【目的】建立人IFN‐λ1‐3型mRNA实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT‐PCR)检测方法。【方法】根据人IFN‐λ1‐3型mRNA的基因序列合成特异性引物及探针,用体外转录方法制备IFN‐λ1‐3型的mRNA标准品,建立人IFN‐λ1‐3型mRNA qRT‐...【目的】建立人IFN‐λ1‐3型mRNA实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT‐PCR)检测方法。【方法】根据人IFN‐λ1‐3型mRNA的基因序列合成特异性引物及探针,用体外转录方法制备IFN‐λ1‐3型的mRNA标准品,建立人IFN‐λ1‐3型mRNA qRT‐PCR检测方法。【结果】IFN‐λ1‐3型RNA标准品与对应的CT 值有良好的线性关系;扩增效率均在90%~100%之间;灵敏度分别是:1×10^0 co pies/μL、1×10^1 co pies/μL、1×10^1 co pies/μL ;变异系数均小于2%;各型间交叉反应不明显。【结论】本研究建立的IFN‐λ1‐3型mRNA qRT‐PCR检测方法灵敏度高,具有良好的重复性及特异性。展开更多
文摘【目的】建立人IFN‐λ1‐3型mRNA实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT‐PCR)检测方法。【方法】根据人IFN‐λ1‐3型mRNA的基因序列合成特异性引物及探针,用体外转录方法制备IFN‐λ1‐3型的mRNA标准品,建立人IFN‐λ1‐3型mRNA qRT‐PCR检测方法。【结果】IFN‐λ1‐3型RNA标准品与对应的CT 值有良好的线性关系;扩增效率均在90%~100%之间;灵敏度分别是:1×10^0 co pies/μL、1×10^1 co pies/μL、1×10^1 co pies/μL ;变异系数均小于2%;各型间交叉反应不明显。【结论】本研究建立的IFN‐λ1‐3型mRNA qRT‐PCR检测方法灵敏度高,具有良好的重复性及特异性。