NMDA干预下Rab30在PC12细胞中的表达及凋亡通路

探讨兴奋毒性氨基酸(NMDA)损伤干预下Rab30在PC12细胞中的表达及其凋亡通路,发现NMDA干预可能通过下调Rab30和GM130的表达,使高尔基体结构破裂成片,并可能通过上调GAAP和Caspase-3的表达,诱导PC12细胞的凋亡和死亡.

lncRNA RAB30-AS1对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡影响的机制研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)RAB30-AS1对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养宫颈癌Hela细胞,分别转染pcDNA-NC(NC组)和pcDNA-RAB30-AS1(RAB30-AS1组),采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转染效率。通过Edu试验和流式细胞术检测细胞增殖能力和凋亡能力的改变。qRT-PCR和蛋白质印迹法(Westernblot)检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)基因的表达。结果NC组和RAB30-AS1组Hela细胞中RAB30-AS1的表达分别为(1.34±0.27)和(8.90±1.60),NC组RAB30-AS1表达明显低于RAB30-AS1组(P<0.01)。NC组和RAB30-AS1组Hela细胞增殖率分别为(41.82±2.86)%和(20.85±3.82)%,RAB30-AS1组细胞增殖率明显低于NC组(P<0.01)。NC组和RAB30-AS1组Hela细胞凋亡率分别为(12.61±1.96)%和(32.19±4.29)%,RAB30-AS1组细胞凋亡率明显高于NC组(P<0.01)。与NC组相比,RAB30-AS1组Hela细胞中GPC5基因表达显著增加(P<0.01)。结论RAB30-AS1过表达能够抑制宫颈癌Hela细胞的增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与促进GPC5基因表达有关。

过氧化氢干预下Rab30在PC12细胞中的表达及促凋亡通路

目的探讨经过氧化氢(H_2O_2)损伤干预下Rab30在PC12细胞中的表达及可能的促凋亡通路。方法将体外常规培养的PC12细胞分为正常组和H_2O_2组。采用MTT检测细胞存活率;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;Western-blot检测Rab30、JNK3、GM130、Caspase-3的蛋白表达情况。结果 H_2O_2损伤干预可导致PC12细胞的存活率显著降低(P<0.05),早期凋亡率和总凋亡率均显著增高(均P<0.05);JNK3、Caspase-3蛋白表达水平在PC12细胞中显著增加(P<0.05),而Rab30、GM130蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论 H_2O_2在PC12细胞中的促凋亡通路可能是H_2O_2激活JNK3的表达而靶向下调Rab30,致使高尔基体结构破碎,并激活Caspase-3的活性,从而诱导PC12细胞的凋亡。

神经元高尔基体碎裂与Rab30表达变化的关系

目的探讨HT22神经元高尔基体的碎裂与小分子GTP结合蛋白-30（Rab30）表达变化的关系及意义。方法将体外常规培养的小鼠海马神经元细胞系HT22分为对照组、毒胡萝卜素处理3h组和毒胡萝卜素处理5h组。采用细胞免疫荧光染色技术观察高尔基体的形态及Rab30的定位：实时荧光定量PCR技术检测R曲30mRNA的表达；Westernblotting检测Rab30、顺式高尔基体基质蛋白-130（GM130）、高尔基体抗凋亡蛋白（GAAP）蛋白的表达。结果毒胡萝h素诱导了HT22神经元高尔基体的碎裂，毒胡萝h素的作用时间越长，高尔基体的碎裂程度越大。海马神经元中存在Rab30的表达，且主要定位于高尔基体。对照组、毒胡萝卜素处理3h组、毒胡萝卜素处理5h组细胞中R曲30mRNA表达均依次下调，相对表达量分别为1．00±0．00、0．73±0．05、0．53±0．01，差异有统计学意义（P〈0．05）。对照组、毒胡萝卜素处理3h组、毒胡萝卜素处理5h组细胞中Rab30、GM130、GAAP蛋白表达均依次下调，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论毒胡萝卜素诱使HT22神经元高尔基体的碎裂可能与细胞内Rab30的表达量降低有关。