RNA干扰低分子重量蛋白2基因对脑缺血大鼠血脑屏障的影响

目的观察RNA干扰免疫蛋白酶体亚基低分子重量蛋白2(LMP2)对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障结构相关蛋白闭合蛋白(Occludin)和闭锁小带蛋白(ZO^(-1))表达的影响。方法线栓法制作SD大鼠大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO)模型,脑缺血1 h再灌注72 h。按照体重将SD大鼠随机分为3组:假手术组、实验组和对照组,每组10只。在MCAO术前1 h,实验组和对照组分别立体定位地脑内注射慢病毒载体LMP2-shRNA和阴性对照shRNA液体。以免疫印迹法分析Occludin、ZO^(-1)蛋白表达,用伊文思蓝(EB)示踪法监测血脑屏障损伤程度。结果 Occludin蛋白与ZO^(-1)蛋白的灰度值:假手术组、对照组和实验组分别1.76±0.09,1.37±0.12;0.24±0.07,0.26±0.07;0.83±0.11,0.74±0.09,与假手术组比较,对照组差异均有统计学意义(均P<0.001);与对照组比较,实验组差异也均有统计学意义(均P<0.001)。脑组织EB含量:假手术组、对照组和实验组分别(3.32±0.14),(11.41±0.21),(6.23±0.28)μg·g^(-1),与假手术组比较,对照组差异有统计学意义(P<0.001);与对照组比较,实验组差异也有统计学意义(P<0.001)。结论沉默LMP2基因表达可显著改善大鼠脑缺血后血脑屏障透通性。