东北春麦区小麦白粉病菌生理小种鉴定及其RAPD分析

对 1999～ 2 0 0 0年小麦白粉病菌的生理小种进行了鉴定 ,并分析了小种种群的变化。应用 2 3个随机引物对白粉病菌 8个不同生理小种进行RAPD分析 ,其中 11个引物的扩增带型在不同生理小种间出现差异 ,共扩增出 5 9条谱带 ,多态性为 47 5 %。通过对RAPD分析结果进行聚类分析 ,初步探明了白粉菌小种间的亲缘关系及其与小种毒力高低的相关性。

用RAPD技术对养殖环境溶藻弧菌遗传多样性的研究

利用RAPD技术对不同宿主、不同环境分离的8个溶藻弧菌Vibrioalginolyticus株系进行了遗传多样性分析,8个引物共获得了46条多态性条带,将8个株系分为3个类群,不同宿主(石斑鱼Epinephelusfario和凡纳对虾Penaeusvannamei)、不同环境及药物处理前后的株系之间有很高的遗传多样性,使用药物后,溶藻弧菌株系遗传多样性和基因型发生了明显的变化,而同一环境和同一时间分离的菌株之间有较高的同源性。从患病石斑鱼上分离到的致病株与非致病株有极高的相似性,但有一个约2kb的条带的差异,该差异条带可能与溶藻弧菌的致病性相关。

应用RAPD分子标记技术研究苜蓿根瘤菌的田间竞争结瘤能力

以在温室条件筛选出与 Vector苜蓿品中匹配较好的根瘤菌系 CCBAU30 1 38和 Vector为材料 ,应用 RAPD技术研究CCBAU30 1 38田间竞争结瘤能力。结果显示 ,利用冻融法处理的根瘤、菌体提取的 DNA可以直接作为 PCR扩增的模板 ,扩增结果与以类菌体 DNA及总 DNA作为模板处理的结果相同 ;以根瘤处理物作为 PCR扩增的模板 ,应用 RAPD分子标记技术对接种菌 CCBAU30 1 38田间竞争结瘤能力进行研究 ,接种 1 4 0 d后 ,CCBAU30 1 38田间占瘤率为 4 7.7% ,表明该菌具有较强竞争结瘤能力和持久力。试验结果还说明 ,在接种菌与土著菌有差异的条件下 ,应用 RAPD技术开展竞争结瘤能力研究 ,可以直接以根瘤处理物作为 PCR扩增的模板 ,具有简易、快速。

海南地区溶藻弧菌遗传多样性的RAPD分析

以来源于泰国的菌株TG06003作对照，对采自海南地区的27株溶藻孤菌（Vibrio alginolyticus）环境菌株进行了随机扩增多态性DNA标记（RAPD）分析，其中6株为毒力菌株，另外22株为非毒力菌株。实验共得到70个多态性条带，多态性比率（PP13）为98．6％。基因多样度的算术平均数和加权平均数分别为0．922和0．4544，Shannon’s信息指数的算术平均数和加权平均数分别为0．1391和0．1713。遗传相似度为0．4429-0．8857，遗传距离为0．1214-0．7520。将溶藻弧菌分为毒力菌株和非毒力菌株两个类群进行分析，结果表明，毒力菌株的遗传多样性丰富，它们的基因多样度和Shannon’s信息指数明显高于非毒力菌株；毒力菌株HN08811、HN08155、HN08809、HN08813明显聚为一类，另外2株毒力菌株分别与非毒力菌株HN08304和HN08803聚为一类，溶藻弧菌毒力菌株存在多种遗传型。

河北省棉区黄萎病菌系基于RAPD的遗传分化研究

本研究对２３个棉花黄萎病菌系，其中１９个为河北省棉区不同致病群（ＶＧｓ）的代表性菌系，用２５个可揭示菌系遗传多态性的随机引物进行ＲＡＰＤ扩增，研究了病菌的遗传分化及与其来源和致病性的关系。结果表明，菌系间的遗传相似系数变化在０．４４２～１．０００之间，但大多数菌系间的同源程度较高。基于８９个ＲＡＰＤ标记的聚类分析表明，供试菌系被划分为２个ＲＡＰＤ群（ＲＧｓ）和８个ＲＡＰＤ亚群（ＲＳＧｓ），其中河北省棉区黄萎病菌系的遗传分化程度较小，９５％的菌系归属于同一ＲＡＰＤ群（ＲＧ１），仅１个菌系属于ＲＧ２。ＲＡＰＤ类群与病菌地理来源有一定相关性，但与病菌致病群（ＶＧｓ）相关性不大。进一步分析表明，ＲＡＰＤ亚群（ＲＳＧｓ）与ＶＧｓ间存在一定关系，其中ＲＳＧ１中的８个菌系全部为强致病力的ＶＧⅠ菌系；ＲＳＧ２中６６．７％的菌系为ＶＧⅡ菌系。ＲＧｓ和ＲＳＧｓ与菌系是否与落叶型无关。

用RAPD技术进行鸡球虫不同种株的多态性研究

本文以随机引物成对组合的方式 ,对和缓艾美耳球虫 (Eimeria .mitis)、巨型艾美耳球虫 (E .maxima)和柔嫩艾美耳球虫 (E .tenella ) 3个种各 2个单卵囊感染纯株、E .tenella 6个抗药性表型不同的单卵囊感染纯株进行了RAPD分析 ,结果发现 ,RAPD技术能非常有效地用于上述球虫种、株间的鉴别。

近交系小鼠RAPD标记的观察

采用随机扩增多态性DNA技术(RAPD),分析BALB/c、C57BL/6、DBA/2、C3H/He等4个近交系小鼠的基因多态性,探讨用RAPD作为遗传标记,对近交系小鼠进行遗传检测。结果表明,4种小鼠表现出了各自不同的多态性RAPD标记,证明RAPD可作为近交系小鼠的分子标记,在DNA水平区别4种近交系小鼠。

应用RAPD技术对鸡柔嫩艾美耳球虫不同地理株的多态性研究

利用RAPD技术对鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)GZ株、HB株、JL株及HB株与JL株杂交虫株FZ1进行了研究。结果表明:E.tenella不同地理株间及同一地理株亲代与子代间均存在DNA多态性。其中不同地理株间种内变异程度较大(SI=0.6225～0.6977)。而同一地理株子代与亲代间也发生遗传变异,但变异程度不大(SI=0.9813～0.9910)。同时对本室培育的HB株与JL株的杂交虫株FZ1的基因组DNA进行RAPD分析,发现该杂交株与其亲本HB株、JL株的相似值为0.8215,0.7916,大于HB株与JL株间相似值(0.6977),小于传代虫株间的相似值(0.9813～0.9910),且其扩增条带显示出与亲本株间的相似,且又有不同,表明该杂交虫株是1株既具有两亲本株的遗传性状,又发生了变异的虫株。

木耳属四个野生菌株的RAPD图谱分析

应用RAPD技术对木耳属四个野生菌株进行了DNA指纹图谱分析。综合 10个随机引物的RAPD聚类分析结果表明 ,供试的四个野生菌株与毛木耳 (Auriculariapolytricha)归为一类 ,四个野生菌株间存在一定的遗传差异 ,不是同一菌株。本研究揭示了木耳属四个野生菌株的类源关系及DNA同质性 ,为进一步界定其系统分类地位提供了较为重要的科学依据。

用随机扩增多态DNA(RAPD)技术研究不同地理株埃及伊蚊的分化

目的 用RAPD技术对实验室饲养的广东、海南、台湾和印尼Baro等 4个不同地理株的 8只雌蚊进行随机扩增多态DNA分析。方法 随机扩增多态性DNA(RAPD)技术。结果 选用 2 0个随机引物进行扩增 ,有 8个引物表现清晰的RAPD谱带并呈显著多态性。UPGMA法构建的分子系统树表明埃及伊蚊 4个地理株之间存在着一定程度的遗传分化。结论 用RAPD方法可以区分不同地理株埃及伊蚊。

剑尾鱼近交系遗传纯度的RAPD分析

目的 分析近交系剑尾鱼 (Xiphophorushelleri)的遗传纯度 ,以指导剑尾鱼实验动物化的培育工作。方法 应用经过筛选的 2 9条随机引物对剑尾鱼的第 19代近交系 12尾剑尾鱼个体基因组DNA进行RAPD扩增 ,计算近交系个体间的相似系数及遗传距离。结果 筛选的 2 9条引物共扩增出 30 6条带 ,扩增片段的大小在 0 2 - 3kb之间。其中多态性带 2 9条 ,多态性带频率在 0～ 5 0 0 0 %之间 ,平均为 9 48%。近交系剑尾鱼不同个体拥有相同条带的比率较高。计算得到近交系的平均相似系数 (S)为 0 9839(0 973～ 0 997) ,平均等位基因频率 ( q)为 0 8731,最低平均杂合率 ( H)为 0 12 6 9。 结论 剑尾鱼第 19代近交系有较高的遗传纯合度。

乌骨鸡种群遗传结构的RAPD分析

利用RAPD技术对3个品系的乌骨鸡鸡种群体遗传结构进行分析,筛选的5个引物对3个品系的乌骨鸡均能产生特异性的条带,获得的多态性可用于乌骨鸡鸡种的遗传分析。品种间相似指数:两个白丝毛品系间(Ⅰ系和Ⅱ系)最高,黑丝毛乌骨鸡(Ⅲ系)与两个白丝毛品系间均较低,这可能与其品种间的外貌特征以及品种的来源有关。

黑木耳不同交配型的单倍体菌株RAPD/BSA分析(英文)

从黑木耳(Auricularia auricula)种内杂交子H2J3的子实体上单孢分离培养得到F1代52个单核体菌株,将F1子代及亲本(H2,J3)等所有供试单核体菌株的菌丝体两两配对培养,采用核荧光染色观察核相,和光学显微镜观察锁状联合,鉴别菌丝交配反应是否形成双核体菌丝,同时测定了亲本菌株所有F1子代的交配型。根据交配型表型将F1子代菌株分成两群(F1-A1,F1-A2),将每群内各自菌株的DNA等量混合,构建交配型基因的等基因池,通过64个随机引物的RAPD分析,发现引物S126在2个等基因池间扩增出差异带S1261021,且在属于同一交配型的亲本及F1子代之间扩增结果基本一致,表明S1261021是与交配型基因连锁的分子标记。

双孢蘑菇三种类型菌株的RAPD扩增研究

用72个随机引物,对三种类型双孢蘑菇菌株2796(杂交型)、8211(优质型)、01(高产型)等进行RAPD扩增,发现26个引物均产生三种不同的带型。用该26个引物进一步作三种类型9株双孢蘑菇白色菌株的RAPD扩增,发现引物U16、U20、B1、H4、H5、M7能很好地区分三类菌株,尤以U20和H5为佳,其产生的三种带型稳定整齐,差异带明显,为双孢蘑菇菌株特性的早期预测提供了DNA水平的标记。

广东省香菇栽培菌株RAPD多态性分析

对广东省5个香菇(Lentinulaedodes)栽培菌株或其衍生菌株进行RAPD分析。结果表明,不同菌株间存在着丰富的遗传多样性。RAPD扩增指纹能有效分辨不同菌株的基因型,可为香菇的商业菌株质量监测提供快速有效的技术手段,为规范食用菌菌种生产管理提供科学依据。

大豆疫霉菌遗传多样性的RAPD分析

利用随机扩增DNA（RAPD）技术分析了15个大豆疫霉菌（Phytophthora sojae）的遗传多样性，并同其它7个疫霉种的8个菌株进行了比较。运用筛选出的12个引物共获得152个RAPD标记，其中84．2％具有多态性。通过聚类分析结果表明．疫霉属种间的遗传相似系数的变化幅度为0．533—0．783，大豆疫霉菌与其它几种疫霉的遗传距离相对较远，用引物OPB06扩增到P．sojae种特有的一个RAPD标记；P．sojae种内菌株间遗传相似系数的变化幅度为0．855—0．967，亦存在较丰富的遗传多样性。该遗传多样性与菌株毒力之间有一定相关性，而与菌株地理来源没有相关性。

荣昌猪与新荣昌猪Ⅰ系遗传变异的RAPD标记分析

利用 6 0个随机引物对荣昌猪和新荣昌猪I系的基因组DNA进行RAPD分析 ,其中 35个引物可扩增出清晰的RAPD带型 ,1个引物A1表现出明显的遗传多态性。结果表明 :荣昌猪和新荣I系群内平均相似系数分别为 0 .787,0 .80 ;平均遗传距离为 0 .2 13,0 .198。两品系间平均相似系数为 0 .795 ;平均遗传距离为 0 .2 0 6。

稗草致病菌——尖角突脐孢菌菌株RAPD指纹图谱的分析

以我国主要稻区的稗草植株上分离的 1 7株尖角突脐孢菌菌株为试验材料 ,采用改良的SDS法提取其基因组DNA ,并运用优化的RAPD分析体系对其进行了分子标记遗传差异研究。从 2 5个随机引物中筛选出 2 0个扩增效果好的引物 ,对全部试验材料进行了RAPD扩增 ,共得到 2 39条有效带 ,其中多态性带 2 2 9条 (占 95 .8% )。依据扩增结果建立了 1 7株尖角突脐孢菌基因型的DNA指纹图谱并对其进行了有效区分。根据RAPD分析结果计算了菌株间的遗传距离 ,分析了它们的遗传差异并进行了聚类分析 ,结果表明 ,RAPD分子标记技术是能够用于杂草致病菌资源的鉴定的 ,并可以进一步应用于特定性状的基因标记研究。

北方棉区棉花黄萎病菌RAPD分析

以１４个黄萎病菌代表菌系为对照，对来自我国北方棉区的３４个棉花黄萎病菌菌系进行ＲＡＰＤ分析。选用对所有供试菌系都有扩增条带的１４个引物，取其结果中稳定性和多态性均好的６５条谱带作类平均法系统聚类分析，建立树状图。将上述４８个菌系分为４大类，结果表明北方棉区河北、河南、山东的部分棉田存在黄萎病菌落叶型菌系的危害，而且８５．７％的落叶型菌系与对照的美国落叶型菌系Ｔ９、Ｖ４４的亲缘关系比与对照的江苏落叶型菌系ＶＢ、Ｖ９９１更接近。

采用RAPD-毛细管芯片电泳法鉴定啤酒大麦品系

我国啤酒大麦主要依赖进口,建立快速准确的进口啤酒大麦品系鉴定方法对保护我国啤酒制造业利益,维护国际贸易公平具有重要意义。该实验采用RAPD和2100毛细管芯片电泳技术,建立了我国主要进口啤酒大麦品系鉴定方法。采用毛细管芯片电泳技术对11次重复实验数据进行统计分析,根据谱带重现性、特异性筛选标志带,根据标志带精确长度和相对量确定判别标准。5条随机引物产生的7条标志带将19个啤酒大麦品种分成13组。