Axl抑制剂R428诱导口腔鳞癌Cal27细胞自噬的研究

目的:探究Axl特异性抑制剂R428对口腔鳞癌细胞自噬的影响。方法:MTT法结合透射电镜、GFP-LC3免疫荧光和Western Blot方法评估R428对口腔鳞癌细胞系Cal27细胞活力及自噬的影响。使用细胞内活性氧(ROS)检测试剂及ROS清除试剂探究ROS在R428诱导的口腔鳞癌细胞自噬中的作用。结果:R428能够呈剂量依赖性(0.5~2μmol/L)地明显降低Cal27细胞活力。R428能诱导Cal27细胞自噬,而抑制自噬可增强R428对Cal27细胞的杀伤作用。此外,R428能显著升高Cal27细胞内ROS水平;阻断ROS后,R428诱导的细胞自噬减弱,细胞活力亦明显降低。结论:Axl抑制剂R428可同时诱导口腔鳞癌细胞死亡和细胞自噬,抑制细胞自噬可增强R428对口腔鳞癌Cal27细胞的杀伤作用。

三种信号通路抑制剂两两联合用药对胰腺癌细胞Panc-28和Panc-1增殖的影响

目的选用表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂厄洛替尼、Anexelekto(AXL)抑制剂R428和γ-分泌酶抑制剂(2S)-N-N-(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT),观察两两联合用药对胰腺癌细胞增殖的影响,为指导临床用药提供参考。方法采用Panc-28和Panc-1胰腺癌细胞,厄洛替尼、R428和DAPT单用或两两联用72 h,MTS法检测细胞增殖率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞毒性,流式细胞术检测细胞周期。结果用厄洛替尼5~80μmol·L^(-1)对Panc-28细胞增殖无明显影响,DAPT 5~80μmol·L^(-1)或R428 50~800 nmol·L^(-1)作用72 h可使Panc-28细胞增殖率呈浓度依赖性降低(rDAPT=0.995,P<0.01;rR428=0.833,P<0.01),最大下降约40%。厄洛替尼50μmol·L^(-1),DAPT 50μmol·L^(-1)或R428 300 nmol·L^(-1)分别两两联用后,与单用相比均未明显增加细胞毒性,厄洛替尼与R428联用使胰腺癌细胞增殖率较R428单用下降>40%(P<0.01)。流式细胞术检测结果表明,厄洛替尼与R428联用分别使Panc-28和Panc-1细胞S期和G_1期增加(P<0.01)。结论 DAPT和R428能一定程度地抑制胰腺癌细胞Panc-28和Panc-1增殖。厄洛替尼与R428联用具有协同抑制Panc-28和Panc-1细胞增殖的作用,对细胞分裂间期阻滞更为明显。