RPA1基因多态性与晚期结直肠癌铂类药物临床疗效的相关性

目的探讨RPA1基因多态性与晚期结直肠癌铂类药物临床疗效的相关性。方法将92例晚期结直肠癌患者作为研究对象,采集其外周静脉血清,用实时聚合酶链反应法(RT-PCR)检测血清标本中RPA1基因的表达情况,并用SDS软件进行基因分型,根据RPA1基因型的不同将患者分为CC组(n=38)、CT组(n=28)、TT组(n=26)。所有患者均给予奥沙利铂注射液治疗,观察CC组、CT组、TT组之前临床疗效的差异。根据临床疗效的不同将患者分为有效组(n=60)与无效组(n=32),比较2组一般资料差异,并对相关影响因素进行Logistic回归分析。对患者进行为期2年的随访,记录CC+CT组、TT组生存情况,用生存曲线分析不同RPA1基因型患者用药后的生存情况。结果CC组、CT组、TT组总体临床疗效及治疗总有效率比较,差异具有统计学意义(P<0.05);组间比较,CC组、CT组治疗总有效率明显高于TT组(P<0.05),CC组与CT组治疗总有效率无明显差异(P>0.05)。单因素分析结果显示,有效组与无效组在有无癌栓、RPA1基因分型上差异明显(P<0.05),Logistic多因素回归分析结果显示,RPA1基因分型是晚期结直肠癌患者铂类药物临床疗效的独立影响因素(OR=1.570,P<0.05)。生存曲线分析结果显示,CC+CT组2年内生存情况明显优于TT组(P<0.05)。结论TT型RPA1基因是晚期结直肠癌患者铂类药物治疗无效的独立危险因素;RPA1基因多态性与晚期结直肠癌铂类药物临床疗效的密切相关,有望成为预测其临床疗效的新指标。

RPA1低表达对辐射抵抗人鼻咽癌CNE-2R细胞侵袭迁移及细胞周期的影响

目的:探讨复制蛋白A1(RPA1)沉默对人鼻咽癌CNE-2R细胞侵袭、迁移及细胞周期的影响。方法:采用shRNA技术构建RPA1低表达的CNE-2R细胞模型并通过RT-PCR和Western blot实验验证。选用空白对照组(CNE-2R)、阴性对照组(NC-shRNA)、RPA1低表达组(RPA1-shRNA)3组细胞完成后续实验,通过CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖能力、Transwell实验检测侵袭能力、划痕实验检测迁移能力,流式细胞术检测细胞周期;Western blot实验检测Chk2、p-Chk2、Cdc25c和p-cdc25c蛋白的表达。结果:与CNE-2R和NC-shRNA组比较,RPA1-shRNA组细胞的RPA1mRNA和蛋白质均显著降低(P<0.01和<0.05);RPA1-shRNA组组细胞的增殖、侵袭、迁移能力显著下降(P均<0.05),细胞周期被阻滞在G2/M期(P<0.01);RPA1-shRNA组细胞Chk2、Cdc25c的表达低于CNE-2R和NC-shRNA组细胞(P<0.05),而p-Chk2、p-cdc25c的表达高于其它两组(P<0.05)。结论:RPA1低表达抑制辐射抵抗人鼻咽癌CNE-2R细胞的增殖、迁移以及使细胞周期阻滞于G2/M期。

辐射抗性食管癌细胞亚系TE-1R的建立及其辐射抗拒机制的研究

目的建立辐射抗性食管癌细胞亚系TE-1R，并探讨其辐射诱导的凋亡性及辐射抗性机制。方法采用分次、间歇照射的方法（2Gy，5次）诱导人食管癌细胞系TE-1产生具有稳定辐射抗性的细胞亚系TE-1R，显微镜下观察细胞形态学差异。以TE-1和TE-1R细胞为实验对象，给予6MVX射线单次照射（2Gy），流式细胞仪分析细胞照射后的凋亡情况，RT—PCR法和Western Blot法分别检测食管癌TE-1、TE-1R细胞中复制蛋白AI（RPA1）mRNA和蛋白的表达情况。结果筛选出辐射抗性食管癌细胞亚系TE—1R。2Gy射线照射后12、24和48hTE-1R细胞的凋亡率低于TE—1细胞（P〈0．05）。RPA1 mRNA和蛋白在TE—1R细胞中的表达高于TE-1细胞（P〈0．05）。结论成功建立了辐射抗性的食管癌细胞亚系TE-1R，新的细胞亚系TE-1R比其亲本细胞系TE-1对射线更加抗拒，RPA1可能在食管癌细胞辐射抗性的修复中起着重要作用。