新型钾通道开放剂(QO-58)在大鼠体内组织分布研究

目的建立大鼠组织中QO-58浓度的测定方法,并研究其组织分布。方法 SD大鼠灌胃给药QO-58(50 mg.kg-1)后,于给药后2、7、18、36 h断头放血处死大鼠,立即取出各脏器组织,滤纸吸干浮血,称重后用2倍量乙腈制成匀浆,取组织匀浆液用乙腈处理,以C18色谱柱Shim-pack VP-ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,选择285 nm为检测波长,流动相为乙腈:0.2 mol.L-1乙酸铵(45∶55),尼群地平为内标,柱温35℃,用HPLC法测定各组织中QO-58药物浓度。比较各组织的QO-58浓度,分析药物在大鼠体内的分布情况。结果大鼠灌胃给予QO-58 50 mg.kg-1后,肝脏中药物浓度最高,其次在肺、小肠、肾和胃等组织浓度较高,在肌肉、脂肪、脑、睾丸中浓度较低。大多数组织在7 h药物浓度达高峰,然后逐渐下降,36 h时大部分组织中检测不到QO-58。结论 QO-58主要分布在肝脏、小肠、肾和胃等组织,脂肪、脑、睾丸中分布量少;在所研究的组织中,未见明显的特殊蓄积现象。

新型钾通道开放剂(QO-58)在大鼠体内药代动力学研究

目的：建立一种新型高效M型钾通道开放剂（QO-58）体内检测方法,研究其在大鼠体内的药代动力学特征。方法大鼠灌胃（ ig,25、50、100 mg＆#183;kg-1）3个剂量和静脉单剂量注射15 mg＆#183;kg-1 QO-58,于给药后不同时间采集血样,乙腈沉淀蛋白,HPLC内标法测定血药浓度,DAS2.1.1软件计算药代动力学参数。结果血浆标准曲线在0．1~160 mg＆#183; L-1范围内线性良好。血浆中QO-58的最低定量限（ LQD ）为0．1 mg＆#183;L-1。方法回收率为89．56%~101．38%,精密度良好,日内和日间RSD中、高浓度样品均小于15%,低浓度样品小于20%。大鼠灌胃及注射给药,药时曲线均呈二室模型。 QO-58灌胃给药25、50、100 mg ＆#183; kg-1的主要药动学参数如下：Cmax （ mg＆#183;L-1）为8．25、16．29、18．27；T 12β（ h）：8．24、5．01、5．92；AUC0-∞（ g ＆#183; min ＆#183; L-1）：261．94、189．57、90．65。结论所建立的HPLC方法简单、专属性强,适用于QO-58在大鼠体内的药代动力学研究。

化合物QO-58对KCNQ1/KCNE1/IKs通道电流调节作用的研究

慢激活延迟整流钾电流(slowly activated delayed rectifier potassium current,IKs)由KCNQ1通道与KCNE1通道共同编码。KCNQl或KCNEl通道电流功能上调能够引发短QT综合征。全新化学结构化合物QO-58对KCNQ1-5通道具有开放作用。该文采用电生理膜片钳技术探讨QO-58对KCNQl/KCNEl/IKs通道电流作用,观察QO-58的心脏电生理毒性。结果表明,化合物QO-58能够浓度依赖性地增大KCNQ1/KCNE1通道电流,并且引起KCNQ1/KCNE1通道电流电压关系曲线向超极化方向移动。QO-58能够轻微增大豚鼠心室肌IKs通道电流,但对豚鼠乳头肌动作电位时程无显著影响。结果提示,QO-58心脏电生理毒性较低,具有进一步研发成为治疗兴奋性增强等相关疾病的新型药物的潜力。

新型钾通道开放剂QO-58对SD大鼠离体小动脉血管张力的影响及机制

目的 观察离体状态下不同浓度的新型钾通道开放剂（QO-58）对SD大鼠冠状小动脉血管张力、舒张能力的影响,并探究QO-58对于加强血管舒张功能的可能作用机制.方法 显微镜下离体分离20只SD大鼠的冠状小动脉20根,直径1.0-1.5mm,将每根动脉制成血管环10条,每条长1.8-2.0mm,并作如下实验：（1）每只大鼠取6条内皮完整血管环作平行实验,加入A2受体激动剂（U46619）、60mmol/L高钾溶液、内皮素-1（ET-1）处理后产生均持续性收缩,记录最大收缩幅度100%,在此基础上给予不同浓度的QO-58作对比试验,分为实验1组（10μmol/L）、实验2组（20μmol/L）、实验3组（50μmol/L）、实验4组（100μmol/L）、实验5组（500μmol/L）,并另取1条离体冠状小动脉给予二甲基亚砜（DMSO）作对照组,对比各组小动脉血管环的舒张水平（血管张力）指标;（2）另取每只大鼠4条内皮完整血管环,预收缩处理后,取舒张最为明显的一组的用药浓度为实验浓度,每只取4条血管环作对比试验,A组血管环在给予QO-58前加入eNOS抑制剂（L-NAME）孵育30min,B组用药前不予处理,对比A、B组血管环的血管舒张水平;C组血管环在给予QO-58前去内皮,D组为内皮完整血管环,对比C、D组血管环的血管舒张水平,探究QO-58舒张作用机制.结果 （1）SD大鼠的离体冠状小动脉的50%舒张效应血管张力指数（PD2）、最大舒张率（Emax）值均首先随着加入QO-58的浓度的升高而增加,50μmol/L达到峰值,随后逐渐降低,对照组血管环则均无明显舒张作用,其中实验3组的PD2为3.92±0.13、Emax为（99.78±0.65）%,均为最高、舒张效果最为明显（F=2.927,P=0.013）;（2）关于舒张机制的研究结果显示,A组的PD2、Emax均显著高于B组（P=0.000）;而C、D组血管环的PD2、Emax则比较差异无统计学意义（C组比D组,PD2：P=0.845,Emax,P=0.715）.结论 新型钾通道开放剂（QO-58）对于SD大鼠离体冠状小动脉血管具有良好的舒张作用,且呈浓度依赖性,但浓度过大则舒张作用逐渐减弱,QO-58的血管舒张作用机制无内皮依赖性,但QO-58可能有助于促进NO释放进而达到扩张血管平滑肌、改善血管张力的作用,具有临床应用价值.

吡唑并[1,5-a]嘧啶酮类M通道开放剂脂水分配系数的测定及计算

目的计算并测定吡唑并[1,5-a]嘧啶酮类(PPOs)化合物QO-58,QO-58-L及QO-58-Cl的脂水分配系数,并比较两者的相符程度。方法摇瓶法(正辛醇/水)处理样品,水相用C18固相萃取小柱浓缩,高效液相色谱外标法测定QO-58,QO-58-L和QO-58-Cl水相和油相中的浓度,并分别计算其脂水分配系数(log P)。结果 QO-58的logP=2.43,QO-58-L的logP=1.07,QO-58-Cl的logP=5.50。结论 PPOs结构修饰后的脂水分配系数发生了较大改变,与计算结果趋势相符。

钾通道开放剂对大鼠碘乙酸钠所致骨关节炎疼痛作用的实验观察

目的观察钾通道开放剂（QO-58）对大鼠碘乙酸钠所致骨关节炎疼痛的影响。方法大鼠右侧膝关节腔内单次注入3mg／50山碘乙酸钠建立骨关节炎疼痛模型，模型成功后腹腔注射给予化合物50mg／kgQO-58，观察其单次给药以及多次给药对大鼠骨关节炎疼痛模型机械刺痛和辐射热痛痛阈的影响。结果单次腹腔注射给予化合物QO-58，于6h和10h显著提高大鼠骨关节炎疼痛模型机械刺痛和辐射热痛痛阈。从第10-14天每天1次腹腔注射给予化合物QO-58，显著提高第12、14天大鼠骨关节炎疼痛模型机械刺痛和辐射热痛痛阈。结论化合物QO-58能够有效缓解碘乙酸钠所致大鼠骨关节炎疼痛。