用感染病毒细胞超微结构的差异区分RMV及TMV株系

通过透射电镜观察被长叶车前草花叶病毒(RMV)和烟草花叶病毒(TMV)不同株系感染的普通烟叶肉细胞的超微结构,发现两种病毒的粒子分布、内含体类型、被感染细胞超微结构的病变均存在差异.病毒粒子分布有成束、分散、环状、膜包被及角状成层或平行成层排列等类型,存在于细胞质及液泡中,但未见于细胞核、线粒体及叶绿体等细胞器中.内含体的X-小管形状有长杆状、短杆状及颗粒状,数量各异.细胞壁常引起增厚、结构松散及扭曲等变化.叶绿体聚集成堆或分布于细胞边缘,其数量、大小、形状及所含淀粉粒、嗜锇颗粒等存在差异,有些还有颗粒状物质积累.线粒体及内质网等在不同株系间也存在差异.本项研究表明,被感染细胞超微结构的差异可作为RMV和TMV株系区分的依据.

中国MBA商业伦理教育的RMV范式构建研究

基于我国MBA商业伦理教育现状的分析,提出并阐述了MBA商业伦理教育的RMV范式。该范式中,商业伦理教育分为三个层次,分别为责任伦理层次(R,Responsibility)、道德伦理层次(M,Moral)和价值伦理层次(V,Value),并给出各层次商业伦理教育所应该匹配的不同教学手段与教学内容。其中,责任伦理层次教育致力于构建基于外部压力的伦理行为的动力机制,道德伦理层次教育致力于构建基于利益驱动的伦理行为的动力机制,而价值伦理层次教育则致力于构建基于内在追求的伦理行为的动力机制。在每一层次的商业伦理教育中,为MBA学员提供解决实际伦理困境的伦理决策技能与工具都是关键。

基于RMV的CaSiO_3多孔介质热质传递机理研究

基于粗宏观表征体元RMV,建立了CaSiO3多孔介质"三箱"模型,即:黑箱模型、灰箱模型和白箱模型。推导了"三箱"传热物理模型下,导热系数计算的数学模型。数值计算了101.325 k Pa、400 K的过热水蒸气在CaSiO3粗宏观表征体元中传递时的导热系数。数值模拟了孔隙率为30%和70%的CaSiO3灰箱传热模型温度场分布。结果表明,导热系数随孔隙率增大而减小,导热系数随孔隙通道分布系数和迂曲度增大而增大。研究结果对CaSiO3多孔介质及其它功能材料多孔介质热质传递机理研究具有重要的理论价值和工程应用意义。

强迫冷却重负荷RMV型电阻器

电牵引机车动车的起动和制动电阻器,需要满足机车特殊的要求。在设计时采取增加冷却的方法来达到高的负载能力。用弹簧固定电阻带,能使电阻器获得良好的可靠性。下面对RMV型电阻器的设计,用实例加以说明。

大鼠细小病毒双重PCR检测方法的建立

目的建立快速检测大鼠细小病毒的PCR方法。方法根据大鼠细小病毒基因序列的特点,建立鉴别检测大鼠细小病毒(RPV)与其他三种大鼠细小病毒(H-1、KRV、RMV)的双重PCR方法。根据RPV核酸序列的性质,在VP2基因筛选了一对用于特异扩增RPV株的引物,在NS1基因设计了一对用于特异性扩增H-1、KRV和RMV的引物。结果两对引物组成的二重PCR方法可以特异性的扩增RPV而不扩增核酸同源性高的小鼠细小病毒和多种其他病原微生物;敏感性实验表明,二重PCR的最低检测限可达1 000拷贝/μL。双重PCR结合测序在检测23份临床样本中,检测出7份RMV阳性,包括1份与RPV共感染阳性样本。结论本研究建立的检测RPV的双重PCR方法具有特异性好、灵敏度高及操作简单等优点,是一种简便、可靠的检测方法。

用A蛋白免疫电镜快速检测几种蔬菜作物的两种杆状病毒

应用Ａ蛋白免疫电镜技术对几种蔬菜作物的长叶车前草花叶病毒（ＲＭＶ）、烟草花叶病毒（ＴＭＶ）的检测比常规的电镜负染技术至少要灵敏近１０，０００倍，比普通的免疫电镜技术要灵敏１０～１００倍，抗血清浓度稀释至４００，０００倍，病毒粗提液稀释到１，０００，０００倍或病毒提纯液浓度为２．５×１０－７ｍｇ／ｍｌ时均能观察到病毒粒子。同时由于抗体分子能特异性地结合到病毒粒子表面，能够很容易地区分不同的病毒种类。应用此项技术作者检测了杭州地区几种常见的蔬菜病毒病，对大白菜（ＢｒａｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＬ．），蕃茄（ＬｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍＭｉｌ），榨菜（Ｂｒａｓｉｃａｊｕｎｃｅａｖａｒ．ｔｓａｔｓａｉＭａｏ），雪里（Ｂｒａｓｉｃａｊｕｎｃｅａｖａｒ．ｍｕｌｔｉｃｅｐｓＴｓｅｎｅｔＬｅｅ）等作物发病期的叶或果的浸提液用Ａ蛋白免疫电镜进行快速检测，结果在大白菜，番茄等病株上检测到较多的病毒粒子，且大多能被ＲＭＶ抗血清修饰，同时在番茄病株检测到的少量病毒粒子亦能被ＴＭＶ抗血清修饰，而榨菜及雪里等病株上检测到的病毒粒子很少能被ＲＭＶ及ＴＭＶ抗血清所修饰，另外，病毒粒子的含量以番茄病果中为最高。

大鼠微小病毒和细小病毒双重荧光定量PCR检测方法建立

目的建立快速、准确地同时检测和鉴别大鼠细小病毒(RPV)和大鼠微小病毒(RMV)的双重TaqMan实时荧光定量PCR方法。方法根据GenBank中已公布的RMV NTU1株全基因组序列(JX627317.1),在1 705～1 808 nt处设计引物和TaqMan探针,根据RPV NTUI毒株的全基因组序列(JX827169),在863-967nt处设计引物和TaqMan探针。以构建的质粒参考物为模板建立荧光定量PCR检测方法,并对该鉴别检测方法的灵敏度、稳定性和特异性进行评价;用建立的荧光定量方法对50份临床样品进行检测,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)的商品试剂盒进行验证。结果建立的RMV和RPV的鉴别荧光定量PCR方法标准曲线的线性关系良好,R2值可达0.99,最低检测限均为10拷贝数/μL;应用鉴别荧光定量PCR方法和ELISA检测试剂盒,对100份大鼠肝脏和50份血清样品病料进行检测,结果均为阴性。结论建立的RMV和RPV的TaqMan实时荧光定量PCR方法具有特异、灵敏的特点,适用于RMV和RPV的临床监测。

阿尔斯通获得德国氢能源列车订单

2019年5月21日,法国阿尔斯通公司宣布中标德国莱茵美茵区域公交公司(RMV)27列氢能源列车采购订单,项目总价值约5亿欧元。其中,阿尔斯通获得3.6亿欧元。全新的氢能源列车将取代4条区域列车线路上的内燃列车。

重组麻疹病毒沪191株反向遗传系统的建立

目的构建麻疹减毒病毒(Measles virus,MV)沪191(MV-S191)株感染性cDNA,以绿色荧光蛋白(eGFP)为靶标,选择外源基因插入区域,建立反向遗传系统重组病毒载体疫苗技术平台。方法提取MV-S191基因组RNA,逆转录获得cDNA,以PCR法分8段扩增麻疹病毒全长基因组cDNA,通过Gibson法连接各片段构建全长基因组cDNA,并将其克隆至pBR322质粒,获得pMV-S191。在pMV-S191的P、M或H、L基因间区域插入eGFP,获得pMV2-eGFP、pMV3-eGFP。同时构建pcDNA-N、P、L3个辅助质粒分别表达麻疹病毒核蛋白(N)、磷酸化蛋白(P)和依赖RNA的RNA聚合酶(L)。将pMV-S191、pMV2-EGFP和pMV3-EGFP分别与辅助质粒通过脂质体lipofectamine 2000共转染BSR-T7/5细胞,5d后取上清及细胞裂解液感染Vero细胞,收获重组病毒。结果通过反向遗传系统成功获得麻疹病毒疫苗株拯救株rMV-S191,感染Vero细胞后,在显微镜下观察到有合胞体形成。通过无缝克隆的方式,将eGFP基因克隆至pMV-S191中,成功获得pMV2-eGFP、pMV3-eGFP,按照相同的方法共转染获得rMV2-eGFP和rMV3-eGFP,将其分别感染Vero细胞,在显微镜下均可观察到形成的麻疹病毒合胞体,且在荧光显微镜下可观察到表达的绿色荧光蛋白。结论成功建立MV-S191的反向遗传系统并确定外源基因的插入位点,为以麻疹病毒为载体新型疫苗的研发奠定了基础。