基于GC-MS代谢组学的RSV肺炎小鼠尿液和粪便生物标记物研究

目的通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析RSV肺炎小鼠尿液和粪便中代谢物的相对含量变化,寻找可协助RSV肺炎诊断的生物标记物。方法 RSV滴鼻感染BALB/c小鼠建立RSV肺炎模型,分别收集小鼠的尿液和粪便,经肟化和衍生化后,运用GC-MS检测尿液和粪便中所含有的代谢物及其相对含量的变化。结果 RSV肺炎小鼠的尿液中共测得38种代谢产物,其中乳酸、丙酸、L-脯氨酸为差异代谢产物(P<0.05);粪便中共测得43种代谢物,其中亮氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、酪氨酸、嘧啶有显著差异(P<0.05)。结论运用GC-MS代谢组学技术寻找RSV肺炎小鼠尿液和粪便中的生物标记物具有可行性。

中医药治疗小儿RSV肺炎的临床研究

目的探讨中医药治疗小儿RSV肺炎的临床有效性和安全性。方法采用区组随机、平行对照、多中心试验的原则,将297例患儿分为2组,试验组静滴清开灵注射液,痰热闭肺证口服儿童清肺口服液,风热闭肺证口服小儿咳喘灵口服液、对照组静滴利巴韦林注射液,口服复方愈创木酚磺酸钾口服液,疗程10 d。对所得数据进行χ2检验、秩和检验或t检验。结果临床疾病疗效评价结果:试验组愈显率90.54%,对照组81.88%,差异有统计学意义(P<0.05),试验组优于对照组。以治疗前后主症积分的差值减少对疾病进行疗效再评价,结果试验组愈显率87.84%,对照组65.77%,差异有显著统计学意义(P<0.01),试验组优于对照组。两种方法均显示痰热闭肺证2组比较差异有统计学意义(P<0.05),试验组优于对照组,风热闭肺证比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组安全性评价结果显示:试验组优于对照组。结论中医药治疗小儿RSV肺炎具有良好的有效性和安全性,尤其表现在痰热闭肺证上。清开灵注射液静滴和儿童清肺口服液口服的组合是小儿RSV肺炎痰热闭肺证的有效治疗方案。

3种治法对RSV诱导的肺炎小鼠炎性细胞因子的表达及TLR-4/NF-кB信号通路调控研究

目的:探讨3种治法代表方剂对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导引起肺炎的小鼠血清IL-6、IL-8及肺组织Toll样受体4(TLR4)、细胞核转录因子(NF-кB)的影响,揭示其治疗机制。方法:将Wister小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组、银翘散组、玉屏风散组、银屏散组。于感染前3 d,玉屏风散组、银屏散组连续给予玉屏风散(7.5 g·kg·d-1)3 d;除正常组以外,50μL 10 LD50病毒液滴鼻建立呼吸道合胞病毒感染的小鼠RSV肺炎模型。感染2 h后,银翘散组、银屏散组继续给予银翘散治疗(10 g·kg·d-1),连续给药3 d;采用ELISA法检测各组小鼠血清中IL-6、IL-8含量,免疫组化法检测分析肺组织TLR4、NF-кB P65蛋白的表达。结果:与正常组比较,RSV感染诱导小鼠肺组织中TLR4蛋白表达上调,增加NF-кB的活化(P<0.05),使血清中IL-6、IL-8水平升高(P<0.05)。银翘散组、玉屏风散组、双表法组测得IL-6、IL-8含量以及TLR4、NF-κB P65表达相较于模型组显著减弱(P<0.05)。与利巴韦林组比较,双表法组减弱尤为突出(P<0.05)。结论:3种治法对于治疗RSV肺炎均有显著疗效,尤其以双表法疗效更佳。其作用机制可能与抑制炎症因子IL-6、IL-8分泌及阻断TLR4/NF-κB信号通路有关。

清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎痰热闭肺证的临床研究——发热症状改善的临床评价

目的评价清肺口服液对于小儿呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎痰热闭肺证发热症状的改善作用。方法将330例RSV肺炎痰热闭肺证患儿随机分为2组,试验组165例,使用清肺口服液加用不含抗病毒药物的液体;对照组165例,使用利巴韦林加用清肺口服液安慰剂。应用SAS 9.13统计软件进行数据统计分析。结果2组在发热症状改善方面,试验组在治疗第7 d超过对照组,差别有统计意义(P<0.05)。结论清肺口服液治疗小儿RSV肺炎痰热闭肺证,能够改善患儿的发热症状,但是作用缓慢,临床应用时当随证加减。

RSV RNA检测在中医药治疗小儿RSV肺炎的病原学评价中的应用

目的对中医药治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎进行病原学疗效评价。方法中医药治疗小儿RSV肺炎的临床试验按照GCP规范进行,应用实时荧光PCR技术检测RSV RNA。结果对67例入选病例治疗4、71、0 d的鼻咽部分泌物进行RSV检测,结果显示:实验组和对照组RSV d 4d、7转阴比较,差异无统计学意义(P>0.05),d 10全部转阴。结论中医药治疗小儿呼吸道合胞病毒性肺炎,其病毒阴转率与对照组(西药组)没有差异。

新生儿RSV肺炎的临床症状及干扰素治疗效果观察

目的研究重组人干扰素α1b对新生儿呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎临床症状及肺部功能恢复的影响。方法选取2012年1月至2017年1月在秦皇岛市第二医院儿科就诊的150例新生儿RSV肺炎患儿为阳性组,另随机抽取150例同期出生RSV检查阴性的新生儿为阴性组。将阳性组中所有患儿随机分为观察组和对照组,每组各75例患者。入院后,对照组患者进行常规治疗,观察组在常规治疗的基础上增加使用重组人干扰素α1b。对比阳性组和阴性组的肺部啰音消失时间、住院时间、吸氧天数,于一周后评估两组临床疗效。测定并比较观察组和对照组两组患儿的肺功能指标。结果阳性组与阴性组呛奶和发热的发生率比较,差异均无统计学意义(χ~2值分别为0.277、0.905,均P>0.05);阳性组患儿咳嗽、鼻塞、细湿啰音、哮鸣音的发生率明显高于阴性组(χ~2值分别为30.767、27.540、85.394、11.777,均P<0.05);阳性组患儿纯母乳喂养率明显低于阴性组(χ~2=6.595,P<0.05)。观察组的啰音消失时间、吸氧天数和住院时间明显少于对照组(t值分别为-2.306、-3.643、-2.985,均P<0.05),观察组患者的治疗有效率(85.33%)明显高于对照组患者(62.67%)(χ~2=10.014,P<0.05)。治疗期间,观察组和对照组患者均未出现出血、皮疹、心率异常等严重不良反应。治疗后,观察组和对照组的呼吸比(IT/ET)、呼气峰流速(PEF)、达峰容积(VPEF)、吸气时间(IT)、呼气时间(ET)水平比较,差异均无统计学意义(t值分别为-0.855、-1.003、-1.535、-0.272、-0.699,均P>0.05);观察组患儿的MV、TV、TPTEF/TE、VPEF/VE和TPTEF水平均高于对照组,RR值明显低于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为2.310、2.048、2.007、2.559、2.403、-2.034,均P<0.05)。结论鼻塞、咳嗽、哮鸣音、细湿鸣音、纯母乳喂养率低为新生儿RSV肺炎的主要临床特征,使用干扰素治疗新生儿RSV肺炎有显著疗效,能有效促进肺部功能的恢复。

RSV感染足月新生儿肺炎临床表现及实验室检查分析

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染足月新生儿肺炎的临床表现及实验室检查结果的特点。方法随机选取2013年1月至2015年12月义乌市妇幼保健计划生育服务中心儿科收治的足月新生儿肺炎患儿200例,采用直接免疫荧光法对其进行RSV抗原检测,根据检测结果将其分为RSV阳性组和RSV阴性组,分析两组患儿的临床表现及实验室检查结果。结果在200例足月新生儿肺炎患儿中,RSV阴性组179例,RSV阳性组21例,感染率达10.50%。两组在喂养方式、分娩方式及年龄上的差异均有统计学意义(χ~2值分别为4.084、29.007、2.229,均P<0.05)。两组患儿的喘鸣音、细湿性啰音、三凹征、呼吸急促及咳嗽发生率比较差异均有统计学意义(χ~2值分别为13.195、34.641、15.590、17.378、3.979,均P<0.05)。RSV阳性组患儿X线胸片出现斑片影的比例较RSV阴性组明显降低,而出现肺气肿的比例则明显高于RSV阴性组,经比较差异均有统计学意义(χ~2值分别为9.926、67.427,均P<0.05)。在治疗与转归方面,患儿全部使用了抗生素,均治愈。结论足月新生儿感染性肺炎的主要病原体是RSV,顺产及母乳喂养均可在一定程度上降低足月新生儿感染RSV的风险。该类感染性肺炎在临床表现上更易出现肺部啰音、呼吸急促及咳嗽,肺气肿表现则在X线胸片检查上更容易出现。

RSV肺炎患儿T淋巴细胞亚群检测分析

目的探讨T淋巴细胞亚群检测分析对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)肺炎患儿病情严重程度的评估价值。方法以医院2021年3月—2022年3月收治的60例RSV肺炎患儿为研究对象,结合入院后24 h内最差状态的小儿危重病例评分为本次分组依据,患儿共被纳为两组,包括重度组(分值≥80分,n=30)、轻度组(分值<80分,n=30),所有患儿均以相同方法开展T淋巴细胞亚群检测分析,将检测结果进行对比。结果重度组Treg百分数、Treg与Th17的比值低于轻度组,其Th17百分数高于轻度组(P<0.05)。轻度组白介素-17(nterleukin-17,IL-17),白介素-8(interleukin-8,IL-8),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白介素-4(interleukin-4,IL-4)、白介素-5(interleukin-5,IL-5)均低于重度组,且白介素-10(interleukin-10,IL-10),白介素-13(interleukin-13,IL-13),白介素-2(interleukin-2,IL-2),干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)均高于重度组(P<0.05)。结论对RSV肺炎患儿实施T淋巴细胞亚群检测分析可评价其不同病情程度,有一定的可行价值。

雾化吸入干扰素α2b注射液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎的疗效

目的观察雾化吸入重组人干扰素α2b注射液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎的疗效。方法选择2013年9月至2014年8月保定市第一中心医院收治的60例呼吸道合胞病毒肺炎患儿,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组各30例。对照组患儿给予常规治疗,观察组患儿在常规治疗的基础上,雾化吸入干扰素α2b注射液10万IU/kg,1次/天。观察治疗1周后两组患儿咳嗽、喘憋、肺部啰音等症状消失的时间,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)、白介素-18(IL-18)水平的变化以及不良反应发生例数。结果治疗1周,观察组患儿咳嗽、喘憋及肺部啰音消失时间均短于对照组[(4.11±0.89)d vs(5.19±1.27)、(4.01±1.17)d vs(5.22±1.35)d、(4.35±1.09)d vs(5.67±1.32)];观察组血清TNF-α、IL-18水平低于对照组[(43.33±5.65)ng/L vs(58.27±6.21)ng/L、(176.39±88.31)ng/L vs(248.25±91.78)ng/L];IL-10水平高于对照组[(19.74±6.88)ng/L vs(15.26±6.60)ng/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患儿治疗总有效率(96.42%)高于对照组(80.00%),差异有统计学意义(P<0.05),观察组不良反应发生率为6.67%,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论雾化吸入干扰素α2b注射液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎能降低患者炎症因子水平,不良反应较轻,临床疗效显著。

基于脂质代谢网络的虎杖抗呼吸道合胞病毒肺炎代谢组学研究

目的:探讨虎杖用于干预呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)诱导BALB/c小鼠肺炎的脂质代谢网络的变化。方法:选取18只BALB/c小鼠,随机分为空白组、RSV肺炎组、虎杖组3组,RSV肺炎组、虎杖组滴鼻给予RSV病毒诱导产生肺炎,虎杖组灌胃给予虎杖提取物给予治疗,空白对照组灌胃给予生理盐水作为对照。实验结束,取血浆测定其血浆中的脂质代谢物质。建立基于高效液相-线性离子阱-静电场轨道杂交质谱(HPLC-LTQ-Orbitrap-MS)的脂质代谢组学技术,表征3组小鼠血浆中脂质代谢轮廓的变化,通过单因素方差分析筛选差异性化合物(P<0.0.5),并对其差异化合物进行结构确定,阐明其可能调节的脂质代谢网络。结果:多变量数据统计结果显示,3组小鼠的血浆脂质代谢轮廓区分明显,受调控的脂质分子主要为磷脂酰胆碱、三酰甘油成分和磷酸化神经酰胺。代谢通路分析结果显示,虎杖主要调节了磷脂代谢。结论:虎杖提取物通过调节磷脂代谢发挥抗RSV肺炎的作用。

婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎治疗前后肺功能分析

目的探讨婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎治疗前后肺功能的变化。方法采用潮气呼吸法测定23名1～19个月的呼吸道合胞病毒肺炎婴幼儿的肺功能。以26名同龄健康儿童做对照。主要参数为:达峰时间(TPTEF)、达峰时间比(TPTEF/TE)、达峰容积(VPEF)、达峰容积比(VPEF/VE)、呼吸频率(RR)、潮气量(VT/kg)、潮气呼吸容量环(TFVL)。结果治疗前肺炎患儿呼吸频率(RR)为(36.300±7.154)次/分,较同龄对照组(30.950±6.00)次/分明显增快(P<0.01),反映气道阻塞的指标:TPTEF/TE和VPEF/VE分别为(19.650±3.030)%和(23.150±2.860)%,低于健康对照组的(24.580±5.190)%和(26.020±4.340)%,P<0.01。经治疗,患儿呼吸频率逐渐下降为(33.560±5.570)次/分,TPTEF和VPEF、TPTEF/TE、VPEF/VE均明显回升,其中TPTEF/TE、VPEF/VE显著增高,为(24.240±5.700)%和(24.760±3.040)%,P<0.05。TBFV环形态特点:治疗前TBFV环呼气曲线升支陡、高峰提前、降支斜率增大。结论婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎时存在明显的小气道阻塞,潮气呼吸测定能反映肺炎气道病变的程度及临床治疗的效果。

合胞病毒肺炎T细胞趋化值和总IgE的变化

目的探讨T淋巴细胞趋化功能及IgE的产生与呼吸道合胞病毒（RSV）肺炎的发病关系，寻找检测细胞免疫功能的新方法。方法采用微量玻片法和放射免疫法，观察RSV肺炎患儿外周血T淋巴细胞趋化值及总IgE的变化。结导RSV肺炎患儿外周血T淋巴细胞趋化值为4.96％±0.29％，总IgE为（567.00±169.60）mg／L，明显高于正常对照组（P＜0.01）。给论RSV肺炎的患儿类同于支气管哮喘患儿，存在明显的免疫功能紊乱，表现为T淋巴细胞起化性和B淋巴细胞分泌IgE明显的增高。

腺病毒与呼吸道合胞病毒肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群差异分析

目的比较腺病毒(adeno virus,ADV)与呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)肺炎患儿及健康儿童外周血淋巴细胞亚群的百分比例并探讨其临床意义。方法收集2014年1月~2015年12月期间在深圳市儿童医院住院的腺病毒肺炎患儿(ADV组)30例,呼吸道合胞病毒肺炎患儿(RSV组)30例(入选依据:60例病毒感染患儿肺部听诊均可闻及中小湿啰音,肺部X线片有点状或片状阴影,临床诊断为肺炎,直接免疫荧光法检测相关病毒抗原结果为阳性且无其他病原感染的临床及实验室证据)以及健康体检儿童(健康组)35例,应用流式细胞术检测上述研究对象外周血中CD3^+T细胞,CD3^+CD4^+T细胞,CD3^+CD8^+T细胞,CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^-CD19^+B细胞的百分比并比较各组间的差异。结果与健康组相比较,ADV组[(55.04±8.45)%vs(69.07±9.30)%,t=3.32,P=0.002]与RSV组[(60.90±11.12)%vs(69.07±9.30)%,t=2.43,P=0.004]的CD3^+T细胞比例均下降,差异具有统计学意义(P<0.01),特别是ADV组[(21.26±6.16)%vs(26.97±7.63)%,t=1.87,P=0.04]与RSV组[(21.56±7.06)%vs(26.97±7.63)%,t=1.68,P=0.04]的CD3^+CD8^+T细胞比例明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05);与此同时,与健康组相比,ADV组[(28.22±5.16)%vs(17.06±6.42)%,t=3.25,P=0.001]和RSV组[(29.14±10.96)%vs(17.06±6.42)%,t=2.79,P=0.009]的CD3^-CD9^+B细胞比例升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与健康组[(13.54±5.95)%,t=2.01,P=0.03]及ADV组[(16.26±8.34)%,t=2.89,P=0.005]相比,RSV组的CD3^-CD56^+NK细胞亚群比例[(9.59±5.54)%]下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论腺病毒肺炎和呼吸道合胞病毒肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群比例存在统计学差异,病毒性肺炎患儿体内可能存在免疫应答紊乱。

桑白皮多糖对呼吸道合胞病毒肺炎小鼠肺组织病理和外周血T细胞亚群的影响

目的通过研究桑白皮多糖对呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎BALB/c小鼠肺组织病理形态和外周血T细胞亚群的影响,探讨桑白皮多糖对BALB/c小鼠RSV肺炎的干预机制。方法 BALB/c小鼠采用随机数字表法分为正常组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组10只;除正常组外,用RSV(long株)经鼻腔接种,建立小鼠RSV肺炎模型。于感染当天,高、中、低剂量组分别给予桑白皮多糖182、91、45.5 mg·kg-1·d-1灌胃,正常组与模型组给予等体积生理盐水灌胃,每天1次,于感染第7天取外周血进行T细胞亚群的检测及肺组织进行HE染色。结果桑白皮多糖能有效地减少肺泡壁炎细胞的浸润,改善肺组织的炎症状况。高、中、低剂量组与模型组比较,高剂量组CD3+T细胞百分率为(50.35±8.97)%、CD4+T/CD8+T为(3.52±0.79),差异有统计学意义(P<0.05);中剂量组CD3+T细胞百分率为(55.05±5.94)%、CD4+T细胞百分率为(20.39±5.56)%、CD4+T/CD8+T为(2.88±0.56),差异有统计学意义(P<0.05);低剂量组只有CD4+T/CD8+T为(3.49±0.45),差异有统计学意义(P<0.05)。结论桑白皮多糖可以改善肺炎小鼠肺组织病理变化,能够调节机体细胞免疫。

清肺通络膏对呼吸道合胞病毒感染大鼠肺组织PI3K-AKT-NFκB信号通路的影响

目的观察清肺通络膏对呼吸道合胞病毒(RSV)感染大鼠肺组织PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白表达的影响,探讨清肺通络膏对PI3K/AKT/NF-κB信号通路的调控机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组各10只,模型组、治疗组均给予RSV滴鼻接种3d,治疗组于接毒第1天予清肺通络膏背部贴敷,连续7d。于造模第7天后取大鼠肺组织,运用免疫组织化学染色法检测各组大鼠肺组织中PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组大鼠肺组织PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RSV感染大鼠时激活了PI3K/AKT/NF-κB信号通路,清肺通络膏能够抑制PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白的表达,可能是清肺通络膏干预RSV肺炎的机制之一。

呼吸道合胞病毒性毛细支气管炎中嗜酸性粒细胞趋化因子的作用和临床意义

目的探讨嗜酸性粒细胞趋化因子在呼吸道合胞病毒性(RSV)毛细支气管炎患儿血、痰中的临床意义。方法选取来我院就诊的毛细支气管炎患儿48例作为观察组,将观察组患儿按病情程度分为轻、中度和重度毛细支气管炎两组,其中轻、中度组32例,重度组16例,对照组的研究对象为我院18例无喘息病毒性肺炎患儿。观察组及对照组患儿血清和痰中的Eotaxin水平测定采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验。结果对治疗前后的轻、中度组及其重度组患儿的血Eotaxin水平进行比较,差异有统计学意义(P<0.01);与轻、中度组患儿血清和痰液中的Eotaxin水平比较,肺炎组患儿差异具有统计学意义(P<0.01);血清中的Eotaxin水平在轻、中度组和重度组中无显著性差异(P>0.05);与轻、中度组痰中Eotaxin水平比较,重度组无统计学意义(P>0.05)。而与恢复期血清中的Eotaxin水平比较,肺炎组具有统计学意义(P<0.05)。结论血清和痰中Eotaxin水平在毛细支气管患儿中会显著偏高,因此Eotaxin是毛细支气管发病的一个重要因素。

小鼠感染合胞病毒与鼠流感病毒后肺脏病理学比较研究

目的与方法用合胞病毒(RSV)和鼠肺流感病毒(IVP)感染SPF级BALB/c小鼠,复制两种不同的小鼠病毒性肺炎动物模型,观察其临床症状,并对两种模型各自的肺部组织病理学特点进行研究。结果与结论IVP模型组与RSV模型组小鼠感染病毒后,分别在试验的2天和3天发病,临床症状均表现为精神沉郁、耸毛、卷缩、毛无光泽、活动减少、呼吸急促、咳嗽。但IVP感染模型组小鼠在发病后出现死亡,第7天其死亡率达到40%,而RSV感染模型组小鼠7日试验内无死亡病例发生。病理组织学诊断,RSV模型组小鼠为急性渗出性间质性肺炎,IVP模型组小鼠为出血性间质性肺炎。

呼吸道合胞病毒肺炎623例临床分析

本文总结了１９８１至１９９０年呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）肺炎住院患儿６２３例的临床过程。该病患病率比腺病毒（ＡｄＶ）肺炎高。提出ＲＳＶ肺炎的临床分度和分型。Ｘ线片呈大片状阴影和胸腔积液提示本病有双重病原体感染。７．８７％患儿合并有细菌感染。死亡率低的原因可能与我科多年来采用以活血化瘀为主的中药和中西医结合的治疗方法有关。

老年人呼吸道合胞病毒感染的调查研究

目的了解深圳地区老年人呼吸道合胞病毒感染现状。方法采用碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶桥联酶标(APAAP)、间接酶联免疫吸附试验(ELT-SA)和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对老年呼吸疾病患者进行RSU Ag、RSV IgG、RSV RNA进行检测。结果患者标本中,RSV抗原阳性率:老年人组为14.48％,对照组为8.75％;RSV IgG阳性率:老年人组为52.33％,对照组为26.25％;RSV RNA阳性率:老年人组为12.15％,对照组为7.5％(P<0.05)。两组比较无显著差异。结论老年呼吸系统疾病患者中,RSV感染较为普遍,应引起重视。

基于网络药理学及实验验证探讨定喘颗粒干预呼吸道合胞病毒肺炎机制研究

目的基于网络药理学和动物实验验证探讨定喘颗粒干预呼吸道合胞病毒肺炎的作用机制。方法通过TCMSP、TCMID等数据库获取定喘颗粒中各个中药的潜在活性成分及作用靶点,根据ADME药动学参数筛选定喘颗粒中药物的活性成分;通过Genecards、OMIM、DisGeNet数据库获取呼吸道合胞病毒肺炎潜在的疾病靶点;利用String平台构建蛋白互作网络对交集靶点进行可视化处理;采用David数据库对关键核心靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析;随后利用Cytoscape软件(3.9.1)构建定喘颗粒干预呼吸道合胞病毒肺炎的相关网络。选取呼吸道合胞病毒(RSV)致呼吸道合胞病毒肺炎幼龄大鼠模型进行实验验证。结果网络药理学结果显示定喘颗粒共177个潜在活性成分,作用于144个靶点,呼吸道合胞病毒肺炎共1075个相关靶点,得到“药物-疾病”交集靶点55个,其中核心靶点25个为ALB、IL6、CASP3、EGFR、VEGFA等;GO功能富集分析结果显示涉及的生物过程主要包括对转录的正调控、对RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、对基因表达的正调控、对细胞凋亡过程的负调控等;KEGG通路富集主要涉及PI3KAkt信号通路、癌症通路、肿瘤坏死因子信号通路、IL-17信号通路等。动物实验初步表明:定喘颗粒可通过调控PI3K-Akt信号通路,从而参与炎症、免疫反应发挥作用。与正常组相比,模型组幼龄大鼠肺组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt的比值显著升高(P<0.05),病毒载量显著升高(P<0.05),肺组织损伤病理评分显著增高(P<0.05),肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子IL-6、TNF-α含量明显增高(Ρ<0.05)。与模型组相比,定喘颗粒各剂量组和阳性对照组幼龄大鼠肺组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达降低(Ρ<0.05),病毒载量显著降低(P<0.05),肺组织损伤病理评分明显降低(P<0.05),BALF中炎症因子IL-6、TNF-α含量明显降低(Ρ<0.05)。结论研究揭示了定喘颗粒治疗呼吸道合胞病毒肺炎的多组分、多靶点、多通路的协同作用机制。经动物实验验证,RSV感染幼龄大鼠时很有可能激活了PI3K-Akt信号通路,引起炎症因子IL-6、TNF-α释放,定喘颗粒能够有效下调PI3K-Akt信号通路,抑制炎症因子IL-6、TNF-α释放从而达到达到抗炎的作用。