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RNA/DNA嵌合分子介导的高效基因修复 被引量:2
1
作者 汤富酬 韩嵘 薛友纺 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期265-268,共4页
本文介绍了RNA/DNA嵌合分子介导的高效基因修复技术。这一技术是1996年开始发展起来的全新技术 ,它通过人工合成的双链开环RNA/DNA嵌合分子转染细胞而使特定基因靶位点产生单碱基改变 ,从而修复突变基因。这一技术高效 (目前最高可达50 ... 本文介绍了RNA/DNA嵌合分子介导的高效基因修复技术。这一技术是1996年开始发展起来的全新技术 ,它通过人工合成的双链开环RNA/DNA嵌合分子转染细胞而使特定基因靶位点产生单碱基改变 ,从而修复突变基因。这一技术高效 (目前最高可达50 %以上 )、特异性强、安全、无随机插入致变的危险、无免疫反应、无明显毒性 ,能够用于定点突变、基因敲除、动植物功能基因组学、药物遗传学等很多方面的研究 ,在不久的将来能够应用于人类基因治疗 ,具有很高的应用价值和医学前景。 展开更多
关键词 rna/dna嵌合分子 基因治疗 基因修复
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番茄1──氨基环丙烷羧酸(ACC)合成酶基因的反义RNA──核酶嵌合DNA序列的构建 被引量:9
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作者 仇润祥 扈廷茂 +2 位作者 王永胜 张晓海 刘中大 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期1-6,共6页
根据番茄ACC合成酶基因(LE—ACC2)DNA序列,以番茄(LycopersiconesculentumMill)果实的总DNA为模板,利用PCR技术扩增得到预期大小的该基因编码区内部分DNA序列,插入到质粒载体pGEM—3zf(+)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间后转化E.coliDH... 根据番茄ACC合成酶基因(LE—ACC2)DNA序列,以番茄(LycopersiconesculentumMill)果实的总DNA为模板,利用PCR技术扩增得到预期大小的该基因编码区内部分DNA序列,插入到质粒载体pGEM—3zf(+)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间后转化E.coliDH—5α,可选出重组子pRE,经酶切,PCR及DNA序列分析证明克隆成功;将pRE上的目的DNA序列以反义方式构建到我室已合成并克隆的含核酶DNA序列的重组质粒pRⅠ的BamHⅠ和HindⅢ之间,构成含有反义RNA-核酶嵌合DNA序列的重组质粒pREⅠ,经酶切及序列分析,结果与预期一致. 展开更多
关键词 番茄 ACC合成酶 反义rna 核酶嵌合基因
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DNA/RNA甲基化修饰检测技术进展
3
作者 张耿 边佳辉 +1 位作者 崔亚宁 李晓娟 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期348-359,共12页
表观遗传学研究的是在不改变基因序列前提下,持续性和可遗传性改变基因活性状态的分子和机制。其中DNA和RNA的修饰是近几年表观遗传修饰研究的热点。为了对这些表观遗传修饰的动态分布、机制和功能有更深入的认识和理解,研究人员开发了... 表观遗传学研究的是在不改变基因序列前提下,持续性和可遗传性改变基因活性状态的分子和机制。其中DNA和RNA的修饰是近几年表观遗传修饰研究的热点。为了对这些表观遗传修饰的动态分布、机制和功能有更深入的认识和理解,研究人员开发了多种定量和定位分析的检测方法。本文概述了DNA和RNA甲基化修饰形成的机制以及在植物中的功能,重点综述了近年来建立的检测表观遗传修饰的技术,并展望了新兴的单细胞和单分子测序技术的发展。高通量高精度检测技术的突破性发展,将极大促进对植物中表观遗传修饰的研究。 展开更多
关键词 表观遗传 dna修饰 rna修饰 单细胞测序 单分子测序
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RNA聚合酶动态调控DNA转录的单分子水平研究进展
4
作者 郝理 江婷 樊军 《自然杂志》 CAS 2023年第1期33-44,共12页
真核生物的RNA聚合酶Ⅱ(Pol Ⅱ)和原核生物的RNA聚合酶(RNAP)主要负责转录合成信使RNA(mRNA),调控不同基因的转录水平,以调节生物体的生长发育和应对复杂多变的环境。研究者采用传统的荧光显微镜观测到RNAP可形成团簇,据此针对DNA转录... 真核生物的RNA聚合酶Ⅱ(Pol Ⅱ)和原核生物的RNA聚合酶(RNAP)主要负责转录合成信使RNA(mRNA),调控不同基因的转录水平,以调节生物体的生长发育和应对复杂多变的环境。研究者采用传统的荧光显微镜观测到RNAP可形成团簇,据此针对DNA转录调控提出“转录工厂”模型。随着单分子技术的发展,研究者在单分子水平上观测到了活细胞中RNAP动态调控DNA转录,提出RNAP可以通过液-液相分离机制进行转录调控。该综述总结了不同单分子荧光显微镜的技术原理,以及相关的荧光探针标记方法,并介绍了在真核生物和原核生物中应用单分子成像技术可视化RNA聚合酶动态调控DNA转录过程的研究进展,最后展望了单分子技术在转录调控研究中的应用前景。 展开更多
关键词 rna聚合酶 动态调控 dna转录 单分子成像 相分离
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小鼠对乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗免疫应答
5
作者 张建军 杨向东 +2 位作者 史小玲 袁志平 王超 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第1期61-63,共3页
目的:探讨含CD80的乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗的免疫应答.方法:以乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗pcHBV-CD80(含CMV启动子、HBV-preS_2片段、HBV-C片段和CD80)、pcHBV(含CMV启动子、HBV-preS_2片段、HBV-C片段),以及质粒pcDNA-CD80、pcDNA3.... 目的:探讨含CD80的乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗的免疫应答.方法:以乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗pcHBV-CD80(含CMV启动子、HBV-preS_2片段、HBV-C片段和CD80)、pcHBV(含CMV启动子、HBV-preS_2片段、HBV-C片段),以及质粒pcDNA-CD80、pcDNA3.1和生理盐水,im免疫小鼠2次(间隔2wk),末次接种后2wk时检测特异性抗体、γ-IFN水平和淋巴细胞转化率.结果:质粒pcHBV-CD80和pcHBV免疫后均可检测到特异性的抗体,抗-preS2在pcHBV-CD80组和pcHBV组分别为15125.52nkat/L和14463.56nkat/L;抗-HBc在pcHBV-CD80组和pcHBV组分别为7607.35nkat/L和7711.21nkat/L,两组间无明显差异;但pcHBV-CD80更能增加γ-IFN的产生(1266.7ng/Lvs986.3ng/L,P<0.01),并增强免疫小鼠的激淋巴细胞转化.结论:含CD80的乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗可诱导特异性的体液免疫和细胞免疫应答. 展开更多
关键词 嵌合dna疫苗 小基因 CD80分子 乙型肝炎病毒
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Chimeraplasty基因修复技术及其应用
6
作者 李中 曹明富 《杭州师范学院学报(自然科学版)》 CAS 2003年第2期57-59,66,共4页
基因治疗是目前生物学和医学领域里的一个研究热点 ,传统的基因替代方法有许多很难克服的缺点 ,与之相比 ,基因修复策略有着明显的优点 .在此 ,文章介绍了近年来发展起来的具有较好应用价值和医学前景的一种基因修复新技术——
关键词 基因治疗 基因修复 chimeraplasty技术 rna/dna嵌合分子
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结核杆菌Ag85A与协同刺激分子CD80融合DNA真核表达质粒的构建与鉴定
7
作者 赵晔 张帆 +2 位作者 史小玲 张建军 钟森 《泸州医学院学报》 2003年第5期382-385,共4页
目的 :采用基因重组技术 ,将结核杆菌Ag85A与协同刺激信号CD80基因融合 ,构建成融合结核DNA疫苗 ,旨在提高结核DNA疫苗的免疫效果 ,可望通过基因免疫 ,获得免疫原性强 ,以低剂量即可有效刺激机体产生T细胞和B细胞应答 ,安全可靠的新型... 目的 :采用基因重组技术 ,将结核杆菌Ag85A与协同刺激信号CD80基因融合 ,构建成融合结核DNA疫苗 ,旨在提高结核DNA疫苗的免疫效果 ,可望通过基因免疫 ,获得免疫原性强 ,以低剂量即可有效刺激机体产生T细胞和B细胞应答 ,安全可靠的新型结核病疫苗 .方法①pcDNA3-tPA -Ag85A质粒的构建和鉴定以V1Jns-tPA-Ag85A质粒为模板 ,PCR扩增tPA -Ag85A ,(不含终止密码 ) ,定向插入pcDNA3载体的BamHⅠ和EcoRⅠ位点之间 ,构建成pcDNA3-tPA -Ag85A质粒。②pcDNA3-tPA -Ag85A/CD80质粒的构建与鉴定以pcDNA3CD80质粒为模板 ,扩增CD80 (含终止密码 )定向插入pcDNA3-tPA -Ag85A质粒的EcoRⅠ和XbaⅠ位点之间 ,构建成pcDNA -tPA-Ag85A/CD80融合DNA真核表达质粒。结果 :重组质粒pcDNA3-tPA -Ag85A和pcDNA3-tPA -Ag85A/CD80经酶切鉴定和测序鉴定均构建正确。结论 :结核杆菌Ag85A与协同刺激分子CD80融合DNA真核表达质粒构建成功 ,为进一步研究比较其免疫保护效果 。 展开更多
关键词 结核杆菌 抗原85A 协同刺激分子 dna疫苗 融合质粒 真核表达质粒 AG85A CD80 基因融合
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Direct Observation of Histone-Induced DNA Shortening
8
作者 冉诗勇 王晓玲 +5 位作者 付文博 赖振华 王渭池 刘晓晴 麦振洪 李明 《Chinese Physics Letters》 SCIE CAS CSCD 2006年第2期504-507,共4页
We construct a system of magnetic tweezers and apply it to study the interaction between histones and DNA. The condensation of DNA by purified histones at low ionic strengths is directly monitored by recording the len... We construct a system of magnetic tweezers and apply it to study the interaction between histones and DNA. The condensation of DNA by purified histones at low ionic strengths is directly monitored by recording the length of the DNA as a function of elapsed time. It is found that DNA condensates in a dynamic manner. The binding of hist, ones to DNA is energetically favoured, but the ten,sion applied on DNA tends to unravel the DNA-histone complex, The competition between the two processes determiners the rate of the DNA condensation. 展开更多
关键词 SINGLE CHROMATIN FIBERS SUPERCOILED dna rna-POLYMERASE STRANDED-dna moleculeS ELASTICITY FORCE NUCLEOSOMES RESOLUTION TWEEZERS
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实现“终极版”核苷酸测序仪的技术要素 被引量:2
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作者 于军 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期929-937,共9页
20世纪70年代发明的第一代DNA测序技术,尽管测序通量有限,却成功地保证了"人类基因组计划"的实施;世纪之交出现的下一代(第二代)DNA测序技术经历了通量飞跃,为各种精准医学项目的实施提供了保障;目前的第三代技术,尽管通量居... 20世纪70年代发明的第一代DNA测序技术,尽管测序通量有限,却成功地保证了"人类基因组计划"的实施;世纪之交出现的下一代(第二代)DNA测序技术经历了通量飞跃,为各种精准医学项目的实施提供了保障;目前的第三代技术,尽管通量居二代之后,但读长和单分子测序优势也让其有立足之本;第四代测序技术的基本标志是不经过cDNA (以RNA为模版合成的互补DNA),无PCR扩增,而直接测定单分子RNA序列,以及确定单分子RNA上的修饰核苷酸位点。从技术的角度看,第三、四代技术有一定技术要素共享(比如在单分子水平测定DNA序列),但是就测序对象而言,第四代应该属于"终极版"核苷酸测序仪:可以从单细胞出发,既能测定DNA序列,也可以测定RNA序列,也可以直接确定修饰核苷酸位点。因此,要实现这个"终极版"核苷酸测序仪,就要调动相关核心技术要素,而这些要素毫无疑问地会涉及物理、化学、工程学、生物学、半导体科学、计算机科学等领域的前沿技术,包括纳米科学、单分子光学、单分子拉曼光谱、单分子核磁共振、单分子酶学、人工智能等所谓的"硬科技"。其功能是从单细胞的裂解开始,经微纳结构实现组分分流后,直接导入RNA序列测定单元,定量分析细胞RNA分子的种类、数量、序列和修饰核苷酸位点的存在频率。本文系统介绍了第四代测序仪的可能技术要素,以及应用需求和新研究范式。 展开更多
关键词 核苷酸测序技术 单分子 单细胞 纳米技术 纳米孔
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Electron Scattering by C4H10 and C6H6 in the Energy Range 100-1000 eV
10
作者 马二俊 马余刚 +3 位作者 蔡翔舟 方德清 沈文庆 田文栋 《Chinese Physics Letters》 SCIE CAS CSCD 2008年第1期97-100,共4页
We investigate the applicability of the independent atom model (IAM) to elastic electron scattering from complex polyatomic molecules, namely C4H10 and C6H6, in the energy range 100-1000eV. The cross sections of the... We investigate the applicability of the independent atom model (IAM) to elastic electron scattering from complex polyatomic molecules, namely C4H10 and C6H6, in the energy range 100-1000eV. The cross sections of the elastic electron scattering are calculated by employing the IAM together with the relativistic partial waves. The incorporation of both the modified absorption potential and the extended structural factor in the IAM makes the elastic differential cross sections and momentum transfer cross sections have a good agreement with the available experimental data. The present simple model seems to be insensitive to the complexity of the target molecules so that the proposed procedure can be quite useful for calculation of electron scattering from bio-molecules. 展开更多
关键词 TOTAL CROSS-SECTIONS ELASTIC-SCATTERING INTERMEDIATE ENERGIES POSITRON SCATTERING moleculeS dna COLLISIONS ATOMS MODEL rna
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The Mystery on the Physical Conditions for Life
11
作者 Kai Wai Wong Wan Ki Chow 《Open Journal of Biophysics》 2021年第4期383-396,共14页
Based on the Perelmann mappings from the homogenous 5D onto the inhomogeneous Lorentz 4D manifold at liquid water phase temperature range, it is shown that coherent and decoherent molecules, water, carbon, hydrogen an... Based on the Perelmann mappings from the homogenous 5D onto the inhomogeneous Lorentz 4D manifold at liquid water phase temperature range, it is shown that coherent and decoherent molecules, water, carbon, hydrogen and oxygen naturally replace the Quarks in the standard model at Bethe fusion temperature as the SU(3) generators, leading to the formation of nitrogenous bases to house the monopole boson eigenstates that can exist within the RNA and DNA. Through which the growth of organic cells by inducing the Off Diagonal Long-Range Order of “p” type hole states in organic rings and bio-cells and thus “Life”. 展开更多
关键词 Perelmann Mappings rna dna Coherent and Decoherent molecules Including Nitrogenous Bases dna Segments and Deceases Intelligence Senses and Memory
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线粒体糖尿病家系基因突变的遗传学筛查 被引量:13
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作者 任艳 李秀钧 +8 位作者 田浩明 梁荩忠 韩令川 张翔迅 喻红霖 余叶蓉 刘瑞 赵桂芝 王嘉南 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2003年第3期181-185,共5页
目的 探索与糖尿病发病相关的线粒体基因突变位点。方法 采用 PCR、DNA直接测序技术对 2 8个临床疑似线粒体基因突变糖尿病家系 ( mitochondrial diabetes mellitus,MDM)进行线粒体基因突变高发区域 ( t RNAL eu(UUR) 基因及 NADH脱氢... 目的 探索与糖尿病发病相关的线粒体基因突变位点。方法 采用 PCR、DNA直接测序技术对 2 8个临床疑似线粒体基因突变糖尿病家系 ( mitochondrial diabetes mellitus,MDM)进行线粒体基因突变高发区域 ( t RNAL eu(UUR) 基因及 NADH脱氢酶 1基因 )的筛查。结果 两个家系发现与糖尿病发病有关的突变位点。其中 1个家系 ( 16号 )同时携带 nt32 4 3A→ G突变和 16 S r RNA32 0 5 C→ T突变。该家系两例患者均有消瘦、耳聋、β细胞功能低下、发病年龄低的特点 ,先证者血乳酸水平在正常高限。在另 1先证者患耳聋的家系 ( 2 8号 )发现 ND1基因 3434A→ G突变 ,导致氨基酸改变 ,与家系中糖尿病呈共同分离。上述突变均未在正常人中检测到。结论  32 4 3位点突变在本组家系中的发现率为 3.0 8%。 16 S r RNA32 0 5 C→ T突变可能与糖尿病发病有关或与 nt32 4 3A→ G突变协同作用。 ND1基因 3434A→ G突变与 2 展开更多
关键词 线粒体糖尿病 家系 基因突变 遗传学筛查 突变位点
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呼吸道疾病的酒精加热雾化吸入疗法的探讨 被引量:1
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作者 张显会 刘建秀 +1 位作者 史朝侠 郭志忠 《医药论坛杂志》 2020年第7期73-75,共3页
目的提出采用一定浓度的酒精加热雾化吸入,并辅以其他药物联合治疗,从而对呼吸道疾病产生抑制或缓解的一种疗法,并探究这一疗法背后的科学原理。方法采用关键词检索国内外相关文献,分析总结,并随机选择17例患有不同呼吸道疾病的病例作... 目的提出采用一定浓度的酒精加热雾化吸入,并辅以其他药物联合治疗,从而对呼吸道疾病产生抑制或缓解的一种疗法,并探究这一疗法背后的科学原理。方法采用关键词检索国内外相关文献,分析总结,并随机选择17例患有不同呼吸道疾病的病例作为研究对象,其中慢性咽喉炎7例,感冒10例,进行居家酒精加热雾化治疗,观察病例症状的缓解情况及不良反应,验证疗法可行性。结果气态酒精分子能够干扰细胞内DNA或RNA复制过程,从而对一定数目的呼吸道病毒或细菌具有抑制功能。17例病例症状得到缓解或治愈,酒精加热雾化吸入治疗呼吸道疾病存在现实可行性。结论利用一定浓度酒精加热雾化吸入能够有效缓解呼吸道疾病,为呼吸道疾病的治疗提供一种新的解决思路。 展开更多
关键词 呼吸道疾病 75%酒精 酒精气体分子 加热雾化 dna rna
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