RRM2在结直肠癌的放射增敏中的作用及研究

大多数结直肠癌患者治疗失败的原因是对放射治疗的抵抗。本研究采用生物信息学方法,筛选放疗处理后癌组织中的差异基因(DEGs),寻找与放射敏感性相关的治疗靶点。通过细胞周期调节基因核糖核苷酸还原酶调节亚基M2(RRM2)的表达筛选后,分别采用Lipofectamine 2000和3 Gy放射剂量对细胞进行转染及放疗处理,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测RRM2蛋白在结直肠癌中的表达,采用噻唑兰(MTT)方法测量细胞活力,用流式细胞术测定细胞周期和细胞凋亡。本研究共鉴定出4269个DEGs,其中RRM2基因差异最显著。与肠上皮细胞FHC比较,RRM2在肿瘤细胞中的表达显著升高(P<0.05)。与对照(NC)组比较,过表达RRM2可促进细胞活力。与3 Gy组比较,过表达RRM2能够延缓放疗对细胞的杀伤作用。与NC组比较,过表达RRM2会导致细胞凋亡率降低,而抑制RRM2表达则导致细胞凋亡率升高。与单独使用si-RRM2或辐照相比,si-RRM2和辐照的组合显示出了更好的效果。在细胞周期的分析中,RRM2的过表达导致S期细胞聚集,而RRM2的敲低导致G1期细胞聚集。此外,辐照可导致显著的G1相停滞,而RRM2的敲低与辐照一起可导致更显著的G1相停滞。这表明,RRM2介导了结直肠癌细胞的细胞周期调节,并通过细胞周期影响结直肠癌的放射敏感性。本研究为结直肠癌联合疗法的开展提供了重要的数据支持。

RRM2在肝细胞癌中的表达及其与预后、免疫浸润的相关性分析

目的探究核糖核苷酸还原酶小亚基RRM2在肝细胞癌中的表达及其与肿瘤预后和肿瘤微环境免疫浸润之间的关系,预测其潜在的生物学价值。方法从癌症基因组图谱TCGA官网下载肝癌患者的基因表达数据以及相应临床数据,分析RRM2在正常组织以及肝癌组织中的表达差异,对比高表达组和低表达组患者的生存期并绘制生存曲线。采用单因素/多因素回归分析评价RRM2的独立预后价值并绘制相应ROC曲线及预后列线图。借助TIMER 2.0、Linkedomics数据库在线分析RRM2在泛癌中的表达情况及其与免疫浸润的相关性、共表达基因并进行GO、KEGG功能富集分析。结果RRM2在肝癌以及其他多种癌症中表达量显著增高(P<0.05)。高表达组在总生存期、疾病特异性生存期、无进展间隔方面均短于低表达组(P<0.05),回归分析、ROC曲线提示RRM2可以作为影响患者预后的独立危险因素(P<0.05)。共表达分析显示RRM2共表达基因主要调控DNA复制、错配修复、同源重组、胞质分裂、细胞周期等生物学功能,并与药物代谢、炎症反应等功能密切相关。免疫浸润显示RRM2与T、B淋巴细胞、树突状细胞、巨噬细胞以及中性粒细胞浸润均呈现正相关性。结论RRM2的表达水平与肝细胞癌患者的预后及免疫细胞浸润密切相关,对肝细胞癌生物标志物的探究具有重要意义。

RRM2通过干扰前列腺癌细胞G2/M周期促进肿瘤进展

目的探讨RRM2基因对前列腺癌的影响及机制。方法下载TCGA前列腺癌表达谱数据,分析RRM2基因与前列腺癌临床病理的相关性及生存预后情况;前列腺癌组织芯片(55例)及良性组织标本(38例)进行免疫组化染色验证RRM2在前列腺癌组织中的表达情况;生物信息学方法了解RRM2对前列腺癌影响的生物学过程;进一步通过Western blot(WB)、流式细胞术验证RRM2影响前列腺癌进程的生物学过程。结果TCGA数据库和免疫组化结果显示RRM2在前列腺癌中上调表达,且其表达关系和前列腺癌临床分期、病理分级、转移正相关(P<0.05)。高表达RRM2预示患者较差的生存预后。生物信息学显示RRM2共表达正相关基因主要涉及细胞周期通路、嘧啶核苷酸代谢、RNA转运等生物学过程,其中细胞周期途径显著富集。RRM2和细胞周期CDK1、PCNA分子相关性较高。WB实验结果显示干扰RRM2后可减少前列腺癌DU145和LNCap细胞系CDK1和PCNA蛋白表达;流式细胞术实验显示干扰RRM2后前列腺癌DU145和LNCap细胞周期阻滞在G2/M期。结论RRM2干扰前列腺癌细胞G2/M周期,促进了肿瘤进展。

下调RRM2B表达增强乳腺癌细胞辐射敏感性

目的利用转录组测序技术鉴定乳腺癌细胞辐射敏感基因,探讨其表达对乳腺癌细胞辐射敏感性的影响。方法通过转录组测序方法比较辐射后乳腺癌细胞和正常乳腺癌细胞的差异表达基因,从差异基因中筛选并分析与DNA损伤及修复通路相关的基因。利用TCGA-BRCA数据库分析RRM2B在乳腺癌组织的表达及与患者预后的相关性。构建稳定敲低RRM2B的ZR-75-1、MCF-7细胞,采用Western blot、RT-qPCR验证RRM2B的表达。Western blot和免疫荧光检测敲低RRM2B对辐射细胞DNA损伤标志蛋白γ-H2AX表达的影响。通过克隆形成实验、CCK-8实验、Hoechst/PI染色、流式细胞术检测敲低RRM2B对辐射细胞增殖和凋亡的影响。结果辐射刺激能上调培养的乳腺癌细胞中RRM2B基因的表达,TCGA-BRCA数据库分析结果显示,RRM2B表达与乳腺癌患者的总生存期呈负相关关系(P<0.05)。在敲低RRM2B基因后,辐射诱导的乳腺癌细胞中γ-H2AX的表达水平显著增加(P<0.05),细胞增殖能力明显减弱(P<0.05),细胞凋亡水平显著增加(P<0.05)。结论辐射诱导DNA修复因子RRM2B表达上调,下调RRM2B表达通过增加辐射诱导的DNA损伤、抑制细胞增殖,并促进细胞凋亡增强乳腺癌细胞辐射敏感性。

RRM2B基因复合杂合变异致线粒体DNA耗竭综合征1家系报告

本文回顾性分析并总结1个RRM2B变异相关线粒体DNA耗竭综合征家系的临床特点。该先证者女性,4月龄,婴儿期起病,自幼发育落后,因精神差1 d入院。辅助检查提示高乳酸、高氨血症,尿代谢筛查发现尿乳酸明显升高及多种有机酸升高,经积极治疗1周后在自动离院途中死亡。患儿有一哥哥在3月龄时仍不能竖头、无力,4月龄时不明原因死亡。家系全外显子测序分析发现先证者RRM2B基因复合杂合变异:c.231delC(p.Trp78Glyfs*16)、c.806C>G(p.Ala269Gly),突变基因分别来自其父母,该变异未被相关文献报道。该基因突变导致线粒体耗竭综合征8A型或8B型,患儿最终被诊断为线粒体耗竭综合征8A型。线粒体DNA耗竭综合征8A型是一种灾难性遗传性疾病,当患者出现多系统受累伴严重代谢紊乱或家系中有早夭患儿时需考虑该病可能。

RRM系统的构建——现代图书馆参考咨询服务理念的创新

本文探讨的是改革创新图书馆参考咨询服务理念,通过引入企业客户关系管理的成功经营理念,建立读者关系管理系统,,进一步做好信息网络时代的读者服务工作。

长江上游重庆段流域生态风险评价——基于RRM模型

通过建立长江重庆段流域相对风险模型(RRM),探讨了快速城市化化对长江重庆段流域生态环境的影响.结果表明:2010年相较于2006年,长江重庆段流域的综合生态风险有所减小.综合生态风险的结果表明,尽管城市工业用地的潜在风险不断加大,但是环境保护措施,对风险防范意识的加强对缓解风险起到了显著的作用.尤其是在重庆市主城区所处的风险单元流域第3区,其生态风险值在2010年显著降低.但是相较2006年,2010年长江重庆市主城区下游流域的生态风险压力明显升高.

非小细胞肺癌组织芯片中RRM1表达和预后因子分析

背景与目的RRM1与非小细胞肺癌的预后可能有关。本研究的目的是采用组织芯片技术检测非小细胞肺癌中RRM1的表达并分析预后因素。方法取广东省肺癌研究所标本库的417例非小细胞肺癌术后标本制作成组织芯片。通过SP法检测RRM1的表达情况并分析其与预后的关系。结果RRM1在不同的性别、年龄、肿瘤部位、病理类型、分化程度、T状态、N状态、M状态和病理分期等组间的差异均无统计学意义(P均>0.05)。单因素分析显示RRM1表达不是有统计学意义的预后因素(P>0.05)。COX模型多因素分析显示,分化程度、N状态是独立的预后因素。结论通过免疫组化检测的RRM1表达不能作为非小细胞肺癌独立的预后因素。TNM分期仍然是目前最好的预后因素。

我国耕地估价研究思路的整合与RRM综合估价模型——以北京市门头沟区永定镇为例

该文针对目前我国对耕地估价异常激烈的讨论 ,分析了在我国耕地估价实践中较为流行的几种估价方法及其在应用中存在的优缺点 ,指出估价中存在着的“完美主义”和“平均主义”两种研究思路 ,提出了“优势综合”这一新的耕地估价思路 :以标准地块法为框架模型 ,以分等定级成果为估价基础 ,以收益还原法为关键环节 ,构建了RRM综合估价模式———定级 收益还原综合估价模式 (Rating RevenueintegratedModel) ,并在北京市门头沟区进行实地验证。结果表明 :RRM综合估价模式改变了以往以独立的估价方法求取地价的思路 ,解决了单个方法暂时难以解决的问题 。

ERCC1、RRM1和p53表达与Ⅰ-Ⅱ期肺癌术后预后相关性分析

背景与目的顺铂是肺癌化疗的基础药物,而ERCC1、RRM1、p53表达水平与铂类耐药和预后有关,本研究分析Ⅰ-Ⅱ期NSCLC的ERCC1、RRM1、p53表达与术后生存期的关系,探讨它们与患者预后及与顺铂耐药的相关性。方法收集1992年2月-l994年1月有随访的75例Ⅰ-Ⅱ期NSCLC术后患者,Ⅰ期术后随机分成不化疗组和化疗组,Ⅱ期术后均作化疗,化疗采用以DDP为基础的方案。免疫组化法检测手术标本的ERCC1、RRM1、p53表达,并进行统计分析。结果Ⅰ期ERCC1高表达患者预后明显好于ERCC1低表达,1、3、5年生存率分别为100.00%、91.30%、86.74%和96.43%、60.71%、57.14%(P=0.0058)。Ⅰ期不化疗组ERCC1高表达者生存情况优于ERCC1低表达,中位生存期(MST)分别为72.00+个月和64.67个月(P=0.0327)。Ⅱ期与Ⅰ期相反,ERCC1低表达者预后好,ERCC1低表达者的MST为60.00+个月,而高表达者仅为25.50个月(P=0.0442)。RRM1、p53表达与术后生存率无关。结论ERCC1高表达是Ⅰ期NSCLC术后预后良好的独立指标;含DDP化疗延长了Ⅱ期ERCC1低表达患者的生存,术后可根据ERCC1的水平决定是否选用含DDP化疗;ERCC1表达对NSCLC术后生存期的影响在Ⅰ期和Ⅱ期DDP化疗患者中可能不尽相同,ERCC1高表达在Ⅰ期NSCLC术后展现的是其保护的一面,而Ⅱ期以化疗抵抗为主。

RRM RNA结合蛋白的结构与功能

Ｒ Ｒ Ｍ Ｒ Ｎ Ａ 结合蛋白是一类含一个或数个 Ｒ Ｒ Ｍ 结构域及附属结构域的 Ｒ Ｎ Ａ 结合蛋白， 参与 Ｒ Ｎ Ａ 前体的剪接、 Ｒ Ｎ Ａ 的细胞定位、 Ｒ Ｎ Ａ 的稳定性等多种转录后调控过程． 在 Ｒ Ｒ Ｍ 基序中含有许多保守的氨基酸以保证对 Ｒ Ｎ Ａ 的结合活性， 但是这一家族的不同蛋白质却能特异地结合各种不同的 Ｒ Ｎ Ａ 分子． Ｒ Ｒ Ｍ Ｒ Ｎ Ａ

ERCC1、RRM1和BRCA1在非小细胞肺癌中的表达及预后意义

目的:探讨DNA修复基因家族成员ERCC1、RRM1和BRCA1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及预后意义。方法:应用实时荧光定量PCR技术对32例肺癌及16例癌旁组织中ERCC1、RRM1和BRCA1基因的mRNA进行定量检测。用非参数检验、相关分析、Kap lan-M e ier生存曲线和COX多因素回归分析进行统计分析。结果:NSCLC中ERCC1、RRM1和BRCA1在癌组织内表达量显著高于癌旁组织,且在癌内表达具有正相关性;RRM1在肺鳞癌中高于腺癌,但在不同分期中表达无差异;ERCC1和BRCA1在不同病理类型和分期中表达均无差异;RRM1和BRCA1高表达组的生存期明显长于低表达组;COX多因素回归分析示RRM1表达是影响本组患者预后的独立因素。结论:NSCLC中,ERCC1、RRM1和BRCA1在肺癌组织中的表达显著高于癌旁组织,RRM1和BRCA1高表达组的生存期长于低表达组。RRM1和BRCA1可作为判断预后的一种指标。

晚期非小细胞肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的表达研究

目的探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)组织中DNA修复基因家族成员ERCC1、RRM1和BRCA1的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法对122例晚期NSCLC组织进行ERCC1、RRM1及BRCA1蛋白表达检测。回顾性分析NSCLC患者的临床特征、化疗反应及预后与肿瘤组织中ERCC1、RRM1和BRCA1蛋白表达的关系。结果 122例晚期NSCLC组织中ERCC1、RRM1和BRCA1蛋白表达阳性率分别为47.5%、35.2%和46.7%。ERCC1和RRM1蛋白表达阳性率与患者的性别、年龄、吸烟状况、体力状况ECOG评分及肿瘤临床分期和组织学类型均无明显相关性(P>0.05);女性患者肿瘤组织BRCA1蛋白表达阳性率(63.6%)显著高于男性患者(40.4%)。ERCC1和BRCA1蛋白表达阳性与阴性患者的化疗有效率、中位生存期和1年生存率比较差异均无统计学意义(P>0.05);RRM1蛋白表达阳性患者的化疗有效率和1年生存率均显著低于RRM1蛋白表达阴性患者(P<0.05)。结论肿瘤组织中RRM1蛋白表达与晚期NSCLC患者的化疗疗效及预后密切相关。

ERCC1、RRM1表达对肺癌患者术后吉西他滨联合顺铂化疗生存趋势的影响

背景与目的肺癌化疗疗效与肿瘤的基因表达有关,本研究拟探讨ERCC1、RRM1表达与非小细胞肺癌术后吉西他滨联合顺铂(GP)辅助化疗预后的关系。方法随访57例临床Ⅱ-Ⅳ期接受手术治疗的非小细胞肺癌患者,其中术后接受2周期以上化疗者39例(化疗组),未化疗者18例(未化疗组)。采用免疫组化法检测ERCC1、RRM1表达,Cox回归分析筛选影响预后的独立危险因子,Kaplan-Meier生存曲线分析比较各组患者的中位生存时间。结果Cox回归分析显示手术彻底程度、术后辅助化疗与否、ERCC1表达水平为影响术后生存时间的独立危险因子。ERCC1低表达组中化疗组和未化疗组中位生存期分别为23个月和21个月(P=0.088),ERCC1高表达组中化疗组和未化疗组中位生存期分别为42个月和12个月(P=0.018)。RRM1低表达组中化疗组和未化疗组中位生存期分别为42个月和22个月(P=0.010),RRM1高表达组中化疗组和未化疗组中位生存期分别为28个月和21个月(P=0.092)。结论ERCC1高表达、RRM1低表达的非小细胞肺癌患者更能从术后吉西他滨联合顺铂的化疗中受益。

肺癌患者RRM1(-37)位点基因多态性及其与临床相关性的研究

背景与目的吉西他滨是目前治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的一线药物。研究表明作为吉西他滨作用靶点的核苷酸还原酶亚单位M1(RRM1),其启动子区域的基因多态性可以影响吉西他滨对非小细胞肺癌患者的疗效。本研究旨在建立一种简便和高特异性的方法,检测RRM1(-37)位点的基因多态性,并以此方法分析RRM1(-37)位点A/C基因型与吉西他滨治疗NSCLC疗效的相关性。方法收集110例肺癌患者和40例健康人的外周血,提取基因组DNA,以RRM1基因的启动子区域为目的基因,合成野生型引物WF、突变型引物TF和共同的下游引物R。利用DNA荧光嵌入染料SYBR Green I进行荧光PCR扩增,对PCR产物进行熔解曲线分析以确定基因型。分析RRM1(-37)位点基因多态性与患者的一般状态、接受吉西他滨治疗的疗效及生存时间的关系。结果110例肺癌患者和40例健康人中A/A等位基因频率分别为32%和30%,两组人群在RRM1(-37)位点基因分布频率上无统计学差异,RRM1(-37)位点的基因多态性与肺癌患者的性别、病理类型及临床分期无相关性(P>0.05),且与肺癌患者接受吉西他滨治疗的疗效及生存时间无相关性(P>0.05)。结论本研究建立的引物特异性实时荧光PCR法可对RRM1(-37)位点进行准确的基因分型。

RRM1和ERCC1在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨DNA修复基因家族成员ERCCl、RRM1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法应用免疫组织化学PV-9000法对30例NSCLC患者肿瘤组织中的ERCC1、RRM1蛋白表达进行检测。用χ2检验、相关分析、Kaplan-Meier生存曲线进行统计分析。结果 NSCLC患者肿瘤组织中,ERCC1和RRM1表达与患者性别、年龄、分期、病理类型、是否吸烟等参数无明显相关;ERCC1和RRM1的表达呈正相关(r=0.439,P=0.027);ERCC1阴性组的总生存期和无疾病进展生存期均明显长于ERCC1阳性组,RRM1阴性组的总生存期和无疾病进展生存期均明显长于RRM1阳性组(P<0.05或<0.01)。结论 ERCC1和RRM1在NSCLC肿瘤组织中的表达具有相关性,ERCC1和RRM1低表达提示NSCLC患者生存期长、生活质量高,RRM1和ERCC1高表达者对吉西他滨+顺铂化疗耐药,可作为判断其预后的指标,指导临床个体化用药。

ERCC1、RRM1与BRCA1蛋白联合检测在非小细胞肺癌治疗中的价值分析

目的检测ERCC1、RRM1与BRCA1蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达水平,并制订相应化疗方案,观察其敏感性及疗效。方法使用免疫组织化学SP法联合检测NSCLC组织中ERCC1、RRM1与BRCA1蛋白水平,根据检测结果,结合3项指标水平分别与铂类、吉西他滨和紫杉类抗微管药物敏感性成反比的原则,制订相应的针对性化疗方案(观察组),并与以铂类为基础的二联标准一线化疗方案(对照组)对比,观察并分析两组患者的疾病控制率(DCR)与客观缓解率(ORR)。结果观察组55例患者中,ERCC1蛋白高表达(阳性)28例(50.91%),RRM1蛋白高表达(阳性)31例(56.36%),BRCA1蛋白高表达(阳性)25例(45.45%),未发现3项指标均为阳性的患者。观察组患者ORR和DCR均高于对照组(P<0.05)。观察组患者无进展生存时间和生存期均长于对照组(P<0.05)。结论联合检测ERCC1、RRM1与BRCA1蛋白能够为制订针对NSCLC患者的个体化化疗方案提供依据,提高治疗效果,改善患者生活质量,延长其生存期。

SYBR荧光实时定量PCR检测非小细胞肺癌组织与外周血中RRM1和ERCC1及BRCA1基因表达水平

目的:建立荧光实时定量PCR技术,检测非小细胞肺癌组织与外周血RRM1和ERCC1及BRCA1基因表达水平。方法:分别构建RRM1、ERCC1和BRCA1及管家基因β-actin质粒标准品,以SYBR荧光实时定量PCR分析,制备标准曲线,对非小细胞肺癌组织与外周血中RRM1、ERCC1和BRCA1及管家基因β-actin的mRNA进行检测。结果:标准曲线呈良好的线性关系。标准品的熔解曲线均呈单峰,特异性良好,说明基本无非特异性扩增。结论:所建SYBR荧光实时定量PCR方法操作简便,费用低,特异性好,准确度、灵敏度高,为后续研究构建了理想的平台。

ERCC1、RRM1和TS在非小细胞肺癌中的临床意义

肺癌为临床常见恶性肿瘤，2014年肺癌约占所有恶性肿瘤死亡率的1/4，约占所有新发肿瘤的14%[1]，其中非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）约80%[2]。目前临床对NSCLC广泛采纳以解剖为基础的TNM（tumor-node-metastasis）分期及组织病理学作为治疗及预后判断的标准，但近年来出现许多指导NSCLC治疗策略的新观念，典型例子是表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）突变与EGFR-酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine-kinase inhibitor, TKI）治疗， ALK基因重排与克唑替尼治疗的故事等。

ERCC1、TUBB3和RRM1在三阴性乳腺癌组织中的表达及其意义

目的分析三阴性乳腺癌(TNBC)患者肿瘤组织中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、Ⅲ型β微管蛋白(TUBB3)和核苷酸还原酶1(RRM1)蛋白和基因表达情况以及临床意义。方法选取2012年7月-2017年6月首都医科大学附属北京天坛医院的TNBC石蜡包埋病理标本54例作为TNBC组,以及40例非三阴性乳腺癌组织标本作为非TNBC组,分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应和免疫组织化学染色法检测ERCC1、TUBB3、RRM1基因和蛋白表达水平,并分析mRNA与患者临床病理特征的相关性。结果TNBC患者中ERCC1和TUBB3蛋白阳性表达率分别为25.93%和22.22%,mRNA高表达率分别为29.63%和27.78%,与非TNBC组患者基本一致(P>0.05)。而RRM1蛋白在TNBC组患者中阳性表达率为37.04%,mRNA高表达率为53.7%,高于非TNBC组患者(P<0.05)。ERCC1、TUBB3、RRM1 mRNA在TNBC癌组织中的表达与相应蛋白表达均呈正相关(rs=0.727,0.762,0.712)。且TNBC患者肿瘤组织中TUBB3、RRM1 mRNA表达与TNM分期和WHO组织分级差异有统计学意义(P<0.05)。结论TNBC患者组织RRM1表达高于非TNBC患者,且TUBB3、RRM1 mRNA表达与肿瘤TNM分期有关,对治疗方案的选择具有一定指导价值。