The Different Fluorescent Response of Quin 2 to the Binding of Ca^(2+) and La^(3+) and its Application

The fluorescence spectra of Quin 2, (2-[(2-bis-[carboxymethyl] amino-5-methylphenoxy) methyl]-6-methoxy-8-bis [carboxymethyl] aminoquiniline), a Ca2+ probe, were investigated upon incubation with Ca2+ or La3+. The results showed that binding of La3+ to Quin 2 resulted in different fluorescent spectrum from that of Ca2+. Based on this observation, a fluorescent method was developed for simultaneously determination of the dissociation rates of Ca2+ and La3+ from a Ca-La- calmodulin complex (Ca2La2CaM).

赛庚啶对大鼠脑突触体Ca^(2+)水平和Ca^(2+)·Mg^(2+)-ATP酶活性的影响

观察赛庚啶(Cyp)对大鼠脑突触体Ca^(2+)水平和Ca^(2+)·Mg^(2+)-ATP酶活性的影响,以探讨其对脑缺血再灌注损伤的保护作用机理。用Quin2/AM法测定,突触体静息游离Ca^(2+)浓度为88±16μmol·g^(-1)蛋白,1.0,2.5和5.0μmol·L^(-1)的Cyp对其基本无影响。对高K^+所致突触体Ca^(2+)浓度升高有抑制作用但不显著,由185±45μmol·g^(-1)蛋白分别降至182±41、181±41、178±38μmol·g^(-1)蛋白;使突触体Ca^(2+)·Mg^(2+)-ATP酶活性由78±15mmol·h^(-1)·g^(-1)蛋白下降至74±12,70±11和65±8mmol·h^(-1)·g^(-1)蛋白。表明,Cyp是通过抑制Ca^(2+)内流和选择性抑制Ca^(2+)·Mg^(2+)-ATP酶活性,而稳定内质网和腺粒体内Ca^(2+)浓度,从而达到对脑缺血再灌注损伤的保护作用。

地西泮对大鼠脑突触体内Ca^(2+)水平和Ca^(2+),Mg^(2+)—ATP酶活性的作用

用Quin 2法测得大鼠脑突触体内静息游离Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]i)为 85± 13μmol gprotein .地西泮 0 .1,1和 10mmol L对静息突触体 [Ca2 + ]i 无明显影响 ,但能以剂量依赖方式增高 6 5mmol LKCl所致突触体 [Ca2 + ]i 升高 ,从 10 5± 2 3μmol gprotein分别达到 185± 2 8,2 6 7± 4 9和 2 91± 4 8μmol gprotein.地西泮 1和 10mmol L分别使突触体Ca2 + ,Mg2 + —ATP酶活性降低 2 8.7%和 4 2 .5 %;使Mg2 + —ATP酶活性分别降低 12 .6 %和 32 .8%,提示地西泮可能是通过抑制钙调素 ,进而抑制Ca2 + ,Mg2 + —ATP酶活性 ,使突触体 [Ca2 + ]i 升高 ,促进神经末梢释放递质 .

三氟拉嗪对大鼠脑突触体内Ca2＋水平和Ca2＋，Mg2＋─ATP酶活性的作用

用Ｑｕｉｎ２法测得大鼠脑突触体内静息游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）为８５±１３μｍｏｌ·ｇ－１ｐｒｏｔｅｉｎ．三氟拉嗪（ＴＦＰ）１，５和１０μｍｏｌ·Ｌ－１对静息突触体［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响，但能以剂量依赖方式增高６５ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ所致突触体［Ｃａ２＋］ｉ升高，从１９２±５８μｍｏｌ·ｇ－１ｐｒｏｔｅｉｎ分别达到２３３±６３，４３１±９９和６６１±１７３μｍｏｌ·ｇ－１ｐｒｏｔｅｉｎ．ＴＦＰ５，１０和５０μｍｏｌ·Ｌ－１分别使突触体Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性降低３１％，４１％和４５％；使Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性降低３０％，３６％和３９％，提示ＴＦＰ可能是通过抑制钙调素，进而抑制Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性，使突触体［Ｃａ２＋］ｉ升高。

Quin2法测定人血小板胞浆游离钙浓度

应用荧光钙指示剂Ｑｕｉｎ２测定胞装游离钙浓度的方法，研究了在不同胞外游离钙浓度［Ｃａ￣（２＋）］＿０下人血小板场急状态时及由凝血四激活后的胞装游离钙浓度［Ｃａ￣（２＋）］＿１的变化．结果显示：凝血的可使负载Ｑｕｉｎ２的人血小板［Ｃａ￣（２＋）］＿１呈现浓度依赖性的短暂升高，且这种作用对［Ｃａ￣（２＋）］＿０有明显的依赖性。该项结果提示凝血酸引起的［Ｃａ￣（２＋）］＿１升高主要来源于外钙内流，部分为内钙释放所致．