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鳗鲡疱疹病毒实时荧光重组酶辅助扩增(RAA)检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 陈曦 杨金先 葛均青 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期234-240,共7页
为建立鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)的实时荧光重组酶辅助扩增(recombinase-aided amplification,RAA)检测方法,根据AngHV的ORF 95基因序列设计引物和探针,优化反应温度,确定反应时间,并应用该方法对采集的临床样品进行... 为建立鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)的实时荧光重组酶辅助扩增(recombinase-aided amplification,RAA)检测方法,根据AngHV的ORF 95基因序列设计引物和探针,优化反应温度,确定反应时间,并应用该方法对采集的临床样品进行检测。结果表明:本研究中建立的实时荧光RAA检测方法的最佳反应温度为39℃,反应时间为20 min;实时荧光RAA检测方法的灵敏度、特异性及重复性评价显示,RAA检测AngHV的最低检测量为1×10^(2)copies/μL,可特异性地检测AngHV,与美洲鳗鲡腺瘤病毒(American eel adomavirus,AEAdoV)、蛙虹彩病毒(Rana grylio virus,RGV)、鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)和对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)均无交叉反应;实时荧光RAA检测方法的组内和组间变异系数均小于5%,表明实时荧光RAA检测方法灵敏度高、特异性强和重复性好;应用该方法对采集的25份临床样品进行检测显示,实时荧光RAA检测方法与qPCR方法的检出率一致,均为92%,高于普通PCR的检出率(76%)。研究表明,本研究中所建立的鳗鲡疱疹病毒实时荧光重组酶辅助扩增RAA检测方法快速、灵敏、可靠、准确,可用于AngHV的临床快速检测和流行病学调查。 展开更多
关键词 鳗鲡疱疹病毒(AngHV) 实时荧光raa 快速检测
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猪传染性胃肠炎病毒S基因RAA检测方法的建立与初步应用
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作者 吕林丹 牟豪 +5 位作者 胡霞 刘明妮 李绍梅 李星 宋振辉 杨柳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3590-3599,共10页
本研究旨在建立一种基于猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)S基因便捷、高效和特异的由重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase-aid amplification,RAA)检测方法。通过基因组序列比对,选择TGEV S基... 本研究旨在建立一种基于猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)S基因便捷、高效和特异的由重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase-aid amplification,RAA)检测方法。通过基因组序列比对,选择TGEV S基因中特定片段为检测靶标,构建重组质粒pUC57-S,设计并筛选RAA引物和探针;建立RAA检测方法;评价该方法灵敏度、特异性和重复性;运用该方法检测腹泻临床样品,与荧光定量PCR方法比较检测结果的符合率。结果确定最佳引物对F2/R1和探针PF2;该方法在40℃恒温条件下,30 min即可完成反应;荧光型RAA法最低检出限可达1.34×10^(1)copies·μL^(-1);与猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪呼吸道冠状病毒等常见猪源病毒核酸无交叉反应;采用该方法检测107份临床样本,阳性率为5.61%(6/107),与荧光定量PCR法相比较,检测结果一致。本研究成功建立了一种灵敏、特异、可视化的RAA检测方法,可摆脱对昂贵设备、专业人员和检测技术的依赖,为临床检测TGEV提供良好的技术基础。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 基础型raa 荧光型raa 可视化检测
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基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒RAA-CRISPR/Cas12a检测方法的建立
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作者 肖思民 侯泽玮 +5 位作者 刘方幸妍 赵祎晨 尹纪元 徐伟 吕利群 王浩 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1905-1914,共10页
为建立一种特异性强、灵敏度高、操作便捷的Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)检测方法,研究利用重组酶介导链置换核酸扩增技术(Recombinase-aid amplification,RAA)与成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR)系统相结合,构建了GCRV-Ⅱ病毒RAA... 为建立一种特异性强、灵敏度高、操作便捷的Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)检测方法,研究利用重组酶介导链置换核酸扩增技术(Recombinase-aid amplification,RAA)与成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR)系统相结合,构建了GCRV-Ⅱ病毒RAA结合CRISPR/Cas12a可视化“一步”快速检测方法。首先选择GCRV-Ⅱ毒株间序列保守,不同基因型GCRV间差异明显的s6基因(GQ896337)的保守区设计5对RAA候选引物和2对crRNA,合成并筛选出特异性引物和crRNA组合。其次测试反应的特异性、灵敏度和准确性。最后建立下层扩增相、上层检测相的“一步法”反应体系。该检测方法在37℃恒温下反应可检测出GCRV-Ⅱ,最低检测限为10^(2) copies/μL。对24份临床样本进行检测,该检测方法阳性检出率高于现行国标PCR法。研究建立的GCRV-Ⅱ检测方法操作便捷、特异性高、灵敏度好、可重复性强、与设备兼容性好、在蓝光灯下可通过肉眼判断检测结果。 展开更多
关键词 GCRV-Ⅱ raa CRISPR/Cas12a 现场诊断
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猪流行性腹泻病毒实时荧光RT-RAA检测方法的建立及应用
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作者 王恋春 郑辉 +7 位作者 张慧 沙洲 房琳琳 尼博 董雅琴 魏荣 崔进 郑泽中 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第20期63-68,74,共7页
为了建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的方法,试验基于PEDV N基因保守区域设计3对特异性引物和1个探针,通过引物的筛选和反应温度的优化建立PEDV实时荧光逆转录重组酶介导等温扩增(reverse-tran... 为了建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的方法,试验基于PEDV N基因保守区域设计3对特异性引物和1个探针,通过引物的筛选和反应温度的优化建立PEDV实时荧光逆转录重组酶介导等温扩增(reverse-transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA)检测方法,对该方法进行敏感性试验、特异性试验和重复性试验,并分别采用该方法和实时荧光定量RT-PCR检测方法对72份猪淋巴结、肝脏等组织临床样品进行检测,计算两种方法的符合率。结果表明:建立的实时荧光RT-RAA方法在41℃条件下反应20 min即可完成检测,对PEDV的最低检测限为1×10~1拷贝/μL;且仅能检测出PEDV,与传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PRoV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV-3)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)、猪圆环病毒4型(Porcine circovirus type 4,PCV-4)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)均无交叉反应;相同拷贝浓度的质粒标准品3次重复的扩增曲线几乎重合,起峰时间与荧光值没有明显差异。对72份临床样品进行检测,该方法与实时荧光定量RT-PCR检测方法的符合率为100%。说明建立的实时荧光RT-RAA方法敏感性高,特异性和重复性良好,同时耗时短、操作简单,可用于PEDV的临床检测。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 N基因 猪流行性腹泻 实时荧光RT-raa 检测方法
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RT-RAA-CRISPR/Cas12a可视化检测番茄褐色皱纹果病毒
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作者 赵振兴 范奇璇 +4 位作者 王思元 董铮 胡中泽 周涛 张永江 《植物检疫》 2024年第3期14-20,共7页
番茄褐色皱纹果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)严重威胁番茄等茄科园艺作物的生产安全。本研究根据其外壳蛋白(coat protein,CP)基因及其同属病毒的差异序列,设计了特异性重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase-aided ... 番茄褐色皱纹果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)严重威胁番茄等茄科园艺作物的生产安全。本研究根据其外壳蛋白(coat protein,CP)基因及其同属病毒的差异序列,设计了特异性重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)引物,并基于CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了靶向RT-RAA扩增产物的CRISPR RNA(crRNA)。通过优化获得了检测信号最强的反应体系,其中报告基因FQ终浓度为600nmol/L、Cas12a和crRNA终浓度分别为200nmol/L和1000nmol/L,最终总反应时间仅为30 min。该方法可特异性检测ToBRFV,对携带ToBRFV的番茄样品RNA检测灵敏度为RT-PCR和RT-qPCR的10000和100倍,检测限为3.46fg/μL。阳性样品验证结果显示,本研究建立的RT-RAA-CRISPR/Cas12a检测技术可以在不同来源的辣椒、番茄侵染的植物叶片、果实及种子中检测到ToBRFV,表明该技术可用于番茄褐色皱纹果病毒的快速、灵敏的可视化检测。 展开更多
关键词 番茄褐色皱纹果病毒 RT-raa CRISPR/Cas12a 可视化检测
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辣椒轻斑驳病毒RT-RAA-CRISPR/Cas12a可视化检测方法的建立
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作者 赵振兴 范奇璇 +3 位作者 王思元 董铮 胡中泽 张永江 《河南农业科学》 北大核心 2024年第9期80-87,共8页
辣椒是重要的园艺作物,辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)严重威胁辣椒等茄科园艺作物的生产安全。为提高PMMoV的防控效率,根据其编码外壳蛋白(Coat protein,CP)的基因保守序列,基于重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombina... 辣椒是重要的园艺作物,辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)严重威胁辣椒等茄科园艺作物的生产安全。为提高PMMoV的防控效率,根据其编码外壳蛋白(Coat protein,CP)的基因保守序列,基于重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase?aided amplification,RAA),设计了特异性RAA引物,实现对PMMoV的快速等温扩增,并基于CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物。优化结果显示,总反应体系在报告基因FQ终浓度为400 nmol/L,Cas12a/crRNA比例为1∶5、终浓度为200 nmol/L和1000 nmol/L条件下检测信号最强,最终的RT-RAA反应和CRISPR显色体系分别仅需15 min,即可在便携式蓝光照射设备下直接观察到阳性信号。该方法可特异性检测PMMoV,对携带PMMoV的辣椒样品RNA的检测极限可达到1.34 pg/μL,分别是普通RT-PCR和实时荧光RT-PCR检测灵敏度的1000倍和10倍。对实际样品中的检测结果显示,建立的RT-RAA-CRISPR/Cas12a检测技术可以在PMMoV侵染的辣椒和番茄叶片、果实及土壤中检测到PMMoV,可用于辣椒轻斑驳病毒的快速、灵敏、可视化检测。 展开更多
关键词 辣椒轻斑驳病毒 RT-raa CRISPR/Cas12a 可视化检测
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基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒快速检测方法的建立
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作者 于晶雪 韦珊珊 +9 位作者 覃绍敏 吴健敏 杨丽华 陈凤莲 许力士 秦树英 华俊 韦珏 方芳 刘金凤 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3237-3246,共10页
[目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]... [目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]分析不同基因型PRRSV全基因组序列,在3′-UTR端保守区设计重组酶介导等温核酸扩增技术(RAA)引物、crRNA及DNA报告底物分子,筛选RT-RAA最佳引物对。表达纯化AsCas12a蛋白,并以质粒为标准品,经RT-RAA扩增后,将产物加入CRISPR/Cas12a系统,建立PRRSV的CRISPR/Cas12a-RT-RAA检测方法,分别以PRRSV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸为模板验证建立方法的特异性,以不同浓度的pMD18T-PRRSV为模板验证建立方法的敏感性。以5.62×10^(6)、5.62×10^(3)、5.62拷贝数/μL的质粒为模板进行重复性试验,最后进行临床效果评价,将所建立的方法与实时荧光定量逆转录PCR方法进行比较。[结果]本研究成功表达并纯化获得具有良好剪切活性的AsCas12a蛋白,蛋白分子质量大小为196 ku;所建立的CRISPR/Cas12a-RT-RAA方法的检测下限可达5.62拷贝/μL;该方法具有良好的特异性,可特异性检测出PRRSV,不能检出其他猪病病毒PCV2、PEDV、CSFV和PRV,并具有良好的重复性。应用该方法对121份猪组织样品进行检测,与实时荧光定量逆转录PCR的阳性符合率为93.75%,阴性符合率为99.05%,总符合率为99.17%。[结论]本研究成功建立基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的PRRSV快速检测方法,该方法特异性强、灵敏性高、重复性好且不依赖复杂设备,可在现场和基层实验室使用。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-raa) CRISPR/Cas12系统
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揿针疗法对痰湿型高血压患者血压及RAAS的影响
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作者 陕艳 毕守红 +2 位作者 文杰 彭艳霞 王凤仙 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第3期0034-0038,共5页
观察揿针疗法治疗痰湿型高血压患者的临床疗效。方法 将2021年9月~2022年4月山西中医药大学附属医院心血管病一区的60例痰湿型高血压患者随机分为对照组(n=30)和观察组(n=30)。对照组采用常规治疗,观察组在常规治疗的同时应用揿针疗法;... 观察揿针疗法治疗痰湿型高血压患者的临床疗效。方法 将2021年9月~2022年4月山西中医药大学附属医院心血管病一区的60例痰湿型高血压患者随机分为对照组(n=30)和观察组(n=30)。对照组采用常规治疗,观察组在常规治疗的同时应用揿针疗法;比较两组患者的血压值及降压疗效、中医证候疗效、血清血管紧张素II、血浆肾素浓度及醛固酮的含量变化。结果 治疗后,观察组患者的收缩压、舒张压均低于对照组(P<0.05);两组患者的中医证候疗效比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者的血清血管紧张素II、血浆肾素浓度及醛固酮水平低于对照组(P<0.05);与同组治疗前比较,两组患者的血清血管紧张素II、血浆肾素浓度及醛固酮水平均有所下降(P<0.001)。结论 在常规治疗的基础上应用揿针疗法可有效改善痰湿型高血压患者的血压水平及中医证候,其操作简便、痛苦小,且安全可靠,值得在临床推广应用。 展开更多
关键词 揿针疗法 中医护理 痰湿型高血压 raaS
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Securing Cloud-Encrypted Data:Detecting Ransomware-as-a-Service(RaaS)Attacks through Deep Learning Ensemble
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作者 Amardeep Singh Hamad Ali Abosaq +5 位作者 Saad Arif Zohaib Mushtaq Muhammad Irfan Ghulam Abbas Arshad Ali Alanoud Al Mazroa 《Computers, Materials & Continua》 SCIE EI 2024年第4期857-873,共17页
Data security assurance is crucial due to the increasing prevalence of cloud computing and its widespread use across different industries,especially in light of the growing number of cybersecurity threats.A major and ... Data security assurance is crucial due to the increasing prevalence of cloud computing and its widespread use across different industries,especially in light of the growing number of cybersecurity threats.A major and everpresent threat is Ransomware-as-a-Service(RaaS)assaults,which enable even individuals with minimal technical knowledge to conduct ransomware operations.This study provides a new approach for RaaS attack detection which uses an ensemble of deep learning models.For this purpose,the network intrusion detection dataset“UNSWNB15”from the Intelligent Security Group of the University of New South Wales,Australia is analyzed.In the initial phase,the rectified linear unit-,scaled exponential linear unit-,and exponential linear unit-based three separate Multi-Layer Perceptron(MLP)models are developed.Later,using the combined predictive power of these three MLPs,the RansoDetect Fusion ensemble model is introduced in the suggested methodology.The proposed ensemble technique outperforms previous studieswith impressive performance metrics results,including 98.79%accuracy and recall,98.85%precision,and 98.80%F1-score.The empirical results of this study validate the ensemble model’s ability to improve cybersecurity defenses by showing that it outperforms individual MLPmodels.In expanding the field of cybersecurity strategy,this research highlights the significance of combined deep learning models in strengthening intrusion detection systems against sophisticated cyber threats. 展开更多
关键词 Cloud encryption raaS ENSEMBLE threat detection deep learning CYBERSECURITY
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全自动RaA氡测量仪研制
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作者 武旭东 范增伟 +3 位作者 李婷 麻金龙 段金松 王玮 《铀矿地质》 CAS CSCD 2024年第6期1193-1200,共8页
应对当前铀矿地质勘查领域中对土壤氡快速、准确检测的需求,设计了一款全自动RaA测氡仪。该仪器采用泵吸式主动取样,将土壤中气体通过采样器抽取至高压静电吸附腔内,对RaA子体进行富集。利用卷带式全自动换带结构,实现粒子收集带的自动... 应对当前铀矿地质勘查领域中对土壤氡快速、准确检测的需求,设计了一款全自动RaA测氡仪。该仪器采用泵吸式主动取样,将土壤中气体通过采样器抽取至高压静电吸附腔内,对RaA子体进行富集。利用卷带式全自动换带结构,实现粒子收集带的自动更换,确保测量的连续性和高效性。通过一体化探测器,配合高灵敏度的幅值提取模块,精确采集并分析α谱数据。双气泵气路设计使排气和取气气路能够自动切换,无需手动插拔管道,确保全程监测并动态修正气体流量。系统还采用嵌入式程序设计,配备背光液晶显示屏和USB接口,实现与上位机程序的数据交互及远程控制。经实验验证,该仪器满足检定规程要求,在实际应用中可靠性高。该仪器自动化程度高,减少了人为操作误差,提升了数据的可靠性和一致性。在铀矿勘查领域具有广泛的应用前景,并为相关领域研究和应用提供了有力的技术支持。 展开更多
关键词 raa法测氡 Α谱 全自动换带 幅值提取
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黄芪甲苷对地塞米松诱导的骨质疏松模型C57BL/6小鼠RAAS系统的影响
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作者 柴艺汇 牛建均 +3 位作者 田兴中 刘春艳 陈云志 吴大梅 《贵州医药》 CAS 2024年第2期180-183,190,共5页
目的探究黄芪甲苷对骨质疏松模型小鼠维生素D系统和肾素-血管紧张素-醛固酮系统通路的影响,以期进一步阐明黄芪甲苷治疗骨质疏松的机制。方法将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为六组:空白组、模型组、黄芪甲苷低、中、高剂量组(6、12、25 mg... 目的探究黄芪甲苷对骨质疏松模型小鼠维生素D系统和肾素-血管紧张素-醛固酮系统通路的影响,以期进一步阐明黄芪甲苷治疗骨质疏松的机制。方法将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为六组:空白组、模型组、黄芪甲苷低、中、高剂量组(6、12、25 mg/kg)、维生素D组(0.7μg/kg,1,25(OH)_(2)D_(3)),每组5只。采用HE染色法观察黄芪甲苷对地塞米松诱导的骨质疏松模型C57BL/6小鼠骨组织病理学改变;采用ELISA法检测黄芪甲苷对地塞米松诱导的骨质疏松模型C57BL/6小鼠血清AKP、25(OH)D_(3)的影响;采用Western-blot检测黄芪甲苷对地塞米松诱导的骨质疏松模型C57BL/6小鼠股骨VDR、FGF23、ACE、AngⅡ蛋白表达的影响。结果与空白组比较,模型组小鼠股骨骨皮质粗糙,破骨细胞增多,伴随凹坑吸收区域的增大,骨小梁变细,数量减少,间隙增大;与模型组比较,黄芪甲苷低、中、高剂量组小鼠股骨骨小梁变细、数量减少程度均明显减轻。与空白组比较,模型组小鼠血清AKP、25(OH)D_(3)含量显著降低(P<0.01);模型组小鼠股骨VDR蛋白表达量显著降低(P<0.01),FGF23、ACE、AngⅡ蛋白表达量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,黄芪甲苷高、中剂量组和维生素D组小鼠血清AKP、25(OH)D_(3)含量显著升高(P<0.01);黄芪甲苷高、中剂量组和维生素D组小鼠股骨VDR蛋白表达量显著升高(P<0.01),FGF23、ACE、AngⅡ蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论黄芪甲苷可防治地塞米松诱导的C57BL/6J小鼠骨质疏松,其机制可能通过调节FGF23、ACE、AngⅡ蛋白表达有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 维生素D raaS 骨质疏松
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重组酶介导等温扩增技术(RAA)在病原微生物检测中的应用进展 被引量:2
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作者 毛迎雪 刘蒙达 +7 位作者 张皓博 曲瑶 南文龙 苏华彬 刘建柱 孙淑芳 胡莉萍 樊晓旭 《中国动物检疫》 CAS 2024年第1期60-66,共7页
重组酶介导等温扩增(RAA)是一种恒温快速核酸扩增技术,是重组酶等温扩增技术中具有代表性和前沿性的检测技术,其弥补了现有核酸体外扩增技术需要热循环的局限性,使得核酸体外扩增更加简便快捷,目前已被广泛应用于动物疫病检测。本文介绍... 重组酶介导等温扩增(RAA)是一种恒温快速核酸扩增技术,是重组酶等温扩增技术中具有代表性和前沿性的检测技术,其弥补了现有核酸体外扩增技术需要热循环的局限性,使得核酸体外扩增更加简便快捷,目前已被广泛应用于动物疫病检测。本文介绍了RAA技术的检测原理、引物探针设计及优缺点,综述了其在病毒、细菌、寄生虫及抗生素耐药基因检测等方面的应用进展,总结了国内现有RAA技术标准及检测产品开发情况,以期为拓展RAA技术的应用提供参考。 展开更多
关键词 重组酶介导扩增 等温扩增 病原检测 生物安全检测
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SGLT2抑制剂联合RAAS阻断剂治疗早期糖尿病肾病的疗效
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作者 杨娟 叶晓霜 +2 位作者 严文艳 周颖 江露月 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第4期0047-0050,共4页
分析SGLT2抑制剂与RAAS阻断剂联合应用于糖尿病肾病早期的治疗效果。方法 选取2020年1月至2022年1月期间至我院门诊及病房就诊的糖尿病肾病患者100例为研究对象,入组患者于2023年1月至2023年6月期间均接受SGLT2抑制剂、RAAS阻断剂加上... 分析SGLT2抑制剂与RAAS阻断剂联合应用于糖尿病肾病早期的治疗效果。方法 选取2020年1月至2022年1月期间至我院门诊及病房就诊的糖尿病肾病患者100例为研究对象,入组患者于2023年1月至2023年6月期间均接受SGLT2抑制剂、RAAS阻断剂加上基础治疗的方案,针对eGFR、血糖、肾功能、血脂和不良反应等指标展开研究分析。结果 治疗后所有患者的eGFR指标显著上升,而HbA1c、2 hPG以及FPG血糖指标明显下降,治疗前后差异存在统计价值(P<0.05);治疗后患者 UACR 、β2-MG、BUN以及Scr等指标均出现明显下降,治疗前后差异存在统计价值(P<0.05);治疗后患者HDL-C 明显提高,而LDL-C、TG以及TC指标明显下降,治疗前后差异存在统计价值(P<0.05);治疗期间患者并没有发生呕吐、腹痛、高钾血症、头晕、干咳等不良症状。结论 临床可以借助 RAAS 阻断剂+ SGLT2 抑制剂来对早期糖尿病肾病患者展开治疗,不仅可以对其肾功能进行有效改善,同时还能够稳定患者血糖和血脂等指标,效果显著,值得进行推广。 展开更多
关键词 SGLT2抑制剂 raaS阻断剂 糖尿病肾病 肾功能
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RAA技术及其在兽医诊断中的应用
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作者 罗晓莹 林福忠 林秋娟 《福建畜牧兽医》 2024年第2期42-44,共3页
重组酶介导等温扩增(Recombinase aided amplification,RAA)技术是新兴的核酸等温扩增技术,在食品安全检测、环境监测、水产病害检测、动物疫病检测等各领域已经被广泛利用。为了解RAA技术原理及其在兽医诊断中的应用,本文从RAA技术原... 重组酶介导等温扩增(Recombinase aided amplification,RAA)技术是新兴的核酸等温扩增技术,在食品安全检测、环境监测、水产病害检测、动物疫病检测等各领域已经被广泛利用。为了解RAA技术原理及其在兽医诊断中的应用,本文从RAA技术原理、引物设计、检测方法和应用进行阐述,旨在提高兽医从业人员对RAA诊断技术的认识。 展开更多
关键词 重组酶介导等温扩增(raa) 诊断 兽医领域
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基于ORF7基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-RAA检测方法的建立
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作者 于娜 马佳镁 +6 位作者 张紫薇 黄春媛 范悦轩 郑佳馨 张艳 刘光亮 曹宗喜 《动物医学进展》 北大核心 2024年第8期117-119,共3页
根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)... 根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)copies/μL;与PRVBartha-K61、PCV、CSFV、PRRSVGD、PRRSVXH-GD、PRRSVGM2、PRRSVCH-1a病毒均无交叉反应。分别对157份样品进行荧光RT-RAA法与PCR方法的检测进行比对,结果显示,荧光RT-RAA法敏感性为94.0%,特异性为100%。建立的PRRSV荧光RT-RAA法操作简便,特异性强,灵敏度高。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF7基因 反转录-重组酶介导等温扩增 特异性 灵敏度
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口蹄疫病毒通用型RT-RAA-LFD快速检测方法的建立
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作者 寇美玲 谢佳芮 +5 位作者 李占鸿 张振兴 苏晓航 王轶男 宋建领 苗海生 《中国动物检疫》 CAS 2024年第6期97-102,共6页
为建立一种操作简便、有效的口蹄疫病毒(FMDV)核酸通用型检测方法,以FMDV 3D基因为靶基因,设计标记引物及探针,建立了一种新的检测FMDV的反转录-重组酶介导链置换核酸扩增结合侧流层析试纸检测(RT-RAA-LFD)方法。该方法操作简便,耗时短... 为建立一种操作简便、有效的口蹄疫病毒(FMDV)核酸通用型检测方法,以FMDV 3D基因为靶基因,设计标记引物及探针,建立了一种新的检测FMDV的反转录-重组酶介导链置换核酸扩增结合侧流层析试纸检测(RT-RAA-LFD)方法。该方法操作简便,耗时短,40℃35 min内即可完成检测,通过肉眼观察可判定结果;具有较好的覆盖面,能够检出我国O型、A型FMDV主要流行拓扑型病毒,与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)等其他猪病病原无交叉反应;对RNA标准品的最低检测限为10^(-7)拷贝/μL,敏感性较高。利用建立的FMDV RT-RAA-LFD方法对5份临床样品进行检测,其结果与RT-PCR结果一致。结果表明,本研究建立的FMDVRT-RAA-LFD方法具有快速、直观、特异强、重复性好等优点,适合在基层兽医防疫部门和养殖场推广应用。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 重组酶介导链置换核酸扩增 侧流层析试纸 恒温扩增 快速检测
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流产衣原体RAA快速检测方法的建立
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作者 李嘉琪 王亚鹏 +5 位作者 张皓博 张研博 张培培 孙世雄 亓菲 孙翔翔 《中国动物检疫》 CAS 2024年第11期118-123,共6页
流产衣原体(Chlamydia abortus)是一种可造成羊、牛、猪等多种动物和人感染的原核微生物,广泛分布于世界各地,是危害畜牧业最严重的衣原体病原之一。为实现流产衣原体的快速准确鉴别,提高检测效率,提升应急响应速度,根据流产衣原体ompA... 流产衣原体(Chlamydia abortus)是一种可造成羊、牛、猪等多种动物和人感染的原核微生物,广泛分布于世界各地,是危害畜牧业最严重的衣原体病原之一。为实现流产衣原体的快速准确鉴别,提高检测效率,提升应急响应速度,根据流产衣原体ompA基因保守区域,设计特异性引物和探针,建立了流产衣原体重组酶介导等温核酸扩增检测技术(recombinase aided amplification,RAA)。该方法仅需在39℃条件下扩增20 min,即可完成检测;最低检测限可达1.13 copies/μL,且与常见细菌核酸无交叉反应;8次重复试验组内变异系数(CV)约为5%;临床样品检测结果显示,建立的RAA方法与荧光PCR符合率为100%。结果表明,本研究建立的RAA快速检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,操作简便,为流产衣原体的现场快速检测提供了新的技术手段,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 流产衣原体 重组酶介导等温扩增 快速检测
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基于RAA技术快速检测EHEC-O157型核酸方法的建立
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作者 任宝红 郭瑞 +2 位作者 韩小改 段蕾 贾继民 《食品工程》 2024年第2期72-75,共4页
针对肠出血性大肠埃希氏菌O157型建立一种核酸诊断方法。针对该病原的rfbE基因,利用重组酶介导等温核酸扩增(recombinase aided isothermal amplification,RAA)技术建立检测方法,并做性能评价。该方法在20 min内完成扩增,与多种标准菌... 针对肠出血性大肠埃希氏菌O157型建立一种核酸诊断方法。针对该病原的rfbE基因,利用重组酶介导等温核酸扩增(recombinase aided isothermal amplification,RAA)技术建立检测方法,并做性能评价。该方法在20 min内完成扩增,与多种标准菌株无交叉反应,质粒10 copies/μL或菌液102 CFU/mL可以检出阳性,37℃加压48 h后数据稳定。该方法在特异性、敏感性、稳定性表现良好,可用于肠出血性大肠埃希氏菌O157型检测。 展开更多
关键词 重组酶介导等温核酸扩增 O157 rfbE
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运动结合饮食控制通过降低RAAS系统活性改善男性肥胖青少年血管内皮功能 被引量:21
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作者 唐东辉 侯玉洁 +6 位作者 白爽 李娟 杨东升 刘润芝 姚梦 李旭龙 弓宇婧 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2017年第9期48-54,F0003,共8页
目的:通过检测封闭式运动减肥训练营中肥胖青少年血管内皮功能及RAAS系统主要成分的变化,揭示运动结合饮食控制改善肥胖青少年血管内皮功能的生物学机制。方法:32名男性单纯性肥胖青少年,年龄:15.38±2.82岁,BMI:33.21±4.23 kg... 目的:通过检测封闭式运动减肥训练营中肥胖青少年血管内皮功能及RAAS系统主要成分的变化,揭示运动结合饮食控制改善肥胖青少年血管内皮功能的生物学机制。方法:32名男性单纯性肥胖青少年,年龄:15.38±2.82岁,BMI:33.21±4.23 kg/m^2。接受为期6周的运动结合饮食控制,采用Endo PAT-2000系统测试受试者实验前后的指端反应性充血指数(RHI),并对血清NO、内皮素(ET-1)、肾素(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转换酶(ACE)、醛固酮(ALD)水平、身体形态、糖脂代谢、血压进行检测。结果:经过6周运动结合饮食控制干预,肥胖青少年身体成分、围度和糖脂代谢指标明显改善。RHI(P<0.01)和血清中NO/ET-1(P<0.01)显著上升,血清PRA、AngⅡ和ALD(P<0.05、P<0.01和P<0.01)显著下降。运动结合饮食控制干预前后血清PRA、AngⅡ和ALD的变化程度呈显著正相关,而AngⅡ与RHI变化程度呈显著负相关(r=-0.562,P=0.003)。结论:肥胖青少年RAAS系统活性显著提高。6周的运动结合饮食控制,能够有效改善肥胖青少年的血管内皮功能,其机制可能与运动结合饮食控制降低了RAAS系统活性有关。 展开更多
关键词 运动 肥胖青少年 内皮功能 EndoPAT raaS
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腰硬联合麻醉对剖宫产产妇围术期凝血功能、RAAS活性及术后镇痛效果的影响 被引量:15
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作者 李建宾 惠建伟 +2 位作者 何婉雯 郭瑞 陈友利 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第7期930-932,935,共4页
目的探讨腰硬联合麻醉对剖宫产产妇围术期凝血功能、RAAS活性及术后镇痛效果的影响。方法收集2013年6月至2016年1月在该院接受剖宫产分娩的产妇118例,按照随机数字表法分为观察组及对照组各59例,观察组产妇接受腰硬联合麻醉,对照组产妇... 目的探讨腰硬联合麻醉对剖宫产产妇围术期凝血功能、RAAS活性及术后镇痛效果的影响。方法收集2013年6月至2016年1月在该院接受剖宫产分娩的产妇118例,按照随机数字表法分为观察组及对照组各59例,观察组产妇接受腰硬联合麻醉,对照组产妇接受硬膜外麻醉。手术前1d(T0)、剖宫产结束前10min(T1)、剖宫产术后6h(T2),采用全自动血凝分析仪测定凝血功能指标,采用放射免疫法测定肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)功能指标。术后6h(T2)、术后12h(T3),采用痛阈测试仪测定疼痛指标。结果 T1、T2时,观察组产妇的凝血指标凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶凝固时间(TT)水平均显著高于对照组产妇,凝血酶原活动度(PTA)水平低于对照组产妇(P<0.05);观察组产妇的血清RAAS指标肾素(R)、血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)、醛固酮(ALD)水平均低于对照组产妇(P<0.05)。T2、T3时,观察组产妇的视觉模拟评分(VAS)评分值低于对照组产妇,痛阈、耐痛阈水平高于对照组产妇(P<0.05)。结论腰硬联合麻醉可减少剖宫产创伤引起的产妇凝血、RAAS功能激活,且在术后镇痛方面效果更显著。 展开更多
关键词 剖宫产 腰硬联合麻醉 凝血功能 raaS 镇痛效果
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