多重PCR检测霍乱弧菌RTX毒力基因

目的:探索建立一种快速、敏感的诊断方法,用于检测霍乱弧菌RTX毒力基因。方法:针对霍乱弧菌霍乱肠毒素A亚单位基因(ctxA)、RTX毒素家族的细胞毒素基因(rtxA)和毒素激活子基因(rtxC)分别设计3对引物,建立多重PCR方法;用Hep-2细胞测毒方法检测rtxA、rtxC阳性菌株毒素的表达。结果:所有183株临床和环境中分离的霍乱弧菌中,PCR和Hep-2细胞测毒法RTX毒素均为阳性,而古典生物型标准株(569B)二者均为阴性。结论:该方法快速、特异、敏感,具有较大的应用价值。