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妊娠期高血压病患者血清DNMT1 mRNA和LncRNA UCA1水平表达与妊娠结局的关系
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作者 侯书利 张金玲 +1 位作者 李燕 李晓晓 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第5期47-53,共7页
目的分析妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy,HDCP)患者血清DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)信使RNA(messenger RNA,mRNA)、长链非编码RNA(long non-codingRNA,LncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(ur... 目的分析妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy,HDCP)患者血清DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)信使RNA(messenger RNA,mRNA)、长链非编码RNA(long non-codingRNA,LncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(urothelial carcinoembryonic antigen 1,UCA1)水平与妊娠结局的关系。方法选取2021年3月~2023年8月在邯郸市妇幼保健院诊治的HDCP患者195例为病例组、健康妊娠孕妇195例为对照组。收集所有孕妇临床资料并检测分娩前1天生化指标;荧光定量PCR法检测血清DNMT1 mRNA,LncRNA UCA1水平;根据病情将病例组分为妊娠期高血压(pregnancy induced hypertension,PIH)组、轻度子痫前期(preeclampsia,PE)组、重度PE组;根据HDCP患者分娩时不良妊娠结局情况分为妊娠结局良好组和妊娠结局不良组;比较对照组和病例组临床资料和生化指标、血清DNMT1 mRNA,LncRNA UCA1水平;比较不同严重程度HDCP患者血清DNMT1mRNA和LncRNA UCA1水平;比较不同妊娠结局HDCP患者临床资料和生化指标、血清DNMT1 mRNA和LncRNAUCA1水平;分析HDCP患者血清DNMT1 mRNA与LncRNA UCA1的相关性,影响HDCP患者妊娠结局的因素,血清DNMT1 mRNA和LncRNA UCA1对HDCP患者发生不良妊娠结局的预测价值。结果与对照组比较,病例组收缩压、舒张压、白细胞计数水平明显升高,血清DNMT1 mRNA(0.72±0.18 vs 1.00±0.04),LncRNA UCA1(0.61±0.16vs 1.00±0.02)水平明显降低,差异具有统计学意义(t=40.651,32.595,7.837,21.205,33.775,均P<0.001);PIH组、轻度PE组、重度PE组血清DNMT1 mRNA(0.85±0.20,0.74±0.18,0.50±0.15),LncRNA UCA1(0.77±0.18,0.58±0.16,0.43±0.13)水平依次降低,差异具有统计学意义(F=52.687,64.030,均P<0.001);HDCP患者血清DNMT1 mRNA与LncRNA UCA1呈正相关(r=0.582,P<0.001);与妊娠结局良好组比较,妊娠结局不良组HDCP严重程度较高,收缩压、舒张压、白细胞计数水平明显升高,血清DNMT1 mRNA(0.80±0.20 vs 0.59±0.15),LncRNA UCA1(0.72±0.17 vs 0.43±0.14)水平明显降低,差异具有统计学意义(χ^(2)=18.386,t=2.615~12.290,均P<0.05);重度PE[OR(95%CI)=1.708(1.193~2.445)]、收缩压[OR(95%CI)=1.495(1.090~2.049)]、舒张压[OR(95%CI)=1.621(1.076~2.442)]是影响HDCP患者发生不良妊娠结局的危险因素,DNMT1 mRNA[OR(95%CI)=0.833(0.725~0.957)],LncRNA UCA1[OR(95%CI)=0.796(0.696~0.909)]是影响HDCP患者发生不良妊娠结局的保护因素(均P<0.05);DNMT1 mRNA和LncRNA UCA1二者联合预测HDCP患者发生不良妊娠结局的曲线下面积(area under curve,AUC)大于DNMT1 mRNA及LncRNA UCA1单独预测的AUC(0.926 vs 0.832,0.844),差异具有统计学意义(Z=2.932,2.345,均P<0.05)。结论HDCP患者血清DNMT1 mRNA和LncRNA UCA1水平均较低,与病情程度、妊娠结局相关,DNMT1 mRNA联合LncRNA UCA1检测对不良妊娠结局有较佳预测效能。 展开更多
关键词 妊娠期高血压疾病 DNA甲基转移酶1信使rna 长链非编码rna尿路上皮癌胚抗原1 妊娠结局
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视网膜母细胞瘤患儿血清LncRNA-NEAT1水平表达及对瘤细胞生物学功能的影响
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作者 罗文 罗钢 +4 位作者 周玉玲 胡佩宏 张青林 王莎莎 明媚 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第3期115-119,151,共6页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)核富集转录体1(nuclera-enriched autosomaltranscript,NEAT1)在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)患儿血清中表达,以及下调Rb细胞Y79中NEAT1对细胞生物学功能的影响。方法以2015年3... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)核富集转录体1(nuclera-enriched autosomaltranscript,NEAT1)在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)患儿血清中表达,以及下调Rb细胞Y79中NEAT1对细胞生物学功能的影响。方法以2015年3月~2021年3月鄂东医疗集团黄石市中心医院诊疗的83例Rb患儿为研究对象,同期,在儿童保健中心选取健康儿童50例(对照组),实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测血清中NEAT1表达,分析Rb患儿和对照组血清NEAT1表达差异,以及不同临床指标Rb患者血清中NEAT1表达差异。培养Y79细胞并分为si-NEAT1组(转染NEAT1的干扰序列)、si-NC组(转染对照序列)和Ctl组(仅加入转染试剂),分别使用qRT-PCR,MTT,流式细胞术和Transwell检测NEAT1表达、细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭情况。结果Rb患儿血清中NEAT1表达量(1.43±0.28)高于对照组(1.01±0.21),差异具有统计学意义(t=9.116,P<0.001);国际视网膜母细胞瘤分期(Intraocular International Retinoblastoma classificaton,IIRC)CDE期、低分化、视神经浸润和淋巴结转移的Rb患儿血清中NEAT1表达量明显高于AB期、中高分化、未发生视神经浸润和淋巴结转移的Rb患儿,差异具有统计学意义(t=2.190~3.693,均P<0.05);血清中NEAT1表达诊断Rb曲线下面积为0.882(95%CI:0.826~0.937),当NEAT1表达量取1.20时,灵敏度和特异度分别为80.00%和79.52%;相比于si-NC组(1.03±0.09)和Ctl组(1.02±0.15),si-NEAT1组细胞中NEAT1表达(0.35±0.06)明显降低,差异具有统计学意义(t=14.829,9.994,均P<0.001);si-NEAT1组24,48,72和96 h时吸光度(A值)明显低于si-NC组和Ctl组(tsi-NC=2.796~4.362,tCtl=2.641~5.555,均P<0.05),而细胞凋亡率相比于si-NC组和Ctl组明显升高,差异具有统计学意义(t=4.999,3.915,均P<0.05);与si-NC组和Ctl组比较,si-NEAT1组迁移细胞数(116.50±9.35 vs 132.00±7.32,134.00±7.95)和侵袭细胞数(96.33±8.94 vs 117.67±12.39,119.17±10.05)均降低,差异具有统计学意义(tsi-NC=3.196,3.421,tCtl=3.492,4.159,均P<0.05)。结论Rb患儿血清中NEAT1表达量升高,对Rb患儿具有一定的诊断价值,沉默Y79细胞中NEAT1表达可减少Rb细胞增殖、加速细胞凋亡,同时抑制细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 长链非编码rna 核富集转录体1 细胞增殖 细胞生物学特性
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LncRNA FER1L4与胃癌细胞多药耐药的关系及机制探究
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作者 王亚楠 《河南医学研究》 CAS 2024年第18期3265-3268,共4页
目的探究长链非编码RNA(LncRNA)FER1L4与胃癌细胞多药耐药的关系及潜在机制。方法培养胃癌亲本细胞系SGC7901、SGC7901多柔比星抵抗细胞系(SGC7901/ADR)及SGC7901长春新碱抵抗细胞系(SGC7901/VCR),将SGC7901/ADR分为对照A组及实验A组,SG... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)FER1L4与胃癌细胞多药耐药的关系及潜在机制。方法培养胃癌亲本细胞系SGC7901、SGC7901多柔比星抵抗细胞系(SGC7901/ADR)及SGC7901长春新碱抵抗细胞系(SGC7901/VCR),将SGC7901/ADR分为对照A组及实验A组,SGC7901/VCR分为对照B组及实验B组,SGC7901作为亲本组,通过慢病毒转染法将Plvx-Puro载体转染至亲本组、对照A组及对照B组中,Plvx-FER1L4-Puro载体转染至实验A组及实验B组中;MTT法检测细胞对ADR及VCR的敏感性,实时荧光定量PCR检测细胞中LncRNA FER1L4及三叶因子1(TFF1)mRNA表达,蛋白印迹实验检测TFF1及核因子κB(NF-κB)p65的蛋白表达。结果相比亲本组,对照A组及实验A组ADR半抑制浓度(IC50)增高(P<0.05),且实验A组低于对照A组(P<0.05);相比亲本组,对照B组及实验B组VCR IC50增高(P<0.05),且实验B组低于对照B组(P<0.05);相比亲本组,对照A、B组FER1L4及TFF1表达下调(P<0.05),实验A、B组FER1L4及TFF1表达增高(P<0.05),对照A、B组及实验A、B组p65蛋白表达均增高(P<0.05)。相比对照A、B组,实验A、B组FER1L4及TFF1表达均增高(P<0.05),而p65蛋白降低(P<0.05)。结论LncRNA FER1L4可促进抑癌基因TFF1的表达,抑制胃癌细胞多药耐药能力。 展开更多
关键词 胃癌 化疗抵抗 长链非编码rna FER1l4 三叶因子1
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仙茅苷调节lncRNA KCNQ1OT1/miR-214-5p轴对骨质疏松大鼠骨代谢的影响王勤俭张攀张睿昕李泊泊
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作者 王勤俭 张攀 +1 位作者 张睿昕 李泊泊 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1261-1267,共7页
目的探讨仙茅苷调节长链非编码RNA(lncRNA)KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)/miR-214-5p轴对骨质疏松大鼠骨代谢的改善作用。方法SD大鼠分为对照组、模型组、仙茅苷组、pcDNA组、pcDNA-KCNQ1OT1组、仙茅苷+sh-NC组、仙茅苷+sh-KCNQ1OT1组。EL... 目的探讨仙茅苷调节长链非编码RNA(lncRNA)KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)/miR-214-5p轴对骨质疏松大鼠骨代谢的改善作用。方法SD大鼠分为对照组、模型组、仙茅苷组、pcDNA组、pcDNA-KCNQ1OT1组、仙茅苷+sh-NC组、仙茅苷+sh-KCNQ1OT1组。ELISA法检测血清中骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平;三点弯曲实验检测股骨最大位移、最大载荷;Micro-CT检测骨微结构变化;HE染色检测股骨病理变化;qRT-PCR检测股骨中lncRNA KCNQ1OT1、miR-214-5p表达;验证lncRNA KCNQ1OT1与miR-214-5p的关系。结果与对照组比较,模型组骨小梁结构紊乱,OCN、ALP水平、股骨最大位移、最大载荷、骨密度、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨体积分数及lncRNA KCNQ1OT1表达降低,TNF-α、IL-6水平、miR-214-5p表达升高(P<0.05);与模型组比较,仙茅苷组骨小梁排列间隙变小,OCN、ALP水平、股骨最大位移、最大载荷、骨密度、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨体积分数及lncRNA KCNQ1OT1表达升高,TNF-α、IL-6水平、miR-214-5p表达降低(P<0.05);与pcDNA组比较,pcDNA-KCNQ1OT1组股骨组织病理损伤有所缓解,OCN、ALP水平、股骨最大位移、最大载荷、骨密度、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨体积分数及lncRNA KCNQ1OT1表达升高,TNF-α、IL-6水平、miR-214-5p表达降低(P<0.05);sh-KCNQ1OT1逆转了仙茅苷对骨质疏松症大鼠炎症反应及骨生物力学性能的改善作用以及成骨促进作用;lncRNA KCNQ1OT1靶向调控miR-214-5p。结论仙茅苷可能通过调控lncRNA KCNQ1OT1/miR-214-5p轴改善骨质疏松症大鼠骨代谢。 展开更多
关键词 仙茅苷 长链非编码rna KCNQ1重叠转录物1 miR-214-5p 骨质疏松症
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大麦种子萌发lncRNA-miRNA-mRNA差异表达分析及ceRNA调控网络构建 被引量:1
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作者 张文英 高浩然 +2 位作者 潘锐 常浩雯 徐乐 《长江大学学报(自然科学版)》 2022年第6期94-102,共9页
为解析长链非编码RNA(lncRNA)、microRNA(miRNA)和mRNA如何在ceRNA互作模式下调控大麦种子萌发,揭示大麦(Hordeum vulgare L.)种子萌发转录水平分子调控机制,基于大麦种子萌发相关的RNA-Seq数据,共鉴定出6447个差异表达的mRNA,661个差... 为解析长链非编码RNA(lncRNA)、microRNA(miRNA)和mRNA如何在ceRNA互作模式下调控大麦种子萌发,揭示大麦(Hordeum vulgare L.)种子萌发转录水平分子调控机制,基于大麦种子萌发相关的RNA-Seq数据,共鉴定出6447个差异表达的mRNA,661个差异表达的lncRNA,310个差异表达的miRNA;对差异表达的mRNA和lncRNA进行加权基因共表达网络(WGCNA)分析,各鉴定到1个与大麦种子萌发高度相关的共表达模块。模块内相关基因涉及水分响应、胚发育等生物学过程,以及MAPK信号转导、植物激素信号转导等信号通路。通过对lncRNA/mRNA和miRNA进行靶基因预测,得到168个miRNA-mRNA靶基因对以及310个miRNA-lncRNA靶基因对,进而构建了包含2个子网络的ceRNA调控网络,发现有16个miRNA、38个lncRNA以及18个mRNA可能具有ceRNA功能。最后,利用qRT-PCR验证了2个关系对:HORVU0Hr1G039470-miR2611-MSTRG.21252以及HORVU6Hr1G031480-miR1858-MSTRG.23227。 展开更多
关键词 大麦(Hordeum vulgare l.) 种子萌发 内源竞争性rna调控网络 lncrna Mrna MIrna
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A Novel Approach for Image Encryption with Chaos-RNA 被引量:1
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作者 Yan Hong Shihui Fang +4 位作者 Jingming Su Wanqiu Xu Yuhao Wei Juan Wu Zhen Yang 《Computers, Materials & Continua》 SCIE EI 2023年第10期139-160,共22页
In today’s information society,image encryption technology is crucial to protecting Internet security.However,traditional image encryption algorithms have problems such as insufficient chaotic characteristics,insuffi... In today’s information society,image encryption technology is crucial to protecting Internet security.However,traditional image encryption algorithms have problems such as insufficient chaotic characteristics,insufficient randomness of keys,and insecure Ribonucleic Acid(RNA)encoding.To address these issues,a chaos-RNA encryption scheme that combines chaotic maps and RNA encoding was proposed in this research.The initial values and parameters of the chaotic system are first generated using the Secure Hash Algorithm 384(SHA-384)function and the plaintext image.Next,the Lühyperchaotic system sequence was introduced to change the image’s pixel values to realize block scrambling,and further disturbance is achieved through spiral index sequence to enhance encryption effectiveness.Subsequently,to obtain the final encrypted image,the diffusion is accomplished through different RNA encoding rules and operation rules corresponding to the chaotic sequence generated by an improved one-dimensional chaotic map(1DCM).Here innovatively propose four new RNA operation rules,increasing the difficulty of decryption.Simulation results demonstrate that the normalized pixel change rate(NPCR)and the unified average changed intensity(UACI)values of the tested encrypted images were 99.61%and 33.46%,respectively.The average ciphertext entropy value in the Red Green Blue(RGB)channels were 7.9986,7.991,and 7.991.Furthermore,this algorithm exhibits a low correlation coefficient and enhanced robustness.This encryption method effectively improves the security and reliability of image encryption compared to other similar techniques. 展开更多
关键词 Chaos-rna SHA-384 lühyperchaotic system block scrambling rna diffusion
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猪嵌合RNA BCL2L2-PABPN1剪接调控、表达与亚细胞定位分析
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作者 杨秀芹 张倩 +4 位作者 李佳欣 郝婉君 张晓涵 何鑫淼 庞宇 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期79-87,共9页
相邻基因间顺式剪接(cis-splicing of adjacent gene,cis-SAGe)产生的嵌合RNA在细胞生长、疾病发生等生理活动中发挥重要作用,为探究cis-SAGe剪接调控机制,研究在前期克隆BCL2L2-PABPN1(BP)基础上,利用minigene、定点突变、瞬时转染、... 相邻基因间顺式剪接(cis-splicing of adjacent gene,cis-SAGe)产生的嵌合RNA在细胞生长、疾病发生等生理活动中发挥重要作用,为探究cis-SAGe剪接调控机制,研究在前期克隆BCL2L2-PABPN1(BP)基础上,利用minigene、定点突变、瞬时转染、半定量RT-PCR以及生物信息学分析等方法分析BP转录后剪接的调控元件,发现thyroid hormone receptor exon 9、gh-1 intron 3、srp40-exonic splicing enhancer、β-tropomyosin exon 6b等剪接增强子元件在嵌合子形成中发挥重要作用。同时比较分析BP与两个亲本基因组织表达以及亚细胞定位情况。研究结果将为进一步揭示BP转录后调控机制及功能提供基础。 展开更多
关键词 嵌合rna BCl2l2-PABPN1 剪接 顺式调控元件
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Lnc RNA PVT1通过LATS2对宫颈癌生物学行为及预后的影响
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作者 姜平 杨喜科 +3 位作者 王秋宇 邵兰云 王松朋 付鹏晓 《实验与检验医学》 2023年第5期632-635,共4页
目的探讨长链非编码RNA PVT1(lncRNA PVT1)通过大型肿瘤抑制因子2(LATS2)对宫颈癌生物学行为及预后的影响。方法利用荧光定量实时PCR(qRT-PCR)测定成对的癌及癌旁组织lncRNA PVT1、LATS2的表达。在Hela细胞中转染PVT1 siRNA,观察PVT1下... 目的探讨长链非编码RNA PVT1(lncRNA PVT1)通过大型肿瘤抑制因子2(LATS2)对宫颈癌生物学行为及预后的影响。方法利用荧光定量实时PCR(qRT-PCR)测定成对的癌及癌旁组织lncRNA PVT1、LATS2的表达。在Hela细胞中转染PVT1 siRNA,观察PVT1下调对LATS2表达量的影响。结果lncRNA PVT1在宫颈癌组织中表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.05),LATS2的表达水平明显低于癌旁正常组织(P<0.05),两者表达为负相关。lncRNA PVT1沉默能够显著降低Hela细胞的增殖、迁移、侵袭能力(均P<0.05),并增加Hela细胞的凋亡率(P<0.05)。lncRNAPVT1高表达患者的生存时间明显短于低表达者(P<0.05)。FIGO临床分期、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及ncRNA PVT1表达水平都可作为宫颈癌患者独立的预后因子(P<0.05)。结论lncRNA PVTl能够抑制LATS2表达而增强癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,降低癌细胞的凋亡率,且lncRNA PVTl表达可作为宫颈癌患者独立的预后因子。 展开更多
关键词 l长链非编码rna PVT1 大型肿瘤抑制因子2 宫颈癌 生物学行为 预后
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OsTHA8 encodes a pentatricopeptide repeat protein required for RNA editing and splicing during rice chloroplast development
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作者 Yanwei Wang Yu Duan Pengfei Ai 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2023年第5期1353-1367,共15页
In higher plants, the chloroplast is the most important organelle for photosynthesis and for numerous essential metabolic processes in the cell. Although many genes involved in chloroplast development have been identi... In higher plants, the chloroplast is the most important organelle for photosynthesis and for numerous essential metabolic processes in the cell. Although many genes involved in chloroplast development have been identified, the mechanisms underlying such development are not fully understood. In this study, a rice(Oryza sativa) mutant exhibiting pale green color and seedling lethality was isolated from a mutant library. The mutated gene was identified as an ortholog of THA8(thylakoid assembly 8) in Arabidopsis and maize. This gene is designated as OsTHA8 hereafter. OsTHA8 showed a typical pentatricopeptide repeat(PPR) characteristic of only four PPR motifs. Inactivation of OsTHA8 led to a deficiency in chloroplast development in the rice seedling stage. OsTHA8 was expressed mainly in young leaves and leaf sheaths.The OsTHA8 protein was localized to the chloroplast. Loss of function of OsTHA8 weakened the editing efficiency of ndhB-611/737 and rps8-182 transcripts under normal conditions. Y2H and BiFC indicated that OsTHA8 facilitates RNA editing by forming an editosome with multiple organellar RNA editing factor(OsMORF8) and thioredoxin z(OsTRXz), which function in RNA editing in rice chloroplasts. Defective OsTHA8 impaired chloroplast ribosome assembly and resulted in reduced expression of PEP-dependent genes and photosynthesis-related genes. Abnormal splicing of the chloroplast gene ycf3 was detected in ostha8. These findings reveal a synergistic regulatory mechanism of chloroplast biogenesis mediated by RNA, broaden the function of the PPR family, and shed light on the RNA editing complex in rice. 展开更多
关键词 Oryza sativa l. Chloroplast biogenesis Pentatricopeptide repeat protein rna editing rna splicing
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微小RNA-26b-5p对缺血性心律失常大鼠心房肌细胞L型钙通道的影响
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作者 丁莹 王晶予 +1 位作者 汤天凤 郑丹丹 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期1088-1092,共5页
目的探讨微小RNA(miR)-26b-5p对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸(PIP3)信号通路的调控作用以及对缺血性心律失常大鼠心房肌细胞L型钙通道的影响。方法选择SD大鼠72只,按照随机数表法分为假手术组、模型组、LY294002组、... 目的探讨微小RNA(miR)-26b-5p对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸(PIP3)信号通路的调控作用以及对缺血性心律失常大鼠心房肌细胞L型钙通道的影响。方法选择SD大鼠72只,按照随机数表法分为假手术组、模型组、LY294002组、阴性对照组、过表达组、联合组,每组12只。各组给予相应干预24h,除假手术组外的其余各组大鼠建立缺血性心律失常模型,假手术组大鼠仅开胸不结扎。建模过程中检测各组大鼠心律失常指标,采用Curtis-Walker评分法进行心律失常评分;荧光定量PCR法检测心房肌细胞中miR-26b-5p表达;全细胞膜片钳技术记录心房肌细胞L型钙通道电流(ICa-L);蛋白印迹法检测L型钙通道α1C亚基(CACNA1C)、钙调蛋白及PI3K/PIP3通路相关蛋白表达。结果与模型组比较,LY294002组大鼠左心室室性期前收缩次数、室性心动过速持续时间、心室颤动持续时间、心律失常评分、心房肌细胞ICa-L峰值密度绝对值、CACNA1C、钙调蛋白表达显著升高,磷酸化PI3K、PIP3、磷酸化蛋白激酶B(Akt)表达显著降低,过表达组大鼠左心室室性期前收缩次数、室性心动过速持续时间、心室颤动持续时间、心律失常评分、心房肌细胞ICa-L峰值密度绝对值、CACNA1C、钙调蛋白表达显著降低,miR-26b-5p、磷酸化PI3K、PIP3、磷酸化Akt表达显著升高(P<0.05)。与过表达组比较,联合组大鼠左心室室性期前收缩次数、室性心动过速持续时间、心室颤动持续时间、心律失常评分、心房肌细胞ICa-L峰值密度绝对值、CACNA1C、钙调蛋白表达显著升高,磷酸化PI3K、PIP3、磷酸化Akt表达显著降低(0.82±0.08vs1.09±0.11,0.91±0.09vs1.17±0.11,0.94±0.09vs1.20±0.12,P<0.05)。结论miR-26b-5p过表达可能通过激活PI3K/PIP3相关信号通路,阻滞缺血性心律失常大鼠心房肌细胞L型钙通道,改善心律失常表现。 展开更多
关键词 心律失常 心性 钙通道 l 磷酸肌醇3-激酶类 微小rna26b-5p
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基于lncRNA/mRNA表达谱探讨百事乐胶囊调控慢性应激抑郁症模型大鼠海马损伤的机制 被引量:1
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作者 刘彤彤 侯光菡 +7 位作者 蔺晓源 杨蕙 刘检 张熙 王枭冶 王宇红 葛金文 孟盼 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期312-321,共10页
目的基于长链非编码RNA(lncRNA)/信使RNA(mRNA)表达谱探讨百事乐胶囊(贯叶金丝桃、人参、姜黄)调控慢性应激抑郁症模型大鼠海马损伤的可能机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组及百事乐胶囊高、低剂量组(2.88、0.72 g·kg^(-1... 目的基于长链非编码RNA(lncRNA)/信使RNA(mRNA)表达谱探讨百事乐胶囊(贯叶金丝桃、人参、姜黄)调控慢性应激抑郁症模型大鼠海马损伤的可能机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组及百事乐胶囊高、低剂量组(2.88、0.72 g·kg^(-1)),每组8只;采用28 d慢性温和不可预测性应激联合孤养的方式构建抑郁症大鼠模型,造模同时灌胃给药,每日1次。采用开野试验和新奇摄食试验评价大鼠模型的抑郁样行为;采用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的水平;采用高通量芯片测序筛选出组间差异的海马组织lncRNA/mRNA表达谱,预测差异表达的lncRNA靶基因,并取lncRNA、mRNA的差异共集基因;对差异共集基因进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析;采用Western Blot法验证差异性蛋白胰岛素生长因子2(Igf2)、核糖体蛋白L36(Rpl36)的表达情况。结果(1)与空白组比较,模型组大鼠4 min内的水平、垂直活动量均显著降低(P<0.01),摄食潜伏期显著延长(P<0.01),血清TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,百事乐胶囊高剂量组大鼠的水平、垂直活动量明显增加(P<0.05,P<0.01),摄食潜伏期显著缩短(P<0.01),血清TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。(2)模型组与空白组比较,差异共集基因有152个,其中上调100个,下调52个;百事乐胶囊高剂量组与模型组比较,差异共集基因有150个,其中上调88个,下调62个;百事乐胶囊低剂量组与模型组比较,差异共集基因有119个,其中上调58个,下调61个。Igf2、Rpl36为百事乐胶囊高剂量组的主要逆向调节基因。百事乐胶囊主要调控与生物学过程(突触化学传递)和细胞组分(细胞连接)密切相关的差异共集基因的表达,可能通过影响MAPK信号转导通路、胰岛素信号改善抑郁症模型大鼠的海马损伤。(3)与空白组比较,模型组大鼠海马组织Igf2、Rpl36蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,百事乐胶囊高剂量组大鼠海马组织Igf2、Rpl36蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论百事乐胶囊可能通过影响差异共集基因Igf2介导的MAPK信号途径和胰岛素信号途径,调控神经元的存活及突触可塑性,以及可能通过Rpl36减少神经元凋亡,从而发挥抗抑郁作用。 展开更多
关键词 百事乐胶囊 抑郁症 长链非编码rna/信使rna表达谱 海马损伤 胰岛素生长因子2 核糖体蛋白l36 大鼠
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长链非编码RNA FER1L4在肝细胞癌中调节miR-106a-5p发挥抑癌因子作用的研究 被引量:1
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作者 侯双双 冯辉 +3 位作者 汪强 高治华 骆东峰 吴惧 《中国现代普通外科进展》 CAS 2023年第2期93-97,共5页
目的:探讨长链非编码RNA FER1L4(lncRNA FER1L4)调节miR-106a-5p的表达影响肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的可能机制及其临床意义。方法:收集2017~2019年阜阳市第五人民医院及大连大学附属中山医院36例肝细胞癌患者手术标本,采用荧光定... 目的:探讨长链非编码RNA FER1L4(lncRNA FER1L4)调节miR-106a-5p的表达影响肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的可能机制及其临床意义。方法:收集2017~2019年阜阳市第五人民医院及大连大学附属中山医院36例肝细胞癌患者手术标本,采用荧光定量PCR技术(RT-qPCR)分析肝癌细胞和癌旁正常肝细胞中lncRNA FER1L4和miR-106a-5p的表达情况。同时采用RT-qPCR分析肝癌细胞系Huh-7、HepG2和正常肝细胞系L-02中lncRNA FER1L4和miR-106a-5p的表达情况。采用CCK-8法、细胞划痕及集落形成实验等方法测定细胞的增殖、转移和成瘤能力。结果:与正常组织相比,lncRNA FER1L4在肝癌组织中表达较低(P<0.05),而miR-106a-5p表达较高(P<0.05),且两者呈负相关(P<0.0001,R2=0.376);与对照组相比,下调FER1L4肝癌细胞的增殖能力增加(P<0.05),敲除FER1L4肝癌细胞的迁移和侵袭能力增加(P<0.05);与对照组相比,转染FER1L4 siRNA的肿瘤细胞中miR-106a-5p的表达增高(P<0.05),敲除miR-106a-5p的肿瘤细胞中FER1L4的表达增高(P<0.05),两者之间存在相互抑制的关系。结论:lncRNA FER1L4通过抑制miR-106a-5p的表达对肝细胞癌产生抑制作用,单独或联合检测lncRNA FER1L4和miR-106a-5p可能预测肝癌的临床预后。 展开更多
关键词 肝细胞癌 rna FER1l4 miR-106a-5p
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胃癌组织中lncRNA-AK054978、lncRNA-FER1L4的表达观察 被引量:1
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作者 吕庆福 周好 +2 位作者 过兆基 曹苇 支巧明 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第43期21-24,共4页
目的观察长链非编码RNA(lncRNA)-AK054978、lncRNA-FER1L4在胃癌组织中的表达变化,并探讨其临床意义。方法胃癌患者96例,手术治疗时留取癌组织及癌旁组织,采用qRT-PCR法对癌组织及癌旁组织中的lncRNA-AK054978、lncRNA-FER1L4进行检测... 目的观察长链非编码RNA(lncRNA)-AK054978、lncRNA-FER1L4在胃癌组织中的表达变化,并探讨其临床意义。方法胃癌患者96例,手术治疗时留取癌组织及癌旁组织,采用qRT-PCR法对癌组织及癌旁组织中的lncRNA-AK054978、lncRNA-FER1L4进行检测。分析癌组织中lncRNA-AK054978、lncRNA-FER1L4表达水平与胃癌患者临床病理参数的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线法分析癌组织中lncRNA-AK054978、lncRNA-FER1L4表达与胃癌患者预后的关系。结果胃癌组织、癌旁组织中lncRNA-AK054978的相对表达量分别为7.32±2.12、1.04±0.12,两者相比,P<0.05;胃癌组织、癌旁组织中lncRNA-FER1L4的相对表达量分别为0.21±0.15、1.09±0.22,两者相比,P<0.05。胃癌组织中lncRNA-AK054978、lncRNA-FER1L4的相对表达量与肿瘤直径、分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移、有无远处转移、TNM分期有关(P均<0.05)。癌组织中lncRNA-AK054978高表达的胃癌患者5年生存率为70.83%、生存时间为(51.94±2.29)个月,癌组织中lncRNA-AK054978低表达的胃癌患者5年生存率为83.33%、生存时间为(55.06±1.81)个月,两者相比,P均<0.05;癌组织中lncRNA-FER1L4低表达胃癌患者的5年生存率为72.92%、生存时间为(52.23±2.24)个月,癌组织中lncRNA-FER1L4高表达胃癌患者的5年生存率为87.50%、生存时间为(56.38±1.64)个月,两者相比,P均<0.01。结论胃癌组织中lncRNAAK054978高表达,lncRNA-FER1L4低表达;lncRNA-AK054978高表达和lncRNA-FER1L4低表达促进胃癌的恶性进展;lncRNA-AK054978、lncRNA-FER1L4可作为胃癌预后预测指标和治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 长链非编码rna 长链非编码rna-AK054978 长链非编码rna-FER1l4 胃癌
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OsPPR9 encodes a DYW-type PPR protein that affects editing efficiency of multiple RNA editing sites and is essential for chloroplast development 被引量:1
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作者 CHEN Chang-zhao WANG Ya-liang +12 位作者 HE Meng-xing LI Zhi-wen SHEN Lan LI Qing REN Deyong HU Jiang ZHU Li ZHANG Guang-heng GAO Zhen-yu ZENG Da-li GUO Long-biao QIAN Qian ZHANG Qiang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2023年第4期972-980,共9页
Photosynthesis occurs mainly in chloroplasts,whose development is regulated by proteins encoded by nuclear genes.Among them,pentapeptide repeat(PPR)proteins participate in organelle RNA editing.Although there are more... Photosynthesis occurs mainly in chloroplasts,whose development is regulated by proteins encoded by nuclear genes.Among them,pentapeptide repeat(PPR)proteins participate in organelle RNA editing.Although there are more than 450 members of the PPR protein family in rice,only a few affect RNA editing in rice chloroplasts.Gene editing technology has created new rice germplasm and mutants,which could be used for rice breeding and gene function study.This study evaluated the functions of OsPPR9 in chloroplast RNA editing in rice.The osppr9 mutants were obtained by CRISPR/Cas9,which showed yellowing leaves and a lethal phenotype,with suppressed expression of genes associated with chloroplast development and accumulation of photosynthetic-related proteins.In addition,loss of OsPPR9 protein function reduces the editing efficiency of rps8-C182,rpoC2-C4106,rps14-C80,and ndhB-C611 RNA editing sites,which affects chloroplast growth and development in rice.Our data showed that OsPPR9 is highly expressed in rice leaves and encodes a DYW-PPR protein localized in chloroplasts.Besides,the OsPPR9 protein was shown to interact with OsMORF2 and OsMORF9.Together,our findings provide insights into the role of the PPR protein in regulating chloroplast development in rice. 展开更多
关键词 rice(Oryza sativa l.) PPR protein chloroplast development rna editing
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水稻lncRNASVR及邻近SAUR基因在种子低温萌发中的表达
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作者 刘金朝 浦娜 +3 位作者 陈淳 陈伟雄 王慧 肖武名 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期896-905,共10页
【目的】长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)长度大于200 nt,一般不具有编码蛋白质功能。探究低温下lncRNA对邻近SAUR基因表达的影响,以期为研究水稻种子低温萌发的能力提供理论依据。【方法】lncRNA SVR由华南农业大学国家植... 【目的】长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)长度大于200 nt,一般不具有编码蛋白质功能。探究低温下lncRNA对邻近SAUR基因表达的影响,以期为研究水稻种子低温萌发的能力提供理论依据。【方法】lncRNA SVR由华南农业大学国家植物航天育种工程技术研究中心前期研究筛选,可以响应低温胁迫,通过生物信息学方法分析lncRNA SVR的二级结构并寻找lncRNA SVR内部的冷胁迫基序,通过qRT-PCR分析lncRNA SVR和SAUR基因的表达特性。【结果】lncRNA SVR序列中存在高度相似的冷胁迫响应基序,且在茎环连接处。表达特性分析表明,在种子萌发过程中低温胁迫会持续降低lncRNA SVR的表达,邻近的多个SAUR基因在低温胁迫下的表达量明显高于在常温下的表达量,表明lncRNA SVR的邻近SAUR基因一定程度上能够和lncRNA SVR一样响应低温胁迫。表达相关性分析表明,在低温萌发中lncRNA SVR与这些SAUR基因的表达均呈负相关关系,lncRNA SVR与OsSAUR55的表达呈显著负相关关系。进一步分析种子低温萌发中SAUR基因在lncRNA SVR敲除系中的表达情况,结果表明,在敲除系中,lncRNA SVR的下降幅度低于其在野生型中的下降幅度,OsSAUR41、OsSAUR53、OsSAUR54、OsSAUR55表达量的上升幅度均显著低于其在野生型中的上升幅度。【结论】lncRNA SVR可能负调控OsSAUR55的表达,进而响应低温胁迫。 展开更多
关键词 水稻 长链非编码rna SAUR基因簇 低温胁迫 转录调控 种子萌发
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长链非编码RNA EPB41L4A-AS1通过AKT调控子宫颈癌细胞的自噬水平
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作者 孙晓琳 郑文丹 +1 位作者 高守翠 廖梅坚 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期265-270,共6页
目的探讨长链非编码RNA EPB41L4A-AS1通过AKT调控子宫颈癌细胞自噬的作用和机制。方法运用小干扰RNA(siRNA)敲低子宫颈癌细胞HeLa中的EPB41L4A-AS1后,应用Western blot技术检测p62、LC3和AKT的蛋白表达水平,qRT-PCR检测AKT1和AKT2的mRN... 目的探讨长链非编码RNA EPB41L4A-AS1通过AKT调控子宫颈癌细胞自噬的作用和机制。方法运用小干扰RNA(siRNA)敲低子宫颈癌细胞HeLa中的EPB41L4A-AS1后,应用Western blot技术检测p62、LC3和AKT的蛋白表达水平,qRT-PCR检测AKT1和AKT2的mRNA表达水平。在GFP-LC3稳定过表达的HeLa细胞中转染siEPB41L4A-AS1,利用共聚焦扫描显微镜检测外源性LC3形成的自噬小体的变化。在HeLa细胞中转染siEPB41L4A-AS1,利用免疫荧光技术和荧光显微镜检测内源性LC3形成的自噬小体的变化。基因集富集(gene set enrichment analysis,GSEA)分析AKT和自噬通路在EPB41L4A-AS1高表达组和低表达组子宫颈癌患者中的富集情况。结果与对照组相比,敲低EPB41L4A-AS148 h后HeLa细胞中p62表达水平显著下降(10%血清组:1.00±0 vs 0.39±0.17,无血清组:1.00±0 vs 0.55±0.14,P<0.05);LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ比值显著上升(10%血清组:1.00±0 vs 1.92±0.19,无血清组:1.00±0 vs 14.35±3.89,P<0.05);AKT1的mRNA(P<0.01)和蛋白(1.00±0 vs 1.82±0.14,P<0.01)水平均显著上调。GFP-LC3稳定过表达的HeLa细胞和未经处理的HeLa细胞在敲低EPB41L4A-AS1后,细胞内自噬小体的数量显著增多(P<0.05),且体积增大(P<0.05)。GSEA分析发现AKT和自噬通路在EPB41L4A-AS1低表达组子宫颈癌患者中显著富集。结论EPB41L4A-AS1可能通过AKT抑制子宫颈癌细胞的自噬水平。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 自噬 长链非编码rna EPB41l4A-AS1 AKT
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RNAi沉默Polo-like kinase-1基因表达对大肠癌细胞端粒酶活性的影响 被引量:2
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作者 倪国华 范钰 +5 位作者 陈坚 钱立平 林庚金 陈功星 丁佳逸 郑树 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期14-18,共5页
目的探讨polo-like kinase-1(PLK1)基因对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法根据PLK1基因序列特点,设计并用化学方法合成小干扰核糖核酸分子(small interfering RNA,si RNA),转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用实时定量PCR和Wester... 目的探讨polo-like kinase-1(PLK1)基因对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法根据PLK1基因序列特点,设计并用化学方法合成小干扰核糖核酸分子(small interfering RNA,si RNA),转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平。分别采用MTT法和TRAP-ELISA方法检测PLK1基因转染对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。结果所设计的5个si RNA均能明显抑制大肠癌SW480细胞PLK1 mRNA水平,以P4效果最好。以P4转染处理大肠癌细胞后,PLK1 mRNA水平和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性。MTT和TRAP-ELISA方法检测发现,P4si RNA转染组细胞增殖和端粒酶活性明显受到抑制,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.05)。结论PLK1基因对大肠癌细胞增殖具有重要的调控作用;以PLK1 si RNA转染处理大肠癌细胞,可明显抑制大肠癌细胞的恶性增殖,其机制可能与抑制端粒酶活性有关。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 polo—like kinase-1 rna干扰 小干扰rna 端粒酶
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RNAi沉默PRL-1基因对肺癌细胞侵袭能力的影响 被引量:2
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作者 钟锡明 范钰 +1 位作者 张瑞佳 郑金旭 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2008年第6期480-483,共4页
目的:探讨RNA干扰(RNAinterference,RNAi)沉默促肝细胞再生磷酸酶1(phosphatase of regenerating liv-er cell-1,PRL-1)基因对肺癌细胞侵袭力的影响。方法:应用PRL-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理肺癌A549细胞后... 目的:探讨RNA干扰(RNAinterference,RNAi)沉默促肝细胞再生磷酸酶1(phosphatase of regenerating liv-er cell-1,PRL-1)基因对肺癌细胞侵袭力的影响。方法:应用PRL-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理肺癌A549细胞后,分别采用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹检测PRL-1基因mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力。结果:与对照组比较,siR-NA转染组PRL-1 mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.05)。体外试验发现,PRL-1siRNA可有效抑制肺癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关(P<0.05,P<0.05)。结论:PRL-1基因在肺癌侵袭中起着重要的作用,采用PRL-1 siRNA转染可抑制肺癌细胞侵袭。 展开更多
关键词 肺肿瘤 促肝细胞再生磷酸酶-1 侵袭 rna干扰 小干扰rna
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中华绒螯蟹EsSox21b-like基因干扰载体的构建及原核表达制备dsRNA 被引量:1
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作者 刘志强 陈洁 邱高峰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期134-138,共5页
Sox(SRY-related HMG-box)基因是一类重要的转录因子,在动物的性别分化与决定、器官的发生等方面具有重要的调控作用。旨在利用RNA干扰技术证实该基因的功能,将EsSox21b-like基因617 bp的片段克隆至含有两个T7启动子的L4440载体上,构建... Sox(SRY-related HMG-box)基因是一类重要的转录因子,在动物的性别分化与决定、器官的发生等方面具有重要的调控作用。旨在利用RNA干扰技术证实该基因的功能,将EsSox21b-like基因617 bp的片段克隆至含有两个T7启动子的L4440载体上,构建了EsSox21b-like-L4440干扰载体,将该重组载体转化至RNaseⅢ缺陷型的HT115菌株中,经IPTG诱导菌株体内转录,获得了EsSox21b-like正义和反义单链RNA,经过变性、退火形成大量双链RNA(EsSox21b-like-dsRNA),能满足以后应用RNA干扰试验对于EsSox21b-like基因功能的研究。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 rna干扰 l4440 HT115 原核表达 DSrna
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紫花苜蓿LEA蛋白基因ihpRNA表达载体构建及烟草转化 被引量:2
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作者 白永琴 康俊梅 +2 位作者 孙彦 杨青川 李燕 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1484-1489,共6页
根据紫花苜蓿LEA蛋白MsLEA3-1基因(GenBank登录号为EU665182)序列,设计两对含有酶切位点的特异性引物LEAf1/LEAf2和LEAr1/LEAr2,以构建好的PMD-LEA质粒为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段pMD-F和pMD-R,将正反义片段分别插入... 根据紫花苜蓿LEA蛋白MsLEA3-1基因(GenBank登录号为EU665182)序列,设计两对含有酶切位点的特异性引物LEAf1/LEAf2和LEAr1/LEAr2,以构建好的PMD-LEA质粒为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段pMD-F和pMD-R,将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置,构建成含有发夹结构的RNAi载体pART-F-R,经过NotI酶切鉴定,证明载体构建成功。通过农杆菌介导的方法,以干扰表达载体pART-F-R转化烟草,经过PCR检测,得到16株阳性转基因植株,为MsLEA3-1基因的功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 MslEA3-1基因 rna干扰 ihprna表达载体 烟草转化
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