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长链非编码RNA基因多态性与原发性肝癌遗传易感性的相关性研究
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作者 黄雪娟 杨正敏 +3 位作者 孙浩 梁雪萌 彭鑫 常巍 《癌症进展》 2024年第7期719-722,726,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)基因单核苷酸多态性(SNP)与原发性肝癌遗传易感性的相关性,为原发性肝癌的早诊断、早预防、开展肝癌遗传易感机制研究提供依据。方法选取41例原发性肝癌患者和83例健康志愿者分别作为病例组和对照组,对浆... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)基因单核苷酸多态性(SNP)与原发性肝癌遗传易感性的相关性,为原发性肝癌的早诊断、早预防、开展肝癌遗传易感机制研究提供依据。方法选取41例原发性肝癌患者和83例健康志愿者分别作为病例组和对照组,对浆细胞瘤变体易位基因1(PVT1)、结肠癌相关转录本1(CCAT1)、结肠癌相关转录本2(CCAT2)、肿瘤易感性8(CASC8)、前列腺癌相关非编码RNA 1(PRNCR1)中的13个SNP位点进行基因分型,比较两组患者的基因型分布。结果病例组与对照组lncRNA PVT1基因RS2392885位点的基因型分布比较,差异有统计学意义(P﹤0.05),其他位点基因型分布比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。lncRNA PVT1基因上RS2392885位点的基因型为CC、CT和TT型,其中病例组各基因型占比分别为12.2%、68.3%和19.5%,对照组各基因型占比分别为19.3%、42.2%和38.6%。结论lncRNA PVT1中的RS2392885位点的基因型可能与原发性肝癌的遗传易感性有关。 展开更多
关键词 原发性肝癌 长链非编码rna 基因多态性
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LncRNA SNHG11通过抑制miR-184/CARM1信号轴促进卵巢癌生长 被引量:3
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作者 李少儒 李燕 +1 位作者 刘珊 户瑞丽 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第6期561-567,共7页
目的探讨长链非编码RNA核仁小分子RNA宿主基因11(LncRNA SNHG11)靶向调控miR-184/CARM1信号轴对卵巢癌细胞的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测卵巢癌组织与细胞中LncRNA SNHG11表达及卵巢癌细胞miR-184表达。将卵巢癌SKOV3细胞分... 目的探讨长链非编码RNA核仁小分子RNA宿主基因11(LncRNA SNHG11)靶向调控miR-184/CARM1信号轴对卵巢癌细胞的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测卵巢癌组织与细胞中LncRNA SNHG11表达及卵巢癌细胞miR-184表达。将卵巢癌SKOV3细胞分为si-NC组、si-SNHG11组、si-SNHG11+anti-NC组、si-SNHG11+anti-miR-184组、miR-NC组、miR-184 mimics组、miR-184 mimics+pcDNA组、miR-184 mimics+CARM1组,分别检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及CARM1、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达,裸鼠成瘤实验检测各组细胞在动物体内成瘤能力,双荧光素酶报告基因实验检验miR-184与LncRNA SNHG11、CARM1的靶向关系。结果LncRNA SNHG11在卵巢癌组织与细胞中表达升高,miR-184在卵巢癌细胞中表达降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-SNHG11组SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭能力下降,瘤体质量与体积减小,N-cadherin表达降低,细胞凋亡率与E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与si-SNHG11+anti-NC组比较,si-SNHG11+anti-miR-184组SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭细胞能力升高,瘤体质量与体积增大,N-cadherin蛋白表达升高,细胞凋亡率与E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-184 mimics组SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭能力下降,瘤体质量与体积减小,N-cadherin蛋白表达降低,细胞凋亡率与E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与miR-184 mimics+pcDNA组比较,miR-184mimics+CARM1组SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭能力升高,瘤体质量与体积增大,N-cadherin蛋白表达升高,细胞凋亡率与E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05);LncRNA SNHG11靶向调控miR-184/CARM1信号轴。结论LncRNA SNHG11通过调节miR-184/CARM1信号轴,促进卵巢癌生长。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 肿瘤浸润 基因治疗 长链非编码rna核仁小分子rna宿主基因11 微小rna-184 共激活相关精氨酸甲基转移酶1
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基于microRNA表达谱初步构建PLS-DA体液识别模型
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作者 钱水 张晶晶 +1 位作者 王致远 梁桑华 《刑事技术》 2023年第2期146-152,共7页
针对外周血、唾液、精液、月经血、阴道分泌物这五种法医学常见的体液样本,采用二代测序(NGS)平台检测获得microRNA(miRNA)表达谱,使用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)建立基于这五种体液的识别模型,并探讨PLS-DA在法医体液溯源中的应用价... 针对外周血、唾液、精液、月经血、阴道分泌物这五种法医学常见的体液样本,采用二代测序(NGS)平台检测获得microRNA(miRNA)表达谱,使用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)建立基于这五种体液的识别模型,并探讨PLS-DA在法医体液溯源中的应用价值。经优化小分子RNA文库制备过程,采用Ion Torrent S5 XL测序系统对前述法医学五种体液样本(每种10例)进行小RNA测序,以PLS-DA构建体液识别模型,评估不同数量miRNA标记组合下预测的准确性。本研究获得法医学常见五种体液样本的miRNA表达谱,外周血与月经血中表达量前10名的miRNAs有6个重叠;唾液和阴道分泌物中表达量前10名的miRNAs有4个重叠。基于全数据集、107个和11个miRNAs构建的体液来源识别模型的准确率分别为0.95、0.94、0.89。本研究通过NGS测序分析获得了五种体液样本的miRNA组(miRNome),利用PLS-DA初步构建了体液识别模型,对于应用miRNome进行体液识别的相关研究具有参考价值。 展开更多
关键词 法医遗传学 体液溯源 rna测序(rna-seq) 最小二乘判别分析(PLS-DA) 微小rna(microrna)
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治疗遗传病的RNA药物研究进展 被引量:1
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作者 罗婷 霍春晓 +1 位作者 周天华 谢珊珊 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期406-416,共11页
RNA药物能够通过识别互补序列靶向对应基因以抑制特定蛋白或RNA的表达,或通过翻译合成目的基因编码的蛋白来发挥遗传性疾病治疗作用。RNA药物主要分为寡核苷酸药物(包括反义寡核苷酸、小干扰RNA和RNA适配体)和信使RNA药物等。其中,反义... RNA药物能够通过识别互补序列靶向对应基因以抑制特定蛋白或RNA的表达,或通过翻译合成目的基因编码的蛋白来发挥遗传性疾病治疗作用。RNA药物主要分为寡核苷酸药物(包括反义寡核苷酸、小干扰RNA和RNA适配体)和信使RNA药物等。其中,反义寡核苷酸和小干扰RNA已用于临床治疗遗传病,而RNA适配体和信使RNA药物目前还处于临床试验阶段。当前主要通过对RNA药物进行化学修饰(如对信使RNA进行假尿嘧啶修饰)来降低免疫原性和提升药物疗效,以及开发纳米粒载体、细胞外囊泡和类病毒载体等递送载体来解决RNA药物的稳定性、特异靶向性和安全性等问题。本文概述了目前用于治疗遗传病的11种RNA药物的具体作用分子机制,并简单讨论了RNA药物的化学修饰及递送载体的研究现状。 展开更多
关键词 rna 药物 rna 医学 反义寡核苷酸 小干扰rna rna适配体 信使rna药物 遗传病 综述
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Common Genetic Variants in Pre-MicroRNAs Were Associated With Increased Risk of Breast Cancer in Chinese Women 被引量:29
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作者 Hu, Z. B. Liang, J. +7 位作者 Wang, Z. W. Tian, T. Zhou, X. Y. Chen, J. P. Miao, R. F. Wang, Y. Wang, X. R. Shen, H. B. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期463-463,共1页
关键词 致癌基因 肿瘤 MIrnaS 医学
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siRNA治疗在妇科肿瘤中应用的研究进展
6
作者 罗燕 孙格格 +1 位作者 韩丽婷 李新(审校) 《国际妇产科学杂志》 CAS 2023年第2期211-215,共5页
妇科肿瘤在女性各类疾病中的发病率、死亡率均位居前列,且常规治疗后复发、耐药患者预后不佳。小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)能够高效沉默靶向基因,具有基因沉默效率高、合成简便且靶点广泛的优点,是一种有应用前景的治疗基... 妇科肿瘤在女性各类疾病中的发病率、死亡率均位居前列,且常规治疗后复发、耐药患者预后不佳。小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)能够高效沉默靶向基因,具有基因沉默效率高、合成简便且靶点广泛的优点,是一种有应用前景的治疗基因相关疾病的工具。但临床应用siRNA药物还需面对裸序列不稳定、体内传送效率低以及不可控的不良反应等问题。近年来,关于选择何种载体以实现体内递送siRNA药物以及如何选择合适的应用靶点,是针对siRNA治疗的研究焦点。综述近年来有关载体修饰siRNA药物在妇科肿瘤治疗中的应用,以及各类妇科肿瘤中siRNA重要的潜在应用靶点的研究进展。 展开更多
关键词 生殖器肿瘤 女(雌)性 rna 小分子干扰 基因治疗 诊断治疗纳米医学 分子靶向治疗
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Genetic variation may play a crucial role in non-coding RNA biogenesis
7
作者 Jeyalakshmi Kandhavelu Meenakshisundaram Kandhavelu 《American Journal of Molecular Biology》 2012年第4期386-389,共4页
Transcription, post-transcriptional modification, translation, post-translational modification, DNA replication, and signaling interaction of intra- and extra- cellular components are the relevant mechanisms in gene r... Transcription, post-transcriptional modification, translation, post-translational modification, DNA replication, and signaling interaction of intra- and extra- cellular components are the relevant mechanisms in gene regulation. Transcription is one of the most important mechanisms in the control of gene expression. Further, post-transcriptional modifications play a crucial role after transcription which determine whether the transcribed gene is coding or non-coding RNA (ncRNAs). Genome-wide analysis of RNAs provides information about the coding RNAs, whereas the status of ncRNAs are still at large and must be discussed in detail as variations in the ncRNAs can lead to different phenotypes. In this short article, we discuss the role of genetic variation in ncRNA genes and how this variation may play a crucial role in ncRNA biogenesis that eventually leads to phenotypic variation and thus speciation. 展开更多
关键词 Genome Wide Analysis BIOINFORMATICS genetic Variation NON-CODING rna BIOGENESIS rna Structure SPECIATION
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Reverse genetics: Unlocking the secrets of negative sense RNA viral pathogens 被引量:1
8
作者 Kathryn Edenborough Glenn A Marsh 《World Journal of Clinical Infectious Diseases》 2014年第4期16-26,共11页
Negative-sense RNA viruses comprise several zoonotic pathogens that mutate rapidly and frequently emerge in people including Influenza, Ebola, Rabies, Hendra and Nipah viruses. Acute respiratory distress syndrome, enc... Negative-sense RNA viruses comprise several zoonotic pathogens that mutate rapidly and frequently emerge in people including Influenza, Ebola, Rabies, Hendra and Nipah viruses. Acute respiratory distress syndrome, encephalitis and vasculitis are common disease outcomes in people as a result of pathogenic viral infection, and are also associated with high case fatality rates. Viral spread from exposure sites to systemic tissues and organs is mediated by virulence factors, including viral attachment glycoproteins and accessory proteins, and their contribution to infection and disease have been delineated by reverse genetics; a molecular approach that enables researchers to experimentally produce recombinant and reassortant viruses from cloned cD NA. Through reverse genetics we have developed a deeper understanding of virulence factors key to disease causation thereby enabling development of targeted antiviral therapies and well-defined live attenuated vaccines. Despite the value of reverse genetics for virulence factor discovery, classical reverse genetic approaches may not provide sufficient resolution for characterization of heterogeneous viral populations, because current techniques recover clonal virus, representing a consensus sequence. In this review the contribution of reverse genetics to virulence factor characterization is outlined, while the limitation of the technique is discussed withreference to new technologies that may be utilized to improve reverse genetic approaches. 展开更多
关键词 Reverse genetics Viral pathogen NEGATIVE SENSE rna viruses Influenza A VIRUS EBOLA VIRUS RABIES VIRUS Hendra VIRUS Nipah VIRUS
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基于多解并行遗传算法预测RNA二级结构及假结
9
作者 尹正胜 崔梦琦 +1 位作者 徐成振 吴晓敏 《淮北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第2期63-69,共7页
非编码RNA功能通常与其结构密切相关,准确预测RNA的二级结构有助于揭示RNA的功能。在传统的遗传算法基础上,结合RNA二级结构和假结的特点,提出一种多解并行的遗传算法预测RNA二级结构和假结。首先构建茎区池和初始解集;然后根据RNA二级... 非编码RNA功能通常与其结构密切相关,准确预测RNA的二级结构有助于揭示RNA的功能。在传统的遗传算法基础上,结合RNA二级结构和假结的特点,提出一种多解并行的遗传算法预测RNA二级结构和假结。首先构建茎区池和初始解集;然后根据RNA二级结构的基本特点建立目标函数、约束函数、自适应度函数和相应的遗传算子,基于初始解集中多条序列—结构模型进行并行遗传迭代,预测最优RNA二级结构;然后在RNA二级结构基础上,使用遗传算法继续进行迭代和筛选,预测含假结的RNA二级结构。实验结果表明,该方法不仅可以解决大规模茎区的组合问题,还可以减少随机性。该方法与常用的预测假结的IPknot方法比较,对单序列RNA的结构预测结果正确率高且稳定。 展开更多
关键词 遗传算法 多解并行 rna二级结构 假结 预测方法
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双壳纲动物核糖体RNA 185-ITS1序列及其在分子系统发育研究中的应用 被引量:14
10
作者 丁小雷 何毛贤 +1 位作者 邓凤姣 张锡元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期319-324,共6页
测定了双壳纲不同科、属、种及种内共11个个体的核糖体RNA 18S-ITS1序列。结果表明,该序列在种间存在很高的多态性,长度从558bp到784bp不等,碱基差异百分比在10.7%~61.7%之间,ITS1序列同源性很低,有片段的插入与缺失。种间18S部分序... 测定了双壳纲不同科、属、种及种内共11个个体的核糖体RNA 18S-ITS1序列。结果表明,该序列在种间存在很高的多态性,长度从558bp到784bp不等,碱基差异百分比在10.7%~61.7%之间,ITS1序列同源性很低,有片段的插入与缺失。种间18S部分序列碱基差异百分比在0.9%~23.7%之间,变化主要是碱基的转换。用邻接法(NJ)构建了8个种的18S部分序列(约240bp)的系统发育树,与传统形态学分类结果相符。马氏珠母贝(Pinctada martensi)4个不同地域个体间的序列差异百分比在0.6%~1.9%之间。分析指出:18S基因可以作为双壳纲动物高阶元系统发育的分子标记;ITS1序列种间变化很大,可以应用于该纲物种的分类及鉴别,在亲缘关系相近种及种内变异相对较小,但核苷酸变异位点信息量丰富,可用于属内种间、亚种和群体间的遗传多样性研究。 展开更多
关键词 ITS1 18S rna 遗传多样性 双壳纲
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小干扰RNA体外抑制HBs-GFP融合基因的表达 被引量:4
11
作者 羊正纲 陈智 +4 位作者 倪勤 徐宁 潘修成 金晗英 李星仪 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第2期110-115,共6页
目的利用增强型绿荧光蛋白(EGFP)和小发夹RNA(shRNA)表达载体技术,建立一种行之有效且相对经济的验证siRNA的方法。方法将HBVS基因融合到EGFP中,建立HBs-GFP融合基因表达载体;同时构建带U6+27RNA转录启动子的shRNA表达载体pAVU6+4sh357... 目的利用增强型绿荧光蛋白(EGFP)和小发夹RNA(shRNA)表达载体技术,建立一种行之有效且相对经济的验证siRNA的方法。方法将HBVS基因融合到EGFP中,建立HBs-GFP融合基因表达载体;同时构建带U6+27RNA转录启动子的shRNA表达载体pAVU6+4sh357。二载体共转染HepG2细胞后,流式细胞仪检测HBs-GFP蛋白的荧光强度;同时RT-PCR和实时定量PCR法检测HBs-GFPmRNA水平的改变。结果小干扰RNA有效抑制目的基因的表达,共转染后第72h荧光蛋白抑制率为55.4%;HBs-GFP融合基因的RNA表达受到显著抑制,抑制率达到90%。结论载体法表达的小干扰RNA体外显著抑制HBs-GFP融合基因的表达。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 rna/遗传学 rna干扰 表面抗原 绿荧光蛋白
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G250基因siRNA表达载体的构建与鉴定 被引量:5
12
作者 赵俊峰 郑少斌 +2 位作者 姜耀东 赵善超 张香梅 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第6期23-25,共3页
目的构建肾癌相关抗原G250小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,通过抑制G250基因的表达,探索肾癌基因治疗的新途径。方法根据基因库上的肾癌相关抗原G250 mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的75个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4... 目的构建肾癌相关抗原G250小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,通过抑制G250基因的表达,探索肾癌基因治疗的新途径。方法根据基因库上的肾癌相关抗原G250 mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的75个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接至线性化的质粒pRNAT-U6.1/Neo中,构建成重组质粒(命名为pshRNA-G250 a,pshRNA-G250b),进行酶切及序列鉴定。结果pshRNA-G250表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA序列一致。结论成功构建pshRNA-G250表达载体,为进一步的研究及探索肾癌基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤相关抗原 G250基因 干扰rna 遗传载体 基因疗法 肾肿瘤
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质粒介导的RNA干扰对AD293细胞中HBcAg表达的抑制作用 被引量:5
13
作者 徐宁 羊正纲 +3 位作者 朱海红 姚航平 侯晓丽 吴炜 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第2期104-109,共6页
目的研究质粒介导的RNA干扰效应对HBcAg基因表达的抑制作用。方法设计并构建针对HBcAg基因的小发夹RNA表达载体,将构建好的shRNA表达载体和HBcAg-增强型绿荧光蛋白融合蛋白表达载体共转染人胚肾细胞株AD293,以空载体组以及针对无关序列... 目的研究质粒介导的RNA干扰效应对HBcAg基因表达的抑制作用。方法设计并构建针对HBcAg基因的小发夹RNA表达载体,将构建好的shRNA表达载体和HBcAg-增强型绿荧光蛋白融合蛋白表达载体共转染人胚肾细胞株AD293,以空载体组以及针对无关序列的shRNA表达载体组为阴性对照,流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测RNAi的抑制效果。结果构建的特异性shRNA表达载体可以抑制HBcAg基因在AD293细胞中的表达,流式细胞仪检测抑制率可达76%,实时荧光定量PCR法检测HBcAg基因的mRNA,抑制率可达58.6%。结论质粒介导的RNAi可以有效抑制HBcAg基因的表达,为利用RNAi进行抗乙型肝炎病毒复制研究提供了一个可供选择的方法。 展开更多
关键词 肝炎核心抗原 乙型/分析 基因疗法 rna/遗传学 基因表达调控 rna干扰
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pRNAT-U6.1/Neo系统在E2F-3基因RNA干扰载体构建中的应用 被引量:5
14
作者 胡海龙 吴长利 +2 位作者 孙岩 张文岚 韩瑞发 《天津医药》 CAS 北大核心 2009年第10期829-831,913,共4页
目的:构建针对E2F-3基因的siRNA表达载体。方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F-3基因的寡核苷酸链,各64个碱基,退火、克隆到经BamHI、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6.1/Neo载体上,重组构建RNAi质粒。通过双酶切、PCR鉴定及基因片段... 目的:构建针对E2F-3基因的siRNA表达载体。方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F-3基因的寡核苷酸链,各64个碱基,退火、克隆到经BamHI、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6.1/Neo载体上,重组构建RNAi质粒。通过双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建效果。结果:重组构建的pRNAT-U6.1/Neo载体经PCR分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致,插入序列无点突变位点。结论:载体的成功构建为进一步研究E2F-3基因在膀胱肿瘤中的作用奠定了基础,为进一步以其为靶点进行膀胱癌细胞系体外实验创造了条件。 展开更多
关键词 rna干扰 遗传载体 质粒 rna 小分子干扰
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花生FAD2基因RNAi载体转化及转基因籽粒脂肪酸分析 被引量:16
15
作者 黄冰艳 张新友 +5 位作者 苗利娟 严玫 海燕 易明林 徐静 陈占宽 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期290-293,共4页
在构建了以花生△12脂肪酸去饱和酶(FAD2)基因自身启动子驱动、有内含子间隔的该基因编码序列反向重复片段的RNA干扰载体的基础上,对上述干扰载体进行了农杆菌介导的花生胚小叶的遗传转化,以期特异调控花生籽粒中油酸、亚油酸含量。在2... 在构建了以花生△12脂肪酸去饱和酶(FAD2)基因自身启动子驱动、有内含子间隔的该基因编码序列反向重复片段的RNA干扰载体的基础上,对上述干扰载体进行了农杆菌介导的花生胚小叶的遗传转化,以期特异调控花生籽粒中油酸、亚油酸含量。在2个受体品种中获得105株抗性再生植株,用两对引物对其进行了PCR扩增,其中32株初步证实为转基因植株。采用近红外分析仪对转基因T1籽粒油酸和亚油酸含量的检测结果表明,转基因株系内油酸/亚油酸比值的变异高于对照,多数转基因株系油酸亚油酸比值平均数也显著高于对照。 展开更多
关键词 花生 FAD2基因 rna干扰 遗传转化 油酸 亚油酸
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应用全自动核糖体RNA基因指纹技术快速鉴定细菌菌种 被引量:5
16
作者 刘继超 姜铁民 +1 位作者 姜阿赤 陈历俊 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期170-172,177,共4页
应用RiboPrinter全自动核糖体RNA基因指纹技术对4株未知菌种进行快速鉴定,并与生理生化试验结合16SrDNA序列测定方法相比较。结果表明,两种方法均成功地完成了4株未知菌种的鉴定,其结果分别为大肠杆菌、嗜热链球菌、地衣芽孢杆菌和枯草... 应用RiboPrinter全自动核糖体RNA基因指纹技术对4株未知菌种进行快速鉴定,并与生理生化试验结合16SrDNA序列测定方法相比较。结果表明,两种方法均成功地完成了4株未知菌种的鉴定,其结果分别为大肠杆菌、嗜热链球菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。相比之下,生理生化试验结合16SrDNA序列测定的方法经济实用,而RiboPrinter系统更为简便、快速,在8h内快速地完成了4株未知菌种的鉴定,并且为菌株的基因分型以及溯源分析奠定了基础。 展开更多
关键词 RiboPrinter系统 基因检测 rna基因指纹 细菌鉴定
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反义RNA技术在现代作物遗传改良中的应用 被引量:4
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作者 许本波 张学昆 李加纳 《中国农学通报》 CSCD 2003年第3期84-88,共5页
介绍了反义RNA的作用原理及其在作物遗传改良中的应用 ,主要有 :(1)在提高作物耐储藏性中的应用 ;(2 )在植物抗病虫中的应用 ;(3)在提高作物品质中的应用 ;(4 )改变花卉颜色中的应用 ;(5 )雄性不育控制中的应用。
关键词 反义rna技术 作物 遗传改良 应用 作用原理 耐储藏性 抗病虫 品质 花卉颜色
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RNA干涉培育低木质素杨树 被引量:10
18
作者 宋恩慧 蔡诚 +2 位作者 魏国 高慧 项艳 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期39-44,共6页
采用改良的CTAB法提取南林95杨的基因组DNA,经PCR扩增得到肉桂酰辅酶A还原酶CCR基因的第4个外显子部分序列,通过中间载体pUCCRNAi,构建含正反向干涉片段的pBI121表达载体,导入农杆菌LBA4404。利用叶盘法侵染南林95杨,获得3株转基因植株... 采用改良的CTAB法提取南林95杨的基因组DNA,经PCR扩增得到肉桂酰辅酶A还原酶CCR基因的第4个外显子部分序列,通过中间载体pUCCRNAi,构建含正反向干涉片段的pBI121表达载体,导入农杆菌LBA4404。利用叶盘法侵染南林95杨,获得3株转基因植株,经分子鉴定证实干涉片段已导入南林95杨。测定Klason木质素及综纤维素含量的结果显示:转基因植株Klason木质素含量与对照相比平均降低了9.86%,综纤维素含量与对照相比平均增加了3.17%,纤维长宽比明显增加,均表明转基因植株更有利于造纸。 展开更多
关键词 CCR rnaI 木质素 遗传转化
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人胃癌细胞端粒酶RNA组分hTR基因片段的克隆及其正反义真核表达载体的构建 被引量:11
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作者 冯润华 李建芳 +2 位作者 刘炳亚 朱正纲 尹浩然 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第12期1409-1414,共6页
目的克隆人胃癌细胞端粒酶RNA组分(hTR)基因片段并构建其正义和反义真核表达载体,为以端粒酶为靶目标的肿瘤基因治疗奠定基础。方法采用RT-PCR方法从人胃癌细胞株MKN-45中扩增出人hTR部分cDNA序列。将该片段插入pEF6/V5-His-TOPO载体后... 目的克隆人胃癌细胞端粒酶RNA组分(hTR)基因片段并构建其正义和反义真核表达载体,为以端粒酶为靶目标的肿瘤基因治疗奠定基础。方法采用RT-PCR方法从人胃癌细胞株MKN-45中扩增出人hTR部分cDNA序列。将该片段插入pEF6/V5-His-TOPO载体后构建人端粒酶RNA组分(hTR)基因正义真核表达载体(pEF-hTR)。随后采用EcoRV和SpeⅠ从pEF-hTR上切下该目的基因片段并反向插入pBluescriptⅡKS载体上的EcoRV/SpeⅠ酶切位点上。最后采用KpnⅠ和NotⅠ从pBluescriptⅡKS载体上切下该目的基因片段并正向插入pEF-hTR的KpnⅠ/NotⅠ酶切位点上从而构建出人端粒酶RNA组分(hTR)基因反义真核表达载体(pEF-ahTR)。对所构建的载体均进行酶切鉴定和测序确认。结果所克隆的基因片段其碱基序列与文献报道完全一致,且插入载体的方向完全正确。结论本实验已成功克隆了人端粒酶RNA组分(hTR)基因的部分序列并成功构建其正义、反义真核表达载体,从而为研究反义抑制人胃癌细胞端粒酶活性对胃癌细胞生物学行为的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 胃肿瘤 病理学 端粒 末端转移酶 遗传学 rna 遗传载体 克隆细胞
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家族性糖尿病中线粒体tRNA^(Leu(UUR))基因突变的发生率及临床特点 被引量:3
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作者 张庆 曾瑞萍 +2 位作者 杜传书 修玲玲 程桦 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1997年第S1期62-65,共4页
应用PCR-RFLP方法,对140例有家族史的糖尿病患者的线粒体tRNA1eu(UUR)基因nt3243A→G突变进行筛查,结果发现6例(4.3%)该突变基因阳性者。总结其主要临床特征为:①呈母系遗传,②起病早(<4... 应用PCR-RFLP方法,对140例有家族史的糖尿病患者的线粒体tRNA1eu(UUR)基因nt3243A→G突变进行筛查,结果发现6例(4.3%)该突变基因阳性者。总结其主要临床特征为:①呈母系遗传,②起病早(<40岁),③多消瘦(BMI<24mg/m2),④继发性口服降糖药失效需用胰岛素治疗,⑤多伴有神经性耳聋。本研究提示该突变在中国人家族性糖尿病群体中有较高的发生率;在临床上属于另一种糖尿病亚型。 展开更多
关键词 突变 线粒体/遗传学 rna.转移/遗传学 糖尿病/遗传学
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