黄连素下调NRAV和PI3K/AKT通路减轻RSV感染致HEp-2细胞的损伤

目的探讨长链非编码RNA NRAV(LncRNA NRAV)和PI3K/AKT通路在黄连素(berberine,BE)减轻RSV感染致HEp-2细胞损伤中的机制。方法将HEp-2细胞感染RSV,并用BE、PI3K激活剂740Y-P处理或过表达NRAV。qRT-PCR检测NRAV、RSV-F、NS2表达水平;CCK-8实验检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞的凋亡率和线粒体膜电位;ATP检测试剂盒检测ATP水平;Western blot检测细胞PI3K、AKT、PINK1、Parkin、Beclin1、p62、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、BNIP3、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达;MitoSOX染色检测细胞线粒体ROS(mtROS);ELISA检测细胞IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α分泌水平。结果过表达NARV细胞凋亡率、RSV活性增加,敲低后结果相反;BE能显著抑制NRAV和PI3K/AKT通路(P<0.05),改善线粒体功能、诱导线粒体自噬,提高细胞的活性、降低凋亡率(P<0.05),并降低NLRP3炎性小体活化水平和IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平(P<0.05)。过表达NRAV或740Y-P处理可逆转BE对RSV感染HEp-2细胞的改善作用。结论BE能够减轻RSV感染所致HEp-2细胞损伤,其机制可能与BE下调NRAV和PI3K/AKT通路,诱导线粒体自噬,进而减轻线粒体损伤和炎症反应有关。

2017—2022年杭州地区4079例儿童RSV感染流行特征分析

目的了解杭州地区急性呼吸道感染儿童中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的核酸阳性检出情况及流行特征。方法收集整理2017年1月至2022年12月杭州市儿童医院检出的RSV核酸阳性患儿的信息,对年龄、性别、检出时间等因素进行回顾性分析。结果累计送检样本22755例,其中RSV病例4079例,总阳性检出率17.93%,历年总体呈现不断波动的感染特征。性别方面,男童RSV阳性检出率10.36%,女童7.57%,男女比例为1.36∶1,差异有统计学意义(P<0.05);年龄上,<1岁的婴幼儿阳性检出2378例,占所有阳性检出患儿的58.30%,<3岁患儿占比94.93%,不同年龄段患儿的RSV阳性检出率随年龄增大呈下降趋势;季节方面,RSV在秋、冬季高发,两季检出率占比83.82%,春、夏季检出率仅为16.18%,秋、冬季节的RSV阳性检出率显著高于春、夏季(P<0.05)。结论杭州地区历年急性呼吸道感染患儿中,RSV感染呈波动趋势,且秋、冬季高发,婴幼儿及男童阳性检出率较高,应注意在相应季节的重点人群的防护。

IFN-γ、TLR4、TGF-β1对RSV感染毛细支气管炎患儿病情严重程度的预测价值

目的 分析γ-干扰素(IFN-γ)、Toll样受体4(TLR4)、转化生长因子-β1(TGF-β1)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染毛细支气管炎患儿病情严重程度的预测价值。方法 选取82例RSV感染毛细支气管炎患儿,依据病情严重程度分为轻度组、中度组、重度组。多因素Logistic回归分析RSV感染患儿IFN-γ、TLR4、TGF-β1水平以及病情严重程度影响因素。Spearman分析IFN-γ、TLR4、TGF-β1与病情严重程度的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析IFN-γ、TLR4、TGF-β1水平预测RSV感染毛细支气管炎病情的价值。结果 中、重度组的年龄、IFN-γ水平均低于轻度组且重度组更低,中度组、重度组的早产儿比例、TLR4、TGF-β1水平高于轻度组且重度组更高(P<0.05);RSV感染患儿病情严重程度的保护因素是年龄、IFN-γ,危险因素是TLR4、TGF-β1、早产儿;病情严重程度与TLR4、TGF-β1呈正相关,与IFN-γ水平呈负相关;IFN-γ、TLR4、TGF-β1预测RSV感染毛细支气管炎病情均AUC>0.70,灵敏度>77%,特异度>60%。结论 TLR4、TGF-β1、IFN-γ对RSV感染毛细支气管炎患儿病情严重程度具有较好的预测价值。

儿童清咽解热口服液体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)作用及其抗炎活性研究

目的:研究儿童清咽解热口服液体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)作用及其抗炎活性。方法:以利巴韦林(Ribavirin)作为阳性对照药物,在HEP-2细胞水平上,采用CellTiter-GloTM免疫荧光法测定受试样品的细胞毒性,通过间接免疫荧光法测定流感病毒蛋白表达水平,以检测细胞培养液上清中病毒复制水平,评价儿童清咽解热口服液对呼吸道合胞病毒(RSV)的作用,同时采用AlphaLISA法检测培养上清中IL-6、IL-8、MCP-1等炎症因子的表达水平。结果:儿童清咽解热口服液半数中毒浓度(CC_(50))为15.33mg·mL^(-1),对呼吸道合胞病毒(RSV)的半数有效浓度(EC_(50))为1.27mg·mL^(-1),炎性指标IL-6、IL-8、MCP-1的半数有效浓度(EC_(50))分别为0.73mg·mL^(-1)、0.83mg·mL^(-1)和0.61mg·mL^(-1)。呼吸道合胞病毒(RSV)选择指数(SI)为12.07,炎性指标IL-6、IL-8、MCP-1的SI分别为21、18.5和25.3。结论:在HEP-2细胞水平上,儿童清咽解热口服液对呼吸道合胞病毒(RSV)病毒具有明显的抗病毒作用,并显示出良好的抗炎活性。

基于RSV工艺装置提高乙烷收率的工艺技术

目的为研究大型天然气深冷工艺装置因膨胀机未投运、关键工艺参数未及时优化调整造成脱甲烷塔操作难度大等导致装置乙烷收率降低等问题,现采用适时投运膨胀机、优化液烃回收装置关键工艺参数等措施开展提高乙烷收率的工艺技术研究。方法基于Aspen HYSYS软件建立装置工艺计算模型,对比分析低温分离器温度、回流贫气和过冷原料气流量及温度等关键设计运行参数对提高乙烷收率的影响,考查上述关键工艺参数对装置乙烷收率的效果。结果经现场验证得出结论,低温分离器温度优化为-68.8~-68.0℃,回流贫气流量和温度分别调整为(7.38~7.60)×10^(4) m^(3)/h、-101.45~-100.05℃,过冷原料气流量和温度分别调整为(7.45~7.63)×10^(4) m^(3)/h、-101.48~-100.45℃,装置实现液烃产品年增产17.56×10^(4) t。结论该项目的应用可实现装置乙烷平均收率由30%提高至90%以上,每年可以获得较高的经济效益,具有较大的推广价值。

清肺通络敷胸方干预RSV诱发幼龄大鼠肺损伤肺泡灌洗液中Treg/Th17及相关细胞因子的影响

目的探讨清肺通络敷胸方对感染RSV幼龄大鼠肺损伤肺泡灌洗液中Treg/Th17及相关细胞因子的影响。方法将18只SD幼龄大鼠随机分为正常组、模型组(RSV组)、清肺通络敷胸方组,每组6只。正常组给予0.9氯化钠溶液滴鼻,其余2组采用RSV滴鼻法建立RSV感染大鼠肺损伤模型。在感染病毒的第7天进行取材。HE染色观察大鼠肺部组织的病理变化,ELISA检测大鼠肺泡灌洗液中IL-17和TGF-β含量,流式细胞术检测肺泡灌洗液中Treg/Th17细胞比率。结果RSV感染大鼠肺组织的肺泡灌洗液中,与正常组比较,模型组(RSV组)大鼠BALF中IL-17含量明显升高、TGF-β含量明显下降,BALF中Th17细胞的比率明显升高,Treg细胞比率明显下降;与模型组(RSV组)比较,清肺通络敷胸方组BALF中IL-17含量明显下降、TGF-β含量明显升高;BALF中Th17细胞的比率明显下降,Treg细胞比率明显上升。结论清肺通络敷胸方对RSV感染幼龄大鼠肺组织的BALF中Th17细胞的表达水平下降,同时使Treg细胞的表达水平上升,改善Treg/Th17的失衡,进而抑制炎症反应。

RSV抑制剂BMS-433771中间体的合成

1-环丙基-1,3-二氢咪唑并[4,5-C]吡啶-2-酮是人类呼吸道合胞病毒(RSV)抑制剂BMS-433771的关键中间体,以此为基础可以合成一系列氮杂双咪唑酮类RSV抑制剂。以4-羟基吡啶为原料,经硝化、氯化和亲核取代反应、氢化、环化4步反应得到1-环丙基-1,3-二氢咪唑并[4,5-C]吡啶-2-酮,其结构经^(1)H NMR表征确证。该合成工艺操作简单,杂质少,具有工业化应用前景。

某气田原料气中CO_(2)含量对RSV乙烷回收工艺的影响分析

新疆油田某气田处理装置进行深冷提效改造,采用RSV凝液回收工艺,回收天然气中的乙烷、LPG及稳定轻烃。装置制冷深度-105℃,乙烷收率95%。初始原料气中不含CO_(2),有利于提高乙烷收率。随着气田滚动开发,新的区块天然气中发现含有少量的CO_(2),由于装置制冷深度较深,CO_(2)含量的上升有可能造成设备的冻堵。因此该技术对原料气CO_(2)含量的变化分析,研究其对脱甲烷塔及产品乙烷收率的影响。经技术研究及HYSYS软件模拟计算,得出结论:当原料气中CO_(2)含量超过1%时,及时调整操作参数降低乙烷收率维持装置正常运行,或考虑增加脱碳装置以维持乙烷收率不变。

海南省2012-2021年儿童RSV急性呼吸道感染流行病学特征分析

目的分析海南省儿童呼吸道合胞病毒(RSV)急性呼吸道感染(ARTI)的流行病学特征,为预防和诊治儿童RSV感染提供参考。方法收集2012年3月至2021年12月于海南省多家医院住院治疗的59312例ARTI患儿的临床资料,对RSV感染病例的流行病学和临床资料进行回顾性分析。采用间接免疫荧光法检测血清中RSV、肺炎支原体、嗜肺军团菌、肺炎衣原体、腺病毒、Q热立克次体、副流感病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒等九项呼吸道病原体IgM抗体。结果59312例ARTI患儿的RSV-IgM阳性率为2.07%(1226/59312)。2016—2018年RSV-IgM阳性率呈上升趋势,并在2017年、2018年达到高值,分别为4.46%、5.20%,随后呈下降趋势。男性ARTI患儿的RSV-IgM阳性率显著高于女性(2.21%vs 1.82%;χ^(2)=10.714,P<0.001)。夏季ARTI患儿RSV-IgM阳性率最高(2.59%),秋季最低(1.70%)。1226例RSV-IgM阳性患儿中,单纯RSV-IgM阳性485例(39.56%),混合感染741例(60.44%)。其中合并1种其他病原体感染505例(41.19%),合并2种其他病原体感染191例(15.58%),合并3种其他病原体感染45例(3.67%)。对于RSV-IgM阳性患儿,以临床诊断为肺炎的占比最高,以咳嗽为最常见的临床症状。混合感染患儿发热的发生率高于单一RSV感染者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论海南省2012—2021年住院ARTI患儿RSV-IgM总阳性率为2.07%。RSV感染以夏季发病率最高,秋季发病率最低。各年龄段均有RSV感染发生,其中婴儿期RSV感染率最高,学龄期最低。男性RSV感染率高于女性。RSV感染常合并1种病原体感染,多为肺炎支原体。RSV感染临床症状主要为咳嗽、发热、鼻塞、流涕、喘息和气促。

重组人干扰素α1b对新生儿呼吸道合胞病毒 (RSV) 肺炎临床症状及肺部功能恢复的影响分析

探究对新生儿呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎治疗采用重组人干扰素 α1b 的临床效果。方法:以我院收治的呼吸道合胞病毒肺炎新生儿患儿 96 例作为观察对象,研究起止时间为 2021.06-2022.06,运用数字表法随机将患儿分为对照组和研究组,各有48例患儿。其中对照组患儿接受常规治疗法,研究组患儿采用重组人干扰素α1b治疗,对比两组患儿的临床症状消失时间(咳嗽、发热)、治疗总有效率指标、肺功能指标等。结果:经实施分组干预,研究组患儿各项症状消退时间均短于对照组(P<0.05);研究组患儿治疗有效率,高于对照组(P < 0.05);研究组患儿肺功能指标,均优于对照组(P < 0.05)。结论:运用重组人干扰素 α1b 治疗新生儿呼吸道合胞病毒肺炎具有积极价值,可缩短症状消退时间、改善临床治疗有效率,并可推动患儿肺部功能恢复,值得推广应用。

天然辅助细胞在初次和再次RSV感染所诱发气道炎症反应中的作用

天然辅助细胞(natural helper cell,NHC)是近期发现的二型固有淋巴细胞的一种,因其在病毒感染后分泌大量Th2型细胞因子,故在病毒感染所诱发的气道炎症反应中发挥重要作用。呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)是最常见的呼吸道病毒,也是一个反复感染的过程。NHC在RSV感染过程发挥的作用尤其是在再次感染中具体作用尚不清楚,故本研究建立初次及再次感染模型,通过计数肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞数量,HE染色观察肺病理炎症反应,Real-time RT-PCR法检测肺组织及NHC内Th1/Th2型细胞因子IFN-γ、IL-5、IL-13mRNA的表达,膜表面染色检测肺组织内CD45+Lin-ST2+标记的NHC数量,细胞膜内染色检测分泌Th1/Th2型细胞因子IFN-γ、IL-5、IL-13的NHC数量,探讨NHC在初次及再次RSV感染所诱发导致气道炎症反应中的作用。结果显示与再次RSV感染相比,初次RSV感染引起的肺炎症反应明显加重,且肺组织内Th2型细胞因子IL-5、IL-13mRNA表达水平亦明显增多,提示与再次RSV感染相比,初次RSV感染可能通过诱导机体产生更多的Th2型细胞因子,进而导致较重的气道炎症。流式细胞分析术发现初次RSV感染鼠肺组织内NHC总数及IL-5+NHC,IL-13+NHC数量明显多于再次RSV感染组,提示与再次RSV感染相比,初次RSV感染诱导更多的Th2型NHC进入肺组织,参与气道炎症。研究证实NHC通过分泌Th2型细胞因子,尤其是IL-5和IL-13,介导RSV感染所诱发的气道炎症反应。

RSV毛细支气管炎外周血嗜酸粒细胞与婴幼儿哮喘关系

目的:婴幼儿呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎急性期外周血嗜酸粒细胞增多对预测今后发生婴 幼儿哮喘是否有意义。方法:检测60例首次患RSV毛细支气管炎婴幼儿急性期外周血嗜酸粒细胞的绝对及相对计数,并在该组患者3周岁时进行电话随访,根据毛细支气管炎发病后有无反复发作喘息将随访到的43例患儿分成3组:无喘息发作、可疑哮喘组、哮喘组,同时记录哮喘家族史。结果:哮喘组RSV毛细支气管炎急性期嗜酸粒细胞数(M,98//mm3)明显多于无喘息发作组(0/mm3)和可疑哮喘组(0/mm3),RSV毛细支气管炎急性期嗜酸粒细胞增多与无嗜酸粒细胞增多比较,今后发生婴幼儿哮喘的比率差异显著(P<0.05),而有无哮喘家族史、男女性别差异在发生哮喘的比率无明显差异(P>0.05)。结论:RSV毛细支气管炎急性期嗜酸粒细胞增多以后更易发生婴幼儿哮喘。

IL-33在呼吸道合胞病毒(RSV)感染致哮喘急性发作中的作用

目的研究IL-33在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染致哮喘急性发作中的作用。方法将24只3周龄SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为PBS组、RSV组、卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)组和OVA/RSV组,每组6只。首先应用OVA或PBS激发并致敏小鼠,再感染RSV致哮喘急性发作。麻醉后处死小鼠。ELISA法测小鼠血清总IgE水平、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及肺组织IL-33蛋白水平;瑞氏/吉姆萨染色后测BALF细胞总数及各细胞分类计数;取肺组织病理切片HE染色;real-time PCR测T辅助细胞2型(T helper 2,Th2)细胞因子、IL-33等mRNA表达。结果 OVA组与PBS组相比,血清IgE水平明显升高(P<0.05)。OVA/RSV组中BALF细胞总数较OVA组显著增加,主要表现为巨噬细胞和中性粒细胞的增加。病理切片HE染色可见OVA/RSV组小气道周围炎性细胞浸润更加明显。以上表明RSV感染OVA诱导哮喘急性发作的小鼠模型成功建立。real-time PCR显示:与OVA组相比,OVA/RSV组IL-13以及IL-33 mRNA表达显著增加(P<0.05),IL-5和ST2表达有所增加,但差异无统计学意义。ELISA结果显示:与OVA组相比,OVA/RSV组肺组织中IL-33浓度增高更加显著(P<0.05),BALF中IL-33浓度也有所增加,但差异无统计学意义。结论 IL-33可能通过启动Th2型免疫反应在RSV感染诱导哮喘急性发作小鼠模型中起重要作用。

3种治法对RSV诱导的肺炎小鼠炎性细胞因子的表达及TLR-4/NF-кB信号通路调控研究

目的:探讨3种治法代表方剂对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导引起肺炎的小鼠血清IL-6、IL-8及肺组织Toll样受体4(TLR4)、细胞核转录因子(NF-кB)的影响,揭示其治疗机制。方法:将Wister小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组、银翘散组、玉屏风散组、银屏散组。于感染前3 d,玉屏风散组、银屏散组连续给予玉屏风散(7.5 g·kg·d-1)3 d;除正常组以外,50μL 10 LD50病毒液滴鼻建立呼吸道合胞病毒感染的小鼠RSV肺炎模型。感染2 h后,银翘散组、银屏散组继续给予银翘散治疗(10 g·kg·d-1),连续给药3 d;采用ELISA法检测各组小鼠血清中IL-6、IL-8含量,免疫组化法检测分析肺组织TLR4、NF-кB P65蛋白的表达。结果:与正常组比较,RSV感染诱导小鼠肺组织中TLR4蛋白表达上调,增加NF-кB的活化(P<0.05),使血清中IL-6、IL-8水平升高(P<0.05)。银翘散组、玉屏风散组、双表法组测得IL-6、IL-8含量以及TLR4、NF-κB P65表达相较于模型组显著减弱(P<0.05)。与利巴韦林组比较,双表法组减弱尤为突出(P<0.05)。结论:3种治法对于治疗RSV肺炎均有显著疗效,尤其以双表法疗效更佳。其作用机制可能与抑制炎症因子IL-6、IL-8分泌及阻断TLR4/NF-κB信号通路有关。

RSV乙烷回收控制CO2冻堵工艺改进

为提高RSV流程对原料气CO2摩尔分数的适应性,应用重烃对CO2的吸收原理提出部分原料气过冷乙烷回收工艺(recycle split-vapor and feed,RSVF),并对提出的RSVF流程进行了改进效果、原料气CO2适应性及流程特性分析。分析结果表明,与RSV流程相比,RSVF流程对原料气CO2摩尔分数适应性更强,相同条件下提高CO2冻堵裕量1.5~1.8℃,节省主体装置总压缩功0~7.56%;当原料气CO2摩尔分数达2.5%时,对不同气质RSVF流程仍能达到90%以上的乙烷回收率。此外,RSVF流程过冷原料气的量一般控制在原料气总量的10%~20%;低温分离器气相过冷量控制在低温分离器气相总量的1%~10%;低温分离器液相过冷量需根据气质条件及原料气CO2摩尔分数确定。

RSV感染患儿外周血CD_4~*”CD_(45)RO^+CD_(45)RA^+表达变化的研究

目的 探讨下呼吸道感染呼吸道合胞病毒 (RSV)患儿外周血辅助性T淋巴细胞 (CD4 ) ,原始T细胞 (CD4 5RA+) ,记忆性T细胞 (CD4 5RO+)表达的变化。方法 用单克隆抗体免疫荧光标记 ,流式细胞仪检测 30例RSV下呼吸道感染患儿急性期外周血单个核细胞 (PBMCs)CD4 +,CD4 5RA+细胞 ,其中 11例同时检测CD4 5RO+细胞 ,同期检测 9例年龄、性别无差异的健康儿为对照。结果 RSV下呼吸道感染组患儿CD4 为 (32 .74± 10 .6 0 ) % ,明显低于对照组 (4 0 .76± 6 .82 ) % ,2组有显著性差异 (P <0 .0 5 )。RSV下呼吸道感染组CD4 5RA+细胞为 (80 .6 5± 10 .35 ) % ,比对照组 (6 7.43± 7.5 4) %明显升高 ,有显著性差异 (P <0 .0 1)。RSV下呼吸道感染组CD4 5RO+细胞比对照组降低 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 RSV感染急性期存在免疫功能紊乱 ,外周血CD4 ,CD4 5RO+下降 ,而CD4 5RA+明显增加 ,这可能是CD4 5RO+向呼吸道迁移的结果。

金欣口服液对RSV感染细胞TLR4及TNF-α表达的影响

目的研究开肺化痰清热止咳中药金欣口服液对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的Hep-2细胞TLR4及该通路下游细胞因子TNF-α表达的影响。方法制备血行药物成分溶液,作用于RSV感染的Hep-2细胞,通过RT-qPCR、免疫荧光标记结合激光共聚焦技术及ELISA法,分别观察分析细胞TLR4mRNA、蛋白和相关细胞因子的表达水平,分析药物作用机制。结果与病毒对照组比较,金欣口服液作用于RSV感染的Hep-2细胞后,TLR4mRNA及蛋白表达显著降低,TNF-α表达显著降低,细胞病变程度减轻。结论金欣口服液含药血清可以通过下调TLR4和TNF-α表达水平减轻感染RSV后Hep-2细胞的病变程度。

咳喘六味合剂对RSV感染哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察咳喘六味合剂对RSV感染哮喘小鼠肺组织中气道炎症的影响。方法:将40只雄性Balb/C小鼠随机分为4组,每组10只。PBS组为非OVA致敏和不感染RSV的对照组。OVA组应用OVA注射和OVA气道雾化吸入致敏。OVA/RSV组和咳喘六味合剂组(KLH组)在应用OVA致敏后用RSV滴鼻,复制急性病毒性哮喘模型。咳喘六味合剂组(KLH组)还用咳喘六味合剂治疗。处死动物,RT-PCR检测肺组织中白细胞介素13(IL-13)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-17A(IL-17A)mRNA的表达;HE染色观察肺病理变化。结果:HE染色显示咳喘六味合剂能显著改善RSV感染哮喘小鼠气道炎症。与PBS组相比,OVA组IFN-γ降低,IL-13、IL-17A增高(P<0.05,P<0.01);OVA/RSV组IL-13、IL-17A增高(P<0.01),IFN-γ虽降低,但无统计学意义(P>0.05),且IFN-γ、IL-13均较OVA组增高(P<0.05,P<0.01)。较OVA/RSV组相比,KLH组能显著升高IFN-γ(P<0.05,P<0.01);降低IL-13、IL-17A mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:咳喘六味合剂可抑制气道炎症,改善肺组织中炎性因子的表达,达到控制哮喘的目的。

天然咖啡酰基奎宁酸类化合物抗RSV活性及其构效关系研究

目的:研究天然来源的咖啡酰基奎宁酸类化合物体外抗呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)的活性及其构效关系。方法:采用细胞病变(cytopathic effect,CPE)法对咖啡酰基奎宁酸类化合物抗RSV体外活性进行筛选,MTT法检测化合物对HEp-2细胞的细胞毒性,通过3D-QSAR(three-dimensional quantitative structureactivity relationship)模型分析其构效关系。结果:CPE结果显示咖啡酰基奎宁酸类化合物均表现出较好的抗RSV作用,其中活性最好的4,5-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(CQA-4)的IC_(50)=2.5μmol/L,选择性指数SI>153.8,远远优于阳性对照药物利巴韦林(IC_(50)=8.3μmol/L,SI>20);3D-QSAR分析结果显示,咖啡酰基为咖啡酰基奎宁酸衍生物抗RSV的活性基团。结论:天然来源的咖啡酰基奎宁酸类衍生物均具有抗RSV活性,其中双咖啡酰基奎宁酸类化合物活性最好。构效关系研究表明,该类化合物抗RSV活性受其构型和取代基的影响很大。

实时荧光定量PCR检测RSV胁迫下抗病、感病水稻中与脱落酸相关基因的差异表达

采用实时荧光定量PCR方法测定了水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)胁迫下抗性不同品种水稻中与脱落酸相关基因的mRNA转录水平变化。结果表明:感病品种武育粳3号中WGP1、OsGASA2、Polcalcin、Os-CBL4、Myb和OsCIPK15基因表达水平均上调,上调比率分别为4.96、5.17、2.01、5.17、12.04和7.84。而抗病品系KT95-418中,OsGASA2和OsCIPK15基因表达水平下调,下调比率分别为1/5.40和1/2.08;Polcalcin和Myb基因表达水平上调,上调比率分别为4.20和3.86;WGP1和OsCBL4表达量变化不明显。这些结果表明,RSV胁迫能诱导脱落酸相关基因表达量的变化,并且在抗病、感病水稻品种中的表达特征不同,从而提示植物激素脱落酸可能调控了RSV胁迫条件下相关基因的表达。