RA33/36纯化抗原检测抗体在类风湿关节炎的应用

目的探讨RA33/36抗体对类风湿关节炎(RA)的临床价值。方法以纯化的RA33/36为抗原,用免疫印迹法检测RA498例、其他风湿性疾病患者514例、正常对照50名,比较RA33/36抗体在各组人群中的阳性率,并评价其与RA患者临床和实验室指标间的关系、早期诊断及联合诊断价值。结果RA33/36抗体在RA中的灵敏度为32.93%,特异性为88.52%,在RA早期病例中阳性率为32.03%,在72例类风湿因子(RF)阴性的RA患者中有21例阳性(29.17%)。RA33/36抗体与抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体联合检测,特异度为98.46%。RA33/36抗体阳性组和阴性组的关节肿胀数、疼痛关节数、功能分级、X线分期及其他临床指标差异无统计学意义,RF、抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗Sa抗体及抗CCP抗体阳性率两组差异均无统计学意义。结论RA33/36抗体对RA有较好的灵敏度和特异度,且有早期诊断价值,并对RF有补充诊断价值,与抗CCP抗体联合诊断可提高诊断的特异性,可广泛应用于RA的临床诊断。

类风湿关节炎患者RA33/36抗体,角质蛋白抗体及抗核周因子的相关性初步研究

目的对类风湿关节炎（ＲＡ）患者血清中的ＲＡ３３／３６抗体，角质蛋白抗体（ＡＫＡ）及抗核周因子（ＡＰＦ）进行检测，并对这些抗体间的相关性进行探讨。方法采用免疫印迹法检测血清ＲＡ３３／３６抗体；采用ＩＦ法检测ＡＫＡ及ＡＰＦ抗体；采用卡方检验及Ｆｉｓｈｅｒｓ检验对结果进行统计学比较。结果ＲＡ患者血清中ＲＡ３３／３６抗体阳性率为３５．６％（１６／４５），ＡＫＡ（１８０）阳性率为３１．１％（１４／４５），ＡＰＦ的阳性率为５３．３％（２４／４５）。结论虽然ＲＡ患者血清中可出现上述三种抗体，但三者间无相关性。

HeLa细胞及Ehrlich瘤细胞分别提取RA33/36抗原用于诊断RA的比较

目的比较由HeLa细胞及Ehrlich瘤细胞分别提取RA33/36抗原在类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)诊断中的敏感性和特异性。方法RA33/36抗原由HeLa细胞及Ehrlich瘤细胞提取,抗RA33/36用免疫印迹法检测。研究对象分RA患者、非RA患者及正常对照。结果HeLa细胞抗原和Ehrlich瘤细胞抗原两者检测抗RA33/36对RA诊断的特异性为85.7%和87.5%,敏感性为28.2%和26.9%。抗RA33和抗RA36对RA均有诊断价值。结论HeLa细胞及Ehrlich瘤细胞均可用于提取RA33/36抗原。

RA33/36抗原的纯化及相应抗体的检测

目的纯化RA33/36抗原,观察其检测效率。方法从小鼠Ehrlich腹水癌细胞中提取RA33/36粗抗原,使用肝素-琼脂糖凝胶CL-6B对RA33/36粗抗原进行亲和层析,SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)和免疫印迹法(IBT)检测富含RA33/36的组分,比较粗抗原和纯化抗原的检测效果。结果SDS-PAGE和IBT显示RA33/36抗原主要存在于缓冲液C的洗脱峰中,纯化抗原较粗抗原杂蛋白条带明显减少,且更加清晰,在检测RA33/36抗体时得到了相同的阳性和阴性结果。结论纯化的RA33/36抗原较粗抗原提高了抗体检测效率,可广泛应用于临床。

Hela抗原和Ehrlich抗原检测抗RA33、RA36抗体的比较研究

目的探讨Ehrlich抗原能否取代Hela抗原检测抗RA33、36抗体,为临床提供简便、可靠的检测手段。方法分别以Hela细胞核提取物和Ehrlich腹水瘤细胞核提取物为抗原,用免疫印迹法,对281例类风湿关节炎(RA)、89例其他风湿病以及50名正常人血清进行检测。结果两种抗原均可以检出抗 RA33、抗RA36抗体,但检测结果一致率只有65．5％。抗A33和抗RA36抗体不仅见于RA,也见于系统性红斑狼疮等其他风湿病。281例RA中,Hela抗原和Ehrlich抗原检测结果对RA诊断的敏感性和特异性分别为34．8％和83．5％对44．1％和71．9％。两者联合,敏感性达52．3％,特异性70．5％。两种抗原检测的阳性结果一致者,其病情活动性和预后不良的指标多数高于结果均阴性者。结论抗RA33抗体和抗RA36抗体都不是RA的标志性抗体。Hela抗原和Ehrlich抗原不能互相代替。同时使用两种抗原进行抗RA33/36抗体的检测能提高对RA诊断的敏感性,并有助于RA病情活动性的判断和预后估计。

RA33/36抗原的提取、半纯化及相应抗体的检测

目的 提取、半纯化RA33/ 36抗原 ,探讨RA33/ 36抗体对类风湿关节炎 (RA)诊断的特异性及敏感性。方法 以Ehrlich腹水癌细胞核提取物作粗抗原 ,采用肝素 琼脂糖凝胶CL - 6B层析柱对此粗抗原进行分离半纯化。分别用粗抗原和半纯化抗原作抗原 ,免疫印迹法检测 12 0例RA患者、40例红斑狼疮 (SLE)患者、35例干燥综合征 (SS)患者、2 5例系统性硬化症 (SSc)患者、10例混合性结缔组织病 (MCTD)患者和 30例正常对照血清中的RA33/ 36抗体。结果 ①SDS -PAGE示 2种抗原在相对分子质量 (Mr)为 33× 10 3 和 36× 10 3 处均可见条带 ,半纯化抗原杂带较粗抗原明显减少。②与粗抗原相比 ,半纯化抗原免疫印迹反应条带明显减少 ,且特别清晰 ,但阴性和阳性结果相同。③RA36抗体并不总是与RA33抗体以 2条带的形式同时出现。④RA33抗体和RA36抗体对RA诊断的敏感性差异无显著性 ,而特异性RA36抗体优于RA33抗体。⑤RA36抗体与RF、APF、ESR、关节相X线分期、关节功能分级无明显相关性。结论 半纯化抗原可直接用于检测RA33/ 36抗体 ,或用其作质量控制 ;RA36抗体可能是RA的一种可作为标记的特异性抗体 ,应对此抗体进行更深入研究。

类风湿性关节炎自身抗体及其临床意义

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的致畸性系统性自身免疫性疾病,滑膜炎持久反复发作关节内软骨和骨质被破坏关节功能障碍是RA的主要临床特征。其病因和发病机制尚未阐明,患者在发病两年内即可出现不可逆的骨关节破坏,最后将导致关节强直、畸形和功能丧失。大量研究显示多种自身抗体对于RA早期诊断和鉴别诊断,了解病情发展,监测药物治疗效果,判断疾病的严重程度和预后均有重要价值。现将RA患者自身抗体的研究进展综述如下。