玫瑰花组织总RNA提取方法研究

以玫瑰盛开期花瓣为材料,采用RNAiso Plus植物RNA提取试剂盒和改良CTAB法提取总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测并比较所提取总RNA样品的质量。结果表明:改良CTAB法提取的总RNA较完整,条带清晰,D260nm/D280nm为2.05,D260nm/D230nm为2.12,几乎无降解,纯度较好,质量较高。再采用改良CTAB法提取玫瑰衰老期花瓣及盛开期花器官不同部位组织的总RNA,琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计检测,并以所提取的玫瑰花组织总RNA为模板进行RT-PCR验证,发现所获得的RNA纯度较好,质量较高,PCR扩增得到的条带较清晰,与目的片段大小一致,完全可以满足进一步分子生物学研究的需要,说明所建立的改良CTAB法是玫瑰花组织总RNA提取的理想方法。

甜高粱茎秆总RNA提取方法的比较

甜高粱是最具潜力的能源作物之一,新鲜的甜高粱茎秆中含有大量汁液且富含多糖和多酚成分,很难获得高质量的总RNA。以甜高粱Rio的茎秆为实验材料,利用Trizol法、SDS法、改良CTAB法和RNAiso法分别提取新鲜茎秆总RNA,比较几种方法获取的总RNA质量与纯度。实验结果证明,RNAiso改良法提取的茎秆总RNA质量高,完整性好,总RNA产物可直接用于建库和转录组测序等后续实验。

红花花瓣总RNA提取方法的比较研究

红花花瓣富含多糖、多酚和花色素苷等次生代谢产物,严重影响花瓣总RNA的提取。为探索适合红花花瓣总RNA的提取方法,以4种红花不同时期的花瓣为材料,通过对4种RNA提取方法,即RNA提取试剂盒、RNAiso Plus试剂法、改良的CTAB法和SDS法进行比较研究。结果表明:RNAiso Plus试剂法效果最好,提取的总RNA完整性好,纯度高、浓度高。通过RT-PCR验证,所提取的RNA达到基因克隆和实时定量PCR等分子生物学实验要求。

叶尔羌高原鳅肝胰脏总RNA提取方法的比较

比较利用TRIZOL法和用TaKaRa的RNAiso Plus法,两种方法提取叶尔羌高原鳅肝胰脏总RNA的可行性,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计检测及一步法RT-PCR验证,对提取所得RNA的完整性、纯度及浓度进行分析,试验结果表明:TRIZOL法获得的叶尔羌高原鳅总RNA纯度高,完整性好,可以继续进行分子克隆试验。

白芥叶片总RNA提取方法的比较研究

以白芥为材料，分别采用柱式植物总RNA抽提纯化试剂盒法、RNAisoPlus法和CTAB-异丙醇法3种方法提取白芥叶片总RNA，通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计及RT-PCR反应进行检测，最后对3种方法得到的结果进行分析比较．结果表明，RNAisoPlus法提取出的总RNA条带与其他方法相比更为清晰，A260／A280比值介于1．9～2．1之间，该方法更适合用于白芥叶片总RNA的提取．

谷子种子高质量总RNA提取方法的优化

为得到高质量的谷子种子RNA,本研究以5个不同谷子品种为材料,对RNAiso Plus法、改良RNAiso Plus法、CTAB法提取的RNA进行质量和纯度的比较。结果表明,改良RNAiso Plus法提取的总RNA完整性、纯度、浓度均优于其他2种方法提取的总RNA,5个不同谷子品种和不同萌发时期的谷子均可用改良RNAiso Plus法提取出高质量、完整性好的RNA,所得RNA产物可用于构建cDNA文库和转录组测序等后续试验。本研究为禾谷类植物种子的总RNA提取提供了一定的参考,也为谷子种子后续的分子生物学试验奠定了基础。

3种烟草RNA高效提取方法的比较

为了寻求烟草叶片RNA高效提取方法,为烟草分子生物学研究提供理论基础,试验以烟草叶片为材料,采用试剂盒法、Trizol法、RNAiso法提取RNA,凝胶电泳和分光光度计检测确定高效、经济的RNA提取方法。结果表明：试剂盒法操作简单,但提取量较少;Trizol法方便快捷,但有部分蛋白质污染,并出现RNA降解现象;相比以上2种方法,RNAiso法提取的RNA浓度在100～500 ng/μL之间,A260/A280在1.8～2.0之间,条带清晰明亮,无RNA降解,且28 S条带亮度约是18 S的两倍;RT-PCR检测结果显示,RNAiso法提取的RNA可以扩增出目的基因,大小约2500 bp,与参考序列大小吻合,可用于后续的功能验证。因此,在烟草RNA提取方法比较中,RNAiso法较适合烟草叶片RNA提取,并已在很多实验室推广利用。