改良的RIHA方法定量检测PCV2 Cap抗原的研究

为提高反向间接血凝试验(reverse indirect hemagglutination assay,RIHA)定量检测PCV2 Cap抗原的稳定性和精准性,将RIHA方法改良为:1)将被检样品稀释为几个适宜稀释度,分别做RIHA检测;2)检测孔100%、75%、50%、25%、0%凝集分别记录为4、3、2、1、0分,将几个稀释度的被检样品全部检测孔的分数加和;3)同法检测参照品并将参照品分数加和;4)被检样品与参照品总分数对比计算,获得被检样品抗原含量。改良的RIHA方法进行稳定性评价并与ELISA方法做比较。结果显示,改良RIHA方法的批内差异为6.8%~19.4%、批间差异为11.4%~23.6%、检测同一个样品差异系数为8.5%,均优于常规RIHA方法。改良RIHA方法检测纯化前和纯化后的PCV2 Cap抗原共30份,与ELISA方法检测结果比较相关系数为0.9568。研究结果表明,改良的PCV2 Cap抗原RIHA定量检测方法稳定性良好,且与ELISA方法检测结果有相关性,可在PCV2 Cap抗原生产中做定量检测,也可在毒种筛选、生产工艺优化中快速定量检测PCV2 Cap抗原含量。

McAb-RIHA和McAb-Dot-ELISA检测急性血吸虫病患者尿排泄抗原的效果比较

本研究建立了冰冻—加热浓缩法，将尿样浓缩20倍。应用MCAb-RIHA和McAb-Dot-ELISA平行对比检测了43份急性血吸虫病患者和101份健康人尿样，两法的阳性检出率分别为81．39％和69．76％；假阳性率分别为14．85％和0％。应用MCAb-RIHA和MCAb－Dot－ELISA对比检查55份华枝睾吸虫病患者和49份钩虫病患者尿样，前者出现的交叉反应率分别为16．36％和14．28％；后者出现的交叉反应率均为0％。

McAb-RIHA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的效果

本文报告了用抗日本血吸虫肠相关趋阴极抗原单克隆抗体致敏血球建立反问间接血凝试验，对66例急性血吸虫病，123例慢性血吸虫病，57例肝吸虫病，54例钩虫病和82例非疫区健康人血清的检测效果。结果显示，该方法检测急、慢性血吸虫病血清的敏感性分别达到98．5％。和81．3％，与肝吸虫病血清交叉反应率为10．5％，与钩虫病血清未见交叉反应，与非疫区健康人血清仅有1．2％的假阳性巨应。与平行对照的McAb－Dot－ELISA检测结果相比，两者在检测敏感性和特异性上差别均无显著意义，具有较高符合率，表明McAb－RIHA试验是一种诊断效率和可靠性较高的检测日本血吸虫病血清循环抗原的方法，尤其适宜基层和现场应用。

应用RIHA,Kado,PCR法检测鼠疫菌Fra1抗原的对比研究

目的 了解RIHA ,Kado ,PCR法检测鼠疫菌Fra1抗原的敏感性及特异性 ,比较三种方法的优劣。方法 采用反向间接血凝抑制法 (RIHA)、Kado法及双重式聚合酶链 (Pla -F1-PCR)反应三种方法。结果 检测鼠疫菌Fra1抗原检出率分别为 10 0 %,93 . 5 %和 96. 7%,经配对资料的卡方检验 ,三者间无显著性差异 ( χ2 =2 . 0 ,P <0 . 0 5 )。结论 RIHA法仅适用于追溯诊断 ,质粒图谱在分子流行病学上具有重要意义 ,双重式聚合酶链法不但具有快速、特异、敏感等特性 ,而且还可用于非典型菌株的检测 。

弓形虫单克隆抗体试剂的研究——应用RIHA及IHA法对弓形虫感染兔、羊循环抗原和抗体的检测

应用抗弓形虫单克隆体(McAb)致敏绵羊红细胞建立的反向间接血凝诊断法(RIHA)和间接血凝诊断方法(IHA),对人工感染弓形虫的兔、羊血清进行了循环抗原(CAg)和抗体(Ab)检测。结果表明,弓形虫弱毒(QHO)株和强毒(RH)株感染的兔和羊血清,用RIHA检出CAg的时间在感染后1～2天,平均4天;IHA检出Ab的时间在感染后8～16天,平均12天。用毒力不同的弓形虫感染后,CAg检出时间有一定差异:QHO株感染的兔平均5.3天,羊平均6.25天;RH株感染的兔平均2.3天,羊为1天。兔、羊CAg的阳性检出率均为100％。兔、羊血清CAg于感染后23～66天先后消失,而Ab滴度长期维持在一定高度(1:64～1:4096)。证明RIHA方法对不同毒力弓形虫感染的动物血清CAg可以达到早期诊断的目的。为弓形虫病急性期和早期现症感染提供了可靠的诊断方法和手段。

McAb-RIHA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的效果

本文报告了用抗日本血吸虫肠相关趋阴极抗原单克隆抗体致敏血球建立反向间接血凝试验,对66例急性血吸虫病,123例慢性血吸虫病,57例肝吸虫病,54例钩虫病和82例非疫区健康人血清的检测效果。结果显示,该方法检测急、慢性血吸虫病血清的敏感性分别达到98.5％和81.3％,与肝吸虫病血清交叉反应率为10.5％,与钩虫病血清未见交叉反应,与非疫区健康人血清仅有1.2％的假阳性反应。与平行对照的McAb-Dot-ELISA反应结果相比,两者在检测敏感性和特异性上差别均无显著意义,具有较高符合率,表明McAb-RIHA试验是一种诊断效率和可靠性较高的检测日本血吸虫病血清循环抗原的方法,尤其适宜基层和现场应用。

McAb-RIHA和McAb-ELISA检测急性血吸虫病患者尿排泄抗原的效果比较

本研究建立了冰冻-加热浓缩法,将尿样浓缩20倍。应用McAb-RIHA和McAb-Dot-ELISA平行对比检测了83份急性血吸虫病患者和101份健康人尿样,两法的阳性检出率分别为78.31％和65.06％;假阳性率分别为14.85％和0％。就用McAb-RIHA和McAb-Dot-ELISA对比检查55份华枝睾吸虫病患者和49份钩虫病患者尿样,前者出现的交叉反应率分别为16.36％和14.28％;后者出现的交叉反应率均为0％。

McAb-RIHA和McAb-Dot-ELISA检测尿中循环抗原诊断日本血吸虫病的研究

通过建立的冰冻—加热浓缩法,将尿样浓缩20倍。应用 McAb-RIHA 和 McAb-Dot-ELISA 平行对比检测了83份急性血吸虫病患者和110例慢性血吸虫病尿样。前者两法的阳性检出率分别为78.31%和65.06%。后者两法的阳性检出率分别为20%和10%。检测101份健康人尿样。两法的假阳性率分别为14.85%和0%。应用 McAb-RIHA 和 McAb-Dot-ELISA对比检查55份华枝睾吸虫病患者和49份钩虫病患者尿样,前者出现的交叉反应率分别为16.36%和14.28%。后者出现的交叉反应率均为0%。12例尿路感染病人中5例含有蛋白的尿样加热前 McAb-Dot-ELISA 检测均阳性,而经76℃2h 加热后均为阴性。

McAb-RIHA试验诊断血吸虫病的现场应用研究

本文以单盲法在现场条件下对单克隆抗体反向间接血凝试验（McAb-RIHA）诊断血吸虫病的效果进行了观察，结果显示McAb-RIHA与Kato法粪检样本的检测总符合率达80．0％，与粪检阳性样本的符合率达83．9％；对首次粪检阳性而McAb－RIHA检测阴性的8份样本复查，发现3份为假阳性；对粪检阴性，McAb-RIHA检测阳性的样本，以Kato法复查（3张涂片），检出24．6％的阳性样本，是总样本粪检阳性率6．8％的3．6倍；与试验中平行设置的单克隆抗体斑点酶联免疫吸附试验（McAb-Dot－ELISA）的检测结果比较，两法的结果差异无显著意义。试验结果说明，McAb-RIHA在现场诊断血吸虫病具有较高的敏感性和准确性，该法操作简便、诊断快速，具有一定的实用价值。

多价McAb-RIHA检测血吸虫循环抗原的应用研究

采用多价ＭｃＡｂ－ＲＩＨＡ检测５０６例不同疫区粪检阳性的血吸虫病人血清ＣＡｇ，累计阳性率为９０．３％，比用单价ＭＣＡｂ－ＲＩＨＡ提高了敏感性。３７５例正常人的假阳性率为２．１３％，与２２例肺吸虫病人和６６例肝吸虫病人的交叉反应率分别为４．５％和０％。血吸虫病人经吡喹治疗后半年和１年，ＣＡｇ转阴率分别为７９．０％和９２．３％。结果表明该方法有较高的敏感性和特异性，可用于确诊病人和１年内考核疗效，操作简便快速．经济，基层适用性好。

反向间接血凝试验(RIHA)在动物疾病诊断中的应用进展

反向间接血凝试验(RIHA)是一种简单实用的实验室检测技术,已广泛应用于人类及动物疾病的田间及临床检测。本文概述了RIHA在动物病毒病、细菌病和寄生虫病诊断方面的应用进展,以期为兽医临床科技工作者更好地应用该法诊断疾病提供参考。

反向间接血凝试验检测猪囊虫病患者血清中循环抗原的研究

循环抗原（ＣＡｇ）的检测对寄生虫感染早期诊断、感染度的估计和疗效考核有明显的实用价值。目前国内外对囊虫病患者ＣＡｇ的检测已有许多报道〔１，２〕，但用铬离子－单克隆抗体（Ｃｒ＋＋＋－ＭｃＡｂ）鞣酸法致敏绵羊红细胞（ＲＢＣ）作反向间接血凝试验（ＲＩＨＡ）...

检测日本血吸虫病家兔尿中循环抗原的实验研究

本研究首次用单克隆抗体证实了日本血吸虫病兔尿液中存在日本血吸虫肠相关趋阴极抗原。用ＭｃＡｂ－ＲＩＨＡ和ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ平行对比检测浓缩５倍的重感染家兔尿样６１份和正常家兔尿样３０份。两法的阳性率分别为８１．９７％和７８．６９％；假阳性率分别为１３．３３％和０％。认为可进一步用于检测日本血吸虫病患者尿排泄抗原的研究。

福建省鼠疫检验实验室血清学室间质控结果与评价

[目的]为评价全省鼠疫检验实验室检验工作能力,及时发现影响实验检验因素,纠正不规范的检验操作,避免检测工作中室间误差,确保鼠疫监测检验结果的准确性。[方法]统一制备质控血清,各鼠疫实验室统一时间检测,及时反馈结果。省疾病预防控制中心对质控结果进行分析与评价。[结果]3种检测方法平均合格率均在92%以上,各年度合格率没有显著性差异。[结论]全省各监测点鼠疫检验实验室基本具备鼠疫血清学检验能力,检验质量达到质控要求。

三种方法检测鼠疫菌的结果分析

目的 了解广西地区鼠疫菌质粒图谱。方法 采用反向血凝试验、双重式聚合酶链式反应及质粒图谱分析 ,对分离自广西的 3 1株鼠疫菌进行检测。结果 反向血凝试验和双重式聚合酶链式反应检出阳性率达 10 0 %,质粒图谱分析发现广西鼠疫菌株含 4,6,45 ,65及 111. 3 6Mdal 5种质粒 ,可划分为Ⅰ (含 4,6及 45Mdal 3种质粒 ,占 3 . 2 %)、Ⅱ (含 4,6,45及 65Mdal 4种质粒 ,占 93 . 6%)及Ⅲ (含 4,6,45及 111. 3 6Mdal 4种质粒 ,占 3 . 2 %) 3个质粒图谱类型。此外 ,还发现广西鼠疫菌株质粒图谱与云南省澜沧江下游区域的相同。

三方法检测猪囊尾蚴患者血清的实验对比

目的 为寻求对诊断猪囊虫病的简便易行的方法,方法 RIHA、ELISA、DOT-ELISA三种不同的检测方法对猪囊尾蚴患者血清特异循环抗原CAg,进行对比分析,结果 三种检测方法检出率分别为90%,91.7%,91.7%。结论 尤其RIHA法具有操作简单,结果稳定,特异性敏感性高等优点,适宜门诊及大面积调查工作。ELISA、DOT-ELISA法检出率稍高于反向RIHA,但重复性稍差,且操作较繁杂。

单克隆抗体反向间接血凝检测急性血吸虫病患者粪便虫源性抗原的效果

本文报告了McAb-RIHA法检测30例急性血吸虫病患者粪便虫源性抗原的结果。首次证实,急血患者粪便中存在日本血吸虫肠相关趋阴级抗原。McAb-RIHA法检测敏感性为90％,特异性为92.5％,与肝吸虫患者粪便的交叉反应率为10％。推测急血患者粪便中虫源性抗原可能是通过胆汁分泌途径排入肠道。文中对粪便中虫源性抗原检测在血吸虫免疫诊断上的意义进行了讨论。

检测日本血吸虫病家兔尿中循环抗原的实验研究

本研究首次用单克隆抗体证实了日本血吸虫病家兔尿液中存在日本血吸虫肠相关趋阴极抗原。用McAb-RIHA和McAb-Dot-ELISA平行对比检测浓缩5倍的重感染家兔尿样61份和正常空兔尿样30份。两法的阳性率分别为81.97％和78.69％;假阳性率分别为13.33％和O％。认为可进一步用于检测日本血吸虫病患者尿排泄抗原的研究。

不同方法检测鼠疫动物脏器的研究

应用双重式聚合酶反应 (Pla -F1-PCR)、常规细菌培养和反相血凝试验 (RIHA) ,对 9只实验感染鼠疫的动物脏器 (豚鼠 6份 ,小白鼠 3份 ) ,在 4℃条件下保存不同时间后进行同步检测。结果表明 ,保存 90d和 180d后 ,PCR与RI HA均为阳性 ,而细菌培养阳性率明显降低 ,PCR和RIHA法敏感性高于常规培养。提示对鼠疫或疑似鼠疫材料的检测除常规培养外应做PCR和RIHA ,以防漏诊。

仔猪大肠杆菌纤毛抗原反向间接血凝检测方法的建立与应用

为建立大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原的快速鉴别诊断和定量检测方法,用纯化的大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原免疫家兔制备阳性血清,其琼扩效价分别达到1∶32、1∶32、1∶128;利用该阳性血清IgG致敏醛化的绵羊红细胞,确定了最适K88、K99、987P阳性血清IgG的质量浓度分别为40、160、80μg/mL。用该方法对同一批次的K88、K99和987P纤毛抗原进行3次检测,K88、K99和987P纤毛样品的RIHA效价均为1∶1 600、1∶1 600和1∶800。结果表明,该检测方法具有较好的特异性和可重复性,可用于大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原的快速鉴别诊断。