长,并诱导肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 原花青素 qbc939细胞 增殖 凋亡 细胞周期 裸鼠
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Src激酶特异性抑制剂PP2对人胆管癌QBC939细胞侵袭能力的影响和机制研究 被引量:1
5
作者 王刚 解寒冰 +1 位作者 戚文涛 董梁 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第16期19-23,共5页
目的探讨Src激酶特异性抑制剂PP2对人胆管癌QBC939细胞侵袭能力的影响和机制。方法通过Western Blot技术检测PP2对人胆管癌QBC939细胞中Src激酶活化的影响;用Transwell小室法观察PP2对QBC939细胞的影响;用RT-PCR和Western Blot技术检测... 目的探讨Src激酶特异性抑制剂PP2对人胆管癌QBC939细胞侵袭能力的影响和机制。方法通过Western Blot技术检测PP2对人胆管癌QBC939细胞中Src激酶活化的影响;用Transwell小室法观察PP2对QBC939细胞的影响;用RT-PCR和Western Blot技术检测PP2对QBC939细胞侵袭能力相关分子的作用。结果 PP2组中p-Src蛋白的表达水平明显低于对照组;PP2组QBC939细胞的体外侵袭能力较对照组显著降低;与对照组相比,PP2组E-cadherin的表达显著增强,CD44的表达则明显减弱。结论 PP2能通过抑制Src激酶的活化,增强QBC939细胞侵袭抑制分子E-cadherin、减弱促侵袭分子CD44的表达,进而抑制人胆管癌QBC939细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 胆管癌 SRC激酶 PP2 qbc939细胞 侵袭能力
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阿托伐他汀对人胆管癌QBC939细胞系侵袭的影响 被引量:1
6
作者 郑龙志 林伟 +2 位作者 陈有挺 石铮 何庆良 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2014年第11期1344-1346,共3页
目的探讨阿托伐他汀(ATV)对人胆管癌QBC939细胞系侵袭的影响及其可能作用机制。方法应用细胞培养技术培养人胆管癌QBC939细胞,经不同浓度的ATV处理后,以Matrigel侵袭实验和半定量RT-PCR检测ATV对QBC939细胞内Rho C mRNA表达的影响情况... 目的探讨阿托伐他汀(ATV)对人胆管癌QBC939细胞系侵袭的影响及其可能作用机制。方法应用细胞培养技术培养人胆管癌QBC939细胞,经不同浓度的ATV处理后,以Matrigel侵袭实验和半定量RT-PCR检测ATV对QBC939细胞内Rho C mRNA表达的影响情况。结果 Matrigel侵袭实验显示,经10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L干预48 h后的QBC939细胞,随着浓度的增加,其体外侵袭能力明显减弱(P<0.01);半定量RT-PCR测定显示,ATV作用48 h后,QBC939细胞中Rho C的表达改变并不明显。结论 ATV可减弱人胆管癌QBC939细胞体外侵袭能力。 展开更多
关键词 阿托伐他汀 qbc939细胞 肿瘤侵袭
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RNA干扰ANXA5表达对人胆管癌细胞QBC939的增殖和侵袭的影响 被引量:1
7
作者 丁向民 柏斗胜 +4 位作者 姚捷 蒋国庆 李振南 钱建军 汤劲松 《中国现代普通外科进展》 CAS 2018年第10期764-769,共6页
目的:探讨膜联蛋白A5(ANXA5)对人胆管癌细胞QBC939增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:构建3个沉默QBC939细胞ANXA5的shRNA质粒(ANXA5-sh1/2/3)和1个阴性对照质粒,慢病毒包装质粒后感染QBC939细胞,流式细胞仪检测感染效率。病毒感染QBC... 目的:探讨膜联蛋白A5(ANXA5)对人胆管癌细胞QBC939增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:构建3个沉默QBC939细胞ANXA5的shRNA质粒(ANXA5-sh1/2/3)和1个阴性对照质粒,慢病毒包装质粒后感染QBC939细胞,流式细胞仪检测感染效率。病毒感染QBC939细胞后,Western blotting检测细胞的ANXA5蛋白表达情况;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率变化;划痕实验和Transwell实验评估QBC939细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:干扰组(KD)细胞中的ANXA5蛋白水平显著低于空白组(BC)和阴性对照组(NC)细胞中的ANXA5蛋白水平。与NC组和BC组细胞相比,KD组细胞中G0/1细胞的百分比和凋亡率增高,而细胞增殖活性降低。KD组细胞中的细胞迁移和侵袭能力也低于NC和BC组细胞。结论:RNA干扰QBC939细胞的ANXA5表达后,明显抑制其增殖、侵袭和诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 AnnexinA5 RNA干扰 人胆管癌细胞 qbc939 细胞功能揖
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阿伐他汀诱导人胆管癌QBC939细胞凋亡的研究 被引量:2
8
作者 郑龙志 陈有挺 石铮 《江西医药》 CAS 2012年第6期480-482,共3页
目的观察阿伐他汀(ATV)对人胆管癌QBC939细胞增殖及凋亡的影响。方法应用细胞培养技术培养QBC939细胞,经不同浓度的阿伐他汀处理后,以MTT法检测QBC939细胞的存活率,通过光镜、倒置显微镜及琼脂糖凝胶电泳检测胆管癌细胞凋亡的形态学特... 目的观察阿伐他汀(ATV)对人胆管癌QBC939细胞增殖及凋亡的影响。方法应用细胞培养技术培养QBC939细胞,经不同浓度的阿伐他汀处理后,以MTT法检测QBC939细胞的存活率,通过光镜、倒置显微镜及琼脂糖凝胶电泳检测胆管癌细胞凋亡的形态学特征、生化学特征。结果在阿伐他汀的作用下,QBC939细胞的生长、增殖变的相对缓慢,凋亡的细胞出现膜小泡、凋亡小体等特征性改变;DNA电泳呈现典型的梯状条带。结论阿伐他汀可抑制胆管癌细胞的生长、增殖,并可诱导细胞发生凋亡,且其作用呈剂量效应关系。 展开更多
关键词 阿伐他汀 qbc939细胞 肿瘤细胞增殖 细胞凋亡
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羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤MMP-2、TIMP-2的影响
9
作者 孙举来 赵翰林 《安徽医药》 CAS 2005年第8期568-569,共2页
目的探讨羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)的影响,分析MMP-2及TIMP-2与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌QBC939细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,将24只裸鼠随机分成对... 目的探讨羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)的影响,分析MMP-2及TIMP-2与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌QBC939细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,将24只裸鼠随机分成对照组、干预组和实验组,分析移植瘤体生长情况,免疫组化法结合图像分析系统半定量检测瘤体内MMP-2、TIMP-2及MMP-2/TIMP-2的比值。结果与对照组比,实验组可使移植瘤体的MMP-2、TIMP-2含量增高,后者差异有统计学意义(P<0.01);实验组可降低MMP-2/TIMP-2的比值和抑制移植瘤生长,差异有统计学意义(P<0.01)。结论实验组可降低移植瘤MMPV2/TIMP-2比值,对人胆管癌裸鼠移植瘤细胞外基质的降解可能具有抑制作用,进而抑制移植瘤的生长。 展开更多
关键词 胆管癌 裸鼠 移植 qbc939细胞 金属蛋白酶类 基质金属蛋白酶-2(MMP-2) MMP-2/TIMP-2 裸鼠移植瘤 qbc939 羟基喜树碱
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LPS对5-FU杀伤QBC939细胞影响的实验研究
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作者 霍胜军 吕忠诚 +2 位作者 邹晓鹤 宋建文 王康 《医学研究杂志》 2015年第3期78-80,共3页
目的探讨LPS联合化疗药物5-FU对人胆管癌QBC939细胞生长和诱导细胞凋亡的影响。方法四甲基唾哇蓝(MTT)试验检测LPS对5-FU抑制QBC939细胞增殖的影响,流式细胞术观察LPS对5-FU诱导QBC939细胞凋亡的影响。结果 1MTT法检测显示5-FU对胆管癌... 目的探讨LPS联合化疗药物5-FU对人胆管癌QBC939细胞生长和诱导细胞凋亡的影响。方法四甲基唾哇蓝(MTT)试验检测LPS对5-FU抑制QBC939细胞增殖的影响,流式细胞术观察LPS对5-FU诱导QBC939细胞凋亡的影响。结果 1MTT法检测显示5-FU对胆管癌细胞株QBC939杀伤作用明显,但易出现耐药性,LPS可以增强5-FU后期杀伤作用,能一定程度上防止耐药的出现;2流式细胞术结果显示化疗药物5-FU后能显著诱导QBC939细胞发生凋亡,凋亡指数为11.50±2.15(P<0.05),对照组为3.53±0.32,加用LPS后,能更明显地诱导凋亡,凋亡指数达到26.50±3.12,与单用加化疗药物5-FU比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LPS能增强5-FU对胆管癌细胞株QBC939的后期杀伤作用,LPS联合化疗药物可能是胆管癌临床治疗的一种合理策略。 展开更多
关键词 胆管癌qbc939 CXCR4 脂多糖 基因治疗
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冬凌草甲素对胆管癌QBC939细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响 被引量:6
11
作者 丁明勇 王卫星 《广西医学》 CAS 2016年第3期308-312,共5页
目的探讨冬凌草甲素对胆管癌细胞系QBC939细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响。方法采用不同浓度冬凌草甲素(0、10、20、40、80、100μmol/L)处理QBC939细胞24、48、72 h,MTT法测定QBC939细胞活力并计算增殖抑制率;不同浓度冬凌草甲素(0... 目的探讨冬凌草甲素对胆管癌细胞系QBC939细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响。方法采用不同浓度冬凌草甲素(0、10、20、40、80、100μmol/L)处理QBC939细胞24、48、72 h,MTT法测定QBC939细胞活力并计算增殖抑制率;不同浓度冬凌草甲素(0、20、40、80μmol/L)处理QBC939细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,Western Blot法检测QBC939细胞B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达,端粒酶重复序列扩增法检测QBC939细胞的端粒酶活性。结果 QBC939细胞增殖抑制率随冬凌草甲素的药物浓度升高、作用时间延长而升高;与0μmol/L冬凌草甲素组相比,其他浓度冬凌草甲素组的S期细胞比例降低;0、20、40、80μmol/L冬凌草甲素组QBC939细胞的凋亡率分别为0.5%、14.8%、25.8%及37.7%;Western Blot结果显示随着药物浓度的升高,QBC939细胞的Bax表达量逐渐升高,Bcl-2表达量逐渐降低;其他浓度冬凌草甲素组QBC939的端粒酶活性均低于0μmol/L冬凌草甲素组,且QBC939细胞的端粒酶活性随冬凌草甲素浓度的升高而降低(P<0.05)。结论冬凌草甲素可抑制QBC939细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制Bcl-2表达以降低端粒酶活性有关。 展开更多
关键词 胆管癌 冬凌草甲素 qbc939细胞 增殖 凋亡 端粒酶活性 B淋巴细胞瘤-2蛋白
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阻断NF-κB信号通路对人肝门部胆管癌细胞QBC939增殖的影响 被引量:1
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作者 刘勇刚 陈汝福 +2 位作者 于新发 周成宇 李志花 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期1065-1068,共4页
目的:研究阻断NF-κB信号通路对人肝门部胆管癌细胞QBC939生长增殖的影响。方法:常规培养QBC939细胞,采用PDTC(100μmol/L)阻断NF-κB信号通路,Western blot检测核内P65蛋白水平的表达,CCK-8检测细胞生长增殖抑制率,流式细胞仪观察细胞... 目的:研究阻断NF-κB信号通路对人肝门部胆管癌细胞QBC939生长增殖的影响。方法:常规培养QBC939细胞,采用PDTC(100μmol/L)阻断NF-κB信号通路,Western blot检测核内P65蛋白水平的表达,CCK-8检测细胞生长增殖抑制率,流式细胞仪观察细胞周期与凋亡的变化情况。结果:经PDTC阻断NF-κB信号通路后,与对照组相比,细胞核内P65蛋白水平明显下降(P<0.05)。CCK-8检测显示细胞增殖活性明显受到抑制,并随时间的延长而愈渐明显,12、24、36h后细胞增殖抑制率分别为(22.53±0.03)%、(46.54±0.03)%、(58.02±0.03)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测发现实验组G0/G1期细胞比例高于对照组,分别为(68.53±1.72)%、(38.3±1.35)%,差异有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡率在实验组为(27.68±2.77)%,对照组仅为(9.27±2.36)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阻断NF-κB信号通路诱导人肝门部胆管癌细胞G_0/G_1期阻滞及细胞凋亡,从而抑制细胞生长与增殖,提示NF-κB信号通路组成性激活参与人肝门部胆管癌的发生发展,以NF-κB信号通路作为治疗的靶点可能给人肝门部胆管癌带来新的治疗选择。 展开更多
关键词 胆管癌细胞qbc939 NF-ΚB 细胞增殖 细胞周期 凋亡
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AMD3100对胆管癌CXCR4基因、蛋白表达及QBC939细胞增殖能力的影响 被引量:1
13
作者 贺许良 曾良玉 +1 位作者 易小龙 张树友 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2019年第1期98-102,共5页
目的:探讨CXCR4基因在胆管癌组织标本及人胆管癌细胞株QBC939中的表达情况,分析AMD3100应用对CXCR4基因表达及QBC939细胞的生物学行为变化。方法:收集人胆管癌组织标本,培养人胆管癌细胞株QBC939,加入不同浓度的AMD3100抑制剂。采用RT-... 目的:探讨CXCR4基因在胆管癌组织标本及人胆管癌细胞株QBC939中的表达情况,分析AMD3100应用对CXCR4基因表达及QBC939细胞的生物学行为变化。方法:收集人胆管癌组织标本,培养人胆管癌细胞株QBC939,加入不同浓度的AMD3100抑制剂。采用RT-PCR和Western blot方法,分别检测人胆管癌标本及转染AMD3100抑制剂前后QBC939胆管癌细胞株中CXCR4基因和蛋白的表达。应用CCK-8试剂盒对转染后细胞增殖活性进行检测。通过克隆形成实验观察AMD3100对细胞克隆形成的抑制。结果:CXCR4基因及其蛋白在胆管癌组织标本及人胆管癌细胞株QBC939中均高度表达。不同浓度AMD3100抑制剂对QBC939胆管癌细胞株的增殖抑制活性取决于AMD3100抑制剂的孵育浓度、孵育时间。其中,转染不同浓度抑制剂24 h,并未对细胞增殖造成影响;转染48 h后,0.1μg·ml^(-1)AMD3100无明显影响,1μg·ml^(-1)、5μg·ml^(-1)的AMD3100抑制剂明显抑制了细胞的增殖;转染72 h后,各浓度均对细胞增殖有明显抑制作用。克隆形成实验分析显示,抑制CXCR4基因表达明显延长了克隆体形成时间,使克隆体体积和数目减少。结论:AMD3100抑制剂影响人胆管癌细胞株QBC939的增殖能力,抑制CXCR4基因和蛋白的表达。 展开更多
关键词 胆管癌 qbc939细胞株 CXCR4 AMD3100 增殖
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内脂素对人胆管癌细胞QBC939侵袭及增殖影响的体外研究
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作者 张俊华 傅赞 +3 位作者 吴新权 石毅 白剑峰 孙跃明 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期809-812,共4页
目的:研究人内脂素(visfatin)对胆管癌细胞QBC939体外增殖和侵袭能力的影响,并初步探讨可能存在的机制。方法:培养胆管癌细胞QBC939,在不同浓度的内脂素作用不同时间后,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,用Tran-swell小室检测... 目的:研究人内脂素(visfatin)对胆管癌细胞QBC939体外增殖和侵袭能力的影响,并初步探讨可能存在的机制。方法:培养胆管癌细胞QBC939,在不同浓度的内脂素作用不同时间后,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,用Tran-swell小室检测内脂素(200 ng/ml)24 h后对胆管癌QBC939细胞侵袭能力的影响,Western blot检测内脂素对QBC939细胞内基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2蛋白的表达。结果:内脂素可以促进QBC939细胞的增殖(P<0.01),且存在剂量依赖性;内脂素(200 ng/ml)处理24 h后,QBC939细胞穿透聚碳酸酯膜的能力与对照组相比显著增强(P<0.01);Westernblot显示内脂素(200 ng/m1)处理24 h后,QBC939细胞MMP-2蛋白的表达明显增高。结论:内脂素可以明显提高人胆管癌细胞QBC939的增殖和侵袭能力,其作用机制可能与MMP-2水平的增高有关。 展开更多
关键词 内脂素:人胆管癌细胞qbc939 基质金属蛋白酶-2
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蛇床子素对胆管癌QBC939细胞的诱导凋亡研究 被引量:6
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作者 朱幼姗 宋巍 +3 位作者 赵莹 黄坡 郝常宇 杨海波 《广东医学》 CAS 2018年第4期516-520,共5页
目的研究蛇床子素对胆管癌细胞的影响及其作用机制特点。方法采用MTT方法、Giemsa染色、Hoechst33258荧光染色、AO/EB荧光染色、流式细胞术和Western blot方法研究蛇床子素对胆管癌QBC939细胞增殖、形态变化,凋亡率、周期分布和凋亡相... 目的研究蛇床子素对胆管癌细胞的影响及其作用机制特点。方法采用MTT方法、Giemsa染色、Hoechst33258荧光染色、AO/EB荧光染色、流式细胞术和Western blot方法研究蛇床子素对胆管癌QBC939细胞增殖、形态变化,凋亡率、周期分布和凋亡相关蛋白表达变化的影响。结果蛇床子素对人胆管癌细胞QBC939的增殖有明显的抑制效果,且呈现剂量和时间依赖性,处理24 h和48 h的IC_(50)分别为0.169 63mmol/L和0.100 19 mmol/L;蛇床子素可诱导人胆管癌细胞QBC939的凋亡,0.15 mmol/L蛇床子素作用48 h后QBC939细胞凋亡率达到37.15%,并出现细胞凋亡的特征性形态变化,周期进程阻滞在G2/M期;蛇床子素可改变依赖于Caspase的凋亡途径中相关的蛋白Fas和Caspase-3的表达水平。结论蛇床子素具有良好的抗癌效果,依赖于Caspase的外源信号凋亡途径可能其凋亡机制之一。 展开更多
关键词 蛇床子素 胆管癌细胞 凋亡
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circAGFG1靶向miR-4429对胆管癌QBC939细胞增殖、迁移与侵袭的影响及其可能的机制 被引量:2
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作者 王全晖 袁守信 张元浩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期128-134,共7页
目的:探讨circAGFG1对胆管癌QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:收集2017年4月至2019年10月于联勤保障部队第九八八医院接受手术的33例胆管癌患者的癌组织及对应癌旁组织,qPCR法检测组织中circAGFG1和miR-4429表达水平... 目的:探讨circAGFG1对胆管癌QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:收集2017年4月至2019年10月于联勤保障部队第九八八医院接受手术的33例胆管癌患者的癌组织及对应癌旁组织,qPCR法检测组织中circAGFG1和miR-4429表达水平。体外培养胆管癌QBC939细胞,分别转染si-circAGFG1、miR-4429 mimic、共转染si-circAGFG1与anti-miR-4429后,采用CCK-8法和克隆形成实验检测对细胞增殖的影响,划痕实验和Transwell法分别检测对细胞迁移和侵袭的影响,WB法检测对细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证circAGFG1和miR-4429之间的靶向调控关系。结果:胆管癌组织中circAGFG1的表达量高于癌旁组织(3.89±0.26 vs 1.00±0.08,P<0.05),而miR-4429的表达量低于癌旁组织(0.28±0.03 vs 1.00±0.05,P<0.05)。干扰circAGFG1或过表达miR-4429后,QBC939细胞增殖水平、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数及细胞中N-cadherin蛋白表达均显著降低(均P<0.05),而E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。circAGFG1可靶向结合miR-4429,且干扰circAGFG1会促进QBC939细胞中miR-4429表达(均P<0.05)。下调miR-4429表达能够逆转干扰circAGFG1对QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响(均P<0.05)。结论:circAGFG1在胆管癌组织中表达升高,其可能通过靶向抑制miR-4429促进胆管癌QBC939细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 胆管癌 qbc939细胞 circAGFG1 miR-4429 增殖 迁移 侵袭
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MMP-2、TIMP-2与人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤生长相关性的研究
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作者 赵中伟 孙举来 +1 位作者 崔杰 赵翰林 《安徽医药》 CAS 2006年第8期595-597,共3页
目的探讨人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤内基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)的表达与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌裸鼠移植瘤模型,并随机分成对照组、干预组(羟基喜树碱,2.5 g.kg-1)和实验组(羟基喜树碱,... 目的探讨人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤内基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)的表达与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌裸鼠移植瘤模型,并随机分成对照组、干预组(羟基喜树碱,2.5 g.kg-1)和实验组(羟基喜树碱,10 g.kg-1),观察裸鼠移植瘤体生长情况及瘤体病理组织学。结果所有移植瘤标本病理组织学检查符合胆管中分化腺癌;与对照组比,实验组可明显提高移植瘤内TIMP-2的含量,降低MMP-2/TIMP-2的比值;移植瘤体积与前者呈负相关,与MMP-2/TIMP-2呈正相关。结论实验组可降低移植瘤MMP-2/TIMP-2比值,抑制移植瘤的生长,对人胆管癌裸鼠移植瘤细胞外基质的降解可能具有抑制作用。 展开更多
关键词 胆管癌 裸鼠 移植 qbc939细胞 金属蛋白酶类
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沉默TUG1基因对肝门部胆管癌QBC939细胞增殖、凋亡及周期的影响
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作者 车宇 梁静 +4 位作者 杨怡萍 廖娟 王蒨 蔡英全 邵帅 《陕西医学杂志》 CAS 2020年第5期538-541,591,共5页
目的:研究长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(TUG1)对肝门部胆管癌QBC939细胞增殖、凋亡及周期的影响。方法:通过荧光实时定量PCR(RT-QPCR)检测人肝内胆管上皮细胞系HIBEpic、人肝门部胆管癌细胞系QBC939中TUG1的表达;通过RNA干涉技术沉默QB... 目的:研究长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(TUG1)对肝门部胆管癌QBC939细胞增殖、凋亡及周期的影响。方法:通过荧光实时定量PCR(RT-QPCR)检测人肝内胆管上皮细胞系HIBEpic、人肝门部胆管癌细胞系QBC939中TUG1的表达;通过RNA干涉技术沉默QBC939细胞中TUG1的表达,检测siRNA在QBC939细胞中对TUG1-siRNA的沉默效果;MTT法检测沉默TUG1对QBC939细胞增殖的影响;流式细胞术检测沉默TUG1对QBC939细胞凋亡和周期的影响。结果:肝门部胆管癌细胞QBC939中TUG1的表达较人肝内胆管上皮细胞HIBEpic显著上调;TUG1-siRNA可有效沉默QBC939细胞中TUG1的表达;沉默TUG1的表达可抑制QBC939细胞的增殖能力,促进QBC939细胞的细胞凋亡,使QBC939细胞周期阻滞于G1期。结论:TUG1在肝门部胆管癌细胞中表达上调并促进肿瘤细胞增殖,是潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 牛磺酸上调基因1 qbc939细胞 增殖 凋亡 细胞周期
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人肝门部胆管癌细胞QBC939中Vimentin基因的siRNA构建研究
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作者 王磊 贾剑超 +3 位作者 宋双龙 戚晓辉 胡向赟 王石 《中国实验诊断学》 2022年第3期409-412,共4页
目的 构建可抑制Vimentin基因表达的siRNA并转染进入人肝门部胆管癌QBC939细胞株,初步鉴定siRNA的干扰效果。方法 设计并合成Vimentin(NM-003380)基因的可作用于不同位点的3种siRNA及一组siRNA阴性对照序列,使用脂质体法将3种不同的siRN... 目的 构建可抑制Vimentin基因表达的siRNA并转染进入人肝门部胆管癌QBC939细胞株,初步鉴定siRNA的干扰效果。方法 设计并合成Vimentin(NM-003380)基因的可作用于不同位点的3种siRNA及一组siRNA阴性对照序列,使用脂质体法将3种不同的siRNA序列及阴性对照序列瞬时转染进入人肝门部胆管癌QBC939细胞,分别命名为T1组(siVIM-1)、T2组(siVIM-2)、T3组(siVIM-3)及NC组(siCtrl),使用RT-PCR、Q-PCR技术测定实验中各组细胞Vimentin在mRNA水平上的表达情况。结果 T1、T2及T3组Vimentin在基因表达水平上均较NC组受到抑制,T2组的抑制效果较T1及T3组更明显,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 成功建立并筛选出人肝门部胆管癌细胞QBC939细胞Vimentin基因的siRNA。为后续进一步研究Vimentin的生物学特性及在肝门部胆管癌QBC939细胞中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 肝门部胆管癌 qbc939细胞 SIRNA
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野生型XPD转染对胆管癌QBC939细胞生物学行为的影响
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作者 王振杰 龚辉 +1 位作者 龚丹 朱水山 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第15期1531-1536,共6页
目的:探讨野生型X P D基因对人胆管癌QBC939细胞的生物学影响.方法:用碱裂解法提取空载质粒pEGFP-N2和重组质粒pEGFP-N2-XPD,提取出的质粒以KPNⅠ、BGIⅡ和SPHⅠ酶切鉴定.实验分4组,重组质粒pEGFP-N2-XPD组、空载质粒pEGFP-N2组、脂质体... 目的:探讨野生型X P D基因对人胆管癌QBC939细胞的生物学影响.方法:用碱裂解法提取空载质粒pEGFP-N2和重组质粒pEGFP-N2-XPD,提取出的质粒以KPNⅠ、BGIⅡ和SPHⅠ酶切鉴定.实验分4组,重组质粒pEGFP-N2-XPD组、空载质粒pEGFP-N2组、脂质体组,并用具有相同遗传背景和代数的QBC939细胞作为空白对照.用脂质体转染法瞬时转染四组细胞.荧光显微镜下观察转染后绿色荧光蛋白报告基因表达情况.提取各组细胞总RNA,合成cDNA,用聚合酶链反应(PCR)检测4组细胞中XPD、p53、cyclin D1、c-myc表达情况.并用四甲基偶氮唑盐(MTT)和流式细胞仪检测细胞增殖及其细胞周期的变化.结果:pEGFP-N2-XPD细胞与pEGFP-N2、脂质体组和空白对照组相比,XPD mRNA表达量明显增加(0.778±0.018vs0.561±0.039,0.544±0.035,0.542±0.034,均P<0.01).pEGFP-N2-XPD细胞中p53mRNA相对表达量与pEGFP-N2、脂质体组和空白对照组比较具有统计学意义(0.421±0.019vs0.256±0.014,0.267±0.015,0.274±0.018,均P<0.01).pEGFP-N2-XPD细胞与其他组相比,cyclin D1mRNA相对表达量明显降低(0.339±0.041vs0.560±0.039,0.558±0.050,0.560±0.041,均P<0.01).pEGFP-N2-XPD细胞与其他组相比,c-myc mRNA相对表达量明显降低(0.355±0.045vs0.570±0.075,0.560±0.041,0.537±0.050,均P<0.01).流式细胞仪检测pEGFP-N2-XPD组细胞周期G1期为81.65%,S期为11.83%,其他组Gl期分别为65.54%、56.61%、63.26%;S期分别为24.10%、29.52%、27.28%,结果具有统计学意义(P<0.05).MTT检测示pEGFP-N2-XPD细胞生长率为0.249±0.02,与其他组相比,细胞增殖力明显减弱(P<0.01).结论:野生型XPD基因可以抑制胆管癌细胞的生长,XPD基因可抑制c-myc、cyclin D1基因的表达,增加p53基因表达. 展开更多
关键词 胆管癌 qbc939细胞 XPD c-myc CYCLIND1 p53 细胞周期
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