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Inhibitory Effect of Flavonoid Glycosides from Chlorophytum comosum on Nasopharyngeal Carcinoma 5-8F Cells and Its Mechanism
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作者 Chenliang CHU Xinchen WANG +2 位作者 Kuan LU Liang QIN Lu JIN 《Medicinal Plant》 2024年第1期66-70,共5页
[Objectives]To study the inhibitory activity of two flavonoid glycosides isolated from Chlorophytum comosum Laxum R.Br on human nasopharyngeal carcinoma(NPC)cell line 5-8F in vitro and its mechanism.[Methods]The flavo... [Objectives]To study the inhibitory activity of two flavonoid glycosides isolated from Chlorophytum comosum Laxum R.Br on human nasopharyngeal carcinoma(NPC)cell line 5-8F in vitro and its mechanism.[Methods]The flavonoid glycosides were isolated and purified from the ethanol alcoholic extract of the roots of Liliaceae plant Chlorophytum comosum by silica gel column chromatography,macroporous resin column chromatography,Sephadex LH-20,and reverse column chromatography(ODS).The inhibitory activity of flavonoid glycosides on human nasopharyngeal carcinoma cells was analyzed by CCK-8 method,and the potential mechanism was preliminarily analyzed by molecular docking.[Results]Two flavonoid glycosides were identified as isovitexin 2″-0-rhamnoside and 7-2″-di-O-β-glucopyranosylisovitexin.Two flavonoid glycosides showed promising inhibitory effect on human nasopharyngeal carcinoma cell line 5-8F,with IC_(50) values of 24.8 and 27.5μmol/L,respectively.Molecular docking results showed that the potential targets of two flavonoid glycosides include CyclinD1,Bcl-2β-Catenin,ILK,TGF-β,in addition,two glycosides showed higher predicted binding affinity towards CyclinD1,which verifies the cytotoxicity of the two compounds on human nasopharyngeal carcinoma cell line 5-8F in vitro.[Conclusions]Two flavonoid glycosides are the active molecules in Chlorophytum comosum that can inhibit the proliferation of human nasopharyngeal carcinoma cells,and have the potential to be used in the research and development of anti nasopharyngeal carcinoma drugs. 展开更多
关键词 Chlorophytum comosum Laxum R.Br. flavonoid glycosides 5-8f cells Antitumor mechanism
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烟酰胺单核苷酸对RIN-m5f细胞中胰岛素分泌及PDX-1和FoxO1基因表达的影响(英文) 被引量:3
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作者 盛飞凤 任贤 +7 位作者 戴幸平 徐潇静 董敏 裴奇 屈健 周智广 周宏灏 刘昭前 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期958-963,共6页
目的:在细胞水平研究烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对胰岛素分泌的调节作用及其对与胰岛素分泌相关的重要转录因子胰十二指肠同源盒基因(pancreatic and duodenalhomeobox-1,PDX-1)和分叉头框家族转录因子1(forkhead... 目的:在细胞水平研究烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对胰岛素分泌的调节作用及其对与胰岛素分泌相关的重要转录因子胰十二指肠同源盒基因(pancreatic and duodenalhomeobox-1,PDX-1)和分叉头框家族转录因子1(forkhead box-containing protein O-1,FoxO1)基因表达的影响。方法:采用大鼠胰岛素ELISA试剂盒检测RIN-m5f细胞胰岛素分泌水平。用Real-time PCR检测RIN-m5f细胞PDX-1和FoxO1的mRNA表达水平。用Western印迹检测RIN-m5f细胞PDX-1蛋白表达水平。结果:用瑞格列奈10 nmol/L+NMN 100μmol/L处理RIN-m5f细胞48 h,与空白对照及DMSO对照组相比,胰岛素分泌量均显著增高(P<0.05);与NMN 50μmol/L组比较,胰岛素分泌量的增高也有统计学意义(P<0.05)。10,50和100μmol/L的NMN作用RIN-m5f细胞36 h,PDX-1的mRNA表达量均上调(依次为P<0.05,P<0.01,P<0.001)。100μmol/L剂量组与10μmol/L和50μmol/L剂量组比较差异也有统计学意义(P<0.001)。50,100和200μmol/L的NMN作用RIN-m5f细胞36或48 h,PDX-1的蛋白表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NMN可以调控RIN-m5f细胞中胰岛素的分泌及PDX-1的mRNA表达水平。 展开更多
关键词 烟酰胺单核苷酸 胰十二指肠同源盒基因 分叉头框家族转录因子1 rin-m5f
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豆芋异黄酮的制备及其对RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用 被引量:1
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作者 邓珂 陈镠 +5 位作者 杨良缘 胡钰 许光治 张有做 王艳 倪勤学 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第19期200-207,共8页
以豆芋(Apios americana Medik.)为原料,采用乙醇热回流提取、乙酸乙酯萃取,以异黄酮质量浓度为指标,优化大孔树脂富集工艺,并对得到的豆芋异黄酮(记为AI-3)抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶抑制能力及对胰岛瘤细胞RIN-m5F氧化损伤的保护作用... 以豆芋(Apios americana Medik.)为原料,采用乙醇热回流提取、乙酸乙酯萃取,以异黄酮质量浓度为指标,优化大孔树脂富集工艺,并对得到的豆芋异黄酮(记为AI-3)抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶抑制能力及对胰岛瘤细胞RIN-m5F氧化损伤的保护作用进行探究。结果:优化的D101型大孔树脂富集工艺为:上样质量浓度1.5 mg/m L,体积分数80%乙醇溶液(p H 6)洗脱,洗脱体积80 m L(4倍柱体积),所得AI-3得率为0.44%(占豆芋干基质量),异黄酮质量分数50.83%;AI-3对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基的半抑制质量浓度分别为19.51、3.40 μg/m L,铁离子还原抗氧化能力为387.83 μmol/mg,对α-葡萄糖苷酶活力的半抑制质量浓度为235.97 μg/m L;AI-3在0~300 μg/m L范围内,RIN-m5F细胞存活率同空白对照组相比无显著差异(P>0.05),且25~300 μg/m L时可极显著提高RIN-m5F氧化损伤细胞的存活率(P<0.01),300 μg/m L时细胞存活率达84.19%,高于阳性对照组。结论:D101型大孔树脂可有效富集豆芋异黄酮,所得AI-3具有较强的抗氧化、α-葡萄糖苷酶抑制活性及RIN-m5F细胞氧化损伤保护作用。研究结果为开发预防糖尿病等代谢综合征功能性食品提供了理论依据。 展开更多
关键词 豆芋异黄酮 大孔树脂富集 抗氧化 α-葡萄糖苷酶抑制 rin-m5f细胞保护
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GLP1R-GFP稳定转染Rin-m5F细胞系的构建
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作者 胡涌泉 曾璐漫 +2 位作者 吴艳阳 魏云林 刘东波 《中南药学》 CAS 2017年第6期785-789,共5页
目的本研究目的是构建一种能稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)人胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)的胰岛细胞系,用来筛选GLP1R激动剂类药物。方法使用X-treme GENE HP DNA Transfection Reagent将pCMV6-AC-GLP1R-GFP质粒转染到Rin-m5F细胞,经G418... 目的本研究目的是构建一种能稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)人胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)的胰岛细胞系,用来筛选GLP1R激动剂类药物。方法使用X-treme GENE HP DNA Transfection Reagent将pCMV6-AC-GLP1R-GFP质粒转染到Rin-m5F细胞,经G418筛选单克隆Rinm5F/GLP1R-GFP细胞并扩大培养。结果该细胞能稳定传代,荧光显微镜下观察细胞绿色荧光分布均匀,Western blot验证GLP1R蛋白表达显著增加。在实验验证中,对照空白组中细胞绿色荧光分布均匀,阴性药物格列本脲(非GLP1R靶点药物)作用时细胞内无明显荧光斑点出现,阳性药物百泌达作用(GLP1R激动剂类药物)时细胞内出现显著荧光斑点。结论 GLP1R激动剂类药物筛选模型Rin-m5F/GLP1R-GFP成功构建。该模型能对混合物样品进行筛选,具有假阳性极低、筛选所需样本小、筛选样品量大、易标准化、筛选速度快、特异性强等优势,为GLP1R激动剂类药物的筛选奠定了基础。 展开更多
关键词 人胰高血糖素样肽-1受体 rin-m5f 质粒转染
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The F5 gene predicts poor prognosis of patients with gastric cancer by promoting cell migration identified using a weighted gene co-expression network analysis
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作者 MENGYI TANG BOWEN YANG +6 位作者 CHUANG ZHANG CHAOXU ZHANG DAN ZANG LIBAO GONG YUNPENG LIU ZHI LI XIUJUAN QU 《BIOCELL》 SCIE 2021年第4期911-921,共11页
Distal gastric cancer(DGC)is a subgroup of gastric cancer(GC),which has different molecular characteristics from proximal gastric cancer(PGC).These differences result in different overall survival(OS)rates;however,dat... Distal gastric cancer(DGC)is a subgroup of gastric cancer(GC),which has different molecular characteristics from proximal gastric cancer(PGC).These differences result in different overall survival(OS)rates;however,data pertaining to the survival rate in PGC or DGC are contradictory.This suggests that the location of GC is not the unique cause of the different survival rates,while the molecular characteristics might be more important factors determining the prognosis of DGC.Therefore,the aim of this study was to discover key prognostic factors in DGC using bioinformatic methods and to explore the potential molecular mechanism.The Cancer Genome Atlas(TCGA)public database was employed to screen data relating to DGC,and we conducted a weighted gene co-expression network analysis(WGCNA)on DGC patient samples to establish co-expression modules.High-weight genes(hub genes)in a dominant color module were identified.In vitro experiments and gene set enrichment analyses(GSEA)were carried out to elucidate the potential molecular mechanism.In this study,139 DGC samples were enrolled to perform a co-expression analysis.According to the correlation between gene modules and clinical characteristics,the royal blue module related to stage M of DGC was screened,and a survival analysis was conducted to show that highcoagulation-factor V(F5)expression was related to the short OS of patients with GC.In vitro experiments confirmed that F5 could promote the migration of GC cells.GSEA suggested that F5 might have affected the prognosis of GC by modulating the activities of the Wnt and/or the TGF-βsignaling pathways.Our results indicated that high F5 expression predicts poor prognosis of patients with DGC,and it functions probably by promoting cell migration through the Wnt and/or the TGF-βsignaling pathways. 展开更多
关键词 Distal gastric cancer WGCNA f5 cell migration Poor prognosis
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5-氮-2'-脱氧胞苷对肺癌A549细胞凋亡及范可尼贫血互补基团F表达的影响
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作者 余宗涛 张吉才 +2 位作者 高琼 高波 胡春卉 《检验医学》 CAS 2015年第5期507-511,共5页
目的探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肺癌A549细胞凋亡及抑癌基因范可尼贫血互补基团F(FANCF)基因表达的影响。方法以浓度为0.5、5、50μmol/L的5-Aza-CdR处理人肺癌细胞株A549,常规培养采用四唑盐(MTT)比色法观察细胞的生长活... 目的探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肺癌A549细胞凋亡及抑癌基因范可尼贫血互补基团F(FANCF)基因表达的影响。方法以浓度为0.5、5、50μmol/L的5-Aza-CdR处理人肺癌细胞株A549,常规培养采用四唑盐(MTT)比色法观察细胞的生长活性,甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测FANCF基因甲基化状态;以荧光定量PCR检测FANCF mRNA的表达,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 5-Aza-CdR能明显抑制肿瘤细胞的生长,细胞增殖抑制率(CPIR)随5-Aza-CdR浓度和作用时间的不同而变化,呈剂量依赖性(P<0.005)和时间依赖性(P<0.001);药物处理后FANCF mRNA表达明显升高,细胞凋亡率与5-Aza-CdR剂量呈正相关(r=0.998,P<0.05)。结论 5-Aza-CdR能使FANCF基因去甲基化,促进细胞凋亡,增强抑癌功能,但同时有增加顺铂耐药的风险。 展开更多
关键词 范可尼贫血互补基团 f 基因 甲基化 5-氮-2′-脱氧胞苷 A549 细胞 凋亡
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表达呼吸道合胞病毒融合前F蛋白的重组人5型腺病毒的构建
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作者 马亚林 柴鹏弟 +4 位作者 王金冬 毛彤瑶 张鹏 李慧莹 段招军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期515-522,共8页
目的筛选并构建成功表达A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,HRSV)融合前构象F蛋白的重组人5型腺病毒(Recombinant Human type5 adenovirus,rHADV-5),为制备和研发HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定基础。方法在真核表... 目的筛选并构建成功表达A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,HRSV)融合前构象F蛋白的重组人5型腺病毒(Recombinant Human type5 adenovirus,rHADV-5),为制备和研发HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定基础。方法在真核表达载体pcDNA3.1(+)上插入具有不同突变位点的HRSV F蛋白编码序列,利用融合前F蛋白单克隆抗体AM14和D25筛选HRSV F蛋白突变体;通过同源重组将筛选出的前构象F蛋白突变体编码序列插入非复制型人5型腺病毒载体,在HEK293细胞中进行重组病毒的包装和扩增,经氯化铯密度梯度法获得纯化的重组病毒;应用夹心ELISA法和Western blot鉴定F蛋白的表达及构象。结果通过AM14和D25单克隆抗体筛选出了2个稳定维持在融和前构象的HRSV F蛋白序列(SC-3M和SC-5M)。将SC-3M和SC-5M编码序列插入非复制型人5型腺病毒载体,对两种重组人5型腺病毒(pAd5-SC-3M和pAd5-SC-5M)和空载体(pAd5-vector)纯化,病毒滴度分别达到2.016×10^(10),2.52×10^(10)和2.948×10^(11)IU/mL。pAd5-SC-3M和pAd5-SC-5M感染HEK293后均能高效表达HRSV融合前构象的F蛋白并维持三聚体结构,且pAd5-SC-5M感染细胞中F蛋白表达量高于pAd5-SC-3M。结论成功在体外传代细胞中获得可高效表达A型HRSV融合前F蛋白的重组人5型腺病毒,为进一步通过动物试验评价该HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 5型腺病毒载体 人呼吸道合胞病毒 融合前f蛋白 HEK293细胞
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Effect of hypoxia and glutamine or glucose deprivation on the expression of retinoblastoma and retinoblastoma-related genes in ERN1 knockdown glioma U87 cell line
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作者 Dmytro O. Minchenko Leonid L. Karbovskyi +2 位作者 Serhii V. Danilovskyi Michel Moenner Oleksandr H. Minchenko 《American Journal of Molecular Biology》 2012年第1期21-31,共11页
The expression of retinoblastoma and several retinoblastoma-related genes was studied in glioma cell line U87 and its subline with knockdown of ERN1 (endoplasmic reticulum—nuclei-1), the main endoplasmic reticulum st... The expression of retinoblastoma and several retinoblastoma-related genes was studied in glioma cell line U87 and its subline with knockdown of ERN1 (endoplasmic reticulum—nuclei-1), the main endoplasmic reticulum stress sensing and signaling enzyme. It was shown that a blockade of the ERN1 enzyme function increases the expression levels of retinoblastoma, retinoblastoma-like 1 and most retinoblastoma related genes: EID1, JARID1B, E2F1, E2F3, RBAP48 and CTIP, does not change RNF40 and RBAP46 and decreases KDM5A. We have also demonstrated that hypoxia reduces the expression levels of retinoblastoma, EID1, and E2F1 in ERN1-deficient glioma cells only. At the same time, the expression levels of retinoblastoma-like 1, E2F3, RBAP46, RBAP48 and CTIP decrease, while JARID1B and RBBP2 increase in both types of cells in hypoxic conditions, but the expression is much stronger in cells with suppressed function of ERN1. The expression level of JARID1B and KDM-5A mRNA is also enhanced in glutamine deprivation condition in both tested cell types, moreover, this effect is amplified by the blockade of the ERN1 enzyme function. The expression levels of retinoblastoma, EID1, RBAP48, and E2F3 are decreased in glutamine deprivation condition only in ERN1-deficient glioma cells, but RBL1, CTIP, RBAP46, and E2F1—in both tested cell types with more significant effect in ERN1-deficient cells. Glucose deprivation condition leads to a decrease of expression levels of retinoblastoma, RBL1, E2F3, RBAP46, and RBAP48 in both used cell types and of EID1 and E2F1 only in glioma cells with suppressed function of signaling enzyme ERN1. Thus, expression levels of retinoblastoma and most retinoblastoma-related genes are increased under a blockade of ERN1 enzyme function and significantly changed in hypoxia, glucose or glutamine deprivation conditions both in control U87 cells and ERN1-deficient cells, but inhibition of the unfolded protein response sensor ERN1 predominantly enhances these effects. Moreover, it is possible that the induction of the expression of retinoblastoma and most retinoblastoma-related genes after knockdown of ERN1 plays an important role in suppression of glioma proliferation. 展开更多
关键词 mRNA EXPRESSION RETINOBLASTOMA RBL1 RBAP48 RBAP46 CTIP KDM5A JARID1B E2f1 E2f3 GLIOMA cells ERN1 HYPOXIA Glucose DEPRIVATION GLUTAMINE DEPRIVATION
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稳定表达RFP-GFP-LC3的大鼠胰岛β细胞株的构建
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作者 周佳丽 吴艳阳 +3 位作者 罗玉霜 袁玉菊 刘明俊 刘东波 《生命科学研究》 CAS CSCD 2019年第2期87-91,共5页
为了简便自噬相关机理药物在胰岛β细胞上的高通量筛选,实验通过慢病毒转染技术,将RFP-GFP-LC3质粒转入大鼠胰岛β细胞株(RIN-m5f),用G418对感染细胞进行筛选,激光共聚焦进行活细胞拍摄验证,得到100%表达RFP-GFP-LC3质粒的细胞株。无血... 为了简便自噬相关机理药物在胰岛β细胞上的高通量筛选,实验通过慢病毒转染技术,将RFP-GFP-LC3质粒转入大鼠胰岛β细胞株(RIN-m5f),用G418对感染细胞进行筛选,激光共聚焦进行活细胞拍摄验证,得到100%表达RFP-GFP-LC3质粒的细胞株。无血清饥饿处理细胞,结果显示:饥饿组GFP/RFP荧光点比值较对照组下降, P62蛋白表达量以及S6K磷酸化水平降低,加入10μmol/L氯喹部分抑制自噬后, GFP/RFP荧光点比值回升。以上结果表明稳定表达RFP-GFP-LC3的RIN-m5f构建成功,并能够以简单的检测方式准确表达自噬全过程,为自噬在糖尿病药物机理方面的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 糖尿病:自噬 慢病毒转染 rin-m5f细胞株
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黄刺多糖中单糖含量与体外降血糖活性相关性分析
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作者 岳庆明 韩丽娟 +2 位作者 邓永蓉 马娜娜 赵玉欣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第8期122-133,共12页
基于糖脂毒性(glucolipotoxicity,GLTy)诱导的RIN-m5F胰岛细胞模型及α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性共同探究不同产地黄刺多糖(Berberi dasystachya polysaccharides,BDPs)降血糖活性,以期探究其单糖含量与降血糖活性之间的相关性。以青... 基于糖脂毒性(glucolipotoxicity,GLTy)诱导的RIN-m5F胰岛细胞模型及α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性共同探究不同产地黄刺多糖(Berberi dasystachya polysaccharides,BDPs)降血糖活性,以期探究其单糖含量与降血糖活性之间的相关性。以青海省5个地区黄刺浆果为原料,采用超声辅助热水浸提法提取5种不同产地BDPs(Ⅰ~Ⅴ),明确BDPs化学组成及初级结构,探讨BDPs体外降血糖活性及对GLTy损伤的胰岛细胞的保护作用,揭示BDPs单糖含量与降血糖活性之间的相关性。结果表明,不同产地BDPs均是由β-糖苷键连接且具有吡喃糖环骨架构型的不具备三螺旋构象的杂多糖,在200℃以下表现出优良的热稳定性。另外不同产地BDPs单糖组成及分子质量存在较大差异。不同产地BDPs均展现了良好的体外降血糖活性,其中BDPs-I对α-淀粉酶具有显著的抑制效果,抑制率高达67.41%(P<0.05)。此外,不同产地BDPs对GLTy诱导的RIN-m5F胰岛细胞具有良好的保护作用,其中BDPs-I具有最优的细胞增殖活性,可有效清除活性氧水平,显著降低肿瘤坏死因子-α含量。最后,通过相关性分析发现葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等单糖与α-淀粉酶抑制率呈现较强的正相关关系,甘露糖与活性氧之间存在较强的负相关性。本研究为黄刺浆果资源在降血糖活性方面的利用及开发提供一定理论依据。 展开更多
关键词 黄刺多糖 单糖 rin-m5f胰岛细胞 体外降血糖活性 糖脂毒性 相关性分析
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Efficient up-conversion Yb3+, Er3+ co-doped Na5Lu9F32 single crystal for photovoltaic application under solar cell spectrum excitation 被引量:1
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作者 Xiong Zhou Hui Wang +4 位作者 Haiping Xia Hongwei Song Xu Chen Jianxu Hu Baojiu Chen 《Chinese Optics Letters》 SCIE EI CAS CSCD 2019年第9期68-72,共5页
Yb^3+/Er^3+co-doped Na5Lu9F32 single crystals used as a spectral up-converter to improve the power conversion efficiency of perovskite solar cells are prepared via an improved Bridgman approach. Green and red up-conve... Yb^3+/Er^3+co-doped Na5Lu9F32 single crystals used as a spectral up-converter to improve the power conversion efficiency of perovskite solar cells are prepared via an improved Bridgman approach. Green and red up-conversion(UC) emissions under the excitation of near-infrared(NIR) bands of 900–1000 nm and1400–1600 nm can be observed. The effectiveness of the prepared materials as a spectral converter is verified by the enhancement of power conversion efficiency of perovskite solar cells. The sample with a UC layer is 15.5%more efficient in converting sunlight to electricity compared to the UC layer-free sample due to the absorption of sunlight in the NIR range. The results suggest the synthesized Yb^3+/Er^3+co-doped Na5Lu9F32 single crystals are suitable for enhancing the performance of perovskite solar cells. 展开更多
关键词 Na5Lu9f32 photovoltaic application solar cell SPECTRUM EXCITATION
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PARP-1抑制剂在游离脂肪酸诱导胰岛细胞凋亡中的作用 被引量:1
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作者 潘玉琴 曾庆娣 +3 位作者 许向红 何帮顺 毛晓明 王书奎 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期291-295,326,共6页
目的:探讨PARP-1抑制剂3-氨基苯酰胺(3-Aminobenzamide,3-AB)在游离脂肪酸棕榈酸诱发的胰岛细胞凋亡和坏死中的作用。方法:常规培养RIN-m5F细胞株,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察棕榈酸和PARP-1抑制剂3-AB作用后细胞的增殖情况,并... 目的:探讨PARP-1抑制剂3-氨基苯酰胺(3-Aminobenzamide,3-AB)在游离脂肪酸棕榈酸诱发的胰岛细胞凋亡和坏死中的作用。方法:常规培养RIN-m5F细胞株,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察棕榈酸和PARP-1抑制剂3-AB作用后细胞的增殖情况,并用流式细胞术及TUNEL法分析细胞凋亡和坏死。结果:棕榈酸明显抑制RIN-m5F细胞的增殖(P<0.01);低浓度3-AB与棕榈酸共同孵育24h后细胞的凋亡率和坏死率显著低于棕榈酸单独培养(P<0.01);高浓度3-AB与棕榈酸共同孵育后较棕榈酸单独培养时细胞凋亡率显著性增强(P<0.01)。结论:低浓度3-AB能有效抑制棕榈酸所诱导的胰岛细胞株RIN-m5F细胞坏死,缓解细胞凋亡;而高浓度3-AB则促进细胞凋亡。进一步说明了3-AB在棕榈酸所诱导的胰岛细胞凋亡过程中具有双重作用,此可为2型糖尿病的治疗提供一个新的靶点。 展开更多
关键词 PARP-1 3-氨基苯酰胺 棕榈酸 rin-m5f细胞 2型糖尿病
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GIP受体激动剂类药物筛选模型的构建
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作者 周海燕 吴艳阳 +1 位作者 刘东波 谢红旗 《激光生物学报》 CAS 2017年第6期534-539,共6页
目的:GIP受体激动剂类药物筛选模型的构建。方法:GIP受体激动剂能刺激胰岛素分泌,可作为治疗Ⅱ型糖尿病的潜在药物,因此,GIP受体激动剂的筛选模型十分重要。本研究采用PCR的方法扩增GIPR基因,将扩增产物酶切回收后与表达载体pCMV6-AC-GF... 目的:GIP受体激动剂类药物筛选模型的构建。方法:GIP受体激动剂能刺激胰岛素分泌,可作为治疗Ⅱ型糖尿病的潜在药物,因此,GIP受体激动剂的筛选模型十分重要。本研究采用PCR的方法扩增GIPR基因,将扩增产物酶切回收后与表达载体pCMV6-AC-GFP连接,构建pCMV6-AC-GIPR-GFP重组质粒,转化大肠杆菌DH5α经菌落扩增、质粒提取及序列测序重组质粒;利用脂质体lipofectamine2000转染重组质粒到RIN-m5F细胞中,通过抗生素G418筛选,挑单克隆得到稳定的RIN-m5F/GIPR-GFP细胞株。结果:结果表明PCR扩增获得长度为1 319 bp的GIPR基因,克隆至pCMV6-AC-GFP真核表达载体,经菌落PCR酶切鉴定及序列分析后,证实质粒pCMV6-AC-GIPR-GFP构建成功;通过荧光显微镜观察到细胞内荧光分布均匀,表明重组质粒成功转到RINm5F细胞中。该细胞株经阳性对照(D-Ala^2)GIP处理后,与对照组对比,具有荧光斑点聚集。结论:因此,GIP受体激动剂筛选模型RIN-m5F/GIPR-GFP成功构建,可用于筛选新的GIP受体激动剂,为糖尿病药物开发提供新的筛选模型。 展开更多
关键词 GIP受体激动剂 药物筛选模型 GfP rin-m5f 质粒转染
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黄刺多糖工艺优化及其对过氧化氢损伤的胰岛β细胞的保护作用 被引量:1
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作者 邓永蓉 韩丽娟 +3 位作者 岳庆明 漆莹 马娜娜 赵玉欣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期146-156,共11页
为研究黄刺粗多糖(Berberi dasystachya polysaccharides,BDPs)对H_(2)O_(2)诱导的RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用,以黄刺浆果为原料,通过单因素试验和响应面Box-Behnken设计实验优化超声波辅助酶解提取黄刺果实多糖的工艺。采用高效体... 为研究黄刺粗多糖(Berberi dasystachya polysaccharides,BDPs)对H_(2)O_(2)诱导的RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用,以黄刺浆果为原料,通过单因素试验和响应面Box-Behnken设计实验优化超声波辅助酶解提取黄刺果实多糖的工艺。采用高效体积排阻色谱、离子色谱、扫描电镜及刚果红实验对BDPs理化性质进行分析,以H_(2)O_(2)诱导RIN-m5F细胞建立氧化应激损伤模型,通过CCK-8法测定细胞存活率,DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量探讨BDPs对氧化损伤细胞的保护作用。结果表明,当加酶量为1.25%(质量分数),酶解时间57 min,酶解温度45℃,超声波功率164 W时,黄刺多糖提取得率为(3.478±0.075)%,与预测值3.451%相近。此外,BDPs的重均分子质量为10.2 kDa,主要由岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸以及葡萄糖醛酸组成(摩尔比为1∶42.2∶32.6∶11.8∶4.4∶56.1∶5.1∶1.8)。刚果红实验结果表明,BDPs具有三螺旋结构。细胞实验结果表明,H_(2)O_(2)能够导致RIN-m5F细胞的氧化损伤,与模型组相比,经0.0625~0.5 mg/mL的BDPs干预后的细胞存活率增加(P<0.05),ROS、MDA水平呈下降趋势。BDPs能够提高细胞SOD、CAT活性,并且呈一定量效关系。综上所述,BDPs在一定剂量范围内可以提高细胞存活率,对H_(2)O_(2)诱导的氧化损伤具有保护作用,研究结果可为黄刺多糖功能研究提供参考。 展开更多
关键词 黄刺多糖 抗氧化 rin-m5f细胞 氧化应激
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黄芪多糖配伍小檗碱对胰腺RIN-m5f细胞脂质沉积的调控作用
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作者 雷文静 毛竹君 《中华中医药杂志》 CAS 2024年第11期6080-6083,共4页
目的:探讨黄芪多糖(AP)联合小檗碱(BBR)对胰腺RIN-m5f细胞脂质沉积的调控作用。方法:将RIN-m5f细胞分成对照组、模型组和AP-BBR组。高浓度葡萄糖与棕榈酸诱导RIN-m5f细胞建立高糖高脂(HFHS)细胞模型。对照组细胞常规培养,不做任何干预;... 目的:探讨黄芪多糖(AP)联合小檗碱(BBR)对胰腺RIN-m5f细胞脂质沉积的调控作用。方法:将RIN-m5f细胞分成对照组、模型组和AP-BBR组。高浓度葡萄糖与棕榈酸诱导RIN-m5f细胞建立高糖高脂(HFHS)细胞模型。对照组细胞常规培养,不做任何干预;模型组进行HFHS细胞造模;AP-BBR组进行造模,经AP与BBR按质量比为1∶1混匀后干预24 h。采用油红O染色法检测脂肪变性程度,CCK8法检测RIN-m5f细胞活力;流式细胞术检测RIN-m5f细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,模型组细胞脂滴明显增多,细胞存活率显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与模型组比较,AP-BBR组细胞脂滴明显减少,细胞存活率显著升高(P<0.01),细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:AP-BBR对胰腺RIN-m5f细胞脂质沉积有改善作用。 展开更多
关键词 黄芪多糖 小檗碱 配伍 2型糖尿病 胰腺 rin-m5f细胞 脂质沉积
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细柱五加叶中凹脉鹅掌柴酸通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号保护胰岛β细胞研究
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作者 鲁曼霞 杨阳 +2 位作者 卢茂芳 罗姣 刘向前 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1008-1014,共7页
目的基于通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号通路,研究细柱五加叶(Acanthopanax gracilistylus W.W.Smith)中凹脉鹅掌柴酸(impressic acid)的胰岛β细胞保护作用。方法运用炎症细胞因子IL-1β和IFN-γ诱导RIN-m5F细胞建立2型糖尿病细胞模型;采... 目的基于通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号通路,研究细柱五加叶(Acanthopanax gracilistylus W.W.Smith)中凹脉鹅掌柴酸(impressic acid)的胰岛β细胞保护作用。方法运用炎症细胞因子IL-1β和IFN-γ诱导RIN-m5F细胞建立2型糖尿病细胞模型;采用MTT法对细胞毒性进行评价;采用ELISA法测胰岛素分泌评价胰岛细胞功能;采用Griess法测定导致胰岛β细胞的凋亡的关键物质一氧化氮(NO)水平;采用Caspase-3活性检测法检测Caspase-3水平;检测细胞内活性氧物质(reactive oxygen species,ROS)水平;并采用Western blot法检测相关蛋白(iNOS、NF-κB)的表达。结果细柱五加叶中提取的凹脉鹅掌柴酸(5~20μmol·L^(-1))无细胞毒性,并且能够通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号通路以浓度依赖的方式恢复细胞因子IL-1β和IFN-γ诱导RIN-m5F细胞凋亡、下调NF-κB表达,下调iNOS表达,降低NO水平,抑制细胞凋亡剪切酶Caspase-3活性,下调活性氧物质ROS水平保护胰岛素β细胞。结论凹脉鹅掌柴酸(5~20μmol·L^(-1))能够通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号通路对胰岛β细胞起到保护作用,从而抗2型糖尿病进展。 展开更多
关键词 凹脉鹅掌柴酸 rin-m5f细胞 一氧化氮 caspase-3 活性氧 Nf-κB-iNOS-NO
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4-苯基丁酸对棕榈酸诱导的胰岛β细胞内质网应激的效应 被引量:1
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作者 于平 孙琦 +2 位作者 潘慧 安芳 朱惠娟 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第14期2004-2006,共3页
目的探讨4-苯基丁酸(4-PBA)对棕榈酸诱导的大鼠RIN-m5F细胞内质网应激(ERS)的效应。方法大鼠RIN-m5F细胞用基础培养基孵育24 h,转为无糖1640培养基,孵育24 h,加入1 mmol/L棕榈酸及不同浓度4-PBA共孵育24 h。QT-PCR(实时荧光定量聚合酶... 目的探讨4-苯基丁酸(4-PBA)对棕榈酸诱导的大鼠RIN-m5F细胞内质网应激(ERS)的效应。方法大鼠RIN-m5F细胞用基础培养基孵育24 h,转为无糖1640培养基,孵育24 h,加入1 mmol/L棕榈酸及不同浓度4-PBA共孵育24 h。QT-PCR(实时荧光定量聚合酶链反应)检测4-PBA处理前后ERS相关因子GRP78、CHOP及caspase3mRNA的表达变化。蛋白免疫印迹方法(Western blotting)测定相应蛋白的表达水平。结果棕榈酸刺激后细胞内GRP78、CHOP及caspase3 mRNA表达水平增加。10 mmol/L 4-PBA处理后,CHOP、caspase3表达量降低;蛋白免疫印迹结果显示,棕榈酸刺激后CHOP、caspase3蛋白表达增加,10 mmol/L4-PBA处理后表达降低。结论 4-PBA可能通过CHOP途径减轻RIN-m5F细胞的ERS,对细胞凋亡具有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 内质网应激 4-苯基丁酸 rin-m5f细胞 实时荧光定量聚合酶链反应 蛋白免疫印迹
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