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3种茎线虫rDNA区的PCR-RFLP分析 被引量:7
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作者 季镭 王金成 +2 位作者 杨秀丽 黄国明 林茂松 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期39-43,共5页
采用PCR-RFLP技术对来自国内外的10个茎线虫属群体进行了限制性片段长度多态性分析(RFLP),发现甘薯茎线虫(D itylenchus destructor)不同群体间存在基因分化现象。来自山东的2个群体Dell和Dely的酶切图谱与来自其他地区的线虫群体相比... 采用PCR-RFLP技术对来自国内外的10个茎线虫属群体进行了限制性片段长度多态性分析(RFLP),发现甘薯茎线虫(D itylenchus destructor)不同群体间存在基因分化现象。来自山东的2个群体Dell和Dely的酶切图谱与来自其他地区的线虫群体相比明显不同。对甘薯茎线虫的近似种鳞球茎茎线虫(D.dipsaci)以及食菌茎线虫(D.myceliophagus)的分析结果显示,通过ITS-RFLP技术建立的酶切图谱可以很好地将3种茎线虫区分开来。 展开更多
关键词 甘薯茎线虫 鳞球茎茎线虫 食菌茎线虫 ITS-rflp 酶切图谱
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江苏省肠出血性大肠埃希菌O157的基因PCR-RFLP分型研究 被引量:2
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作者 钱慧敏 朱叶飞 +2 位作者 董晨 张平平 朱凤才 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期983-986,共4页
目的对历年从江苏省不同地区分离的肠出血性大肠埃希菌O157(以下简称:O157)进行分型分析。方法采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法对108株O157分子分型,比较不同地区、不同年份菌型差异。结果根据EcoRV限制性酶... 目的对历年从江苏省不同地区分离的肠出血性大肠埃希菌O157(以下简称:O157)进行分型分析。方法采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法对108株O157分子分型,比较不同地区、不同年份菌型差异。结果根据EcoRV限制性酶切图谱可将菌株分成JS01-JS10十个不同的型别。主要菌型JS01占64.9%,JS02型与JS01型菌株酶切图谱相似度很高,JS03和JS04型菌株数目较少(12株),但近一半属于人源菌株。从时间方面看,1999年分离的菌型最多;从地区方面看,铜山县分离到的菌株型别最为多样化。结论不同菌型之间的致病性存在差异,菌株与地理来源的关系密切。PCR-RFLP方法操作简便、重复性好,为O157的流行病学研究提供了一条全新途径。 展开更多
关键词 大肠埃希菌O157 限制性酶切 PCR-rflp 分子分型
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基于培养性质模糊解析和28S rDNA-PCR-RFLP解析的外担子菌属真菌的分类学研究 被引量:3
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作者 张星耀 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第4期59-71,T001,共14页
外担子菌属(Exobasidium)的真菌引起树木的细胞增生性和肥大性病害。本研究基于PSA培养基上菌落的形态和性状的模糊解析,以及分离菌株在不同温度、pH值、氮源、碳源下生长曲线的模糊解析和28SrDNAPCR... 外担子菌属(Exobasidium)的真菌引起树木的细胞增生性和肥大性病害。本研究基于PSA培养基上菌落的形态和性状的模糊解析,以及分离菌株在不同温度、pH值、氮源、碳源下生长曲线的模糊解析和28SrDNAPCRRFLP解析,分布于日本的12个种和1个变种的外担子菌属真菌的35个分离菌株被分类为18个菌群。其中9个菌群和传统分类的种是一致的,这些种包括:坏损外担子菌(E.vexansMas)、网状外担子菌(E.reticulatumItoetSawada)、山茶外担子菌(E.cameliaeShirai)、E.cylindrosporiumEzuka、E.shiraianumP.Heen.、E.hachijoenseOtani,KakishimaetIijima、E.bisporumSawadaetEzuka、E.pievidisovalifoliaeSawada和E.symplocijaponicaeKusanoetTokubuchi;细丽外担子菌(E.gracile(Shirai)Sydow)的7个菌株分化为4个菌群,表现了种内的地理、寄主分化;日本外担子菌(E.japonicumShirai)? 展开更多
关键词 外担子菌 培养性质 rflp 模糊解析 分类学
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SSDNA cutter v0.0 a new <i>in silico</i>RFLP tool in C
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作者 Somnath Chakravorty Saumyadip Samui Ratan Gachhui 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 2012年第4期321-323,共3页
Summary: SSDNA Cutter v0.0 is a new in silico RFLP tool written in C. It has a significant utility in studying population diversity as it has the capability of restriction digestion of a group of linear DNA se-quences... Summary: SSDNA Cutter v0.0 is a new in silico RFLP tool written in C. It has a significant utility in studying population diversity as it has the capability of restriction digestion of a group of linear DNA se-quences and then segregate the restriction patterns into separate groups as per similarity in the restriction maps. The software has an inbuilt database for 20 restriction enzymes and it is flexible so that the user can add up to 100 more restriction enzymes to the list. The interface is easy, simple and interactive which enables the user to obtain restriction pattern groups which are quite similar to Operational Taxonomic Units obtained from phylogenetic trees. Availability: The software and the source code is currently available from the authors on request without any cost. We intend to release it in a public domain soon. SSDNA Cutter v0.0 is licensed under the GNU General Public License. 展开更多
关键词 In Silico rflp RESTRICTION pattern Segregation
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木质包装材料中线虫一新种(线虫门,滑刃科)记述(英文) 被引量:19
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作者 王金成 余本渊 林茂松 《动物分类学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期314-319,共6页
记述了伞滑刃属线虫1新种,即弯尾伞滑刃线虫Bursaphelenchuscurvicaudatussp nov 。线虫样本自中国连云港口岸截获木质包装材料中分离获得。新种体长相对较长(雌虫76 7~96 0 μm ;雄虫6 6 3~831μm) ,口针较短(雌虫13 9~17 4 μm ;雄... 记述了伞滑刃属线虫1新种,即弯尾伞滑刃线虫Bursaphelenchuscurvicaudatussp nov 。线虫样本自中国连云港口岸截获木质包装材料中分离获得。新种体长相对较长(雌虫76 7~96 0 μm ;雄虫6 6 3~831μm) ,口针较短(雌虫13 9~17 4 μm ;雄虫13 9~16 5 μm) ,口针基部略微加厚,交合刺小(16 5~2 1 6 μm) ,末端盘状结构不明显,雌虫尾明显向腹面弯曲。另外,新种雄虫有6个尾乳突,与以前报道有7个尾乳突不同。交合刺形状、雌虫尾的形状及体长等特征能将新种与B hofmanni、B abietinus、B .fun givorus、B .hellenicus、B .hylobianum、B .rainulfi、B .eggersi以及B .corneolus区分开来。新种特有的限制性酶切图谱(PCR ITS RFLP图谱)是该分离物为1新种的分子证据。 展开更多
关键词 木质包装材料 新种 线虫门 限制性酶切图谱 伞滑刃属线虫 rflp图谱 伞滑刃线虫 雌虫 nov sp. 连云港 雄虫 分离物 口针 乳突 形状 截获 长相
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水稻野败不育系与保持系线粒体DNA限制酶酶切图谱分析 被引量:19
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作者 杨金水 VirginiaWalbot 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期181-186,共6页
采用限制酶酶切片段长度多态性(RFLP)分析方法比较了水稻野败不育系及其籼型保持系线粒体DNA酶切图谱。野败不育系与籼型保持系线粒体DNA在组成上存在十分明显的差异。根据具有相同迁移位置与大小的片段比例判断,这2种不同细胞质线粒... 采用限制酶酶切片段长度多态性(RFLP)分析方法比较了水稻野败不育系及其籼型保持系线粒体DNA酶切图谱。野败不育系与籼型保持系线粒体DNA在组成上存在十分明显的差异。根据具有相同迁移位置与大小的片段比例判断,这2种不同细胞质线粒体DNA顺序同源性约为30%。分子杂交结果显示,编码功能蛋白的基因及其邻近顺序存在相当程度的保守性。本文并对线粒体DNA的组成变异与细胞质雄性不育的关系进行了分析与讨论。 展开更多
关键词 水稻 细胞质雄性不育 线粒体DNA 限制酶酶切图谱
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嗜人按蚊和中华按蚊相关细菌差异的初步探讨 被引量:3
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作者 李美 汤林华 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期283-286,共4页
目的通过对河南省桐柏地区嗜人按蚊和中华按蚊的DNA提取物中细菌DNA的拷贝数和种类是否存在差异进行初步探讨,为进一步深入开展蚊媒中肠细菌与蚊媒传播疟疾能力之间的关系提供理论基础。方法以保存于75%乙醇中的成蚊为研究对象,首先应... 目的通过对河南省桐柏地区嗜人按蚊和中华按蚊的DNA提取物中细菌DNA的拷贝数和种类是否存在差异进行初步探讨,为进一步深入开展蚊媒中肠细菌与蚊媒传播疟疾能力之间的关系提供理论基础。方法以保存于75%乙醇中的成蚊为研究对象,首先应用聚合酶链反应(PCR)和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法确定蚊种,在此基础上,用PCR比较蚊虫细菌拷贝数的异同,同时克隆并酶切4只按蚊中细菌的16S rDNA序列,对酶切结果进行统计分析。结果共明确23只按蚊的种类。不同蚊种DNA中所含细菌拷贝数存在差异,但与按蚊的种类没有关系。4只按蚊DNA中共发现19种细菌16S rDNA的酶切类型。不同中华按蚊个体间存在共同的细菌DNA酶切类型;嗜人按蚊仅呈现2种细菌DNA酶切类型,均与中华按蚊不同。结论嗜人按蚊和中华按蚊中含有的细菌种类存在差异,该项研究为我们进一步研究按蚊中肠细菌是否会影响按蚊对疟原虫的感染性奠定了基础。 展开更多
关键词 媒介蚊虫 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 细菌 16S RDNA 酶切类型
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二花脸与大约克猪21-羟化酶基因位点限制性片段长度多态性比较
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作者 郭晓令 姜志华 刘红林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期1-5,共5页
本研究采用RFLPs分析方法对12头无亲缘关系的二花脸和12头无亲缘关系的大约克猪的21-羟化酶基因位点限制性片段长度多态性(RFLPs)类型进行比较研究,结果5种限制性内切酶(BanⅠ、HindⅢ、KpnⅠ、Pst... 本研究采用RFLPs分析方法对12头无亲缘关系的二花脸和12头无亲缘关系的大约克猪的21-羟化酶基因位点限制性片段长度多态性(RFLPs)类型进行比较研究,结果5种限制性内切酶(BanⅠ、HindⅢ、KpnⅠ、PstⅠ和TaqⅠ)在2品种中形成了A、B、C、D、E、F、G、H、I9种RFLPs类型。其中大约克出现A~H8种类型,而二花脸只有Ⅰ类型,表明大约克和二花脸在此基因位点存在显著差异。 展开更多
关键词 21-羟化酶 rflps类型 rflp
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不同土地利用方式下滨海盐土细菌多样性变化 被引量:1
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作者 张丽 闫倩 +1 位作者 王保莉 曲东 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期163-167,198,共6页
采用细菌16S rDNA的PCR-RFLP技术,以天津滨海盐土为材料,研究农田(S1和S2)、菜地(S3和S4)和果园(S5)3种土地利用方式下5个土样的细菌多样性。结果显示,基于限制性内切酶HhaⅠ和RsaⅠ的PCR-RFLP分析分别得到93、165、115、158和163个酶... 采用细菌16S rDNA的PCR-RFLP技术,以天津滨海盐土为材料,研究农田(S1和S2)、菜地(S3和S4)和果园(S5)3种土地利用方式下5个土样的细菌多样性。结果显示,基于限制性内切酶HhaⅠ和RsaⅠ的PCR-RFLP分析分别得到93、165、115、158和163个酶切类型,除S1和S3存在一个共同的优势类型,比例分别为33.70%和19.50%外,其余样品没有明显的优势类型;采用α多样性测度对试验结果进行统计分析表明,土壤细菌的多样性指数(H′、Ds)和物种丰富度指数(dMa)均为S2>S5>S4>S3>S1,可见不同土地利用方式下,细菌多样性发生变化;基于16S rDNA核酸序列构建的系统发育树表明,测序的26个序列分属于8个类型,其中酸杆菌所占比例最大(34.62%),其次为变形菌纲(23.08%)、厚壁菌门(15.38%)和放线细菌(11.54%),另外有少量硝化螺旋菌纲、绿弯菌纲、芽单胞菌纲和浮霉菌纲的克隆。可见,不同土地利用方式下,滨海盐土土壤的细菌多样性丰富且彼此间存在显著差异。 展开更多
关键词 土地利用方式 盐土 多样性 PCR-rflp
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沙城产区酿酒酵母多样性研究 被引量:8
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作者 赵静静 李艳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期224-228,共5页
对沙城产区龙眼葡萄相关环境中分离筛选的酿酒酵母进行多样性研究。在连续3年(2008、2009、2010年)的实验中,共从葡萄园土壤、葡萄酒厂设备表面、接触过葡萄酒厂设备的葡萄汁和自然发酵过程中采集菌源样品227份,共分离得到1358株酵母菌... 对沙城产区龙眼葡萄相关环境中分离筛选的酿酒酵母进行多样性研究。在连续3年(2008、2009、2010年)的实验中,共从葡萄园土壤、葡萄酒厂设备表面、接触过葡萄酒厂设备的葡萄汁和自然发酵过程中采集菌源样品227份,共分离得到1358株酵母菌。用5.8S-ITS区域RFLP方法进行分子水平的分类鉴定及赖氨酸培养基复筛,得到了270株酿酒酵母。再利用Interdelta PCR指纹图谱法将酿酒酵母区分为16类,其中土壤5类,自然发酵过程中第2、3、4期分别得到4类、10类和11类;酒厂设备表面3类;接触酒厂设备的葡萄汁3类。酿酒酵母的种类因样品采集时间、采集地点等不同有明显区别。自然发酵过程中得到的酿酒酵母被认为是本土酵母的可能性最大。 展开更多
关键词 酿酒酵母 5.8S-ITS区域rflp分析 Interdelta PCR指纹图谱法 生物多样性 本土酵母
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基于16S rDNA序列的Wolbachia的检测及分型 被引量:1
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作者 曲哲 丛斌 +1 位作者 褚栋 董辉 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期582-587,共6页
Wolbachia是广泛分布于节肢动物体内的一类共生细菌。采用16S rDNA特异片段的PCR-RFLP方法对烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)不同生物型及米蛾Corcyra cephalonica(Stainton)共生菌Wolbachia进行了检测与分型分析。基于wsp基因对烟粉... Wolbachia是广泛分布于节肢动物体内的一类共生细菌。采用16S rDNA特异片段的PCR-RFLP方法对烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)不同生物型及米蛾Corcyra cephalonica(Stainton)共生菌Wolbachia进行了检测与分型分析。基于wsp基因对烟粉虱共生菌B组Wolbachia以及米蛾共生菌Wolbachia进行了系统树分析,并对相应的Wolbachia16S rDNA特异片段进行了克隆、测序以及序列比对。结果表明:16S rDNA的特异片段经NheⅠ酶切后RFLP图谱可有效检测与鉴别Wolbachia。烟粉虱共生菌Wolbachia的16S rDNA特异片段经VspⅠ酶切后可得到预期RFLP图谱,而米蛾共生菌B组Wolbachia(基于wsp序列分析为B组)则产生不同的RFLP图谱。序列分析表明,Nauru型烟粉虱体内B组Wolbachia的16S rDNA片段序列与已知B组Wolbachia对应序列(DQ278884)同源性为100%;米蛾体内B组Wolbachia16S rDNA特异片段有碱基变异,并存在于VspⅠ识别位点内,这是导致VspⅠ酶切后RFLP图谱不同的原因。结果提示,B组Wolbachia16S rDNA特异片段经VspⅠ酶切的RFLP图谱存在多态性。本研究结果可为今后Wolbachia的检测与分型提供借鉴。 展开更多
关键词 WOLBACHIA 16S RDNA PCR-rflp rflp图谱 烟粉虱 米蛾
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猪ATF4基因多态性与生产性状的关联及基因表达分析 被引量:7
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作者 陈超 吴望军 熊远著 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1347-1352,共6页
为进一步了解和认识ATF4基因的功能,揭示ATF4对猪脂肪代谢的影响,寻找与肉质性状相关联的分子标记,文章采用PCR方法扩增了ATF4基因部分序列,通过序列比对发现在翻译起始密码子ATG下游159 bp处存在A159G转换,通过PCR-AluⅠ-RFLP对大白猪... 为进一步了解和认识ATF4基因的功能,揭示ATF4对猪脂肪代谢的影响,寻找与肉质性状相关联的分子标记,文章采用PCR方法扩增了ATF4基因部分序列,通过序列比对发现在翻译起始密码子ATG下游159 bp处存在A159G转换,通过PCR-AluⅠ-RFLP对大白猪、长白猪、梅山猪和通城猪进行酶切分型,发现在大白猪和长白猪中均为AA基因型,在梅山猪和通城猪中均为GG基因型。进一步对大白猪×梅山F2群体资源家系进行了酶切分型,并分析该位点的多态性与生产性状的关系。结果表明,ATF4的多态性与臀部平均膘厚存在极显著相关(P<0.01),与胸腰椎间膘厚、平均膘厚、眼肌高、眼肌面积存在显著相关(P<0.05)。采用Real-time PCR分析了ATF4基因在大白猪与梅山猪背最长肌不同发育阶段的表达模式。结果表明,ATF4基因在大白猪和梅山猪胚胎期65 d和出生后3 d中的表达水平相对都比较低,且在两品种间无明显差异;而在出生后60 d和120 d,ATF4基因在大白猪中与梅山猪均出现了上调表达,并且在梅山猪中的相对表达水平要显著高于大白猪。研究结果为进一步深入研究猪ATF4基因在脂肪代谢中的分子机理奠定了基础。 展开更多
关键词 ATF4 PCR-rflp 关联分析 表达模式分析
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抗白粉病小麦染色体组型的分子标记与生化标记分析 被引量:1
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作者 张胜雯 王二明 +4 位作者 魏荣 胡含 梁玉梅 文玉香 周文娟 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1997年第6期524-530,共7页
应用与小麦第六同源群有关的分子和生化标记,包括DNA探针pSc5·3H3和pSR167以及同工酶Est-5和a-Amy-1,对来自六倍体小黑麦Beagle与普通小麦科冬58杂交后代F1花粉植株的抗白粉病株系M24... 应用与小麦第六同源群有关的分子和生化标记,包括DNA探针pSc5·3H3和pSR167以及同工酶Est-5和a-Amy-1,对来自六倍体小黑麦Beagle与普通小麦科冬58杂交后代F1花粉植株的抗白粉病株系M24.M09及M17进行了分析。结果表明,M24、M09及M17不同程度地含有黑麦染色体成分,而且电泳谱带差别较大,据此推断,M09为6RL的易位系。因此,生化和分子标记不仅可以用于确定外源片段的存在。 展开更多
关键词 小麦 染色体组 白粉病抗性 分子标记 生化标记
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植原体16S rDNA RFLP指纹图谱分析软件研究 被引量:2
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作者 牟海青 赵文军 +1 位作者 邓中亮 朱水芳 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期522-529,共8页
植原体是一类寄生于植物韧皮部的原核生物。目前国际上主要根据植原体16S rDNA RFLP图谱的比对进行分类及鉴定。传统的PCR-RFLP试验步骤繁琐、重复性差,误差大,尤其在检测鉴定大量植原体病原时,耗时、耗力。通过对目前已公布的全部植原... 植原体是一类寄生于植物韧皮部的原核生物。目前国际上主要根据植原体16S rDNA RFLP图谱的比对进行分类及鉴定。传统的PCR-RFLP试验步骤繁琐、重复性差,误差大,尤其在检测鉴定大量植原体病原时,耗时、耗力。通过对目前已公布的全部植原体16S rDNA序列进行比对整理,并生成16S rDNA RFLP电子指纹图谱库。在此基础上开发了指纹图谱分析软件DNA-FP Cluster1.0。该软件可基于序列或图谱形式进行比对,并自动输出比对结果。结果呈现形式为3种:即一种16S rDNA RFLP图谱与多种图谱间相似性分析;多种16S rDNA RFLP图谱间相似性分析;16S rDNA RFLP图谱间相似度树状图。该软件在不需要酶切试验操作的情况下实现了对植原体的快速分类与鉴定,并解决了因植原体材料不全而无法进行植原体酶切后比对的难题,为今后植原体候选种内的细化分类提供了方法与工具。 展开更多
关键词 植原体 分类 rflp图谱 聚类分析软件
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厦门口岸首次从木包装中截获瓦里西伞滑刃线虫
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作者 王宏毅 吴佳霖 +4 位作者 佘伟嘉 丛尧华 陈宁 林国诚 黄蓬英 《植物检疫》 北大核心 2012年第2期50-55,共6页
厦门口岸于2011年6月从来自希腊的荒料石垫木中截获一种伞滑刃属线虫。经形态学比较、测量,该线虫虫体细长,侧区有4条侧线。雌虫有小阴门盖,尾圆锥形,略腹弯,尾端尖。雄虫交合刺成对,不愈合,显著腹弯,长约13~15μm;基顶前伸,端部圆滑,... 厦门口岸于2011年6月从来自希腊的荒料石垫木中截获一种伞滑刃属线虫。经形态学比较、测量,该线虫虫体细长,侧区有4条侧线。雌虫有小阴门盖,尾圆锥形,略腹弯,尾端尖。雄虫交合刺成对,不愈合,显著腹弯,长约13~15μm;基顶前伸,端部圆滑,略背弯;喙突显著,末端钝尖,远端有小而明显的盘状突;雄虫尾部乳突7个。结合ITS-RFLP指纹图谱比对,进一步将该线虫鉴定为瓦里西伞滑刃线虫(Bursaphelenchus vallesianus Braasch,Schonfeld,Polomski,et al,2004)。 展开更多
关键词 包装木 瓦里西伞滑刃线虫 形态学鉴定 ITS-rflp鉴定
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