PPAR-γ配体RGZ对胆管癌移植瘤抗肿瘤活性的实验研究

目的探讨PPAR-γ配体罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)对胆管癌移植瘤的抗肿瘤活性。方法采用不同浓度和剂量的RGZ对荷瘤裸小鼠进行灌胃干预3W后处死,测量各组瘤体体积和重量,计算相对肿瘤体积、相对肿瘤增值率T/C%;RT-PCR检测PPAR-"的表达,Tunel检测凋亡,SP法检测CD34的表达并计算MVD,进行统计学分析。结果胆管癌移植瘤随RGZ剂量增高,PPAR-γ的表达升高,凋亡率增高,瘤体体积和重量减少,相对肿瘤增值率T/C%减少,CD34表达降低,MVD密度降低。对照组与低剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05);而与高剂量组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 10倍以上剂量RGZ对胆管癌移植瘤有明显的增值抑制作用和较好的抗肿瘤活性。

RGZ-120型人体秤校准规范编制初探

近年来,由于JJG 13-2016 《模拟指示秤》检定规程的修订,法定计量检定机构对医疗卫生单位常用的人体秤的周期检定已失去了技术依据,这在行业内造成了一定程度的混乱。为解决这个问题,现实迫切需要编制地方性检定规程或全国性的校准规范。该文就如何具体编制RGZ-120型人体秤校准规范做出了有益的探索。

PPAR-γ配体抑制胆管癌的体内有效作用途径实验研究

目的探讨PPAR-γ(peroxisome proliferactor-activated receptor gamma,PPAR-γ)配体罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)抑制胆管癌的体内有效作用途径。方法采用不同RGZ给药方法和途径对胆管癌细胞系QBC939荷瘤裸鼠进行干预,7d后处死,测量瘤体体积和重量,计算各组肿瘤生长抑制率。结果RGZ对胆管癌细胞有明显的增殖抑制作用,连续多次灌胃组[12mg/(kg.d)](临床途径组)抑制作用明显,而单次灌胃组、单次与多次腹腔灌注组抑制作用均不明显。统计学处理,连续多次灌胃组与其他给药途径比较,P<0.05,有统计学意义;而其他方法与对照组比较,P>0.05,无统计学意义。结论连续多次给药法是PPAR-γ配体RGZ对胆管癌有效抑制作用方法之一。

高糖对肾小管上皮细胞脂质代谢影响及罗格列酮的干预研究

目的探讨高糖环境中肾小管上皮细胞脂质代谢变化,以及罗格列酮对其干预作用。方法体外培养HKC细胞,随机分为正常糖组、高糖组、罗格列酮干预组,采用油红染色检测细胞内脂质,免疫细胞化学和WesternBlot检测固醇调节元件结合蛋白1(sterolregulatory element binding protein-1,SREBP-1)表达。结果与正常糖组比较,高糖培养的肾小管上皮细胞内出现明显脂滴;免疫细胞化学、WesternBlot检测发现固醇调节元件结合蛋白1表达于胞浆,12、24、48、72h固醇调节元件结合蛋白1前体和成熟体表达高糖组均高于正常对照组,差异有统计学意义,其中以48h表达量最大(前体2.334±0.045,成熟体1.082±0.040),罗格列酮组相对于高糖组,前体和成熟体表达均下降,脂滴形成有所减少。结论高糖可诱导肾小管上皮细胞固醇调节元件结合蛋白1前体和成熟体表达升高,进一步导致脂质合成增多;罗格列酮减少脂质合成可能是部分通过抑制固醇调节元件结合蛋白1表达而实现。

PPAR-γ配体罗格列酮对胆管癌细胞增殖抑制作用的实验研究

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)配体罗格列酮(RGZ)对胆管癌细胞增殖的影响。方法采用不同浓度RGZ对胆管癌细胞系QBC939进行干预,计算不同浓度下QBC939细胞的增殖抑制率,用流式细胞技术检测各浓度下细胞周期变化和凋亡发生率。结果RGZ对胆管癌细胞有明显的增殖抑制作用,以1200mg/L浓度组最为明显,最高增殖抑制率达83.66%;在1200mg/L、600mg/L、300mg/L、150mg/L、75mg/L和37.45mg/L组经48h和72h培养处理后,细胞增值抑制率与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.001)。细胞周期亦受到明显的调控,高浓度组有62.77%细胞停滞于G0/G1期。结论PPAR-γ配体RGZ在体外对胆管癌细胞系QBC939有明显的增殖抑制作用。

罗格列酮对裸小鼠移植瘤PPAR-γ表达的影响

目的探讨罗格列酮(RGZ)对裸小鼠移植瘤过氧化物酶体增殖物激素受体-γ(PPAR-γ)表达的影响。方法采用不同浓度和剂量的RGZ对荷瘤裸小鼠进行灌胃干预3周后,RT-PCR实时荧光定量检测PPAR-γ的△Ct值和表达拷贝数,测量各组瘤体体积(TV)和重量(TW),计算相对肿瘤体积(RTV)和相对肿瘤增值率(T/C%)。结果胆管癌移植瘤随RGZ剂量增高PPAR-γ的表达升高,而相对肿瘤增值率T/C%减少;高剂量组与对照组比较差异显著(P<0.001)。结论在裸小鼠移植瘤内RGZ能呈剂量依赖性地上调PPAR-γ表达。

罗格列酮逆转Burkitt淋巴瘤raji细胞对紫杉醇耐药的作用及机制

目的研究罗格列酮(RGZ)逆转Burkitt淋巴瘤raji细胞对紫杉醇耐药的作用及机制。方法建立人Burkitt淋巴瘤raji紫杉醇耐药细胞株(raji/TAX 25),细胞计数法检测raji/TAX 25对TAX的耐药指数和RGZ处理后各组raji细胞的增殖活性。流式细胞仪检测凋亡率,蛋白质印迹法(western blot)检测raji细胞耐药基因P-gp和多药耐药相关蛋白(MRP)的变化。结果成功建立了raji/TAX 25耐药株、耐药指数为45.90,RGZ明显逆转Burkitt淋巴瘤raji细胞对紫杉醇的耐药性(P<0.01)。western blot检测发现raji细胞P-gp和MRP表达显著下降(P<0.05)。结论 RGZ具有逆转Burkitt淋巴瘤raji细胞对紫杉醇耐药的作用,其作用机制与下调P-gp和MRP表达有关。

罗格列酮影响肝纤维化大鼠转化生长因子β_1(TGF-β_1)表达的机制

目的探讨罗格列酮对大鼠肝纤维化的保护作用和对转化生长因子β1(TGF_β1)mRNA表达影响的机制。方法检测肝组织病理学改变;生化法检测肝功能指标;免疫组织化学技术检测TGF_β1、PPARγ在肝内的表达及定位;采用RT_PCR检测肝组织TGF_β1、PPARγmRNA的表达。结果与模型组大鼠比较,干预组肝组织结构变化明显改善,纤维化增生程度减低,肝功能改善,大鼠肝内TGF_β1表达有所降低,并且大剂量组干预效果最为显著。结论罗格列酮能有效减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤及纤维化程度,其机制可能与PPARγ直接或间接抑制肝内TGF_β1mRNA的表达有关。

PPARγ激动剂罗格列酮对大鼠肾脏再灌注损伤的保护作用

目的探讨罗格列酮(Rosiglitazone,RGZ)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及作用机制。方法将30只大鼠按照双盲法随机均分成假手术组(Sham)、缺血性肾损伤组(IRI)和罗格列酮(RGZ)组,各10只。利用血管夹夹闭左侧肾蒂,去除右肾诱导大鼠肾缺血再灌注损伤模型,缺血45 min,再灌注4 h。ELISA检测血清血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-8(IL-8)和白介素-6(IL-6)表达水平;RT-PCR检测TNF-α、IL-8和IL-6 mRNA水平;硫代巴比妥酸(TBA)法检测丙二醛(MDA)的含量;Western blot检测PPAR-γ和pPPAR-γ表达水平;黄嘌呤氧化酶法检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;过碘酸雪夫氏(PAS)染色检测肾组织病理形态。结果 IRI组血清Cr和BUN分别为(160.15±25.17)μmol/L和(90.22±16.17)mmol/L,较RGZ组的(47.16±5.13)μmol/L和(23.11±3.28)mmol/L明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏病理损伤评分为(3±0.5)分,较RGZ组的(1±0.5)分明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);IRI组血清中TNF-α、IL-8和IL-6表达水平分别为(1 400±350)pg/mL、(1 200±300)pg/mL、(1 150±250)pg/mL,较RGZ组的(650±150)pg/mL、(450±120)pg/mL和(550±170)pg/mL明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏中TNF-α、IL-8和IL-6 m RNA表达水平分别为(14.00±55)、(11.00±4.3)、(9.50±2.8),较RGZ组的(5.50±1.7)、(6.40±2.1)和(3.80±1.3)明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏中MDA含量为(18.12±4.15)nmol/mg,较RGZ组[(7.12±1.15)nmol/mg明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏中CAT、GPX和SOD活性分别为(8.77±1.52)U/mg、(7.22±1.03)U/mg和(6.54±1.22)U/mg,较RGZ组的(25.17±3.22)U/mg、(23.42±3.07)U/mg和(21.22±2.79)U/mg明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏中p-PPAR-γ含量为(0.32±0.07),较RGZ组的(0.51±0.11)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);IRI组与RGZ组P PAR-γ表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PPAR-γ激动剂罗格列酮对大鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用,能够减少肾脏病理改变,其作用机制与抑制氧化应激和炎症反应相关。

罗格列酮与秋水仙碱对肝纤维化大鼠防护作用的比较

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对实验性大鼠肝纤维化的防护作用。方法:采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导的大鼠肝纤维化模型,70只SPF级SD大鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、罗格列酮组、罗格列酮预防组(小、中、大剂量组各10只)秋水仙碱组。应用HE染色、Masson染色、网状纤维染色观察大鼠肝纤维化的程度;生化法检测肝功能ALT、AST、Alb等;免疫组化染色法检测肝组织过氧化物酶体增生激活受体(PPARγ)、转化生长因子β1(TGFβ1)的表达。结果:罗格列酮预防组大鼠与模型组相比,肝组织结构明显改善,纤维化增生程度减低,肝功能改善,肝组织内丙二醛(MDA)、TGFβ1的表达均降低;RGZ综合效果优于秋水仙碱。结论:RGZ可通过激活PPARγ途径,减轻氧化应激后继的肝纤维化病变,降低TGFβ1的表达,对肝纤维化有良好的防护作用。

罗格列酮对肺成纤维细胞增殖的影响

目的探讨罗格列酮(RGZ)对肺成纤维HELF细胞增殖的影响,并探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路在其中的作用。方法HELF细胞培养于DMEM培养液中,实验分为:对照组、TGF-β1组、低剂量RGZ(LD-RGZ)组和高剂量RGZ(HD-RGZ)组。CCK-8检测细胞增殖。流式细胞仪检测细胞周期。Western blot检测蛋白表达。结果24 h、48 h和72 h时HD-RGZ组细胞增殖OD450值显著低于LD-RGZ组(P<0.05),LD-RGZ组又显著低于TGF-β1组(P<0.05)。对照组、TGF-β1组、LD-RGZ组和HD-RGZ组G1期细胞分别占细胞周期的(91.23±6.32)%、(70.35±4.14)%、(76.12±4.38)%和(82.35±5.16)%,各组间存在显著差异(P<0.05)。其中,HD-RGZ组G1期细胞比例显著高于LD-RGZ组(P<0.05),LD-RGZ组又显著高于TGF-β1组(P<0.05)。HD-RGZ组Col I、Col III和P-p38MAPK蛋白显著低于LD-RGZ组(P<0.01),LD-RGZ组又显著低于TGF-β1组(P<0.01)。结论罗格列酮抑制p38MAPK通路,进一步抑制肺成纤维细胞增殖以及胶原的合成。

罗格列酮联合依那普利对腹膜纤维化大鼠的腹膜功能的影响

目的：研究观察罗格列酮联合依那普利对腹膜透析所致腹膜纤维化的影响，探讨其对腹膜纤维化的作用及可能的机制。方法80只SD大鼠（6～8周龄，体重180～200 g）随机分为4组，每组20只。分为对照组、模型组、依那普利治疗组和罗格列酮联合依那普利联合用药组。除对照组外其余组均采用高糖腹膜透析液＋红霉素制作慢性腹膜透析无菌性腹膜纤维化的大鼠模型。上述各组大鼠均于腹腔注射7周后处死；进行1小时腹膜平衡试验，用免疫组化方法测定各组的FN以及TGF-β1的表达水平。结果罗格列酮联合依那普利治疗组的腹膜超滤功能增加更明显。免疫组化分析，联合治疗组中的FN以及TGF-β1的表达率较模型组减低更显著。结论罗格列酮联合依那普利治疗组可降低转化生长因子的表达，减轻腹膜纤维化起到保护腹膜的作用。

罗格列酮对糖基化终产物诱导鼠心肌成纤维细胞氧化应激和胶原代谢影响的研究

目的观察AGE诱导心肌成纤维细胞对氧化应激(OS)和胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ合成分泌的影响及罗格列酮(RGZ)的干预作用。方法不同浓度AGE与心肌成纤维细胞孵育,予RGZ干预48h,收集培养上清液,分别应用超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒检测SOD活性和MDA含量,采用ELISA检测胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ含量。结果 RGZ与200mg/L AGE共同孵育心肌成纤维细胞48h,随RGZ浓度增高(0.1、1、10μmol/L),心肌成纤维细胞培养上清液中SOD活性逐渐增高[(21.564±1.614),(22.323±1.260),(23.661±1.562)vs(19.320±0.896)nU/ml,P<0.05或P<0.01];与200mg/L AGE组比较,MDA含量逐渐降低[(1.325±0.048),(1.279±0.032),(1.229±0.045)vs(1.629±0.043)nmol/ml,P<0.01];与200mg/L AGE组比较,胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白Ⅲ含量均呈递减趋势[(79.17±3.25),(60.42±3.58),(42.71±5.11)vs(85.54±2.28)ng/ml,P<0.01;(37.52±3.43),(27.09±4.75),(20.81±3.26)vs(40.75±2.70)ng/ml,P<0.01]。结论 AGE诱导心肌成纤维细胞OS,增加胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ合成分泌;RGZ能抑制AGE诱导的心肌成纤维细胞OS,抑制AGE诱导的胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ合成分泌,对糖尿病心肌纤维化的防治有重要意义。