大豆抗胞囊线虫病种质rhg_1和Rhg_4位点的单核苷酸多态性(SNPs)

研究以 5 7份中美大豆抗胞囊线虫病种质资源为实验材料 ,利用基于检测微珠的单碱基延伸方法 ,对与大豆胞囊线虫病 (SCN)抗性基因rhg1和Rhg4紧密连锁的SNPs进行分析 ,目的是阐明我国大豆抗性种质在这两个位点的SNPs等位变异分布频率 ,为中国大豆种质抗SCN资源的利用奠定基础。分析结果表明 ,SNPs的抗性等位基因与中国大豆种质综合抗性的关系比不同生理小种的抗性关系更为密切。在rhg1和Rhg4位点 ,美国的 9份抗性种质中 ,有 7份抗性种质的SNPs均为纯合抗病基因型 ,而中国 4 8份抗性种质中有 32份 ,分别占鉴定总数的 77 8%和 6 6 7% ,推测大豆抗SCN种质中 ,以rhg1和Rhg4这两个基因协同作用表现出的抗性可能占多数 ,但还存在其他的抗性机制。

妇科恶性肿瘤放化疗期间应用聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)的中国专家共识(2023年版)

中性粒细胞减少症是妇科恶性肿瘤放化疗最常见的血液学毒性,可导致后续治疗延迟和剂量减少,并易引发中性粒细胞减少性发热及严重感染,影响患者预后。重视中性粒细胞减少症的危害,对其进行风险评估和规范性防治具有重要意义。聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)作为重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的长效制剂,可预防和治疗中性粒细胞减少症,临床使用便捷。为促进临床合理用药,本共识制定小组以循证证据为基础,评估其在妇科恶性肿瘤放化疗期间应用的有效性及安全性,明确预防与治疗的临床路径及给药方式,形成妇科恶性肿瘤放化疗期间应用PEG-rhG-CSF的中国专家共识。

利用KASP标记筛选含rhg1和Rhg4位点的大豆抗病资源

大豆胞囊线虫(SCN,soybean cyst nematode)病是一种世界性大豆病害,培育抗SCN大豆品种是防治SCN的重要措施。本研究利用来自抗SCN主效位点rhg1和Rhg4的2个KASP标记,对487份大豆材料进行筛选,选择含有抗性位点且农艺性状优异的材料;通过室内接种大豆胞囊线虫2号、4号、5号生理小种和新小种X12,进行抗性鉴定验证其抗性水平,为培育抗病品种提供抗源材料。标记筛选结果表明,20份材料含有rhg1和Rhg4这2个主效抗性位点,其中,2份材料仅含有Rhg4位点。表型抗性鉴定结果表明,在接种的22份材料中,有1份材料对3个小种表现中抗,5份材料对2个小种表现抗或中抗。其中,1份材料对2号小种表现抗病、4份表现中抗;2份材料对4号小种表现中抗;4份材料对5号小种表现抗病、14份表现中抗;22份材料对新小种X12均表现出感病或中感。因此,本研究从487份材料中筛选出20份含有2个SCN抗性位点并具优异农艺性状的材料,可通过rhg1和Rhg4位点的累加培育抗病品种。

rhG-CSF治疗30例肺癌化疗所致的白细胞减少症疗效观察

目的 :观察基因重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF ,特尔津 )对肺癌化疗所致的白细胞减少症的疗效。方法 :用rhG CSF治疗 3 0例肺癌化疗所致的白细胞减少患者 ,随机与用其他口服升白细胞药物治疗 3 0例肺癌化疗所致的白细胞减少患者 ,进行对比观察。结果 :rhG CSF和其他口服升白细胞药均能使化疗后白细胞减少症患者的白细胞数恢复至正常范围 ( 4× 10 9/L) ,但rhG -CSF组白细胞数回升至正常的时间比其他口服升白细胞药物组明显缩短 (P <0 0 0 2 ) ,且其继发性感染发生率明显降低 (P =0 0 2 99)。结论 :rhG CSF可有效治疗化疗所致的白细胞减少症 ,并能减少继发性感染机会 。

大豆抗胞囊线虫基因Rhg 1和Rhg 4产物基本性质分析与结构预测

抗胞囊线虫病基因是大豆抗病育种的重要基因资源。目前已经在抗胞囊线虫品种中发现了两个对于抗性具有重要贡献的Rhg1和Rhg4基因,但是关于蛋白质结构和功能的信息还很少。本研究注释了RHG1和RHG4完整的结构域特征,二级结构分析显示两蛋白质均采用α/β折叠,蛋白激酶结构域的空间结构采用与所有真核生物的丝氨酸/苏氨酸及酪氨酸特异性蛋白激酶的核心相同的折叠方式.具有类似结构特点。

rhG-CSF在血液肿瘤粒细胞减少症的临床应用分析

目的回顾性研究重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF)在血液肿瘤因化疗引起的中性粒细胞减少症的疗程及影响因素。方法收集贵港市人民医院65例化疗后出现中性粒细胞减少症且应用rhG-CSF的血液肿瘤患者资料,将患者分为长疗程组(用药疗程>5 d)和短疗程组(用药疗程≤5 d),比较两组的性别、年龄、体重指数、基线中性粒细胞计数、白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量确定影响疗程长短的相关因素。结果rhG-CSF平均疗程为(12.80±7.79)d,长疗程组基线白细胞计数明显低于短疗程组(P<0.05),通过多因素分析年龄、基线白细胞计数确定为血液肿瘤合并粒细胞减少症患者应用rhG-CSF疗程的独立影响因素。结论血液肿瘤粒细胞减少症患者应用rhG-CSF平均疗程为(12.80±7.79)d,高龄、低基线白细胞计数的患者应用rhG-CSF的疗程要更长。

rhG-CSF治疗儿童ALL的药效学及药代动力学分析

目的探究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)治疗儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的药效学及药代动力学特征。方法选择126例ALL患儿相关资料进行回顾性分析,所有患者均接受柔红霉素+阿糖胞苷+依托泊苷(DAE)化疗,根据患者治疗期间是否应用rhG-CSF将患儿分为研究组38例和对照组88例,比较两组患者治疗疗效以及安全性,分析rhG-CSF药动力学情况。结果研究组患者疾病控制率、中性粒细胞绝对值(ANC)最低值高于对照组,粒细胞减少时间、粒细胞缺乏时间、粒缺伴发热时间低于对照组;研究组患者胃肠道感染、肺炎、败血症发生率低于对照组;研究组骨髓抑制不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。rhG-CSF血药质量浓度随着rhG-CSF注入时间先上升后下降,ANC水平低时,rhG-CSF清除速度缓慢,ANC上升至正常水平时,rhG-CSF清除速度上升;药代动力学参数药峰浓度、总清除率、消除半衰期、达峰时间、平均滞留时间中位数分别为356.24μg/L、3.13 mL/(h·kg)、15.24 h、48.00 h、79.53 h。结论儿童ALL采用rhG-CSF治疗疗效与安全性优异,药代动力学特点与中性粒细胞介导清除机制相符。

抗SCN位点rhg1与Rhg4在种质资源中的单倍型分析及分子标记开发

rhg1和Rhg4是抗大豆胞囊线虫病种质所具有的主要的抗性基因,利用与rhg1和Rhg4位点紧密连锁的SSR标记和SNP标记对15份抗感病大豆种质进行基因分型。结果表明:rhg1位点连锁SSR标记Satt309对抗病种质的检出率为55.56%,Rhg4位点连锁SSR标记Sat_162对抗病种质的检出率为66.67%;rhg1位点序列引物PCR产物630bp位置存在腺嘌呤与胞嘧啶(A/C)突变,感病等位为A碱基,抗病等位为C碱基,在Rhg4位点标记引物SHMT的PCR产物上2 749 bp位置存在胞嘧啶和鸟嘌呤(C/G)突变,感病等位为C碱基,抗病等位为G碱基。rhg1和Rhg4位点内SNP对抗病种质的检出率分别为77.78%和100%。利用高分辨率溶解曲线法设计rhg1和Rhg4位点SNP标记,在扫描温度为65℃起始,60℃保持,94℃终止时可得到理想的分型结果。

rhG-CSF动员健康供者CD34^+细胞产率的影响因素分析

为探讨rhG-CSF动员健康供者年龄、性别等因素对采集物CD34+细胞产率的影响,分析61例健康供者外周血采集物CD34+细胞数量与自身特点的相关性,并进行多因素回归分析。以供者性别、年龄、身高、体重、体重指数(BMI)和采集时间作为研究参数,外周血采集物单核细胞计数、CD34+细胞占有核细胞百分比、CD34+细胞计数、CD34+细胞每公斤体重(供者)计数的均值作为研究变量。结果表明,供者年龄是影响CD34+细胞产率主要因素,呈中等负相关(-0.60<r<-0.45,p<0.005)。偏相关分析排除身高、体重、BMI的影响,年龄仍和CD34+细胞产率呈中等负相关(-0.50<r<-0.35,p<0.02)。BMI仅与CD34+细胞每公斤体重计数呈微弱负相关(r=-0.297,p<0.05),性别对CD34+细胞产率无明显影响,CD34+细胞计数的差别仅出现在男性和女性低龄组(年龄<35岁)间,男性身高、体重、BMI为CD34+细胞计数增加的有利因素。供者采集时间为给药后第4天采集,70%供者CD34+细胞产率达峰值。结论:年龄应作为供者选择的首要因素,性别、身高、体重和BMI对CD34+细胞产率的影响是次要的。

rhG-CSF动员对供者T细胞增殖和细胞毒的影响

为了解rhG-CSF动员对供者T细胞增殖和细胞毒的影响,在rhG-CSF动员前和动员后第5天抽取供者外周血分离单个核细胞(PBMNC),在PBMNC中加入CD3单克隆抗体和rhIL-2以激活T细胞,培养96小时后检测T细胞增殖率和细胞毒性,并进一步对动员前后激活的T细胞用流式细胞术检测Fas表达率,用RT-PCR检测穿孔素(perforin)和Fas配体(FasL)mRNA表达情况,应用放射免疫分析方法检测细胞的γ干扰素(IFN-γ)分泌情况。结果发现,供者外周血T细胞增殖能力在应用rhG-CSF后下降(68.5±15.1)%(P<0.05);动员后CD3单克隆抗体和rhIL-2激活后T细胞对K562细胞的细胞毒性均比动员前细胞有显著减弱(P<0.05);动员前后T细胞在激活后的Fas表达率无明显差异(P>0.10);动员前后T细胞在激活后均表达perforinmRNA,不表达FasLmRNA;动员前T细胞激活后分泌IFN-γ的能力明显高于动员后(P<0.01)。结论:rhG-CSF动员致使供者T细胞在CD3单克隆抗体与rhIL-2激活后的增殖率和细胞毒性下降。

rhG-CSF改变大鼠局灶性脑缺血预后的初步研究

目的 研究重组人粒细胞集落刺激因子 (recombinanthumangranulocytecolony stimulatingfactor,rhG CSF)对大鼠局灶性脑缺血预后的影响以及与微管相关蛋白 (macrotubule associatedprotein 2 ,MAP 2 )mRNA表达的关系。 方法 用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型 ,观察rhG CSF对死亡率和神经功能评分的影响。用半定量逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,测定rhG CSF用药组和非用药组的MAP 2mRNA表达水平的改变。 结果 比较rhG CSF治疗组与非用药组 :治疗组大鼠 ,局灶性脑缺血再灌注后死亡率显著降低 ,神经功能评分明显改善。治疗组缺血侧脑组织的MAP 2mRNA表达明显提前恢复正常。结论 一定剂量的rhG CSF可以减轻脑缺血再灌注损伤 ,保护神经元 ,改善功能预后。

rhG-CSF动员的儿童自体外周血干细胞冻存后回输的毒副作用研究

本研究探讨儿童患者中冻存自体外周血造血干细胞回输的相关毒性。对35例恶性肿瘤患儿经大剂量化疗或大剂量化疗加放疗的预处理后,进行解冻后的冻存自体外周血造血干细胞分次快速回输,对70例次输注进行了毒性评定。全部病人采用化疗加重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF)进行动员,以CS-3000 plus型或COBE spec-tra-4型血细胞分离机采集外周血造血干细胞。移植物置于10%二甲亚砜(DMSO)中冷冻,并保存在液氮中。35例恶性肿瘤患儿输注总量190-420ml(265±73ml,相当于13.7±4.2ml/kg),含干细胞数(4.43±1.91)×108/kg,DMSO平均输注总量0.94±0.18g/kg。单次输注量90-300ml(132±37ml,相当于6.6±5.2ml/kg),DMSO0.68±0.12g/kg,同时观察并记录输注过程中出现的症状,并监测输注后24小时内脉搏、血压、体温、呼吸频率,每15分钟记录1次。输注前、后检测血清钾、钠、肌酐、总胆红素、天门冬氨酸转移酶和丙氨酸转移酶及尿液检测。结果表明:回输后出现轻微相关毒性,诸如血红蛋白尿(77.1%)、头痛(40.0%)、恶心(34.3%)、呕吐(24.3%)、腹痛(11.4%)、心动过速(10.0%)、心动过缓(5.7%),但无休克等严重毒性反应。血胆红素在输注后有所升高。输注量>200ml的患者,其血红蛋白尿、头痛、恶心、呕吐和腹痛的发生率有升高趋势(P<0.01),仍可迅速消失。首次输注后总胆红素有升高(P<0.01),并观察到输注后胆红素升高程度与输注量明显相关(r=0.8977,P<0.01)。结论:冻存的儿童自体外周血造血干细胞分次回输的相关毒副作用较轻,发生率较低,头痛、恶心、呕吐的发生率与单次回输量有关。

rhG-CSF在动员外周血造血干/祖细胞过程中对T细胞的影响及机制

重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对人体具有广泛的免疫调节作用。在动员外周血造血干／祖细胞 过程中给予的rhG-CSF可以使外周血T淋巴细胞数量和功能发生改变,并影响移植后GVHD的发生。rhG-CSF主 要通过时单核细胞和树突状细胞的作用而间接影响T细胞,其中单核细胞分泌的大量IL-10对调节T细胞的细胞 因子分泌、增殖和细胞毒效应具有重要作用。IL-10作用于T细胞后引起的SOCS3表达显著增高可能在相关的信 号转导机制中具有重要作用。本综述重点阐述rhG-CSF在动员过程中对T细胞的影响及相关机制。

微柱高效液相色谱分析基因工程药物rhG-CSF肽谱的应用研究

用二硫代苏糖醇还原基因工程药物产品中的二硫键，并用碘乙酰胺封闭巯基，再用胰蛋白酶裂解，经微柱高效液相色谱分离分析rhG－CSF产品的肽谱，3个批号批间结果完全一致。该方法具有系统操作误差小，用样品量少，较常现高效液相色谱检测灵敏度高，重视性好的优点。是适用于基因工程药物产品肽谱分析，衡量产品生产纯化工艺稳定性比较优秀的方法之一。

大豆胞囊线虫抗性候选基因Rhg1的克隆及其功能验证

大豆胞囊线虫(Soybean cyst nematode,SCN)是大豆生产上一种危害严重的世界性害虫,给大豆的产量和品质造成极大的损失。大豆抗性品种选育是其防治措施中最经济、有效的方法。文章拟利用RT-PCR方法克隆得到大豆胞囊线虫抗性候选基因Rhg1,通过构建植物过量表达载体pCAMBIA3301/Rhg1,并采用根癌农杆菌介导的大豆子叶节方法转化大豆东农50。PCR检测草丁膦抗性植株,表明目的基因已经整合到了大豆基因组中;实时荧光定量PCR结果也进一步证实,目的基因在转基因植株中有较高水平的表达丰度。在胞囊线虫的侵蚀下,转基因植株体内的超氧化物歧化酶含量显著高于野生型植株,而丙二醛含量低于野生型植株。研究证实了Rhg1为大豆胞囊线虫的主抗基因,同时为大豆胞囊线虫的分子抗性育种提供理论基础。

PEG-rhG-CSF与G-CSF预防及治疗化疗后中性粒细胞缺乏的效果比较

目的:回顾性分析PEG-rhG-CSF与G-CSF在淋巴瘤化疗后中性粒细胞缺乏预防中的作用,及其不良反应对比。方法:回顾性选取诊断明确的淋巴瘤患者共78例,其中在淋巴瘤化疗后立即给予PEG-rhG-CSF预防中性粒细胞缺乏的患者42例(实验组),另外36例患者则是在出现中性粒细胞缺乏后给予G-CSF治疗(对照组),直至粒细胞>2.0×10^(9)/L。对比PEG-rhG-CSF与G-CSF在化疗后粒细胞缺乏中的预防及治疗作用,观察中性粒细胞平均最低值,中性粒细胞缺乏的持续时间,以及4级FN的发生概率,并观察两组发热、肺内感染、感染相关指标以及不良反应的发生概率。结果:两组患者的化疗前KPS评分无统计学差异,中性粒细胞平均最低值在对照组明显低于实验组,中性粒细胞缺乏的持续时间在实验组明显缩短,4级FN的发生率在实验组明显降低,并且不良反应在两组无明显差异。结论:PEG-rhG-CSF与G-CSF比较,在不增加不良反应的同时,缩短了中性粒细胞缺乏的持续时间及4级FN的发生概率,降低了感染的概率,减轻了患者的痛苦,增加了患者的依从性。

不同剂量的rhG-CSF对恶性血液病患者化疗后白细胞减少持续时间及白细胞水平的影响

目的:比较不同剂量rhG-CSF对恶性血液病患者化疗后白细胞减少持续时间和外周血象的影响。方法:选取2011年12月-2016年6月期间我院收治的90例的恶性血液病患者作为观察组;选取2004年1月-2007年1月期间的30例患者作为对照组,所有患者均接受标准化疗方案。将观察组患者随机分为A(rhG-CSF 200μg/m^2)、B(rhG-CSF 300μg/m^2)和C(rhG-CSF 400μg/m^2)3组。比较观察组和对照组化疗前后白细胞最低值(WBC_(min))及其持续时间,最高值(WBC_(max))及其出现时间;比较患者治疗期间的感染发生率、rhG-CSF的总用量及不良反应发生率。结果:对照组外周血WBC_(min)为(1.30±0.11)×10~9/L,持续时间(3.2±0.7)d,WBC_(max)为(5.14±0.41)×10~9/L,出现时间(26.1±1.8)d;A组分别为(3.14±0.23)×10~9/L,(2.7±1.0)d,(10.08±0.69)×10~9/L及(14.9±1.8)d;B组分别为(3.11±0.32)×10~9/L,(0.9±0.5)d,(10.17±0.75)×10~9L及(10.7±1.5)d;C组分别为(3.15±0.30)×10~9/L,(0.5±0.3)d,(11.95±0.86)×10~9/L及(10.6±1.5)d。与对照组相比,A、B、C组WBC_(min)持续时间缩短,WBC数最小值及最大值均明显升高,WBC最大值出现提前,其差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组感染率33.33%,显著高于C组的3.33%(P<0.05);A、B、C组间感染率、不良反应发生率及rhGCSF的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:与低剂量的rhG-CSF相比,中、高剂量的rhG-CSF能够明显缩短恶性血液病患者化疗后白细胞减少持续时间。

rhG-CSF预防恶性肿瘤化疗后粒细胞减少的Ⅱ期临床研究

目的：评价ｒｈＧ－ＣＳＦ（粒生素）对预防恶性肿瘤化疗后粒细胞减少的作用及不良反应。方法：人组总数６３例，均为病理或细胞学证实的恶性肿瘤。采用自身交叉方法将患者随机分入ＡＢ和ＢＡ两组。Ａ为治疗周期，即化疗用药结束４８ｈ开始，每日１次皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ ５μｇ／ｋｇ，连续用药７～１４ｄ。Ｂ为空白对照周期。自化疗开始隔日查血常规１次，观察中性粒细胞（ＡＮＣ）及白细胞（ＷＢＣ）的变化。结果：治疗组于ｒｈＧ－ＣＳＦ注射２４ｈ后，ＷＢＣ及ＡＮＣ迅速上升，４８ｈ出现第１个高峰，第１０天出现第２个高峰，而对照组化疗后，ＷＢＣ和ＡＮＣ逐渐下降，始终低于治疗组。ＷＢＣ，ＡＮＣ的最低值、ＷＢＣ＜４．０×１０９／Ｌ、ＡＮＣ＜２．０×１０９／Ｌ的持续时间，以及化疗后第２１天ＷＢＣ＜４．０×１０９／Ｌ的病例数在治疗组和对照组间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论：ｒｈＧ－ＣＳＦ可以促进化疗患者ＷＢＣ和ＡＮＣ的恢复，耐受性良好，可以作为肿瘤化疗中提高剂量强度的有效辅助药。

PEG-rhG-CSF对以顺铂为基础联合化疗所致骨髓抑制的预防作用

目的探讨PEG-rhG-CSF预防晚期癌症患者以顺铂为基础的联合化疗所致骨髓抑制的效果及其不良反应。方法选择92例晚期癌症患者,按随机数字法分为对照组46例和观察组46例。2组患者均采用以顺铂为基础的联合化疗方案,化疗开始后常规监测血常规。在前一周期化疗过程中出现Ⅰ度及以上骨髓抑制并及时处理后,在下一周期化疗用药结束48 h后观察组予PEG-rhG-CSF皮下注射,5μg·kg/次/周期,隔天化验血常规1次,如果骨髓抑制继续加重达Ⅳ度则补充rhG-CSF皮下注射5μg·kg/次/天;对照组则予rhG-CSF皮下注射,5μg·kg/次/天。2组患者均在中性粒细胞绝对值≥2.0×109和(或)白细胞计数≥4.0×109时停用rhG-CSF。治疗过程中如果出现粒细胞减少性发热则2组患者均按照诊疗常规予抗生素防治感染。详细记录用药后患者的不良反应。结果观察组患者的中性粒细胞减少的发生率(43.48%)明显低于对照组(63.04%)(P<0.05)。观察组患者恶心11例(23.91%)、白细胞下降18例(39.13%)、胃肠道反应16例(34.78%)及肾毒性16例(34.78%)等,不良反应发生率明显低于对照组[恶心17例(36.95%)、白细胞下降29例(63.04%)、胃肠道反应23例(50.00%)及肾毒性19例(41.30%)](P<0.05)。结论PEG-rhG-CSF可有效减轻以顺铂为基础联合化疗所致骨髓抑制的程度,不良反应轻微,具有良好的应用前景。

改良CVP联合rhG-CSF动员方案外周血干细胞移植治疗血液肿瘤及实体瘤41例

目的:研究改良CVP联合rhG-CSF方案对血液肿瘤和实体瘤41例患者自体外周血干细胞移植(APBSCT)动员及造血重建效果。方法:2001年3月至2006年3月采用改良CVP联合rhG-CSF动员方案,完成APBSCT41例(血液肿瘤32例,实体瘤9例),平均年龄39.6岁(18岁～67岁)。WBC升至4.0×109/L左右采集单个核细胞(MNC)并计数MNC和CD34+细胞数;预处理结束48h～72h回输MNC。结果:动员期间患者WBC均降至1.0×109/L以下,PLT40×109以下。34例1次采集成功,7例(双次移植5例)作第2次采集。采集MNC数0.9×108/kg～8.3×108/kg(2.8±2.0×108/kg),CD34+细胞1.1×106/kg～9.4×106/kg(3.2±2.6×106/kg)。预处理后所有病例均达到骨髓抑制,WBC恢复到1.0×109/L时间为+8～+16d(平均+11.3d);38例PLT恢复到50×109/L时间为+13～+22d(平均+16.8d),3例PLT恢复延迟,最长+35d。随访15～65个月,持续完全缓解19例(46.3%),部分缓解或好转13例(31.7%),总有效率78.0%,无效9例(22.0%),无1例发生移植相关死亡(其中5例带瘤生存,17例死亡)。结论:改良CVP联合rhG-CSF动员方案行APBSCT是一种安全有效的动员自体外周血造血干细胞的方法,临床疗效满意。