-
题名阴道毛滴虫Rab1a基因的cDNA克隆及重组表达
被引量:2
- 1
-
-
作者
徐晓园
傅玉才
许铭炎
史咏梅
刘红
-
机构
汕头大学医学院细胞衰老实验室
-
出处
《热带医学杂志》
CAS
2006年第6期616-619,630,共5页
-
文摘
目的克隆和分析阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis,Tv)Rab1a基因,构建Rab1a基因表达重组载体并表达其融合蛋白,以进一步探讨其功能。方法提取阴道毛滴虫基因组DNA为模板,扩增TvRab1a基因,用pQE80L载体与TvRab1acDNA克隆构建原核表达重组体并表达融合蛋白,纯化表达产物并由SDS-PAGE鉴定。结果在阴道毛滴虫cDNA文库克隆中发现了Rab1a基因,序列分析显示Rab1a基因的基因组DNA序列含有一个25bp大小的内含子。成功构建了pQE/Rab1a原核表达重组体,并表达出预期大小的重组蛋白质。结论分析表明TvRab1a基因是阴道毛滴虫Rab1鸟苷三磷酸酶同源基因,它含有一个25bp的内含子。获得了该基因的重组蛋白,将对TvRab1a基因的功能进行进一步研究。
-
关键词
阴道毛滴虫
Rab1a
重组蛋白表达
-
Keywords
Trichomonas vaginalis
rabla homolog
recombinant protein expression
-
分类号
R382.21
[医药卫生—医学寄生虫学]
-
-
题名阴道毛滴虫Rab1a重组蛋白的表达和细胞内定位
被引量:1
- 2
-
-
作者
徐晓园
傅玉才
许铭炎
许锦阶
张仁利
-
机构
汕头大学医学院
深圳市疾病预防控制中心
-
出处
《热带医学杂志》
CAS
2006年第12期1253-1256,共4页
-
文摘
目的制备阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis,Tv)Rab1a重组蛋白及其多克隆抗体,并对TvRab1a蛋白进行阴道毛滴虫的细胞内定位。方法将我们已构建的pQE80L/TvRab1a重组表达质粒转入大肠埃希菌E.coliM15,在IPTG诱导下表达重组蛋白,经Ni-NTA亲和柱层析后获得纯度较高的TvRab1a的重组蛋白;用经复性处理的重组蛋白免疫动物,获得TvRab1a重组蛋白抗血清,免疫印迹WesternBlot鉴定抗血清。采用荧光免疫细胞化学对TvRab1a蛋白进行细胞内定位。结果WesternBlot分析显示,TvRab1a重组蛋白可与豚鼠的抗TvRab1a血清反应,同时该抗血清在滴虫提取蛋白中检测到与预测TvRab1a分子量一致的条带;免疫荧光化学检测发现TvRab1a分布于细胞核周围的高尔基复合体与内质网。结论获得的抗TvRab1a蛋白的多抗血清可用于TvRab1a基因功能的研究;TvRab1a功能场所位于高尔基复合体与内质网。
-
关键词
阴道毛滴虫
Rab1a
重组蛋白表达
TvRab1a抗血清
细胞内定位
-
Keywords
Trichomonas vaginalis
rabla homolog
gene expression
Tvrabla antiserum
intra-celluar localization
-
分类号
R382.21
[医药卫生—医学寄生虫学]
-