RP-HPLC法同时测定茵栀解毒颗粒中绿原酸和栀子苷的含量

建立RP-HPLC法同时测定茵栀解毒颗粒中绿原酸和栀子苷的含量。采用反相高效液相色谱法,色谱柱为C_(18)柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈‒甲醇‒0.1%磷酸(11∶8∶81),等度洗脱,检测波长为(235±1)nm,流速为1 mL/min。结果显示,绿原酸的线性范围为0.0943~0.7544μg,r=0.999999(n=5),平均回收率为99.25%(n=6);栀子苷线性范围为0.1971~1.5766μg,r=0.999999(n=5),平均回收率为99.56%(n=6)。该方法检测效率高、专属性强、重复性好,为茵栀解毒颗粒的质量评价提供了简便、准确、可靠的定量方法。

RP-HPLC法测定人血中伏立康唑血药浓度

目的建立一种快速、简便、准确的RP-HPLC法测定人血中伏立康唑血药浓度的方法,以便于监测伏立康唑的血药浓度,指导患者个体化治疗。方法采用2倍体积乙腈沉淀血浆蛋白,采用RP-HPLC法,以卡马西平为内标,色谱条件如下:色谱柱为Agilent TC-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(40∶60,V/V),流速1.0 ml·min^(-1),紫外检测波长为255 nm,进样量10μl。结果伏立康唑与卡马西平的保留时间分别为10.1和6.52 min。伏立康唑在0.2256~22.56μg·ml^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9998);定量下限为0.2256μg·ml^(-1);相对标准偏差分别批内≤4.30%,批间≤3.94%;伏立康唑高、中、低三个浓度的绝对回收率为80.51%~95.44%。结论该方法灵敏度高,操作简便,结果准确,检测成本低,更适用于临床实践中常规的伏立康唑血药浓度监测及基础药代动力学研究。

RP-HPLC法快速测定常山胡柚果皮中3种主要成分

目的建立常山胡柚果皮中3种主要成分的含量测定方法。方法采用RP-HPLC法测定含常山胡柚果皮中芸香柚皮苷、柚皮苷和新橙皮苷的含量,色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse Plus C_(18)(4.6×250mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.1%乙酸-水溶液(B),流速为1.0mL·min^(-1),于283nm波长下检测,柱温35℃,进样量5μL。结果常山胡柚果皮中芸香柚皮苷、柚皮苷和新橙皮苷在一定范围内线性良好(r>0.9992)。结论该法操作简便,灵敏度高,检测快速,适用于常山胡柚果皮中黄酮类成分的含量测定。

红花药材RP-HPLC指纹图谱的建立及其质量评价研究

本文收集了市面上常见的红花药材,对红花的前处理方法进行优化,使用乙酸乙酯萃取等对红花进行初步提取。建立了红花药材的指纹图谱,对其中主要峰进行了化学指认,通过使用“相似度评价软件”进行数据处理,对红花药材指纹图谱的相似度进行比较分析,以研究不同产地红花药材的质量。

RP-HPLC法测定安石榴苷在大鼠血浆中的浓度及其药动学研究

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定安石榴苷的血药物浓度,并用于大鼠灌胃后的药动学研究。采用COSMOSIL-Chol-ester C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱,检测波长370 nm,柱温40℃,流速1.0 mL/min。SD大鼠单次口服安石榴苷(300 mg/kg)后,眼眶静脉丛采血,检测24h内11个时间点血浆中的药物浓度。安石榴苷在2.18~58.00μg/mL范围线性关系良好,定量下限(LLOQ)2.18μg/mL,日内、日间精密度RSD<15%,提取回收率为89.67%~115.56%。PK Slutions 2.0^(TM)药动学软件拟合主要药动学参数C_(max)、T_(max)、AUC_((0-t))分别为(26.33±5.65)μg/mL、(1.67±0.52)h和(243.40±111.62)(μg·h)/mL。所建立RP-HPLC法测定安石榴苷的血药浓度简便、准确、专属性强,给大鼠灌服安石榴苷后,其吸收、分布迅速,体内药动学呈开放的二室模型。

RP-HPLC法检测甜梦口服液(甜梦合剂)中淫羊藿苷、紫丁香苷和23-乙酰泽泻醇B的含量

目的建立同时检测甜梦口服液(甜梦合剂)中的淫羊藿苷、紫丁香苷和23-乙酰泽泻醇B含量的RP-HPLC法。方法利用Shimadzu CLC ODS C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)分离甜梦口服液中3种成分(淫羊藿苷、紫丁香苷和23-乙酰泽泻醇B)。测定波长:淫羊藿苷为271 nm、紫丁香苷为265 nm和23-乙酰泽泻醇B为207 nm;柱温30℃,进样体积10μl。流动相:0.3%磷酸溶液(流动相A)-乙腈(流动相B),洗脱程序:0~4 min(95%A)、4~7 min(95%~78%A)、7~10 min(78%~38%A)、10~16 min(38%~26%A)、16~23 min(26%~19%A)、23~28 min(19%A)、28~28.5 min(19%~95%A)。外标法检测3种成分的含量。结果紫丁香苷、23-乙酰泽泻醇B和淫羊藿苷分别在0.1962~19.62μg/ml,0.7544~75.44μg/ml和0.1966~19.66μg/ml质量浓度范围内存在良好的线性关系,线性系数R 2均大于0.995;平均加标回收率分别为99.47%,98.68%和100.26%;仪器精密度和方法重复性RSD(n=6)均在5.0%以内。结论建立的RP-HPLC法具有线性范围广、检测结果准确等优点,可以用于甜梦口服液(甜梦合剂)供试品的质量控制。

畲药小香勾香豆素类成分RP-HPLC含量测定及抗炎靶点预测

[目的]以反相高效液相色谱(reverse phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)法测定畲药小香勾香豆素类成分补骨脂素和佛手柑内酯的含量,并结合网络药理学和动物实验验证小香勾的抗炎作用。[方法]色谱柱为Waters C18柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm),流动相A为乙腈,流动相B为0.1%甲酸溶液(体积比),梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^(-1),补骨脂素检测波长245 nm,佛手柑内酯320 nm,柱温25℃。利用网络药理学平台收集小香勾香豆素类成分及抗炎相关靶点,利用Cytoscape 3.8.2软件建立成分-靶点网络,借助网络拓扑分析插件(Cytoscape network centrality analysis,CytoNCA)筛选抗炎核心靶点,进一步采用Metascape软件进行京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomics,KEGG)通路富集分析。通过二甲苯致小鼠耳肿胀法进一步验证小香勾的抗炎作用。[结果]补骨脂素和佛手柑内酯的质量浓度分别在0.51~102.00μg·mL^(-1)(r=0.9996)和0.24~48.00μg·mL^(-1)(r=0.9998)时与峰面积呈良好的线性关系。通过筛选获得小香勾补骨脂素和佛手柑内酯的相关基因57个,抗炎靶点2148个,交集靶点31个。KEGG通路富集分析发现,这些靶点主要涉及化学致癌作用-活性氧、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路、癌症途径、催乳素信号通路和叶酸生物合成等信号通路。与模型对照组比较,小香勾高剂量组(400 mg·kg^(-1))能显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀(P<0.01),显示小香勾具有良好的抗炎作用。[结论]建立的RPHPLC法操作简单,灵敏度高,可用于小香勾质量控制。小香勾香豆素类成分通过多靶点多通路表现出良好的抗炎作用,为后续深入探讨小香勾抗炎机制提供了有利的科学依据。

HPLC-DAD双波长法同时测定鼠尾草中3个酚酸类成分的含量

建立鼠尾草中咖啡酸、原儿茶酸和迷迭香酸3个酚酸类成分含量测定的方法。采用SHIMADZU VP-ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水(梯度洗脱),检测波长为260 nm和327 nm,柱温为30℃。结果表明咖啡酸、原儿茶酸、迷迭香酸的线性范围分别是0.45~22.53μg/mL(r=0.9999)、0.21~10.34μg/mL(r=0.9999)、0.53~21.19μg/mL(r=0.9999),平均加样回收率分别为98.60%、100.32%、99.28%,RSD分别为1.43%、1.90%、0.91%。本方法简单快速,重复性好,可用于鼠尾草中上述3种酚酸类成分的含量测定。

RP-HPLC梯度洗脱法测定盐酸金霉素有关物质方法研究

目的 建立准确可靠的RP-HPLC梯度洗脱法用于测定盐酸金霉素原料药有关物质。方法 采用Ultimate XB-C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以高氯酸-水-二甲基亚砜(16∶934∶525)(pH<2.0)、乙腈、甲醇分别作为流动相A、B、C,进行梯度洗脱;柱温为45℃;检测波长为280 nm;流速为0.8 mL/min。结果 与《中国药典》2020年版相比,检出杂质多2个,盐酸金霉素与11个已知杂质分离度良好。13批样品均检出6个已知杂质,除盐酸四环素、4-差向金霉素外,还检出杂质B、E、J、L,其中杂质B、E为主要其他杂质。结论 该方法适用性好、专属性强,可真实反映盐酸金霉素有关物质状况,为其质量控制提供方法支撑。

RP-HPLC法检测阿齐沙坦有关物质的方法改进

目的建立一种新的阿齐沙坦有关物质检测方法。方法以YMC Triart C 18(4.6×250 mm,5μm)为色谱柱;以0.05 mol·L^(-1)乙酸铵缓冲液(氨水调节pH至9.0)为流动相A,甲醇为流动相B,线性梯度洗脱;流速0.8 mL·min^(-1);检测波长251 nm。结果阿齐沙坦与各杂质分离良好,各杂质和阿齐沙坦质量浓度0.1~1.0μg·mL^(-1)范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系,相关系数0.9990~1.0000;1、2、3、4和5检测限分别为0.0476、0.0570、0.0532、0.0588和0.0556μg·mL^(-1),平均回收率分别为96.66%、109.94%、102.18%、100.62%和100.26%,RSD分别为5.53%、6.14%、1.45%、3.0%和3.48%(n=9)。结论本法专属、可靠,可用于阿齐沙坦原料药有关物质的测定。

RP-HPLC法测定姜黄消痤搽剂中姜黄素的含量

目的:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定姜黄消痤搽剂中姜黄素含量。方法:采用Gemini C_(18)(ODS,250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温约为20℃,进样量为20μl,流动相为乙腈-0.2%冰醋酸,梯度洗脱,流速为1.00 ml/min,紫外检测波长为430 nm。结果:姜黄素在5~200μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9994),线性方程为Y=86210.9957X+226168.7965。平均加标回收率为95.49%,RSD为1.31%。结论:本法前处理简单、结果可靠,可作为姜黄消痤搽剂的质量控制方法。

RP-HPLC测定眩晕宁颗粒制剂中3种成分的含量

目的:建立了RP-HPLC法测定眩晕宁颗粒制剂中异绿原酸A等3种成分含量的方法。方法:CapcellPak UG C18色谱柱分离;检测波长:异绿原酸A、23-乙酰泽泻醇B和β-蜕皮甾酮检测波长分别设定348 nm、250 nm和208 nm;进样体积:10µL;柱温:28℃;以乙腈(A)-0.5%磷酸溶液(B)为洗脱溶剂,外标法定量检测。结果:异绿原酸A、β-蜕皮甾酮和23-乙酰泽泻醇B分别在浓度0.0767~7.67、0.0983~9.83和0.0197~1.97μg/mL范围内线性良好;回收率依次为100.05%、98.33%和99.42%;重复性和精密度RSD均在5.0%以内;供试品溶液在24h内稳定。结论:结果证明,此方法具有前处理简单等优点,可以用于眩晕宁颗粒制剂的质量控制。

RP-HPLC测定百蕊草中紫云英苷的含量

目的：建立百蕊草中紫云英苷的含量测定方法。方法：采用RP-HPLC测定，C18柱，流动相为乙腈．水（23：77），用冰醋酸调pH至3．85，流速1．0mL·min^-1，检测波长346nm；供试品溶液的制备采用50％乙醇提取2次。结果：测定了同一产地不同批次的百蕊草药材，紫云英苷质量分数在0．120％-0．155％。结论：建立的测定方法简便、可靠。

RP-HPLC法同时测定夏桑菊颗粒中绿原酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和蒙花苷

目的建立RP—HPLC法同时测定夏桑菊颗粒（夏枯草、桑叶、野菊花）中绿原酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和蒙花苷4种活性成分的方法。方法采用AgilentEclipseXDB—C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈-1．0％醋酸水溶液，采用梯度洗脱，检测波长为320nm，体积流量1．0mL／min，柱温30℃，进样体积10μL。结果绿原酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和蒙花苷的线性范围分别为0．0389～0．7771μg、0．0067～4．200μg、0．0480～0．9600Ixg和0．0386～0．7714μg（0．9992〈r〈0．9999），平均回收率在98．35％和98．62％之间。结论该法检测效率高，专属性强，重复性好，可用于夏桑菊颗粒中绿原酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和蒙花苷的定量测定，可作为该制剂的质量控制方法之一。

RP-HPLC对金银花和连翘单煎、单煎后合并及混煎的分析

目的：利用RP-HPLC对金银花和连翘单煎、单煎后合并及混煎进行分析，寻找异同。方法：采用Alltech-C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱进行分离，流动相采用乙腈-水（含0．2％醋酸）系统梯度洗脱，流速1．0mL·min^-1，检测波长有280nm，柱温为室温，进样体积10μL。结果：绿原酸和连翘酯苷A分别在下列范围内有良好的线性：0．980—9．800μg（r=0．9999）和0．972—9．720μg（r=0．9999）。平均回收率（n=6）分别为99．85％（RSD2．0％）和100．87％（RSD1．6％）。归属了银翘药对主要色谱峰的来源，定量了绿原酸和连翘酯苷A的含量，定性地比较了以下色谱峰所代表的成分在4个供试品中含量的多少，色谱峰k，m，n：金银花〉合并〉混煎；色谱峰g，h：连翘〉合并〉混煎；色谱峰d，e，i：混煎〉金银花，混煎〉合并。结论：金银花和连翘单煎、单煎后合并及混煎4个供试品的RP—HPLC图有异同表明银翘药对的物质基础和金银花、连翘单用的物质基础有异同，为进一步研究课题“银翘药对的药效物质基础研究”提供了方向，为临床和制药提供了一些实验依据，同时也为中药复方研究提供了参考，具有一定的理论和实践意义。

RP-HPLC法测定三七中11种皂苷的含量

目的:建立同时测定三七中多种皂苷成分的RP-HPLC方法。方法:Zorbax Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);乙腈-水二元梯度洗脱,乙腈:0～30min,18%;30～35min,18%→30%;35～55min,30%→35%;55～65min,35%→55%;65～70min,55%。流速1.5mL·min^(-1);DAD监测器,检测波长203nm;柱温为40℃。结果:三七皂苷R_1,人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rg_2、Rh_1、Rc、Rb_2、Rb_3和Rd的线性范围分别为0.24～4.75μg(r=0.9999),0.57～11.40μg(r=1.0000),0.50～9.90μg(r=1.0000),0.24～4.80μg(r=1.0000),0.54～10.65μg(r=1.0000),0.18～3.60μg(r=1.0000),0.16～3.10μg(r=1.0000),0.26～5.10μg(r=1.0000),0.25～4.90μg(r=1.0000),0.25～4.95μg(r=1.0000),0.32～6.30μg(r=1.0000);回收率为97.3%～102.8%。结论:RP-HPLC法可同时测定三七中11种皂苷的含量,有利于其质量控制。

RP-HPLC法测定穿山龙中薯蓣皂苷的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定穿山龙中薯蓣皂苷的含量。方法:采用Hypersil C18(ODS2)色谱柱,乙腈-水(54:46)为流动相,流速1.0 mL·min-1,紫外检测波长为210 nm。结果:薯蓣皂苷可与其他主要成分分离,薯蓣皂苷与峰面积呈良好的线性关系,线性范围为2.3-11.5μg,r=0.9999;样品平均回收率为98.6%,RSD为1.0%(n=5)。结论:本方法用反相高效液相色谱法直接测定了全国6个地区共8个批次的穿山龙中薯蓣皂苷的含量。该方法无需衍生化,分离效果好,分析快速、准确,灵敏度高,重现性好。

不同产地延胡索药材RP—HPLC指纹图谱及质量研究

目的:建立延胡索药材的 RP—HPLC 指纹图谱,研究不同产地延胡索药材的质量差异,为延胡索药材制定质量标准提供参考。方法:直用 Phenomenex Luna C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm)包谱柱,柱温30℃,以甲醇-磷酸盐缓冲溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长289 nm;采用"中药色谱指纹图谱相似度评价2004A 版"软件比较不同产地炮制与未炮制延胡索药材指纹图谱的相似度,利用对照药材指纹图谱对21批样品进行聚类分析。结果:不同产地炮制和未炮制延胡索药材指纹图谱稍有不同,分别建立共有模式,相似度较好;聚类分析结果表明个别药材质量较差。结论:炮制与否对延胡索药材的化学组成有所影响,但各地延胡索药材质量差异不大,采用 RP—HPLC 方法分别建立炮制和未炮制延胡索药材的指纹图谱,方法重现性好,可用于延胡索的质量评价和品种鉴别。

RP-HPLC测定不同产地鬼灯檠中岩白菜素的含量

目的 :用反相高效液相色谱法测定陕西不同地区鬼灯檠中岩白菜素的含量。方法 :采用SymmetryC18色谱柱(5 μm ,4 .6mm× 15 0mm) ,流动相为甲醇 水 (2 5∶75 ) ,流速为 1.0mL·min-1,柱温为 (30± 1)°C ,检测波长为 2 75nm。结果 :岩白菜素在 0 .8～ 4 .0 μg呈良好的线性关系 (r =0 .9993) ,方法回收率为 99.95 % ,岩白菜素的相对标准偏差为 3.0 % (n=5 ) ,最低检测限为 0 .1ng。 结论 :本方法快速、简单、灵敏度高 ,岩白菜素含量与原料产地有一定的关系。

RP-HPLC测定虫草菌粉中核苷类成分

采用高效液相色谱法测定虫草菌粉中核苷类成分,尿苷、鸟苷、腺苷及腺嘌呤能很好分离,其优化的色谱条件为:AlltimaC1 8(2 5 0mm×4 .6mm ,5 μm)色谱柱,乙腈-水(V/V =4 :96 )为流动相,流速为1 .0ml/min ,检测波长为2 6 0nm。该方法灵敏度高、定量准确、重现性好、回收率高(98.7%～1 0 1 .5 %) ,适合用于虫草菌粉中核苷类成分的分析。虫草菌粉中尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷的含量分别为1 0 .5 2mg/g ,8.5 6mg/g ,0 .70 8mg/g和1 .79mg/g ,其测定RSD范围为0 .5 1 %～1 .30 %(n =5 )。