RAGE受体阻断剂对癫痫幼鼠脑电图、神经元损伤及S100B蛋白表达的影响

目的探究晚期糖基化终末产物(Receptor for Advanced Glycation End Products,RAGE)受体阻断剂对癫痫幼鼠脑电图、神经元损伤及S100B蛋白表达的影响。方法选取40只无特定病原体级SD雄性幼鼠,随机分为正常组(N组)、模型组(M组)、苯妥英钠组(P组)、RAGE受体阻断剂组(R组),每组10只。M组、P组、R组腹腔注射戊四氮建立癫痫模型,N组不建立该模型,建模成功后,对P组腹腔注射20 mg/kg苯妥英钠,对R组腹腔注射1 mg/kg RAGE受体阻断剂FPS-ZM,N组、M组同期腹腔注射同体积0.9%氯化钠溶液。观察各组幼鼠模型行为学,记录脑电图,采用FJB染色和尼氏染色检测神经元损伤情况,免疫酶标法检测S100B蛋白表达。结果与N组比较,M组、P组、R组幼鼠Racine评分、发作持续时间、发作次数明显升高(P<0.05);与M组比较,P组、R组幼鼠Racine评分、发作持续时间、发作次数明显降低(P<0.05);且与P组相比,R组上述指标显著降低(P<0.05)。与N组比较,M组、P组、R组幼鼠波幅明显升高(P<0.05);频率明显降低(P<0.05);与M组比较,P组、R组幼鼠波幅明显降低(P<0.05),频率明显升高(P<0.05);且与P组相比,R组上述指标变化显著(P<0.05)。与M组相比,P组、R组神经元损伤明显减轻,神经元数量有所增加,神经元形态有所改善,神经元细胞及尼氏小体数目明显增加。与N组比较,M组、P组、R组海马、中脑、额叶皮层S100B蛋白表达显著升高(P<0.05);与M组比较,P组、R组海马、中脑、额叶皮层S100B蛋白表达显著降低(P<0.05);且与P组相比,R组上述指标显著降低(P<0.05)。结论RAGE受体阻断剂可显著改善癫痫幼鼠脑电图和神经元损伤,并抑制S100B蛋白表达。

RAGE在胃癌组织中的表达及与肿瘤侵袭转移的关系

目的研究RAGE蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌的侵袭和转移的关系。方法选取50例胃癌组织标本,采用SP免疫组化法检测RAGE表达情况。选取9例新鲜手术切除胃癌标本用于蛋白质印迹(western blot)检测。结果RAGE在正常组织表达于内皮、平滑肌细胞、单核吞噬细胞。胃癌组织中表达明显增多(P<0.05)。RAGE在低分化腺癌中的表达明显升高,RAGE的表达和有无淋巴结转移呈负相关(γs=-0.399,P=0.004)。有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。RAGE蛋白表达的相关性分析表明浸润深度与RAGE蛋白的表达呈正相关(γs=0.385,P=0.06)。不同浸润深度的RAGE的表达差异有显著性意义(P<0.05)。Western blot结果分析表明:胃癌的组织学类型与RAGE的表达呈正相关(γs=0.744,P=0.001)。在正常组织、癌旁组织、高分化、中分化、低分化癌组织中,RAGE蛋白含量呈依次上升趋势(P<0.05)。结论RAGE在正常胃组织低水平表达,在胃癌组织中的表达明显增强。RAGE的表达与胃癌的侵袭转移密切相关。

RAGE介导S100蛋白的细胞外信号效应

S100蛋白家族至少由25个成员组成,参与多种细胞内功能活动的调节。最近研究表明,一些S100蛋白经过非经典途径释放到细胞外,并与晚期糖基化终末产物受体结合发挥生物学效应。S100蛋白与晚期糖基化终末产物受体的相互作用在炎症、肿瘤的发生发展中可能起重要的作用。

HMGB1/RAGE蛋白在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨HMGB1/RAGE蛋白在食管鳞癌中的表达及其对食管鳞癌预后判定的作用。方法以食管鳞癌旁正常组织40例为对照,免疫组化检测80例食管鳞癌组织HMGB1、RAGE蛋白的表达,分析HMGB1、RAGE表达与临床病理因素的关系及其对食管鳞癌预后的影响。结果HMGB1、RAGE蛋白在食管鳞癌组织和正常鳞状上皮的阳性表达率分别为47.5%vs17.5%和72.5%vs42.5%,差异均具有统计学意义;HMGB1、RAGE蛋白的阳性表达与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移及TNM分期正相关(P<0.05),与癌细胞分化程度负相关(r分别为-0.51、-0.242,P<0.05);HMGB1和RAGE之间的表达呈正相关(r=0.35,P=0.001);HMGB1、RAGE蛋白阳性表达食管鳞癌患者预后较差,COX分析显示HMGB1蛋白为影响食管鳞癌预后的独立因素(HR=4.853,P=0.000)。结论HMGB1和RAGE蛋白的表达与食管鳞癌的临床病理学特征密切相关,HMGB1与其受体RAGE的结合可能参与了食管鳞癌的侵袭和转移,HMGB1可作为预测食管鳞癌预后的重要指标。

腹主动脉瘤组织HMGB1与RAGE表达及意义

目的检测高迁移率族蛋白B1（HMGB1）及晚期糖基化终产物受体（RAGE）在腹主动脉瘤（AAA）组织中的表达,探讨它们在AAA发展、破裂中的作用。方法 AAA病人42例,小AAA（横径〈5 cm）病人9例,中AAA（横径5~7 cm）病人15例,大AAA（横径〉7 cm）病人6例,破裂AAA病人12例;另选10例正常腹主动脉壁组织作为对照。采用免疫组化方法检测两组HMGB1及RAGE蛋白的表达。结果 AAA组织中HMGB1、RAGE的阳性表达率均明显高于正常腹主动脉组织（2χ=15.61、13.37,P〈0.01）,大、中AAA组织中RAGE的阳性表达率高于小AAA组织（χ2=6.075,P〈0.05）,大AAA和破裂AAA组织中RAGE的阳性表达率高于中小AAA组织（2χ=4.978,P〈0.05）。而HMGB1在不同大小AAA及破裂AAA组织中的表达差异无显著性（χ2=3.060,P〉0.05）。HMGB1与RAGE在AAA组织中的表达无相关性（P〉0.05）。结论 HMGB1可能参与了AAA的发展过程,尤其RAGE与AAA的扩张和破裂可能密切相关。

sRAGE与重症肺炎患者病情程度、应激性高血糖的关系

目的探讨血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)水平与重症肺炎患者病情严重程度和应激性高血糖发生的关系。方法选取2016年6月—2019年5月在马鞍山市人民医院重症医学科住院治疗的成人非糖尿病重症肺炎患者100例、普通肺炎患者100例,以及同期该院健康体检者100例。检测血清sRAGE、晚期糖基化终末产物(AGEs)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。检测重症肺炎患者空腹血糖,并分为合并应激性高血糖(空腹血糖≥7.0 mmol/L)(合并组)和未合并应激性高血糖患者(空腹血糖<7.0 mmol/L)(未合并组)。比较两组患者血清sRAGE水平,采用多元线性回归对sRAGE的影响因素进行分析。结果重症肺炎患者血清sRAGE水平高于健康对照和普通肺炎患者(P<0.05)。合并组血清sRAGE水平高于未合并组(P<0.05)。APACHEⅡ评分[OR=2.295(95%CI:1.877,3.241)]、MODS评分[OR=3.315(95%CI:2.186,5.673)]、sRAGE[OR=1.271(95%CI:1.026,1.573)]、AGEs[OR=1.328(95%CI:1.105,1.792)]是重症肺炎患者发生应激性高血糖的独立影响因素(P<0.05)。结论血清sRAGE在重症肺炎患者尤其是发生应激性高血糖的重症肺炎患者中的表达水平明显升高,sRAGE不仅可反映肺炎患者的疾病严重程度,而且参与应激性高血糖的发生过程。

血脑屏障RAGE/LRP1转运体及神经血管单元与阿尔茨海默病关系的研究进展

血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)是介于外周和中枢神经系统之间的一道生理屏障,对维持中枢神经系统的稳态起着重要作用。研究表明,血脑屏障与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发生发展密切相关。该文重点论述血脑屏障晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)/低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1)受体转运系统及以血脑屏障为核心组分的神经血管单元(neurovascular unit,NVU)介导的中枢β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)水平调控与AD发病机制的关系,为AD防治提供新思路。

HMGB1-RAGE/TLRs-NF-κB信号通路中关键蛋白的表达与糖尿病肾病的关系

目的探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)-晚期糖基化终产物受体(RAGE)/Toll样受体(TLRs)-核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中关键蛋白的表达与糖尿病肾病的关系。方法C57BL/6雄性小鼠注射链脲菌素(STZ)建立糖尿病肾病(DN)模型列为DN组,生理盐水替代列为对照组,在DN组基础上给予胰岛素治疗列为治疗组,对比3组小鼠体质量、血糖、尿白蛋白定量和HMGB1-RAGE/TLRs-NF-κB信号通路中关键蛋白水平差异。另外给予DN组小鼠HMGB1拮抗剂A Box注射,观察注射前后小鼠尿白蛋白和肾组织切片变化。结果与对照组相比,DN组和治疗组小鼠体质量、血糖和尿白蛋白定量均明显增加(P<0.01);与DN组相比,治疗组上述各指标均明显下降(P<0.05)。建模完成后各时间段,DN组HMGB1、RAGE、TLR4,NF-κB蛋白水平均较对照组明显升高(P<0.05),治疗组小鼠HMGB1、RAGE、TLR2、TLR4和NF-κB蛋白水平均较对照组明显升高(P<0.05)。DN组和治疗组HMGB1、RAGE、TLR2、TLR4和NF-κB mRNA水平均明显高于对照组(P<0.01)。与DN组小鼠相比,治疗组小鼠各时间段上述几种蛋白和mRNA水平均明显偏低(P<0.05)。给予A Box后,生理盐水处理小鼠组织学染色无明显变化(P=0.933),DN模型小鼠肾小管间质胶原蛋白沉淀明显减少(P=0.013)。结论HMGB1-RAGE/TLRs-NF-κB信号通路关键蛋白HMGB1、RAGE、TLR2、TLR4和NF-κB在糖尿病肾病小鼠中表达增高,阻断HMGB1和RAGE、TLRs结合能够阻止糖尿病肾病发展。

S100A12和RAGE在子痫前期孕妇外周血及胎盘组织中的表达

目的探讨S100钙结合蛋白A12（S100A12）及晚期糖基化终末产物受体（RAGE）基因在子痫前期孕妇外周血及胎盘组织中的表达及意义。方法选取2014年2月至2015年3月在中国医科大学第四医院和昌乐县人民医院产科分娩的87例子痫前期孕妇分为非重度组（n=46）和重度组（n=41），同期选取正常孕妇40例作为对照组。利用实时荧光定量PCR技术检测外周血及胎盘组织中S100A12 mRNA及RAGE mRNA的表达。结果子痫前期孕妇外周血中S100A12 mRNA和RAGE mRNA相对表达量均高于对照组（t值分别为12．341和10．517，均P〈0．05），重度组子痫前期孕妇外周血中S100A12 mRNA和RAGE mRNA相对表达量均高于非重度组和对照组，且非重度组均高于对照组，差异均有统计学意义（t=1．980—8．191，均P〈0．05）。子痫前期孕妇胎盘组织中S100A12 mRNA和RAGE mRNA相对表达量均高于对照组孕妇（t值分男11为9．747和8．625，均P〈0．05），重度组孕妇胎盘组织中S100A12 mRNA和RAGE mRNA相对表达量均高于非重度组和对照组，且非重度组高于对照组，差异均有统计学意义（t=2．235～7．286，均P〈0．05）。经Pearson相关分析显示，子痫前期孕妇外周血和胎盘组织中S100A12 mRNA相对表达量均与RAGE mRNA相对表达量呈正相关（r值分别为0．603和0．552，均P〈0．05）。结论S100A12及RAGE基因在子痫前期孕妇外周血及胎盘组织中呈高表达，可能共同参与了子痫前期孕妇机体炎性反应的发生。

六味地黄丸和通络救脑滴丸对2种痴呆模型小鼠脑组织Aβ降解的影响

目的:分析六味地黄丸和通络救脑滴丸对“肾精不足”和“毒损脑络”2种不同痴呆症模型动物脑组织Aβ降解的影响。方法:通过SAMP8小鼠和在SAMR1小鼠双侧海马区注射Aβ_(1-40)分别复制痴呆动物模型,采用水迷宫测定行为功能学,免疫组织化学染色(IHC)法检测海马和皮层中Aβ的表达,Western Blotting法检测海马和皮层中胰岛素降解酶(IDE)、低密度脂蛋白相关蛋白1(LRP1)和晚期糖基化终末产物受体(RAGE)蛋白的表达。结果:2种痴呆模型在游速、避暗错误次数、错误区时间、脑组织海马和皮层中IDE、RAGE和海马中LRP1等蛋白的表达,差异均有统计学意义(均P<0.05);与双侧海马区注射Aβ_(1-40)模型小鼠比较,SAMP8模型小鼠的游速和避暗错误次数下降,脑组织中RAGE表达升高,IDE和LRP1表达降低;通络救脑滴丸对改善双侧海马注射Aβ_(1-40)模型小鼠的避暗潜伏期、脑组织海马区IDE和RAGE的表达水平作用明显;六味地黄丸对改善SAMP8模型小鼠水迷宫寻台成功率、避暗潜伏期、脑组织皮层和海马区IDE表达和海马Aβ的表达水平作用明显。结论:六味地黄丸可改善“肾精不足”证痴呆模型小鼠脑组织Aβ清除障碍,通络救脑滴丸可改善“毒损脑络”证痴呆模型小鼠脑组织Aβ清除障碍。

脑内β淀粉样蛋白水平的调节

β淀粉样蛋白(βamyloid protein,Aβ)是体内重要生物活性物质,主要包括Aβ40和Aβ42,它们在体内的利与害取决于其浓度高低。生理条件下脑内Aβ通过两个平衡维持在一定水平上,第一个平衡是Aβ的生成和降解,β分泌酶和γ分泌酶参与Aβ的生成,而脑啡肽酶和胰岛素降解酶参与Aβ的降解;第二个平衡是Aβ跨越血脑屏障的内向转运和外向转运,高级糖基化终产物受体(RAGE)是血脑屏障上Aβ内向转运体,而低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)是血脑屏障上Aβ外向转运体。如果这两个平衡任何一个被破坏,将会导致脑内Aβ水平异常升高,继而Aβ聚集和沉淀,形成老年斑。本文综述生理条件下脑内Aβ水平的调节以及降低病理状态下脑内Aβ水平的策略。

六味地黄丸对狼疮肾炎患者糖基化终末产物受体、单核细胞趋化蛋白1及趋化因子Fractalkine的影响

目的观察六味地黄丸对狼疮肾炎患者糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)、单核细胞趋化蛋白1及趋化因子Fractalkine水平的影响,探讨六味地黄丸用于狼疮肾炎的临床疗效,以期为临床上狼疮肾炎的治疗提供参考。方法收集大连大学附属中山医院2014年9月至2016年9月肾内科门诊收治的狼疮肾炎患者46例,其中男性25例,女性21例,按照随机数字表法原则分为观察组和对照组,每组23例,其中对照组给予甲泼尼龙0.5 g/d静脉滴注3 d后口服泼尼松片(0.6 mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗,8周后逐渐减量至10 mg/d维持治疗;观察组在常规西医治疗的基础上给予浓缩六味地黄丸辅助治疗,8丸/次,3次/日,均进行8个疗程(16 d为一个疗程)治疗。分别比较2组患者治疗前、后糖基化终末产物受体、单核细胞趋化蛋白1及趋化因子Fractalkine水平以及2组患者的临床疗效进行观察。结果与对照组临床疗效相比,六味地黄丸观察组总有效率为78.3%,高于对照组的70.0%(P<0.05);与对照组治疗后相比,观察组治疗后糖基化终末产物受体、单核细胞趋化蛋白1、趋化因子Fractalkine水平显著低于对照组(P<0.05)。结论六味地黄丸辅助常规西药治疗狼疮肾炎能够降低糖基化终末产物受体、单核细胞趋化蛋白1以及趋化因子Fractalkine的表达,提示六味地黄丸能够通过减轻狼疮肾炎的相关指标对狼疮肾炎具有治疗作用,值得临床进一步推广。

西红花酸对晚期糖化终产物诱导内皮细胞晚期糖基化终产物受体表达的抑制作用(英文)

目的:研究西红花酸对晚期糖基化终产物(AGE)诱导牛内皮细胞(BEC)中晚期糖基化终产物受体(RAGE)mRNA表达的抑制作用,并探讨其可能机制。方法:不同浓度的西红花酸(1、0.1、0.01μmol/L)预孵BEC细胞12h后,用AGE(100mg/L)刺激细胞12h,RT-PCR法测定RAGEmRNA的表达水平;ELISA法测定细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达;试剂盒分别检测胞外超氧阴离子和硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)浓度;同时,还用2,7-二氯荧光素(DCFH)测定了胞内H2O2的浓度,并用罗丹明123(Rh123)荧光法及MTT法分别检测细胞线粒体膜电位(MMP)水平和其琥珀酸脱氢酶(MSDH)的活性。结果:与AGE模型组相比,西红花酸能显著抑制RAGE mRNA的表达(P<0.05),降低胞外超氧阴离子和TBARS(P<0.01或P<0.05)及胞内H2O2水平;结果还显示,西红花酸能提高细胞MMP水平和MSDH活性。对ICAM-1蛋白表达也有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性。结论:西红花酸可能通过清除AGE与RAGE结合产生的活性氧(ROS)来抑制RAGE mRNA的高表达。提示西红花酸对糖尿病血管病变有潜在的治疗价值。

中药复方益糖康颗粒通过AGE-RAGE轴介导SIRT1调控PI3K/Akt/FoxO1信号通路促进足细胞自噬的机制

目的:通过观察中药复方益糖康(YTK)颗粒对晚期糖基化终末产物(AGE)-晚期糖基化终产物受体(RAGE)轴介导沉默信息调节因子1(SIRT1)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路改善糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠足细胞自噬的影响,探讨YTK治疗DKD的可能作用机制。方法:选取8周龄SPF级健康雄性Wistar大鼠96只,使用随机数字表法分为空白组、模型组、YTK高、中、低剂量组(40、20、10 g·kg^(-1))、西药组(氯沙坦片,20 mg·kg^(-1)),采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素建立DKD大鼠模型。造模成功后,各组按照相应比例剂量连续给药8周后取材。严格按照试剂盒所示方法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理形态学变化;免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、肌间质蛋白(Desmin)、裂孔膜蛋白(Nephrin)的平均积分吸光度值;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析DKD大鼠肾组织中滑膜PI3K、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、RAGE、SIRT1、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、FoxO1的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组SOD、GSH-Px、CAT表达水平明显降低,MDA显著升高(P<0.01);大鼠呈现严重肾损现象;足细胞标志蛋白α-SMA、FN、Desmin阳性表达显著增多,Nephrin、足突蛋白质(Podocin)显著下降(P<0.01);肾组织中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、RAGE、Caspase-3蛋白表达水平显著升高,SIRT1、FoxO1蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,YTK各剂量组大鼠血清中SOD、GSH-Px、CAT水平显著升高,MDA显著下降(P<0.01);肾损程度均发生了不同程度减轻;足细胞标志蛋白α-SMA、FN、Desmin平均积分吸光度值均明显降低,Nephrin、Podocin显著升高(P<0.01);肾组织中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、RAGE、Caspase-3表达水平显著降低,SIRT1、FoxO1表达水平显著提升(P<0.01)。中药组表现出明显的量效趋势。结论:YTK可能通过AGE-RAGE轴介导SIRT1调控PI3K/Akt/FoxO1信号通路,改善足细胞自噬,从而减轻肾脏病理损害,减少蛋白尿,保护肾功能,达到延缓DKD进展的目的。且中药组具有量效趋势。

表面等离子体共振技术研究肝素对高迁移率族蛋白1与晚期糖基化终产物受体亲合力的影响

测定肝素与高迁移率族蛋1(HMGB1),及其与晚期糖基化终产物受体(RAGE)的亲和力,探讨肝素对HMGB1/RAGE亲和力的影响。用表面等离子体共振技术,实时分析肝素与HMGB1,HMGB1与RAGE的亲和常数,利用其binding analysis分析肝素对HMGB1/RAGE配受体结合的影响。肝素与HMGB1的动力学速率常数ka=1.78×105L.(mol.s)-1,kd=8.02×10-4.s-1,亲和常数KA=2.22×108L·mol-1,KD=4.5×10-9mol·L-1;HMGB1与RAGE的动力学常数ka=1.85×103L.(mol.s)-1,kd=1.81×10-4.s-1,亲和常数KA=1.02×107L·mol-1,KD=9.77×10-8mol·L-1。肝素与RAGE的亲和力极低。当浓度分别为50,100,1000,10000U.L-1的肝素与HMGB1混合后,后者与RAGE的亲和力下降。上述不同浓度的肝素对HMGB1/RAGE亲和力的影响没有显著差异。结果表明,肝素可与HMGB1结合并影响后者与RAGE的亲和力,该作用并不与肝素浓度呈正相关。

二陈汤加味通过HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路对COPD大鼠细支气管炎症的影响

目的:观测二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠细支气管中高迁移率族蛋白1(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)通路中关键分子表达的影响,探讨二陈汤加味通过HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路对COPD细支气管炎症的作用及分子机制。方法:60只SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组(5、10、20 g·kg^(-1))和丙酮酸乙酯(EP)组(HMGB1抑制剂),每组10只。以烟熏联合气管滴注脂多糖的方法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味各干预组灌胃(ig)给药,并腹腔注射林格溶液4 mL;EP组ig等体积生理盐水,并腹腔注射EP(0.04 g·kg^(-1));正常组和模型组等体积生理盐水ig、并等体积林格溶液腹腔注射,连续干预21 d。酶联免疫吸附测定法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中HMGB1、趋化因子CXCL1和CXCL2、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)检测肺组织中HMGB1、RAGE和NF-κB p65 mRNA表达,免疫组化(IHC)检测细支气管组织中HMGB1、RAGE、磷酸化(p)-κB p65和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组用力肺活量(FVC)、第1秒末时间肺活量(FEV1)和FEV1/FVC均显著降低(P<0.01);BALF中HMGB1、CXCL1、CXCL2和MCP-1的含量均显著升高(P<0.01);肺组织HMGB1、RAGE、NF-κB p65 mRNA表达显著增加(P<0.01);HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65和α-SMA蛋白表达明显增强(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,二陈汤加味中、高剂量组FEV1/FVC均明显提高(P<0.05,P<0.01);BALF中HMGB1、CXCL1、CXCL2和MCP-1含量均明显降低(P<0.05,P<0.01);HMGB1、RAGE、NF-κB p65 mRNA表达明显减少(P<0.05,P<0.01);HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65和α-SMA蛋白表达均明显减弱(P<0.05,P<0.01)。结论:二陈汤加味能有效对抗COPD细支气管炎症反应。其机制可能与通过下调HMGB1、RAGE mRNA表达,抑制NF-κB活化,减少HMGB1、CXCL1、CXCL2和MCP-1的释放,从而抑制细支气管炎症损伤及异常修复有关。

右美托咪定对脓毒症小鼠中枢神经炎症反应的调控及机制研究

目的探究右美托咪定(Dex)通过减轻脓毒症小鼠外周和大脑海马区神经炎症反应对神经认知功能恢复的影响。方法选择51只CD1小鼠随机分为假手术组、脓毒症组、Dex组各17只。假手术组小鼠仅行开腹手术及盲肠暴露操作,余下2组采用盲肠结扎及穿孔的方式建立脓毒症小鼠模型,建模成功后,Dex组小鼠采用Dex腹腔注射,而假手术组、脓毒症小鼠于相同时间予生理盐水腹腔注射。观察各组小鼠1、2、3、4 d学习记忆能力(进入目标盒时间)及不同条件恐惧实验僵直时间,比较各组小鼠大脑海马区高迁移率族蛋白1(HMGB1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、Iba-1、伊文氏蓝(EB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平及外周血TNF-α、IL-6、IL-1β水平。结果1、2、3、4 d时,脓毒症组小鼠进入目标盒时间显著长于假手术组,Dex组小鼠进入目标盒时间显著短于脓毒症组(P<0.05)。在环境及声音条件恐惧实验中,脓毒症组小鼠僵直时间均显著短于假手术组,Dex组小鼠僵直时间均显著长于脓毒症组(P<0.05)。脓毒症组小鼠大脑海马区HMGB1、RAGE、EB、Iba-1表达水平显著高于假手术组,Dex组小鼠大脑海马区HMGB1、RAGE、EB、Iba-1表达水平显著低于脓毒症组(P<0.05)。脓毒症组小鼠外周血及大脑海马区TNF-α、IL-6、IL-1β水平均显著高于假手术组(P<0.05);Dex组小鼠外周血及大脑海马区IL-6、IL-1β水平均显著低于脓毒症组(P<0.05)。结论Dex可改善脓毒症小鼠外周和大脑海马区神经炎症反应,减轻脓毒症导致的血脑屏障通透性升高程度,有利于促进神经认知功能的恢复。

S100A8/A9和S100A12与动脉粥样硬化关系的研究进展

S100蛋白因能在中性条件下溶解在100%饱和硫酸铵溶液中而得名,其为一个酸性的钙离子结合蛋白家族,S100A8/A9和S100A12均为该家族成员。最近的研究表明,S100A8/A9和S100A12与动脉粥样硬化的发生发展有密切联系,并有望成为动脉粥样硬化性疾病预防、诊治的新靶点。本文将主要从S100家族中的S100A8、A9、A12等的结构、功能特性及其与动脉粥样硬化关系的研究进展进行综述。

六味地黄丸通过RAGE/LRP1受体介导对SAMP8小鼠脑微血管的调节作用

目的:探讨六味地黄丸对SAMP8小鼠神经血管单元损伤的保护作用。方法:将75只6月龄SAMP8小鼠作为肾精不足证阿尔茨海默病(AD)动物模型,设模型组、盐酸多奈哌齐(0.747 mg·kg^(-1)·d^(-1))组、六味地黄丸高、中、低剂量(2.700、1.350、0.675 g·kg^(-1)·d^(-1))组,每组15只,以SAMR1小鼠15只作为正常组,连续给药2个月。采用Morris水迷宫检测小鼠空间记忆能力;苏木素-伊红(HE)观察脑组织海马和皮层病理变化;免疫组化(IHC)法检测脑组织海马和皮层中β淀粉样蛋白(Aβ)沉积情况及血管性血友病因子(vWF)和CD34表达情况;电镜观察脑微血管超微结构变化情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑组织海马和皮层中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、低密度脂蛋白相关蛋白1(LRP1)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)和P-选择素(P-selection)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期、游泳路程显著延长(P<0.01),神经胶质细胞数量增多,神经细胞数量减少,脑微血管内皮细胞间隙紧密连接模糊或间隙变大,膜结构损伤较重,内皮细胞线粒体肿胀、膜破裂、嵴大部分溶解,海马和皮层组织中Aβ、vWF蛋白表达显著增加(P<0.01),CD34蛋白表达明显降低(P<0.05),皮层中RAGE和P-selection蛋白表达水平显著升高(P<0.01),LRP1和VEGF-A蛋白表达水平显著下降(P<0.01);与模型组比较,六味地黄丸各剂量组小鼠逃避潜伏期、游泳路程均明显缩短(P<0.05),皮层和海马中神经胶质细胞数量减少明显,皮层中微血管数量增多明显,微血管内皮细胞间隙紧密连接双层膜结构较清晰,线粒体数量增多、膜完整、线粒嵴恢复,海马和皮层中Aβ、vWF、RAGE和P-selection蛋白表达明显降低(P<0.05),CD34、LRP1和VEGF-A蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:六味地黄丸能够通过RAGE/LRP1受体系统调节Aβ代谢,通过抑制vWF表达和增加VEGF-A和CD34促进脑微血管新生,改善SAMP8小鼠脑微血管损伤。

补阳还五汤对肺纤维化中HMGB1-RAGE信号通路的调控作用

目的:观察肺纤维化中诱导免疫损伤和异常修复的高迁移率族蛋白Box-1(high mobility group Box-1 protein,HMGB1)及晚期糖基化终产物受体(receptor of advanced glycation end-product,RAGE)的表达,及补阳还五汤对HMGB1-RAGE信号通路的调控作用。方法:144只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组,博莱霉素(BLM)模型组,补阳还五汤低、中、高剂量组(6.83,13.66,27.32 g·kg^(-1)),阳性药组(强的松,4.2 mg·kg^(-1)),动物实验采用博莱霉素气管注入法复制肺纤维化模型后,分别给予补阳还五汤高、中、低剂量和强的松灌胃,于造模后第7,14,28天分批提取样本。采用逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)法检测肺组织中的HMGB1,RAGE mRNA的表达;采用蛋白质免疫印记法(Western blot)检测HMGB1,α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle action,α-SMA)的表达。细胞实验采用含药血清药理学的实验方法,以5%,10%,15%,20%的补阳还五汤含药血清和空白血清来干预HMGB1诱导刺激的人肺成纤维细胞(HFL1),采用Western blot法检测α-SMA蛋白的表达。结果:动物实验中,与正常组比较,模型组在第28天显著上调HMGB1 mRNA(P<0.01),在第7天和第14天显著上调RAGE mRNA(P<0.01),在各时间点显著上调HMGB1,α-SMA(P<0.01);与BLM模型组比较,补阳还五汤高剂量组在第14天和第28天显著下调HMGB1 mRNA(P<0.01),在第7天和第14天显著下调RAGE mRNA(P<0.01),在各时间点显著下调HMGB1和α-SMA蛋白(P<0.01)。细胞实验中,与空白组比较,20%空白血清预培养加HMGB1组显著升高α-SMA蛋白(P<0.01);与20%空白血清预培养加HMGB1组比较,不同剂量的补阳还五汤含药血清显著下调细胞中α-SMA蛋白(P<0.01)。结论:补阳还五汤可抑制HMGB1在大鼠肺组织中和人肺成纤维细胞中所引起的RAGE,α-SMA的表达增加。提示补阳还五汤可能通过阻断HMGB1/RAGE信号通路,减少肌成纤维细胞生成,对肺纤维化的发生发展起到防治作用。